全 文 ：大孔树脂吸附法在黄褐毛忍冬总皂苷
提取中的应用研究
杜 江 o丁 宁 o贾宪生
k贵阳中医学院 o贵州 贵阳 xxsssul
≈摘要 目的 }改进黄褐毛忍冬总皂苷的提取分离方法 ∀方法 }采用 ⁄vxus型大孔吸附树脂用于黄褐毛忍冬总
皂苷的提取分离 ∀结果与结论 }该方法能明显提高皂苷的收率和纯度 ∀
≈关键词 黄褐毛忍冬总皂苷 ~大孔吸附树脂 ~提取工艺
≈中图分类号 u{w qu ≈文献标识码
≈文章编号 tsst2xvsukusstlts2sy{x2su
黄褐毛忍冬是忍冬科植物 Λονιχερα φυλϖοτο2
µεντοσα的花蕾 o被贵州省地方药材标准收载 o是贵
州金银花的主流品种之一 ∀本所在对该药的研究中
发现其中的总皂苷对多种毒物所致肝损伤有明显的
保护作用≈t ∗ w ∀如何寻找一种高效 !实用的提取工
艺是该总皂苷作为有效部位进一步开发研究的重要
环节 o我们选用 ⁄vxus型大孔树脂用于本皂苷的提取
分离 o实验证明 ⁄vxus大孔树脂对黄褐毛忍冬总皂苷
有较好的吸附性能 o且易被不同浓度的乙醇洗脱下
来 ∀与原工艺k溶剂法l相比 o能使皂苷的纯度和收
得率均明显提高 ∀
1 仪器 !材料
zuv2可见分光光度计k上海分析仪器三厂l ~
⁄vxus型大孔树脂k天津南开大学化工厂l ~黄褐毛忍
冬皂苷甲对照品 o黄褐毛忍总冬皂苷样品k皂苷含量
为 vs q{t h l均由本所化学室提供 o分别简称为 ƒ 皂
苷甲和 ƒ总皂苷 ~黄褐毛忍冬药材样品k以下简称 ƒ
药材样品l由贵州省贞丰县医药公司提供 o本所生药
室陈德媛鉴定 ∀
2 方法与结果
2 q1 含量测定方法学实验
2 q1 q1 对照品溶液的配制 精密称取 ƒ 皂苷甲对
照品 o用甲醇溶解并定容于 ts °¯ 容量瓶中作为对
照品溶液 ∀
2 q1 q2 最大吸收波长的测定 分别取对照品溶液
和 ƒ总皂苷溶液k含量约为 ts °ª# °¯ p tl o按 2 q1 q3
项下操作至显色后于 zuv2可见分光光度计上扫描测
≈收稿日期 usss2sy2tx
定 o对照品和样品均在 wzw ±°处呈现最大吸收 ∀
2 q1 q3 线性关系考察 分别取 ƒ 皂苷对照品溶液
vs oys o|s otus otxs ot{s Λ¯ o热风挥干溶剂 o加入 x h
香草醛2冰醋酸 s qu °¯ 及 s q{ °¯ 高氯酸 o水浴 zs ε
加热 tx °¬±o冰水浴冷却后加入冰醋酸 x °¯ o摇匀 o
于 wzw ±°处测定吸收度 o根据样品量k Ξl和吸收值
k Ψl可得回归方程 Ψ u .vwv ≅ tsp v n v .{yz ≅ tsp v
Ξ , ρ s .||||( ν yl o线性范围 vs ∗ t{s Λª∀
2 q1 q4 精密度考察 精密吸取对照品溶液 ys Λ¯ o
按 2 q1 q3 项下操作 o测定含量 o并重复 x次 ∀结果精
密度良好 oΡΣ∆为 s qwz h ∀
2 q1 q5 稳定性考察 同一对照品溶液按 2 q1 q3 项
下操作显色后每隔 us °¬±测定 t次含量 ∀该样品
经显色后在 {s °¬±内稳定 oΡΣ∆为 u qxt h ∀
2 q1 q6 回收率试验 取已知含量的样品液 y份 o分
别加入对照品 o按 2 q1 q3 项下操作测定含量 ∀平均
加样回收率为 |{ q{ h oΡΣ∆ s q|w h k ν yl ∀
2 q2 ⁄vxus大孔树脂对 ƒ 总皂苷的吸附及解吸附性
能考察
2 q2 q1 树脂的预处理 取 ⁄vxus大孔树脂用 ts倍
量乙醇浸泡 uw «o然后用乙醇洗至洗出液加适量水
无白色浑浊现象 o再用蒸馏水洗至无醇 o晾干 o备用 ∀
2 q2 q2 吸附容量测定 取 ƒ 总皂苷 t ªo加蒸馏水
制成 tss °¯ 水溶液 o准确称取大孔树脂 ts ª加入皂
苷水溶液中 o放置 o不断振荡 o定时取样并按 2 q1 q3
项下操作测定水溶液中皂苷含量 ∀根据取样时间和
吸附量制作吸附曲线k见图 tl ∀结果表明其吸附时
间主要在前 { «k每 t ª树脂吸附 ux qy °ª皂苷l在
uw «达到饱合 o吸附容量为 ux q| °ª#ªp t ∀
#x{y#
第 uy卷第 ts期
usst年 ts月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ quy o²qts
¦·qousst
图 t ⁄vxus大孔树脂对 ƒ总皂苷的吸附曲线
2 q2 q3 大孔树脂的用量探索 取 ƒ 药材的水提取
液 y份 o每份 us °¯ k相当于生药 u ªl o在各份样品液
中加入不同量的大孔树脂 o不断振荡 ouw «后取滤液
进行 ¬¥¨µ°¤±反应以检查吸附情况 o结果见表 t ∀
表 t ⁄vxus大孔树脂对 ƒ药材提取液中皂苷的吸附情况
药材量rª 树脂量rª ¬¥¨µ°¤±反应
u v qss n
u v qys n
u w qus n
u w q{s p
u y qss p
u z qus p
试验表明当树脂用量为药材的 u qw倍时溶液中
皂苷可被完全吸附 ∀
2 q2 q4 解吸附试验 按药材与树脂的用量比例取
一定量的 ƒ总皂苷制成水溶液 o加入已填装好大孔
树脂的柱中 o依次用蒸馏水及 vs h ozs h o|x h乙醇
洗脱 o收集各部分洗脱液 o浓缩至干 o分别用甲醇定
容后按 2 q1 q3 项下操作测定皂苷含量 ∀结果表明蒸
馏水和 |x h乙醇洗脱部分基本不含皂苷 o而 vs h和
zs h乙醇洗脱部分洗脱了 || q{z h的皂苷 o反映了
其良好的解吸附性能 ∀
2 q3 两种提取工艺的比较
2 q3 q1 原工艺≈x 称取 ƒ 药材 us ª o用 |x h乙醇
回流提取 v次kts o{ o{l o每次 t «∀提取液合并 o回
收乙醇后加水适量 o依次用石油醚 !乙酸乙酯 !正丁
醇萃取 ∀正丁醇萃取部分减压浓缩干后 o用 ws °¯
甲醇溶解 o过滤 o滤液中加入丙酮至沉淀完全 ∀滤液
沉淀 o用乙醚洗涤 o干燥得总皂苷 ∀精密称取该总皂
苷 ux °ªo用甲醇定容于 ux °¯ 容量瓶中 o吸取 tss
Λ¯ 按 2 q1 q3 项下操作测定含量 ∀结果见表 u ∀
2 q3 q2 新工艺 称取 ƒ药材 us ªo用水煎煮提取 v
次kus otx otxl o每次 u «o合并提取液 o过滤 o滤液浓
缩至 ys °¯ ∀将该浓缩液加入已填好 ⁄vxus大孔树脂
w{ ª的柱中 o先用蒸馏水冲洗至无色 o然后依次用
vs h ozs h的乙醇洗脱 ∀合并 u种浓度的乙醇洗脱
液 o回收乙醇并浓缩至干 o用 |x h乙醇 xs °¯ 溶解 o
过滤 o加 wxs °¯ 丙酮沉淀 o滤集沉淀并用乙醚洗涤
后干燥得皂苷 ∀精密称取该总皂苷 ux °ªo用甲醇
定容于 ux °¯ 容量瓶中 o吸取 tss Λ¯ 按 2 q1 q3 项下
操作测定含量 ∀结果见表 u ∀
表 u 两种工艺提取皂苷的结果
组别 样品序号
Ξ
/总皂苷收率
/ %
Ψ
/纯度
/ %
Ζ
r药材中皂苷提取率
r h
原工艺 t ts quu vx q{t v qyt
u tt qvx u| quu v qvs
v tt q{s vs qvs v qxz
新工艺 t ts qus xy q{y x q{s
u ts qyx xx qxw x q|t
v | qys ys qz{ x q{w
注 }原工艺组 ν v Ξ tt .tu % Ψ vt .z{ % Ζ v qxs h
新工艺组 ν v Ξ ts .tx % Ψ xz .zy % Ζ x q{x h
统计结果表明 o两种工艺比较无论是产品纯度
还是药材中皂苷提取收率两组间均有极显著性差异
k Π s qsstl ∀
3 讨论
3 q1 原工艺是采用常规的溶剂法 o该法被认为是提
取皂苷的通则但其工艺较为复杂 o用有机溶剂提取
的成本较高 o特别是用有机溶剂进行梯度萃取在实
际生产上较为困难 o而新工艺采用水提取结合树脂
的使用 o不仅简化了工艺 !降低了成本而且使产品的
收率和质量都明显提高 o具有实用价值 ∀
3 q2 在进行含量测定时因样品显色后稳定的时间
较短 o故样品显色后应在 {s °¬±内进行测定 o否则
吸收值有下降趋势 ∀
≈参考文献
≈t 时京珍 o宛 蕾 o陈秀芬 q黄褐毛忍冬总皂苷对几种化学毒物所
致的小鼠肝损伤的保护作用 q中药药理与临床 ot||s oyktl }vv q
≈u 刘亚平 o贾宪生 q黄褐毛忍冬总皂苷对醋氨酚所致肝损伤的保
护作用 q中国药理学报 ot||u otvkvl }us| q
≈v 时京珍 o刘耕陶 q黄褐毛忍冬皂苷对对乙酰氨基酚致小鼠肝脏
毒性的保护作用 q药学学报 ot||x ovskwl }vtt q
≈w 刘亚平 o贾宪生 q黄褐毛忍冬总皂苷对镉所致急性肝伤的保护
作用 q中国药理学报 ot||u otvkvl }uy| q
≈x 茅 青 o贾宪生 q黄褐毛忍冬化学成份的研究 q药学学报 ot|{| o
uwkwl }uy| q
≈责任编辑 李 禾
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