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北柴胡各器官中总黄酮动态变化研究



全 文 :北柴胡各器官中总黄酮动态变化研究①
谭玲玲, 蔡 霞3 , 胡正海3
(西北大学生命科学学院, 陕西 西安 710069)
摘 要: 目的 测定北柴胡各器官中总黄酮的量, 并揭示不同物候期茎叶中的总黄酮动态变化规律。方法 采用可
见光分光光度法。结果 北柴胡中的黄酮类物质主要积累在其茎叶和生殖器官中, 根中的量很少。在茎叶的发育过
程中, 盛花期的总黄酮量最高, 座果时的量有所下降, 果实成熟时的量又开始上升, 在枯萎前期时, 两者中的总黄酮
量又恢复到一个比较高的水平。结论 对北柴胡中黄酮类物质的开发利用应重点选择叶片, 可以在第一年的北柴
胡植株枯萎前期采收其地上部分, 从而达到综合利用此种药用植物的目的。
关键词: 北柴胡; 茎; 叶; 总黄酮; 动态变化
中图分类号: R 28216   文献标识码: A    文章编号: 0253- 2670 (2008) 02- 0286- 02
  柴胡为常用中药, 以根入药, 具解表和里、疏肝
解郁等功效[1 ]。以往对柴胡化学成分的研究多集中
于柴胡皂苷方面, 但柴胡地上部分中还含有黄酮类
物质, 这些成分具利胆、抑菌, 杀菌等作用[2 ]。如江苏
金陵药厂以烟台柴胡B up leu rum ch inense DC1 f1
p ek inense (M uell2A rg1) Shan et Y1 L i 地上部分中
的黄酮制成了柴酮片, 治疗上呼吸道感染; 此外, 江
苏植物所曾从北柴胡B 1 ch inense DC1 茎叶中提取
了北柴胡茎叶总黄酮, 用于抗流感病毒[3 ]。为此, 本
实验对北柴胡各器官中的总黄酮的量及其动态变化
进行了研究, 以期为此种药用植物的基础研究积累
资料, 并为其综合开发利用提供科学依据。
1 材料与方法
111 材料: 实验材料于 2006 年 5 月至 11 月按其物
候期: 开花前期 (5 月中旬)、盛花期 (7 月下旬)、果期
(9 月中旬)、果熟期 (10 月中旬)、枯萎前期 (11 月上
旬)在西北大学生物园内分别采自一、二年生的北柴
胡栽培植株。材料经干燥后粉碎, 过 40 目筛, 样品测
定前, 经 50 ℃烘干 15 h 后, 取出, 置干燥器中冷却
至室温备用。
112 仪器和试剂: M A 200 电子天平, KS- 80D 型
超声提取仪, H itach i CR 22G 型离心机, DR - HW
- 1 型电热恒温水温箱 (北京西城区医疗器械厂) ,
752C 型紫外可见光分光光度计。
芦丁对照品购于成都思科华生物技术有限公司
(质量分数> 98% ) ; 95% 乙醇、N aNO 2、A l (NO 3 ) 3、
N aOH 等试剂均为分析纯。
2 方法与结果
211 供试品溶液的制备: 精密称取各样品 2 g 于大
试管中, 分别加入 30% 乙醇溶剂 10 mL , 在 70 ℃超
声波间隙振摇 015 h, 室温下12 000 röm in 离心 20
m in, 提取滤过液, 滤液用 30% 乙醇定容于 50 mL 量
瓶中。
212 标准曲线的绘制: 精密称取芦丁对照品 25
m g, 置 25 mL 量瓶中, 加 60% 乙醇沸水溶液, 室温
下配成 1 m gömL 芦丁对照液。分别量取 015、1、
115、2、215、3 mL 对照品溶液于 10 mL 量瓶中, 加
入 30% 乙醇 2 mL 和 5% N aNO 2 017 mL 摇匀, 6
m in 后加入 10% A l (NO 3 ) 3 溶液 017 mL 摇匀, 6
m in 后再加入 4% N aOH 5 mL 摇匀, 再加入 30%
乙醇至刻度, 摇匀, 30~ 40 ℃水温箱中显色 15 m in。
以试剂空白为参比, 用紫外分光光度计在 510 nm
处测定吸光度, 得到质量浓度 (C ) 与吸光度 (A ) 的线
性回归方程A = 61070 5 C + 01404 3, r= 01998。
213 精密度试验: 取同一一年生北柴胡茎供试品溶
液, 重复测定 6 次, 计算总黄酮的量。结果总黄酮的
平均质量分数为 01916% , R SD 为 1112% (n= 6)。
214 重现性试验: 取同一供试品 (二年生开花前期
北柴胡叶) 样品 6 份, 每份 2 g, 精密称定, 制备供试
品溶液, 测定, 计算总黄酮的量。结果总黄酮的平均
质量分数为 41092% , R SD 为 1132% (n= 6)。
215 稳定性试验: 取同一一年生北柴胡叶供试品溶
液, 分别于制备后 0、2、4、6、8 h 测定, 结果总黄酮的
平均质量分数为 41127% , R SD 为 2106% (n = 5) ,
·682· 中草药 Ch inese Traditiona l and Herbal D rugs 第 39 卷第 2 期 2008 年 2 月
① 收稿日期: 2007206216
基金项目: 国家自然科学基金资助项目 (30770122) ; 陕西省自然科学基金资助项目 (2004C102)
作者简介: 谭玲玲 (1980- ) , 女, 山东文登人, 在读博士生, 主要从事结构植物学研究。 
T el: (029) 88302050 E2m ail: tan lingling80@ 1631com3 通讯作者 蔡 霞 E2m ail: caix iah2003@ sina1com; 胡正海 E2m ail: zhenghaihu@ sina1com
表明供试品溶液在 8 h 内稳定。
216 加样回收率试验: 精密称取一年生北柴胡茎 6
份, 准确加入等量芦丁对照品, 制备供试品溶液, 分
别进行测定, 计算总黄酮的量, 结果平均回收率为
1011966% , R SD 为 1173 (n= 6)。
217 样品测定: 精密量取各样品浸提液 10 mL , 进
行显色测定, 依据线性回归方程, 来换算样品中总黄
酮的量, 结果见图 1、2。
图 1 一、二年生北柴胡不同器官中总黄酮的量
F ig11 Con ten t of f lavono ids in d ifferen t organ s
of annual and bienn ia l B 1 ch inense
图 2 二年生北柴胡茎、叶不同发育时期总黄酮的量
F ig12 Con ten t of f lavono ids in d ifferen t
developmen ta l per iods of stem
and leaf in bienn ia l B 1 ch inense
  在不同生长年限的北柴胡中, 就营养器官而言,
黄酮主要积累在叶中; 在茎和根中的量比较少, 特别
是根中的量很低。而在各生殖器官中的量都比较高。
同时, 各器官中总黄酮的量随着生长年限的增加而
有所变化。其中二年生的花和幼嫩果实中的总黄酮
的量都远远高于一年生的; 而二年生根、叶中总黄酮
的量虽较一年生的有所增加, 但增加的幅度不显著;
茎和成熟果实中的较一年生的有所减少。。
北柴胡茎中总黄酮量的变化随生长发育期不同
而呈现出一定的动态变化: 即总黄酮均在盛花期的
茎叶中的量最高, 当植株座果时其量有所下降, 而在
果实成熟时, 其量又开始上升, 在枯萎前期时, 其量
又达到了另一个比较高的值。
3 讨论
实验结果表明, 北柴胡中也含有大量的黄酮类
物质。它主要积累在茎叶和生殖器官中, 根中的量很
少。之所以出现这种结果, 可能与黄酮类物质的某些
理化性质有关。据报道, 黄酮类物质具有毒性, 有驱
虫、杀虫的作用, 且能防御草食动物对植物的吞噬及
病原微生物的侵害。同时, 黄酮类物质是最主要的紫
外吸收物, 它的主要作用是减少UV 2B 辐射对植物
自身的伤害, 并促进紫外吸收物的合成[4, 5 ]。因此, 在
北柴胡中, 相对于埋藏于地下的根而言, 其存在于地
上部分的茎叶和各生殖器官中总黄酮的量高是有一
定生理意义的。同样道理可以解释二年生北柴胡幼
嫩果实中的量高于成熟果实中的。因为成熟果实的
果皮坚硬, 对自身能起到一定的保护作用; 相对而
言, 幼嫩果实需要更多的黄酮类物质来增强对自身
的保护。而在茎叶的不同发育时期中, 以盛花期的茎
叶中的总黄酮的量最高, 经过一定的波动, 在枯萎前
期时两者中的总黄酮的量又恢复到一个比较高的
水平。
由于药用植物中的有效成分的积累动态与植物
生长发育阶段的关系是确定药材适宜采收期的重要
指标[6 ]。因此, 根据以上结果, 建议充分利用北柴胡
除传统药用部位根以外的其他器官, 而其黄酮类物
质的开发利用应重点选择叶片, 可以在第一年北柴
胡植株枯萎前期采收其地上部分, 提取黄酮类物质,
保留其地下部分, 从而达到综合利用此种药用植物
的目的。
参考文献:
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·782·中草药 Ch inese Traditiona l and Herbal D rugs 第 39 卷第 2 期 2008 年 2 月