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刺儿菜对草甘膦的抗药性潜力研究



全 文 :刺儿菜对草甘膦的抗药性潜力研究
刘 延 ,刘华招
(黑龙江省农垦科学院 ,哈尔滨 150038)
  摘要:对刺儿菜经草甘膦茎叶处理后 14d内的取样并进行体内莽草酸含量的测定 , 通过 14d 内草甘膦对莽草
酸含量情况的影响 ,分析刺儿菜对草甘膦的抗药性潜力。
关键词:刺儿菜;草甘膦;莽草酸
  刺儿菜(Cirsium setosum (Willd.)MB.,Spine-
g reens),别名小蓟 ,菊科多年生草本植物 ,全国各地
均有分布 。是大豆 、玉米 、小麦等旱田作物田间的主
要杂草之一 ,同时也是难治杂草之一(魏守辉等 ,
2007)。最有效的防治方法就是在刺儿菜发生严重
的区域 ,用草甘膦进行茎叶涂抹或者喷头安装保护
罩后茎叶处理。草甘膦是一种内吸传导型广谱灭生
性除草剂 ,它的作用机理主要是竞争性抑制莽草酸
途径中的 5-烯醇丙酮莽草酸-3-磷酸合成酶(BOO-
COCK &COGGINS , 1983),结果导致植物体内莽
草酸积累过量而死亡 。草甘膦处理后莽草酸积累量
的变化往往作为检测被测植物是否对草甘膦具有抗
药性的方法。
我国是草甘膦的生产和应用大国。自 1973 年
沈阳化工研究院开始进行草甘膦药效试验以来 ,首
先在茶园使用 ,后来相继在甘蔗 、龙眼等果园和元胡
田应用 ,1985年以后在大豆田 、棉田 、桑园用于免耕
除草 ,全国草甘膦应用范围和使用量不断扩大 ,2007
年原药需求量在 1 万 t 以上(中国县域经济报 ,
2007)。已有报道刺儿菜对草甘膦不敏感(张宏军
等 ,2010),本试验通过草甘膦对刺儿菜体内莽草酸
含量的影响 ,分析刺儿菜对草甘膦的抗药性潜力。
1 材料与方法
1.1 材料准备
a.仪器 低温离心机 、紫外分光光度计。
b.试剂  0.25mo l/LHCl 、高碘酸 、1.0 mol/ L
NaOH 、0.1mol/ L甘氨酸 、莽草酸 。
1.2 方法
1.2.1 草甘膦的喷施
收稿日期:2011-06-03
基金项目:转 EPS PS 基因大豆田间杂草抗性检测技术研究 ,
转基因生物新品种培育重大专项资助(2009ZX08012-
025B)
草甘膦用量按有效成分 800 、1600g/hm2 茎叶
喷雾处理生长 60d后的刺儿菜 ,分别记为 X1 、X2。
1.2.2 莽草酸的提取
喷药后每 2d剪取刺儿菜的地上叶茎洗净晾干
各 0.5g 左右 , 剪碎于研钵中液氮研磨 ,加入 1.0mL
的 HCl ,于 4℃, 12000r/min 离心 15min ,收集上清
液 ,4℃保存待测。每处理 3次重复。
1.2.3 莽草酸含量的测定
取 200μL 上清液 ,加入 2.0mL1%的过碘酸溶
液 ,3h 后加入 2.0mL1.0mo l/L 的 NaOH 并混匀 ,
然后加入 1.2mL 的 0.1mol/ L 甘氨酸混匀 ,静置于
380nm 比色 ,记录 OA值 。参考 SINGH 、CROMAR-
TIE 、娄远来等的方法(SINGH &SHAN ER ,1998;
CROMARTIE &POLGE ,2000;娄远来等 ,2005)。
1.2.4 莽草酸标准曲线制作
将莽草酸标准样品 10mg 溶于 0.25mol/LHCl
1.0mL 中 ,分别取 0 、1 、5 、10 、50 、100μL 加0.25mo l/
LHCl至 1.0mL。与莽草酸含量的测定相同步骤测
定吸光度 OA 值 。
2 结果与分析
a.草甘膦用量有效成分 800g/hm2 处理的刺儿
菜从施药后第 2d 就比对照的莽草酸含量高 ,在第
6d以后急剧下降 ,但在 9d内均高于对照莽草酸水
平 ,第 10d以后低于对照。
b.草甘膦用量有效成分 1600g/hm2 处理的刺
儿菜从施药后第 2d就比对照的莽草酸含量高 ,在第
6d以后虽然略有下降 ,但在第 10d时突然升高达到
最高 ,并且 12d内均高于对照莽草酸水平 ,之后下降
并低于对照 。
c.两个草甘膦处理对刺儿菜莽草酸积累的影响
在第 10d 不同。草甘膦用量有效成分 1600g/hm2
比 800g/hm2 对刺儿菜的莽草酸积累的影响大 ,最
大差异达到 20μg/μL。
51 现代化农业  2011 年第 9 期(总第 386 期) 
几种药剂防治水稻纹枯病试验
陈玉林
(黑龙江省阎家岗农场 ,哈尔滨 150078)
  纹枯病是世界上水稻产区普遍发生的重要病害
之一 ,与稻瘟病 、白叶枯病构成水稻的三大主要病
害。据统计 ,目前全国发病面积达 1333万 hm2 以
上(占总面积的 40%),近年来黑龙江垦区的纹枯病
发生面积也有上升趋势。目前防治水稻纹枯病的主
要药剂有井冈霉素 、纹枯净 、爱苗等药剂 。笔者于
2010年在黑龙江省新华农场两个基层生产队对这 3
种药剂防治水稻纹枯病进行了一系列对比试验 ,结
果显示爱苗对水稻纹枯病的防治效果 、病情指数控
制及药效期上较佳。
1 试验材料与方法
1.1 供试药剂
30%爱苗乳油(农业部推广新药 ,主要成分:丙
环唑+苯醚甲环唑),5%井冈霉素可溶性粉剂 ,20%
纹枯净可湿性粉剂。
1.2 试验地区概况
1.2.1 试验地区气候条件
年平均降水 350 ~ 840mm ,有效积温 2600℃,无
霜期 125d。
1.2.2 试验地区土质
土壤类型为黑土层 ,有机质含量为 10%。
收稿日期:2011-06-16
1.3 供试水稻品种
供试品种为空育 131和垦鉴稻 6号。
1.4 试验设计
试验设在新华农场第二 、三生产队 ,每个生产队
设两组品种 ,每组设 4 个处理 ,每处理设 3次重复 ,
所有的处理随机排列 。每处理试验小区的长度为
13.3m , 宽度为 6m 。 4 个处理分别是:处理 1 为
30%爱苗乳油 225mL/hm 2 ,对水 450kg/hm2 ,均匀
喷雾;处理 2 为 5%井冈霉素可溶性粉剂 2250g/
hm2 ,对水 1125 ~ 1500kg/hm2 ,针对水稻中下部喷
雾或泼浇;处理 3为 20%纹枯净可湿性粉剂 600g/
hm
2 ,对水 600kg/hm2 ,对准稻株基部喷雾;处理 4
为清水对照 ,喷液量 225L/hm2 。空育 131在 6 月
2 5日喷施药剂 ,垦鉴稻6号在7月4日喷施药剂 。
喷药使用器械均为山东产卫士牌WS-16型背负式
手动喷雾器 ,喷头种类为圆锥雾喷头 。
1.5 调查内容 、时间及方法
每个处理(含每个重复)均在施药前 1d ,施药后
10 、20d各调查一次 ,即每个处理(含每个重复)调查
3次。采用对角线取样的方法调查 ,每小区取 5点 ,
每点取 50株 ,按照纹枯病害的分级标准 ,计算出病
情指数 、病情指数增长率和防治效果 。施药后 1 、5 、
10d ,观察药剂对作物及对其他生物的影响 。
3 讨论
施用草甘膦后刺儿菜的莽草酸含量变化明显 ,
草甘膦用量有效成分 1600g/hm2 比 800g/hm2 对刺
儿菜的莽草酸含量影响大 。
植物受草甘膦处理后 ,低剂量下的伤害能自行
恢复 ,莽草酸的含量会因其自身代谢而逐渐减少 。
而在高剂量下植株吸收的草甘膦量增加 ,其体内莽
草酸的含量也逐渐增加 ,自身的代谢功能受到伤害
逐渐加重 ,所以通过测定对莽草酸的代谢能力可以
判断植物草甘膦的靶标酶———EPS PS 的活力大小
(宋小玲等 , 2004;PLINE et al , 1999;FUCHS ,
2002)。根据 FENG等人提出的:莽草酸/草甘膦的
比值越大 ,说明 EPSPS受抑程度越高;相反 ,两者比
值越小 , 说明草甘膦对 EPSPS 的抑制程度越低
(FENG PAUL C.C., 2004),虽然植物种类不同 ,植
物体自身的莽草酸含量有所差异 ,但通过莽草酸的
积累情况可以判断其对草甘膦的敏感性。
本试验结果证实 ,刺儿菜对草甘膦用量有效成
分 800g/hm2 的剂量处理的敏感性比对草甘膦用量
有效成分 1600g/hm2 的剂量处理小 。在草甘膦一
般剂量情况下 ,刺儿菜对草甘膦的敏感性比其它杂
草小 ,也就是说抗药性潜力增强 。在北方大豆 、玉米
田经常使用草甘膦防除刺儿菜等难治杂草的情况
下 ,应该提高警惕 ,对这些杂草的抗药性进行有力的
监测 ,改进除草剂使用技术 ,延缓杂草抗药性的发
生 ,延长高效除草剂的使用年限 。
参考文献略 (020)
52  现代化农业  2011 年第 9 期(总第 386 期)