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野西瓜挥发油抑制人胃癌SGC-7901细胞增殖的研究



全 文 :  Na + , K+ 2A TP 酶的主要功能是将细胞内的
Na + 泵出和将胞外的 K+ 泵入 ,平衡细胞内外 Na + ,
K+ 浓度 ; Ca2 + 2A TP 酶的主要功能是将细胞内
Ca2 + 泵出 ,它同 Na + 2Ca2 + 交换共同维持细胞内
Ca2 + 稳态。Na + , K+ 2A TP 酶和 Ca2 + 2A TP 酶活性
下降 ,导致细胞内 Ca2 + 、Na + 增多。胞内 Na + 增多
引起 Na + 、Ca2 + 交换增加 ,进一步加剧细胞内 Ca2 +
超载。因此 ,Na + , K+ 2A TP 酶和 Ca2 + 2A TP 酶对
维持细胞内离子浓度、维持细胞的正常结构和功能
起着十分重要的作用。脑缺血再灌注时 ,Na + , K+ 2
A TP 酶和 Ca2 + 2A TP 酶活性下降 ,导致 K+ 大量流
向细胞外液 , Na + 及 Ca2 + 大量流入细胞内 ,伴随
H2 O 的进入而导致细胞急速肿胀 ,产生脑水肿。本
研究结果表明 ,蛇床子素通过增强 Na + , K+ 2A TP
酶和 Ca2 + 2A TP 酶活性 ,降低脑缺血再灌注后脑组
织含水量 ,从而保护缺血脑组织。
IL28 是免疫性炎症反应过程中的炎性趋化细
胞因子 ,在脑缺血和缺血再灌注损伤中起着重要作
用。IL28 主要由中性粒细胞、单核巨噬细胞、内皮
细胞等在缺血、缺氧、IL21、内毒素 (L PS) 、内皮素21
( ET21) 和肿瘤坏死因子 ( TN F) 等诱导下合成。
IL28 使中性粒细胞激活 ,促使其趋化、聚集、黏附于
血管内皮和产生大量自由基及蛋白水解酶等炎症介
质 ,损害局部血管 ,导致血管通透性增加 ,造成组织
水肿坏死。脑缺血和缺血再灌注损伤后 ,缺血区脑
组织中 IL28 生成增加 ,使大量中性粒细胞激活 ,促
进其趋化和浸润 ,并释放毒性氧自由基、细胞因子和
一些炎症介质 ,导致局部脑水肿和脑组织坏死。中
性粒细胞中含有 MPO ,每个细胞所含的酶量是一
定的 ,利用这一特点 ,可以通过测量 MPO 活性定量
分析中性粒细胞的数目和组织的浸润情况[10 ,11 ] 。
本研究发现 ,蛇床子素可抑制 IL28 产生 ,阻断中性
粒细胞激活 ,抑制 MPO 活性 ,降低脑缺血再灌注后
中性粒细胞在脑组织中的浸润和聚集 ,抑制局部脑
组织炎症反应 ,减轻脑水肿 ,保护缺血脑组织。
本研究结果表明 ,蛇床子素对大鼠局灶性脑缺
血再灌注损伤有保护作用。通过抑制 IL28 产生 ,抑
制 MPO 活性 ,降低脑缺血再灌注后中性粒细胞在
脑组织中的浸润 ,抑制局部脑组织炎症反应 ,增强
Na + , K+ 2A TP 酶和 Ca2 + 2A TP 酶活性 ,降低脑缺
血再灌注后脑组织含水量 ,减轻脑水肿 ,是其治疗脑
缺血损伤的机制之一。
参考文献 :
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野西瓜挥发油抑制人胃癌 SGC27901 细胞增殖的研究
季宇彬1 ,2 ,3 ,王  崴1 ,于  蕾1 ,2 ,3 ,崔荣田1 ,莫  科1 ,邹  翔1 ,2 ,3

(11 哈尔滨商业大学 生命科学与环境科学研究中心 ,黑龙江 哈尔滨  150076 ; 21 哈尔滨商业大学 药物研究所博士后
科研工作站 ,黑龙江 哈尔滨  150076 ; 31 抗肿瘤天然药物教育部工程研究中心 ,黑龙江 哈尔滨  150076)
摘  要 :目的  研究野西瓜挥发油的抗肿瘤作用。方法  采用 M TT 实验和 SRB 实验观察野西瓜挥发油对 SGC2
·98·中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs  第 40 卷第 1 期 2009 年 1 月
①收稿日期 :2008205222
基金项目 :黑龙江省自然科学基金资助项目 (D200610)
作者简介 :季宇彬 (1956 —) ,男 ,博士 ,博士后 ,教授 ,博士生导师 ,研究方向为抗肿瘤药物研究。
7901 细胞的体外抗肿瘤作用 ;采用倒置荧光显微镜观察野西瓜挥发油作用后典型的细胞凋亡形态 ;采用流式细胞
仪测定野西瓜挥发油对 SGC27901 细胞凋亡及细胞周期的影响。结果  10~200μg/ mL 的野西瓜挥发油作用于
SGC27901 细胞 72 h 后均可不同程度的抑制 SGC27901 细胞的增殖 ,其 IC50为 14515μg/ mL , GI50为 121132μg/
mL ,LC50为 900196μg/ mL , T GI 为 240155μg/ mL ;作用 24 h 后出现典型的凋亡形态 ;75、150、300μg/ mL 的野西
瓜挥发油作用 24 h 时出现细胞凋亡 ;周期分布发生改变 ,呈现 S 期阻滞。结论  野西瓜挥发油具有明显抑制
SGC27901 细胞增殖作用 ,其 SGC27901 机制为诱导肿瘤细胞凋亡及改变细胞周期。
关键词 :野西瓜 ; 挥发油 ; 细胞凋亡
中图分类号 :R286191    文献标识码 :A    文章编号 :025322670 (2009) 0120089205
Inhibition of volatile oil in Ca p pa ris s pinosa on proliferation of human
gastric carcinoma SGC27901 cells
J I Yu2bin1 ,2 ,3 , WAN G Wei1 , YU Lei1 ,2 ,3 , CU I Rong2tian1 , MO Ke1 , ZOU Xiang1 ,2 ,3
(11 Center of Research and Development on Life Sciences and Environmental Sciences , Harbin University of Commerce ,
Harbin 150076 , China ; 2. Institute of Materia Medica and Postdoctoral Programme of Harbin University
of Commerce , Harbin 150076 , China ; 3. Engineering Reseach Center of Natural Anticancer Drugs ,
Minist ry of Education , Harbin 150076 , China)
Abstract : Objective  To study t he anti2t ummor effect of the volatile oil in Ca p p aris s pi nosa . Methods
M T T and SRB were used to st udy t he anti2t ummor effect of the volatile oil i n v i t ro. The typical morp holo2
gy of apoptosis induced by t he volatile oil in C. s pi nosa was abserved by reversed fluorescent microscope.
The effect of t he volatile oil on cell apoptosis and different stages of cell cycles in human gast ric carcinoma
SGC27901 cells was st udied by flow cytometer . Results  The proliferation of SGC27901 cells was inhibited
after t reated wit h t he volatile oil (10 , 50 , 100 , 150 , and 200μg/ mL) for 72 h and t he IC50 was 145. 5μg/
mL , GI50 was 121. 32μg/ mL ,L C50 was 900. 96μg/ mL , T GI was 240. 55μg/ mL . After SGC27901 cells
were t reated by the volatile oil for 24 h , the typical morp hological changes of apoptosis were observed. t he
apoptotic cells were detected af ter t reated with t he volatile oil (75 , 150 , and 300μg/ mL) for 24 h. Cell cy2
cle was also analyzed , wit h the result s showing t hat the volatile oil led S stage block. Conclusion  The vol2
atile oil has t he significant inhibition on proliferation of SGC27901 cells. It s anti2t ummor mechanism could
be at t ributed to it s action of initiating t he apoptosis of t umor cells.
Key words : Ca p p aris s pi nosa L . ; volatile oils ; apoptosis
  野西瓜 Ca p p aris s pi nosa L . 又称老鼠瓜、刺山
柑 ,维语称“波里克果”或“卡盘”,为山柑科山柑属藤
本植物 ,是荒漠、半荒漠、干旱、半干旱地区极有栽培
价值的抗旱植物。我国产于新疆、甘肃、内蒙古、西
藏等省区。我国沙区仅产 1 属 1 种 ,新疆各沙区有
分布 ,以吐鲁番盆地沙漠最多。野西瓜以其叶、果
实、根皮入药 ,具有祛风、除湿、通鼻窍、止瘀消肿、止
痛活血之功效。目前对于野西瓜多糖部位抗肿瘤作
用进行初步研究表明野西瓜多糖可诱导 Hep G2 细
胞凋亡[1 ] ;对野西瓜果实挥发性化学成分也已进行
了部分研究[ 2 ] ,但对挥发油抗肿瘤作用的研究未见
报道 ,为了开发抗肿瘤新药 ,为使刺山柑资源得到充
分的利用 ,发挥其独特的药理活性 ,本实验通过体外
试验来观察野西瓜挥发油的抗肿瘤作用 ,同时观察
了野西瓜挥发油对人胃癌 SGC27901 细胞凋亡以及
对其周期分布的影响 ,试图初步研究其抗肿瘤作用
及机制。
1  材料
111  药品 :野西瓜果实由哈尔滨商业大学药物研究
所提供 ,由黑龙江省药品检验所王青华教授鉴定。
112  挥发油的提取 :将野西瓜果实粉碎过 60 目筛 ,
准确称取 100 g 置于 2 L 圆底蒸馏瓶中 ,加适量水
后按挥发油测定法甲法[3 ] ,采用挥发油测定器提取 ,
至不再有油滴出现为止。静置后分出油层 ,用石油
醚萃取水相 3 次并入油层 ,然后除去石油醚 ,得浓郁
芳香气味的淡黄色油状物即为挥发油 [含 (2 ,2)29 ,
122十八碳二烯酸 26140 % ,棕榈酸 15135 %]。所得
挥发油密封、避光、冷藏备用[2 ] 。
113  肿瘤细胞系 :人胃癌细胞株 SGC27901 ,由哈
尔滨商业大学药物研究所提供。
114  主要试剂 :RPMI21640 培养基干粉、小牛血清
(美国 Gibco 公司) ;胰蛋白酶、二甲基亚砜 (DM2
SO) 、溴化丙啶 ( PI) ,M T T ( Sigma 公司) ;阿霉素
(浙江海正药业股份有限公司 ) ; Hoechst 33258
(
- 20 ℃保存 ,上海华舜生物工程有限公司) ;碘酰
罗丹明B (sulforhodamine B , SRB) (Sigma 公司) 。
·09· 中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs  第 40 卷第 1 期 2009 年 1 月
115  主要仪器 :酶标仪 EL311 (美国 BIO2TE K 公
司) ; FACSC Ablibur 流式细胞仪 (美国 B —D 公
司) ;LNA —111 型 CO2恒温培养箱 (日本三洋) ;超
净工作台 (苏州净化设备厂) ; C KX —41 —32 荧光
倒置显微镜 (日本 Olymp us) 。
2  方法
211  细胞培养 : 实验所用细胞于含 5 % CO2 的
37 ℃培养箱中培养传代 ,用含 10 % 小牛血清 RP2
MI21640 培养液培养 ;用 0125 % 胰酶消化传代 ,每
周传代两次。
212  M T T 法测定肿瘤细胞的存活率 :取处于对数
生长期的 SGC27901 细胞 ,消化后悬浮在一定量的
培养液中 ,计数后调整细胞浓度为 5 ×104 / mL ,接
种于 96 孔板 ,每孔 100μL ,置 37 ℃、5 % CO2的饱
和湿度条件下培养。待 24 h 细胞完全贴壁后 ,实验
组加入野西瓜挥发油至终质量浓度为 10、50、100、
150、200、300μg/ mL (挥发油溶解在 DMSO 中 ,加
入细胞中的 DMSO 终体积分数低于 011 % ,此体积
分数对细胞生长无影响) ;阳性对照组阿霉素的质量
浓度为 0101、011、1、10μg/ mL ;对照组加相同体积
的培养液 ,每个剂量设 6 个平行孔 ,继续培养 72 h
后 ,弃去上清液后 ,每孔加入 M T T 染液 100 μL
(015 mg/ mL) ,继续培养 4 h ,弃去上清 ,每孔加入
DMSO 200μL ,震荡 5~10 min 后 ,使用酶标仪检
测λ= 570 nm 处吸光度 ( A) 值 ,计算抑制率并按中
效方程计算 IC50 [4 ] 。
抑制率 = 对照组平均 A 值 - 给药组平均 A 值对照组平均 A 值 ×100 %
213  SRB 法检测野西瓜挥发油对肿瘤细胞的抑制
作用 :将对数生长期的细胞用胰酶消化后调制成浓
度为 3 ×104 / mL 的细胞液 ,每孔 100μL 接种于 96
孔板。培养 24 h 后加入野西瓜挥发油至终质量浓
度为 10、50、100、150、200、300μg/ mL ,阳性对照组
阿霉素的质量浓度为 0101、011、1、10μg/ mL ;对照
组加相同体积的培养液 ,每个剂量设 6 个平行孔 ,同
时设立加药时对照平板并测定此时细胞的 A 515 值
( T0 ) 。72 h 后弃上清 ,加质量分数为 50 % 的冷三
氯乙酸 ( TCA) 液 ,置 4 ℃冰箱中固定 1 h ,倒掉固
定液 ,用去离子水洗 5 遍 ,干燥后加质量浓度为 4
mg/ mL SRB 染液 ,室温放置 30 min ;倒掉染液用
1 % 醋酸洗 5 遍 ,过夜干燥 ,加 10 mmol/ L 的 Tris
缓冲液 150μL ,10 min 后测定 A 值 ,波长为 515
nm
[5 ] 。用如下公式计算肿瘤细胞的生长率、细胞杀
死率 ;细胞 50 % 生长抑制所需的药物浓度 ( GI50 ) ;
细胞完全生长抑制所需的浓度 ( T GI) ;杀死 50 %
细胞所需的药物浓度 (L C50 ) 。
生长率 = ( T - T0 ) / (C - T0 ) ×100 %
细胞杀死率 = ( T - T0 ) / T0 ×100 %
C表示 ,对照组细胞的 A 值 ; T 表示加药组细胞的 A 值 ; T0
表示加药时对照平板细胞的 A 值 ; GI50 即 ( T - T0 ) / ( C -
T0 ) = 50 % 时的药物浓度 ; T GI 即 T = T0 时的药物浓度 ;
LC50即 ( T - T0 ) / T0 = - 50 % 时的药物浓度
214  Hoechst 33258 染色观察细胞形态 :取处于对
数生长期的人胃癌 SGC27901 细胞常规消化后 ,调
整细胞浓度后接种于 6 孔板中 (孔中事先放入盖玻
片) ,每孔加 3 ×105 / mL 细胞液 1 mL ,待 24 h 细胞
完全贴壁后 ,加药处理 ,共分 5 组 ;对照组 ,阳性 (阿
霉素 5μg/ mL) ,野西瓜挥发油高、中、低剂量 (150、
75、3515μg/ mL) ,给药 24 h 后 ,弃上清 ,用 PBS 洗
涤细胞后加入固定液 (甲醇2冰醋酸 3 ∶1) ,置于
4 ℃冰箱固定 10 min 后 ,加入 5 mg/ L 的荧光探针
Hoechst 33258 ,置于 37 ℃、5 % CO2培养箱中孵育
15 min ,将孔中的盖玻片取出 ,滴好甘油后置于荧光
倒置显微镜上观察细胞形态[5 ] 。
215  流式细胞仪测定 SGC27901 细胞周期及细胞
凋亡 :选择对数生长期的人胃癌 SGC27901 细胞 ,常
规消化后 ,调整细胞浓度后接种于 6 孔板 ,每孔加
3 ×105 / mL 细胞液 1 mL ,待 24 h 细胞完全贴壁后 ,
加药处理 ,共分 5 组 :对照组 ,阳性 (阿霉素 5μg/
mL) ,野西瓜挥发油高、中、低 ( 300、150、75 μg/
mL) 剂量组 ,给药 24 h 后 ,弃上清 ,消化后用 PBS
洗两遍 ,将 1 体积细胞悬液加 9 体积 70 % 乙醇于
- 20 ℃固定 12 h ,离心 , PBS 液洗涤除尽乙醇 ,离
心后悬于 PI 染液中室温染色 30 min ,300 目尼龙网
滤过后 ,在流式细胞仪上测定凋亡细胞所占比例。
检测细胞数为 1 ×104 个。激发波长 488 nm ,发射
波长 630 nm[ 6 ] 。
3  结果
311  M T T 法检测野西瓜挥发油对 SGC27901 的细
胞毒作用 :实验结果表明 :质量浓度为 50~300μg/
mL 野西瓜挥发油对 SGC27901 细胞的生长具有一
定的抑制作用 ,与对照组比较差异显著 ,并且随着质
量浓度增加 ,抑制率逐渐增加 ,即具有剂量依赖关
系 ,经直线回归计算出野西瓜挥发油对 SGC27901
的 IC50为 14515μg/ mL ,阿霉素的 IC50 01405μg/
mL 见表 1。
312  SRB 法检测野西瓜挥发油对 SGC27901 肿瘤
细胞增殖的影响 : SRB 法检测野西瓜挥发油作用
·19·中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs  第 40 卷第 1 期 2009 年 1 月
72 h 对 SGC27901 细胞的 GI50 为 121132μg/ mL 、
L C50为 900196μg/ mL , T GI 为 240155μg/ mL 。阿
表 1  野西瓜挥发油对 SGC27901 的细胞毒作用 ( n = 6)
Table 1  Cytotoxicity of volatile oil in C. s pinosa
on SGC27901 cells ( n = 6)
组别 ρ/ (μg ·mL - 1) A ( x ±s) 抑制率/ %
对照 0 01 796 ±01088 -
野西瓜挥发油   10 01 876 ±01086 01228
50 01 641 ±01093 3 271050
100 01 620 ±01051 3 3 291442
150 01 609 ±01039 3 3 301615
200 01 350 ±01040 3 3 601099
300 01 112 ±01006 3 3 871244
阿霉素 0101 01 390 ±01049 61288
011 01 356 ±01012 3 441015
1 01 089 ±01002 3 3 801303
10 01 089 ±01006 3 3 811667
  与对照组比较 : 3 P < 0105  3 3 P < 0101
  3 P < 01 05  3 3 P < 01 01 vs cont rol group 霉素的 GI50为 53181μg/ mL 、L C50为 5157μg/ mL 、T GI 为 16111μg/ mL 。313  Hoechst 33258 染色观察细胞形态 :结果表明 ,野西瓜挥发油 150、75、3515μg/ mL 剂量组与对照组比较 ,均呈现出细胞核染色质固缩 ,聚集于核边缘并呈块状 ,细胞核碎裂成核膜包裹着的碎块 ,形成凋亡小体 ,出现明显的凋亡形态 ,见图 1。314  流式细胞仪测定野西瓜挥发油对 SGC27901细胞周期及细胞凋亡的影响 :流式细胞术 (FCM) 结果显示 :不同质量浓度野西瓜挥发油作用 SGC27901细胞 24 h 后 , G0 / G1期和 G2 / M 细胞比例减少 ,而 S期细胞数量增加 ,表明野西瓜挥发油对 SGC27901 细胞具有明显的 S 期阻滞作用。不同质量浓度的野西瓜挥发油作用 SGC27901 细胞 ,24 h 时均出现不同程度的凋亡 ,且随着质量浓度的增加凋亡率增加 ,表明具有一定的剂量2效应关系。见表 2。
A2对照组 B~D2野西瓜挥发油 351 5、75、150μg ·mL - 1组 E2阿霉素 5μg ·mL - 1组
A2cont rol group  B —D2volatile oil in C. s pinosa 35. 5 , 75 , 150μg ·mL - 1 group  E2farmicetina 5μg ·mL - 1 group
图 1  野西瓜挥发油作用 24 h 时 SGC27901 细胞形态的变化
Fig. 1  Morphological changes of SGC27901 cells induced by volatile oil in C. s pinosa
表 2  野西瓜挥发油对 SGC27901 细胞周期及细胞凋亡的影响 ( x ±s , n = 3)
Table 2  Effect of volatile oil in C. s pinosa on cell cycle and cell apoptosis of SGC27901 cells ( x ±s , n = 3)
组 别
剂量/
(μg ·mL)
细胞周期/ %
G0/ G1 S G2/ M
凋亡率/
%
对照 0 591 009 ±01211 371 336 ±01321 31655 ±01 102   01 021
野西瓜挥发油 75 541 594 ±01368 401 037 ±11311 51366 ±01 387 71 051 ±01732
150 541 049 ±01842 3 441 724 ±11591 3 11228 ±01 109 3 111 628 ±01817 3 3
300 431 014 ±01709 3 3 561 771 ±11078 3 3 01215 ±01 037 3 3 391 658 ±11604 3 3
阿霉素 5 541 757 ±01298 3 3 261 814 ±01488 3 3 181429 ±01 194 3 3 531 267 ±11364 3 3
  与对照组比较 : 3 P < 0105  3 3 P < 0101
  3 P < 01 05  3 3 P < 01 01 vs cont rol group
4  讨论
  M T T 实验结果表明不同质量浓度的野西瓜挥
发油作用于 SGC27901 细胞 72 h 后对细胞增殖均
有不同程度的抑制作用 ,且随着质量浓度增加 ,抑制
率逐渐增加 ,即具有剂量依赖关系 ,10μg/ mL 的挥
发油对细胞的抑制率较低 ,50~150μg/ mL 的挥发
油具有一定的抑制作用 ,200~300μg/ mL 的挥发
油具有较强的抑制作用。野西瓜挥发油对 SGC2 7901 的 IC50为 14515μg/ mL ,同对照组比较差异非常显著 ( P < 0101) 。从 SRB 结果可以看出低质量浓度的野西瓜挥发油通过抑制肿瘤细胞生长而起抗癌作用 ,其 GI50约为 121132μg/ mL ,当质量浓度达到 240155μg/ mL 时细胞生长受到完全抑制 ,随着质量浓度继续增加至 900196μg/ mL 时有一半数量的细胞被杀死。Hoechst 33258 荧光染色实验可观察到 3715、75、150 μg/ mL 的野西瓜挥发油作用
·29· 中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs  第 40 卷第 1 期 2009 年 1 月
SGC27901 细胞 24 h 后 ,细胞均不同程度的出现细
胞核裂解 ,呈现出核染色质凝聚边缘化 ,质地致密的
染色体边集 ,聚集于核边缘呈块状 ,细胞核碎裂成核
膜包裹着的碎块 ,形成凋亡小体 ,出现明显的凋亡形
态。并且 ,随着剂量的增加 ,所呈现的凋亡形态越加
明显 ,进一步证实了 ,野西瓜挥发油对 SGC27901 细
胞的抑制作用具有剂量依赖剂。
野西瓜挥发油作用 SGC27901 细胞 24 h 后经
PI 染色 , FCM 分析结果表明 ,与对照组比较 ,野西
瓜挥发油改变了 SGC27901 细胞的周期分布 :150、
300μg/ mL 的野西瓜挥发油作用于 SGC27901 细胞
24 h 后 , G0 / G1期和 G2 / M 细胞比例减少 ,S 期细胞
增加 ,而 75μg/ mL 的野西瓜挥发油作用 SGC27901
细胞 24 h 后 ,细胞周期分布变化不明显。
流式结果还表明野西瓜挥发油作用 24 h 后可
诱导 SGC27901 细胞发生凋亡 ,75、150、300μg/ mL 的给药组细胞凋亡率分别达到 71272 %、111146 %、321572 % ,呈现出明显的剂量2效应关系。本研究结果表明 ,野西瓜挥发油抑制 SGC27901 细胞生长 ,并诱导细胞凋亡 ,并且与细胞周期的改变有关 ,且这种关系与其作用剂量有关。参考文献 :[ 1 ]  季宇彬 , 东 方 , 高世勇 , 等1 野西瓜多糖诱导 Hep G2 细胞凋亡的实验研究 [J ]1 中草药 , 2008 , 39 (9) : 1364213671[ 2 ]  白红进 , 赵小亮 , 刘文杰1 刺山柑果实挥发油化学成分的研究 [J ]1 安徽农业科学 , 2007 , 35 (9) : 2517225181[ 3 ]  《中国药典》[ S]1 一部 , 20051[ 4 ]  鄂 征1 组织培养和细胞技术 [ M ]1 北京 : 北京出版社 , 19951[ 5 ]  邹 翔 , 郎 朗 , 武晓丹 , 等1 西兰花中葡萄糖异硫氰酸盐诱导人胃腺癌 SGC27901 细胞凋亡的初步研究 [J ]1 中草药 ,2007 , 38 (2) : 22822311[ 6 ]  季宇彬 , 王宏亮 , 李 燕 , 等1 H13诱导人卵巢癌 A 2780细胞凋亡及其机制的研究 [J ]1 哈尔滨商业大学学报 :自然科学版 , 2006 , 22 (3) : 1241
痹祺胶囊全方及拆方抗炎镇痛作用研究
高  晶1 ,曾  勇1 ,于  飞2 ,1 ,庄露凝2 ,1 ,杨  凌3 ,刘昌孝1

(11 天津药物研究院 天津药代动力学与药效动力学省部共建国家重点实验室 ,天津  300193 ; 21 天津大学化工学院 ,
天津  300072 ; 31 中国科学院大连化学物理研究所 ,辽宁 大连  116023)
摘  要 :目的  研究痹祺胶囊全方及拆方的镇痛、抗炎作用 ,探讨君、臣、佐、使间的配伍规律。方法  采用小鼠热
板法和扭体法观察痹祺胶囊及拆方的镇痛作用 ;采用大鼠佐剂关节炎 (AA) 模型观察痹祺胶囊及拆方的抗炎作
用。结果  君药马钱子 ig 给予小鼠 50 mg/ kg (相当于处方用量) ,大鼠 215 mg/ kg (相当于处方用量) ,其镇痛、消
肿作用并不明显 ,只有高于处方 2 倍以上的用量 ,方可起到一定镇痛作用 ;动物单独 ig 臣、佐、使药后其镇痛、消肿
作用均不明显 ;君 + 臣、君 + 佐、君 + 臣 + 使、君 + 佐 + 使药配伍后镇痛作用不明显 ,对大鼠 AA 原发性和继发性肿
胀有明显消肿作用 ;君 + 使药配伍的镇痛作用和对大鼠 AA 原发性肿胀的消肿作用明显 ,而对 AA 大鼠足趾继发
性肿胀的消肿作用不明显 ;君 + 臣 + 佐药配伍既有明显镇痛作用 ,又有明显的消肿作用 ,痹祺胶囊全方 (君 + 臣 +
佐 + 使) 无论对小鼠的镇痛作用还是对 AA 大鼠足趾肿胀的消肿作用均非常明显。结论  痹祺胶囊具有明显的
抗炎、镇痛作用 ,臣、佐、使药对君药马钱子有减低用量 ,增强疗效的作用。
关键词 :痹祺胶囊 ; 配伍规律 ; 君臣佐使 ; 镇痛 ; 抗炎
中图分类号 :R28515    文献标识码 :A    文章编号 :025322670 (2009) 0120093204
  痹祺胶囊处方来源于汉代名医华佗传世验方
“一粒仙丹”,由马钱子、地龙、党参、茯苓、白术、甘
草、川芎、丹参、三七、牛膝等组成。中医认为痹症的
发生 ,“皆因体虚 ,腠理空疏 ,受风寒湿气而成”,可见
身体虚弱、正气不足、腠理不密、卫外不固是引起痹
症的内在因素 ,感受风寒湿邪是其外在因素 ,故治疗
应以益气养血、祛风除湿、散寒通络、活血止痛为治
疗原则。痹祺胶囊正是宗以上原则立论立法的。马
钱子是痹祺胶囊的“君药”,其有大毒 ,具有散寒消
肿、通络止痛作用 ;臣药由党参、白术、茯苓、丹参构
成 ,党参、白术、茯苓健脾益气 ,丹参养血和血 ,四药
同用益气养血 ,切中病机为臣药 ;佐药由三七、川芎、
·39·中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs  第 40 卷第 1 期 2009 年 1 月
①收稿日期 :2008205218
基金项目 :国家自然科学基金重点项目“确有疗效的中药药代动力学研究”课题 (30630075)
作者简介 :高 晶 (1960 —) ,女 ,天津市人 ,高级实验师 ,从事药代动力学和药效动力学研究工作。E2mail : gaojing 60 @126. com3 通讯作者 刘昌孝 中国工程院院士。Tel : (022) 23006863  E2mail : liuchangxiao @163. com