全 文 ：综上所述, 金思维能明显改善 APP 转基因小
鼠海马 CA1区神经元与突触的损伤,能提高突触相
关蛋白 Shank1 的表达。为金思维开发成为治疗
AD的新药提供了新的思路。然而金思维对神经损
伤保护作用的深入机制还不清楚, 有待进一步研究。
参考文献:
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灵芝孢子油对 N-甲基-N-亚硝脲诱导大鼠视网膜
光感受器细胞损伤的影响
邓新国, 林晓峰,高 杨,孙倩娜,钟志强*
(中山大学中山眼科中心 中山大学眼科学国家重点实验室,广东 广州 510060)
摘 要:目的 探讨灵芝孢子油对 N-甲基-N-亚硝脲 ( M NU ) 诱导的大鼠视网膜光感受器细胞变性动物模型的治
疗作用,为防治视网膜变性提供一种有价值的现代化中药。方法 大鼠随机分为 5 组, 对照组、灵芝孢子油治疗
组、二十二碳六烯酸 ( DH A) 治疗组、灵芝孢子油+ DHA 治疗组和模型组,在造模前 2 d 用不同的药物 ig 给药, 第
3 天采用 40 mg/ kg MNU 单次剂量 ip 造模,造模后继续 ig 给药至第 10 天, 造模后 1、3、5、7、10 d 进行视网膜电图
( ERG)检查,并取眼球进行眼病理检查。结果 不同用药组各时间点的 b 波振幅明显高于模型组 ( P < 01 05、
01 01) ;灵芝孢子油组的 a波振幅明显高于模型组 ( P< 01 05) , 但与 DHA 组和灵芝孢子油+ DHA 组相比较,无明
显差异 (P> 01 05)。眼病理结果,不同用药组在各个时间点与相应的模型组比较, MNU 诱导的大鼠视网膜光感受
器损伤均明显减轻 (P< 01 05)。结论 灵芝孢子油和 DHA 可减轻 MNU 对大鼠视网膜光感受器细胞的损伤程
度,促进 MNU 诱导的大鼠视网膜光感受器细胞损伤的功能恢复。
关键词:灵芝孢子油; 光感受器细胞; 视网膜色素变性
中图分类号: R2851 5 文献标识码: A 文章编号: 0253 2670( 2009) 03-0415-06
Effect of oil in Ganoderma lucidum spores on retina photoreceptor damage
of rats induced by N-methy-l N-nitrosourea
DENG Xin-guo, LIN Xiao- feng, GA O Yang, SUN Qian-na, ZHONG Zh-i qiang
( State Key Laborat ory of Ophthalmolo gy , Zhong shan Ophthalmic Center, Sun Yat- sen Univer sity, Guang zhou 510060, China)
Abstract: Objective T o approach the therapeut ical ef fect of the oil in Ganoderma lucidum spor es
( OGLS) on the retina pho to receto r damage of rats induced by N-methy-l N-nit ro sourea ( MNU) and look
#415#中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 40 卷第 3 期 2009 年 3 月
* 收稿日期: 2008- 07-08基金项目:教育部博士点基金新教师项目 ( 20070558281)作者简介:邓新国( 1961 ) ) ,男,河南郑州人,副研究员,博士,硕士生导师,研究方向为视网膜变性和干眼病的基础和临床研究。
T el : ( 020) 87330289 E-mail: dengx g61@ 163. n et
fo r a kind of effect ive modern Chinese mater ia medica fo r prevent ing and treat ing ret init is pigmentosa.
Methods Sprague-Daw ley ( SD) rats ( 150) w ere randomly div ided into f iv e groups: normal g roup, OGLS
group, docosahexaenoic acid ( DHA) g roup, OGLS combined w ith DHA group, and model g roup. A fter
tw o day s of ig adm inistr at ion w ith dif ferent medicines, besides the r ats in normal group, the rats in the
other groups w ere received a sing le do se of MNU ( 40 mg/ kg ) by ip injection in day 5. At dif ferent t imes,
1, 3, 5, 7, and 10 d, six rats in the dif ferent groups w ere examined w ith electr oretinog ram and their ey es
w ere enucleated af ter sacrif icing rats for patholog ical ex aminat ion. Results T he r esults from ocular elet ro-
r et inogram show ed that the b w ave amplitude of different medical t reated g roups w as obviously higher than
those of MNU model g roup at various t ime points, P< 01 05, or P< 01 01. T he a w ave amplitude of OGLS
group w as higher than those o f MNU model g roup, P< 01 05, but it w as not signif icant by comparing w ith
DHA group and OGLS combined w ith DHA group, P> 01 05. T he results f rom ocular patho logy show ed
that the ret inal photoreceptor damage of r ats induced by MNU was obviously relieved in the different
groups at various time points, compared w ith MNU model group, P< 01 05. Conclusion T he f inal r esults
suggest that OGLS and DHA could reliev e r et inal photorecepto r damage o f rats induced by MNU and pro-
mote ret inal functional r ecovery.
Key words: the oil in Ganoderm lucidum spor es ( OGLS) ; photoreceptor ; r et init is pigmentosa
视网膜色素变性 ( ret init is pigmento sa, RP)
是一组进行性的可致盲的单基因遗传性视网膜疾
病,以视网膜光感受器和色素上皮功能进行性受损
为主要特征,发病率约为 01 025%, 全世界受累人数
约为 100余万人 [ 1]。针对视网膜变性目前应用于研
究的动物模型主要有 4 类, 包括遗传性视网膜色素
变性动物模型 ( r d 小鼠、rds 小鼠和 RCS 大鼠)、基
因敲除或转基因动物模型、光照损伤和化学物质致
突变 剂 N-甲基-N-亚硝脲 ( N-methy-l N-nit ro-
sourea, MNU) 所致的视网膜光感受器细胞变性动
物模型[ 2~ 4]。以上视网膜变性发生机制均是通过光
感受器细胞凋亡所引起的,钙超载、自由基和氧化损
伤也起了关键的作用。对于 RP 的治疗至今未发现
确切有效的方法和手段。目前从实验和临床上探索
性治疗 RP 的方法主要有基因治疗、药物治疗、视网
膜移植治疗、干细胞移植治疗和人工视网膜植
入[ 5~ 7]。现已证实,单次剂量 ip MNU 可特异性导
致视网膜光感受器细胞的损伤和死亡, 该模型是用
于实验研究较为理想的视网膜变性动物模型 [ 4]。灵
芝孢子油是采用 CO2超临界萃取技术从灵芝孢子
中提取的油状物质, 含有三萜类、多糖类和核苷类等
有效成分,具有免疫调节功能、降低化学性和免疫性
肝损害、抗氧化和清除自由基、抗肿瘤等广泛的药理
作用[ 8, 9] 。新近研究表明, 灵芝孢子油对大脑神经
元的损伤有保护作用 [ 10]。因此,本研究拟探讨灵芝
孢子油对视网膜光感受器细胞损伤的保护作用, 期
望找到一种防治 RP 的现代中药。
1 材料
11 1 实验动物: SD 大鼠 150 只, 购于广州中医药
大学实验动物中心, 动物合格证号为 SCXK (粤)
2003-0001,体质量 110~ 130 g ,饲养于中山大学中
山眼科中心动物中心, SPF 饲养条件, 温度 ( 22 ?
2) e ,循环光照 (光照 12 h,黑暗 12 h)。
11 2 药品和试剂: M NU 购于美国 Sigma 公司,
- 20 e 冰箱保存; 灵芝孢子油、二十二碳六烯酸
( do cosahexaenoic acid, DHA ) 和灵芝孢子油+
DHA 购自 H olistal International Ltd. ,批号分别是
B05060102、B05060040、B05060102。Methacarn 固定
液由 60% 甲醛、30% 氯仿和 10% 冰醋酸组成,甲
醛、氯仿和冰醋酸均为分析纯,广州化学试剂厂生产;
美多丽为日本参天制药产品;氯胺酮购于福建古田药
业有限公司;氯丙嗪购于江苏林海药业有限公司。
11 3 仪器设备: 日本光电公司 Neuropack ) Ò 型
电生理仪, 刺激系统为美国 LKC 公司 Grass
PS ) 22 光刺激器和全视野刺激球;德国徕卡手动转
轮切片机;日本 Olympas 生物显微镜。
2 方法
21 1 动物分组和取材: 采用 50 日龄的雌性 SD 大
鼠 150只,饲养 2 d 后, 随机分为 5组,对照组 ( ig
赋形剂)、灵芝孢子油治疗组 ( ig 灵芝孢子油+ 赋形
剂)、DHA 治疗组 ( ig DHA + 赋形剂)、灵芝孢子
油+ DHA 治疗组 ( ig 灵芝孢子油+ DHA + 赋形
剂) 和模型组 ( ig 赋形剂)。在造模前 2 d 用不同的
药物 ig 给药, 每天 1次, 第 3 天采用 40 mg / kg 的
MNU 单次 ip 造模, 造模当天和造模后继续 ig 给
药,每天 1 次, 至第 10天。应用 01 5% 羟甲基纤维
素作为赋形剂, 给药体积为 1 mL, 灵芝孢子油、
DHA 用量为 21 0 g/ kg, 灵芝孢子油+ DHA 用量为
#416# 中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 40 卷第 3 期 2009 年 3 月
各自 11 0 g / kg, 每天称大鼠体质量, 根据大鼠体质
量计算药物用量。在造模后 1、3、5、7、10 d 各大鼠
ip 氯胺酮和氯丙嗪麻醉, 散瞳后做眼视网膜电流图
检查 ( ERG) , 检查完后过量麻醉处死大鼠, 眼球灼
烧做标记定位, 摘除眼球, 放入 Methacar n 液固定,
进行病理检查。
21 2 ERG 检查:大鼠用美多丽眼液散瞳后,暗适应
2 h, ip 氯胺酮 ( 50 mg / kg) 和氯丙嗪 ( 25 mg/ kg )
麻醉,再次散瞳, 滴 1% 卡因眼药水局麻和 01 5%
羟甲基纤维素钠眼液, 3根电极分别放于大鼠尾部、
舌下和眼表面,采用 Neur opack Ò 型电生理仪进行
测定,外部光刺激强度为 100 Hz, 同一眼球连续测
定 2~ 4次,记录 a 波潜伏期、b波潜伏期、a波振幅、
b波振幅。
21 3 眼病理检查: M ethacarn 液固定 24 h 后,经角
膜缘切开取出晶状体, 置于 50% 乙醇 1 h, 常规脱
水包埋 (包埋时眼球水平放置) , 切片厚度为 4 Lm。
通过视神经水平切片再经脱蜡, 苏木素染 10 m in,
伊红复染 5 s 和中性树胶封片, 光学显微镜下观察
视网膜光感受器细胞的损害程度, 并照相。
21 4 MNU 诱导视网膜外核层光感受器细胞损伤
的分级:视网膜外核层排列紊乱, 细胞核损伤, 但外
核层厚度未见明显减少者为损伤Ñ级, 计 1分;视网
膜外核层排列紊乱、细胞核损伤程度小于外核层厚
度的 1/ 2 者, 或外核层全层受损伤, 损伤范围约占
整个外核层长度的 1/ 6 者, 为损伤 Ò 级, 计 2分;视
网膜外核层全层受损伤, 损伤范围约占整个外核层
长度的 1/ 4者,为损伤Ó 级,计 4分; 视网膜外核层
全层受损伤,损伤范围约占整个外核层长度的 1/ 3
者,为损伤Ô 级,计 8分;视网膜外核层全层受损伤,
损伤范围大于整个外核层长度的 1/ 2 者, 为损伤 Õ
级,计 16分。
21 5 大鼠熄灭型视网膜电图的判定:大鼠眼视网膜
电图呈直线, a波振幅和 b波振幅均为零。
21 6 统计学处理:结果以 x ? s表示,采用 SPSS 101 0
统计软件进行统计分析,组间差异采用方差分析。
3 结果
31 1 对 MNU 诱导的大鼠视网膜光感受器细胞损
伤 ERG 潜伏期的作用: 由表 1 可知,除灵芝孢子油
组的第 1天和第 10天外,各组不同时间点与对照组
比较, a 波潜伏期和 b 波潜伏期均明显缩短 ( P<
01 05、01 01) ,各组 a 波潜伏期和 b 波潜伏期在第 3、
5天缩短较为明显。不同用药组在不同时间点与模
型组比较, a 波潜伏期和 b 波潜伏期无明显差异
( P> 01 05)。结果表明, 不同用药组对 MNU 所致
的大鼠视网膜外核层光感受器细胞损伤的ERG a
表 1 灵芝孢子油对 MNU 诱导的大鼠视网膜光感受器细胞损伤 ERG潜伏期的影响 ( x? s, n= 11 )
Table 1 Effect of OGLS on latent periods of electroretinogram in retinal photoreceptor damage
of rats induced by MNU (x ? s, n= 11 )
组别 剂量/
( g # kg- 1)
不同时间点的 ERG 潜伏期/ ms
第 1天 第 3天 第 5天 第 7天 第 10天
对照 - a 波 171 23 ? 21 69 171 16 ? 21 30 171 38 ? 21 67 171 26 ? 11 91 171 10 ? 2144
b波 751 16 ? 51 84 751 72 ? 61 04 741 76 ? 61 68 731 96 ? 71 20 731 85 ? 6123
灵芝孢子油 2 a 波 141 16 ? 71 65 101 46 ? 91 20* 101 35 ? 91 13* 101 45 ? 91 23* 121 43 ? 8169
b波 571 63 ? 311 49 431 28 ? 371 61* 421 92 ? 371 46* 431 46 ? 381 81* 511 52 ? 36115
DHA 2 a 波 101 35 ? 91 02* 81 64 ? 91 91* 81 30 ? 81 81* * 91 01 ? 91 56* 101 42 ? 9110*
b波 431 92 ? 381 08* 351 10 ? 371 34* * 341 92 ? 361 97* * 361 24 ? 381 45* * 431 23 ? 37188*
灵芝孢子油+ DHA 1+ 1 a 波 101 35 ? 91 05* 81 37 ? 81 93* * 61 47 ? 81 98* * 81 52 ? 91 15* * 101 22 ? 8188*
b波 431 59 ? 371 90* 351 33 ? 371 72* * 351 94 ? 381 12* 361 58 ? 381 75* * 411 92 ? 36139*
模型 - a 波 61 21 ? 81 17* * * 31 33 ? 71 03* * * 31 02 ? 61 37* * * 31 62 ? 71 64* * * 61 76 ? 8173* *
b波 281 70 ? 371 64* * 131 59 ? 281 67* * * 141 04 ? 291 84* * * 141 44 ? 301 47* * * 271 77 ? 36117* * *
与对照组比较: * P< 0105 * * P< 01 01 * * * P< 01 001
* P< 01 05 * * P < 01 01 * * * P < 01 001 v s cont rol group
波潜伏期和 b波潜伏期无明显影响。
31 2 对 MNU 诱导的大鼠视网膜光感受器细胞损
伤 ERG 振幅的作用: 由表 2可知,不同用药组各时
间点与对照组相比较, a 波振幅和 b 波振幅均明显
下降 ( P< 01 05、01 01) ;不同用药组各时间点的 b波
振幅明显高于模型组( P< 01 05、01 01) ; 灵芝孢子油
组的 a 波振幅和 b 波振幅与 DHA 组和灵芝孢子
油+ DHA 组相比较, 无明显差异 ( P> 01 05)。各
组 a 波振幅和 b波振幅在第 3、5 天降低较为明显。
降低强度为灵芝孢子油组+ DHA 组或 DHA 组>
灵芝孢子油组。结果表明, 灵芝孢子油和 DHA 对
MNU 诱导的大鼠视网膜外核层细胞损伤 ERG 的 a
波振幅和 b 波振幅的降低,有不同程度的阻抑作用。
31 3 各组大鼠熄灭型 ERG 出现频率比较: 由表 3
#417#中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 40 卷第 3 期 2009 年 3 月
表 2 灵芝孢子油对 MNU 诱导的大鼠视网膜光感受器细胞损伤 ERG振幅的影响 ( x ? s, n= 11 )
Table 2 Effect of OGLS on amplitudes of electroretinogram in retinal photoreceptor damage
of rats induced by MNU ( x? s, n= 11 )
组 别 剂量/
( g # kg- 1 )
不同时间点的 ERG 振幅/LV
第 1天 第 3天 第 5天 第 7天 第10天
对照 2 a波 451 87? 71 97 461 42? 81 92 451 40 ? 51 98 451 28 ? 71 75 441 91 ? 71 35
b波 2431 00? 421 97 2401 50? 401 55 2351 60 ? 391 71 2401 30 ? 411 07 2421 80 ? 451 69
灵芝孢子油 2 a波 281 08? 181 68* v 201 23? 191 92* * v 161 83 ? 141 95* * * v 191 70 ? 221 94* * * 221 16 ? 181 16* *
b波 941 91? 691 19* * * v v 761 10? 671 61* * * v v 671 78 ? 551 18* * * v v 721 62 ? 651 12* * * v 861 95 ? 631 5* * * v v
DHA 2 a波 181 43? 171 94* * * 141 13? 151 71* * * 101 27 ? 111 15* * * 161 61 ? 181 95* * * 191 70 ? 171 97* *
b波 661 90? 611 16* * * v 591 43? 651 22* * * v 471 85 ? 521 05* * * v 531 93 ? 581 06* * * v 641 71 ? 571 60* * * v
灵芝孢子油+ DHA 1+ 1 a波 161 79? 151 67* * * 121 80? 141 31* * * 91 11 ? 101 02* * * 121 06 ? 131 26* * * 161 43 ? 141 77* *
b波 631 99? 571 55* * * v 481 29? 51 77* * * v 441 73 ? 471 7* * * v 491 87 ? 531 02* * * v 611 47 ? 531 49* * * v
模型 - a波 91 41? 121 34* * * 31 71? 71 84* * * 31 49 ? 71 38* * * 41 23 ? 91 00* * * 91 34 ? 121 38* * *
b波 211 43? 271 97* * * 101 09? 21 62* * * 91 90 ? 211 00* * * 111 17 ? 231 55* * * 201 98 ? 271 31* * *
与对照组比较: * P< 0105 * * P< 01 01 * * * P< 01 001; 与模型组比较: v P< 01 05 v v P < 01 01
* P< 01 05 * * P < 01 01 * * * P < 01 001 v s cont rol group; v P < 0105 v v P< 01 01 v s m odel group
表 3 MNU 诱导的大鼠光感受器细胞损伤的熄灭型 ERG
在不同药物治疗组的反应 (x ? s, n= 11 )
Table 3 Responses of rat extinguishable electroretinogram
induced by MNU in different drugs therapeutic
groups ( x? s, n= 11)
组 别 剂量/
( g # kg - 1 )
熄灭型 ERG(眼数)
第 1天 第 3天 第 5天 第 7天 第10天
对照 - 0 0 0 0 0
灵芝孢子油 2 2 4 4 4 3
DHA 2 4 5 5 5 4
灵芝孢子油+ DHA 1+ 1 4 5 5 5 4
模型 - 6 8 8 8 6
可知,在不同时间点, 大鼠熄灭型 ERG 出现的眼
数,灵芝孢子油组最少, DHA 组和灵芝孢子油+
DHA 组相同, 模型组最多。
31 4 眼病理结果: 由表 4 和图 1 所知, 除 DHA 组
和灵芝孢子油+ DHA 组的第 1 天外, 不同用药组
与模型组比较, M NU 诱导的大鼠视网膜光感受器
细胞损伤均明显减轻 ( P< 01 05、01 01)。结果表明,
灵芝孢子油和 DHA 可阻抑 MNU 诱导的大鼠视网
膜光感受器细胞的病理损伤。
4 讨论
MNU 引起视网膜外核层损伤的机制是特异性
表 4 灵芝孢子油对 MNU 诱导的大鼠视网膜光感受器细胞病理损伤的影响 ( x ? s, n= 11 )
Table 4 Effect of OGLS on retinal photoreceptor cell pathologic damage of rats
induced by MNU ( x ? s, n= 11 )
组别 剂量/
( g # kg- 1)
光感受器细胞损伤的病变程度
第 1天 第 3天 第 5天 第 7天 第 10天
对照 0 0 0 0 0 0
灵芝孢子油 2 11 00 ? 01 67* * 11 80 ? 11 40* 21 60 ? 21 37* 21 40 ? 21 55* 21 20 ? 21 70*
DHA 2 11 40 ? 01 84* 21 20 ? 11 32* 21 90 ? 21 85* 21 80 ? 21 97* 21 60 ? 21 95*
灵芝孢子油+ DHA 1+ 1 11 40 ? 11 58 21 30 ? 11 34 31 00 ? 21 26* 21 80 ? 21 49* 21 70 ? 21 54*
模型 - 21 20 ? 11 03 41 60 ? 31 10 71 80 ? 61 13 71 60 ? 61 29 71 40 ? 61 45
与模型组比较: * P< 0105 * * P< 01 01
* P< 01 05 * * P < 01 01 v s model gr ou p
靶向视网膜光感受器细胞, 限制了该细胞核 DNA
的内旋,最终导致光感受器细胞的凋亡,同时表现为
Bax 上调、Bc-l 2下调和 Caspase-3、6、8 的激活 [ 11]。
通过前期的研究结果表明, 40 mg/ kg 的 MNU 用量
是诱导大鼠视网膜光感受器细胞发生最大损伤的初
始剂量,光感受器细胞的损伤发生在造模后第 1天,
第 3~ 5天即达最大损害 [ 12]。
ERG 可以反映视网膜光感受器细胞 (视杆细
胞和视锥细胞) 的功能, a波主要反映了视杆细胞的
功能, b 波主要反映了视锥细胞的功能。本研究结
果显示, 灵芝孢子油组、DHA 组和灵芝孢子油+
DHA 组在各时间点可明显提高大鼠 ERG 的 b波
振幅,灵芝孢子油组在各时间点可明显提高大鼠
ERG 的 a 波振幅。同时,不同用药组在各个时间点
可明显减轻 MNU 诱导的大鼠视网膜光感受器的
损伤 ( P< 01 05)。结果表明, 灵芝孢子油和 DHA
可不同程度减轻 MNU 诱导的大鼠视网膜光感受
器细胞的损伤,促进光感受器细胞损伤的功能恢复。
#418# 中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 40 卷第 3 期 2009 年 3 月
图 1 不同药物对 MNU 诱导的大鼠视网膜光感受器细胞损伤大鼠眼病理改变的影响
Fig. 1 Effect with different drugs on eye pathologic change of photoreceptor cell damage of rats induced by MNU
作用强度为灵芝孢子油> DHA > 灵芝孢子油+
DHA。
DHA 是一种存在于生物膜系统的 X-3 长链不
饱和脂肪酸, 在视网膜尤其是视杆/视锥细胞、外节
盘膜的量最为丰富,对视网膜的发育和功能起重要
作用。DHA 的前体是 A-18碳三烯酸 (A-亚麻酸) ,
在体内不能合成, 需从食物中摄取。一些研究发现
RP 动物模型及 RP 患者体内 DHA 降低。Morigu-
chi等[ 13]对 MNU 诱导的 SD大鼠视网膜光感受器
凋亡动物模型通过饮食补充 DHA,结果显示, DHA
可抑制该大鼠光感受器细胞的凋亡。M izota 等 [ 14]
对卡英酸 (结构类似 L-谷氨酸) 诱导的视网膜损伤
通过饮食补充 DHA 后, 大鼠视网膜和血清中的
DHA 水平升高、ERG 的 b 波提高, 同时神经节细
胞和内核层的细胞数明显增加。通过饮食补充
DHA 存在大鼠饮用量不准确和 DHA 易氧化等缺
点,本实验采用 ig 给予补充 DHA 克服了以上缺
点。本实验结果与以上学者的结果相类似, DHA
可保护 MNU 诱导大鼠视网膜的视功能和光感受
器细胞的损害, 但保护效果稍低于灵芝孢子油。
田戈夫等[ 8] 应用 SFE-GC-MS 对灵芝孢子油的
成分进行了测定,结果显示,灵芝孢子油富含多种不
饱和脂肪酸,不饱和脂肪酸占总量的 681 42%, 其中
亚油酸占 181 82%, 油酸占 431 63%。饱和脂肪酸
以棕榈酸和硬脂酸为主。Semenova 等 [ 15]报道视网
膜光感受器基质富含油酸, 并且,油酸与光感受器维
生素 A 结合蛋白 IRBP ( interphotor eceptor ret in-
oid-binding protein, IRBP) 的结合力强于 DHA。
油酸是一种单不饱和脂肪酸, 具有调血脂、降低血
糖、降低胆固醇、保护心脏和维持神经元细胞的完整
性等作用[ 16, 17] 。油酸可能在参与光子传递、盘膜的
形成和维持盘膜的完整性方面起重要作用。灵芝孢
子油的抗自由基和抗氧化作用可能对 MNU 诱导的
大鼠视网膜光感受器细胞损伤也具有重要的保护作
用,但灵芝孢子油减轻 MNU 诱导的大鼠视网膜光感
受器细胞损伤的具体作用机制仍有待深入研究。
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黄酮苷类与表皮生长因子受体结合模式的理论研究
王晶晶1, 2 ,刘 巍2 ,徐为人2* ,刘 鹏2 , 刘冰妮2 ,汤立达3
( 11 天津医科大学 基础医学院,天津 300070; 21 天津药物研究院 天津市新药设计与发现重点实验室, 天津 300193;
31 天津药物研究院 天津药代动力学与药效动力学省部共建国家重点实验室,天津 300193)
摘 要:目的 利用对接方法对黄酮苷类与表皮生长因子受体 ( epidermal gr ow th factor receptor , EGFR) 结合模
式和能力进行理论研究。方法 从 RCSB Protein 数据库检索 EGFR 晶体结构为受体, 收集黄酮苷类配体, 用
Schrodinger 8. 0 软件对受体和配体进行对接计算,分析其作用模式和对接分数。结果 EGFR 和黄酮苷类配体能
够较好对接,其作用模式大致分为Ñ 、Ò 和Ó 3 种, 3 位和 2c位的取代对结合模式的影响较大, 3、5、7、4c位取代的变
化对结合能力影响较大。结论 黄酮苷类化合物存在与 EGFR 较好的结合, 其中可能有选择性和多靶标的 EGFR
抑制剂存在,其取代位置和方式可以影响结合模式和能力,对于研究黄酮苷类抗肿瘤药物具有参考价值。
关键词:黄酮苷; 表皮生长因子受体; 对接计算; 结合模式
中图分类号: R2851 5 文献标识码: A 文章编号: 0253 2670( 2009) 03-0420-04
Theoretic studies on binding model between flavonoid glycosides
and epidermal growth factor receptor
WANG Jing- jing
1, 2
, L IU Wei
2
, XU We-i r en
2
, LIU Peng
2
, L IU Bing-ni
2
, TAN G L-i da
3
( 11 Basic Medical Colleg e, T ianjin Medical Univer sity, T ianjin 300070, China; 2. T ianjin Key Labor ator y of M olecular Design
and Drug D iscover y, T ianjing Institut e o f Pharmaceutical Resear ch, T ianjin 300193, China; 3. T ianjin State Key Laborato ry
of Pharmacokinetics and Pharmacodynamics, T ianjin Instit ute o f Pharmaceut ical Research, T ianjin 300193, China)
Abstract: Objective To study binding model and capacity betw een f lavonoid g lycosides and epidermal
grow th factor recepto r ( EGFR ) w ith docking calculat ion. Methods Crystal str uctures of EGFR were
downloaded from RCSB Pro tein Data Bank. F lavonoid g lycosides w ere collected as the lig ands. The sof t-
w are Schr odinger 8. 0 w as employed to dock the ligands into the recepto rs, and the binding models and
docking scores w er e analyzed. Results Flavono id g lycosides and EGFR could bind w ell. The binding mo-
del could be classif ied into types Ñ , Ò , and Ó . Substitutions at posit ion 3 and 2c most ly affect the bind-
ingmodel, and at posit ion 3, 5, 7 and 4c most ly af fect the binding capacity . Conclusion Among flavono id
gly cosides, there m ight be select ive EGFR inhibitor s and mult iple tar geted PTKs inhibitors. The binding
#420# 中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 40 卷第 3 期 2009 年 3 月
* 收稿日期: 2008- 08-22基金项目:科技部支撑项目 (项目编号 2007BAI41B00,课题编号 2007BAI41B01) ; 天津市支撑项目 ( 07ZCKFSH 00300)作者简介:王晶晶,女,山东人,硕士研究生,研究方向为新药设计和筛选。E-mail: jess icasnow 77@ yah oo. cn
* 通讯作者 徐为人 T el: ( 022) 23003529 E-mail: xw rt j@ yah oo. com . cn