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苋科6种种子类药材的蛋白电泳鉴别



全 文 :#研究简报#
苋科 y种种子类药材的蛋白电泳鉴别
赵华英 o陈永林
k山东医科大学 药学院 o山东 济南 uxsstul
摘要 目的 }为了准确鉴别苋科种子类药材 ∀方法 }应用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术 o对 y种外形很相似的种子
进行了可溶性蛋白质的电泳分析 ∀结果 }电泳图谱清楚地显示出各样品的特征带 o从而能准确区别各种药材 ∀结
论 }该方法操作简便 o重现性好 o各种间可比性强 ∀能起到准确鉴别药材的目的 ∀
关键词 苋科 ~种子 ~电泳鉴别
苋科植物的种子甚小 o黑亮光滑 o外形极相似 o
肉眼难以识别 o如青葙子 o李时珍在5本草纲目6中
谓 }/ , ,子在穗中 o与鸡冠花子及苋子一样难辨 ∀0
说明从明代就发现其混乱现象 o为了鉴别真伪 o保证
临床用药的安全有效 o我们利用聚丙烯酰胺凝胶电
泳技术 o对苋科 y种种子类药材进行了可溶性蛋白
质的电泳分析 o现报道如下 ∀
1 实验材料 !仪器和试剂
1 q1 材料 y种样品均来源于苋科 o经作者鉴定其
拉丁学名k见表 tl ∀
表 t 样品来源
编号 名称 植物学名 采集地点
t 青葙 Χελοσια αργεντεα 本室标本室
u 牛膝 Αχηψραντηεσ βιδεντατα 西营
v 鸡冠花 Χ. χριστατα 本校药圃
w 皱果苋 Αµ αραντηυσ ϖιριδισ 本校药圃
x 苋 Αµ . τριχολορ 本校药圃
y 反枝苋 Αµ . ρετροφλεξυσ 本校药圃
1 q2 仪器和试剂 ⁄≠ ≠2 ¶{型稳压稳流定时电泳
仪k北京六一仪器厂l o采用垂直板凝胶电泳 o凝胶板
us ¦° ≅ us ¦° ∀主要的试剂有分离胶 !浓缩胶 !四甲
基乙二胺k×∞ ∞⁄l等 o其配制方法见参考文献 ∀
2 方法
2 q1 样品制备 选取干燥成熟的种子 o各取 s qx ªo
置冰箱内低温放置 t «后 o取出加入稀释 w倍的浓
缩胶缓冲液 x °¯ o加少许石英砂 o低温下研磨成匀
浆 o离心 tx °¬±kw sss µ# °¬±p tl o取上清液置冰箱
中备用 ∀
收稿日期 }t|||2st2us
2 q2 电泳操作 参照文献≈t 进行 o注意用微量注
射器加样 o每样品格内加入 tss Λ¯ o点样结束后向上
槽内加入 t滴溴酚蓝指示剂示踪 ∀总电流强度控制
在 vx °„ o样品泳入分离胶后 o电流加大至 zs °„ o
待样品在分离胶中泳动出 ts ¦°时停止电泳 ∀
2 q3 染色和脱色 取出胶板后 o用蒸馏水冲洗一
下 o随即放入考马斯亮蓝 • uxs显色液中 o置恒温箱中
v{ ε 染色 w «后取出 o换上脱色液 o脱至背景清晰
为止 ∀
3 结果与讨论 胶板经脱色后显示出清晰的谱带 o
根据谱带的自然形态绘制电泳图谱k见图 tl并照
相 ∀图谱中用涂黑表示深色的 Œ级带 o作为重点分
析的特征带 o并测其泳动率k见表 ul ∀斜线表示色
较浅的 µ级带 o小点表示色最浅的 ¶级带 ∀
图 t 苋科 y种样品蛋白电泳图谱
t1 青葙子 u1 牛膝子 v1 鸡冠花子
w1 皱果苋子 x1 苋子 y1 反枝苋子
#ux#
第 ux卷第 t期
usss年 t月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ qux o‘²qt¤±qousss
表 u 苋科 y种样品电泳谱带k ´级带l的泳动率
编号 „区 …区 ≤ 区
„t „u „v „w „x „y …t …u …v …w ≤t ≤u
t s qt| s qvs s qwt
u s qs| s qtz s qvs s qvz s qxw s q|t
v s qsw s qs| s qtz
w s qut s quz s qwu s qzx
x s quy s qwt s qxz
y s qtw s qux s qww s qzx
由图谱可见 o同科属植物的种子显示出一些相
同的谱带 o如 „u o„v和 …u处 ∀同时因为种不同 o各
种间的谱带区别也很明显 o如青葙子在 ≤ 区无谱
带 ~鸡冠花子在 …区无 ´级带 ~牛膝子 ´级带的数
目最多 o其 …t o…v和 ≤u带的泳动率足以与其它种
相区别 ~v种苋的谱带数目和泳动率很相似 o显示出
相似的亲缘关系 o但 v种 ´级带的泳动率不同 o如皱
果苋子的 „w带 !苋子的 …w带 !反枝苋的 „v带也足
以区别 ∀总之各种间谱带特征明显 o可比性强 o为准
确鉴别苋科药材提供了可靠的依据 ∀
对于以上种子 o我们还进行了酯酶同工酶和过
氧化物酶同工酶的电泳分析 o由于显示的谱带数目
少 o效果不甚理想而未作总结 ∀
4 参考文献
t 袁晓华 o杨中汉 1 植物生理生化实验 1 北京 }高等教育出版社 o
t|{v }uvv
≈责任编辑 毛华训 
煅牡蛎的加工炮炙条件
李社花
k云南省曲靖市药品检验所 o云南 曲靖 yxxsssl
牡蛎含 {s h ∗ |x h的碳酸钙 !磷酸钙 o5中国药
典6t||x年版对牡蛎的炮制规定为/取净牡蛎 o照明
煅法煅至酥脆0 ∀在对煅牡蛎的抽验检查中 o发现煅
炙的牡蛎 ≠ 外观为白色 !尝时味苦 !回甜 !辣舌 ~
t h的水溶液加酚酞成深紫红色 ~≈ t h水溶液 ³‹
值为 tu q{s ∀显然已煅烧成生石灰k≤¤’l o为此笔者
对牡蛎的煅制条件作了以下实验 o并和生牡蛎进行
了比较 o实验结果见表 t ∀
煅牡蛎在 uss ∗ wss ε t ∗ w «中 o性状为灰青
色粉 o味微咸 ~在 yss ∗ {ss ε 的 t ∗ w «中 o性状为
黄白色或白色粉末 o味苦回甜 o辣舌 o有石灰味 ∀
³‹ 值 o生牡蛎为 z qux o煅牡蛎随着温度升高而
升高 o在 yss ∗ {ss ε 的 t ∗ w «中 o³‹ 值在 tu qvs ∗
tu q{y o几乎不变 o显碱性 ∀
消耗 s qt °²¯#pt硫酸量 }碳酸钙是盐类 o在水
中几乎不溶 o用酸滴定 o不会消耗酸 ~氧化钙溶于水
收稿日期 }t|||2sx2st
生成氢氧化钙 o显碱性 o消耗酸 ∀在 uss ∗ wss
ε 的 t ∗ w «内消耗酸是 s qst ∗ s qw °¯ o和生牡蛎一
致 o而从 yss ε 开始逐渐上升 o到 {ss ε 的 t ∗ w «o
趋于一致 ∀
水溶性钙测定 }碳酸钙在水中几乎不溶 o在不加
酸溶解的情况下 o≤¤u n应测不出来 o温度在 uss ∗
wss ε 的 t ∗ w «内 o≤¤u n测不出来 o和生牡蛎基本
一致 ∀温度在 yss ∗ {ss ε 的 t ∗ w «中 o有 ≤¤u n被
测定出来 o这是碳酸钙被煅制成生石炭 o而生石炭能
溶于水的缘故 ∀
生牡蛎碳酸钙含量为 |v qw h ouss ∗ wss ε 的 t
∗ v «内碳酸钙含量比生牡蛎略高 o在 |x h 左右 ∀
w ss ε w« ∗ {ss ε t ∗ w«中 o碳酸钙的含量在
|z qv h ∗ tyv qx h o在 {ss ε 的 t ∗ w «内趋于一致 o
这是碳酸钙转化为氧化钙的过程 o不能完全以碳酸
钙计 ∀
综上结果看 o牡蛎只应在 uss ∗ wss ε t ∗ v «
条件下煅制 o在这个条件下 o煅牡蛎既能保持生牡蛎
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第 ux卷第 t期
usss年 t月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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