全 文 ：·920· 中草菊ChineseTraditionalandHerbalDrugs第39卷第6期2008年6,El
温莪术HPLC指纹图谱研究
兰泽伦1，李敏1’孙，李校坌2，刘德军2，贾君君1，张钰苓1
(1．成都中医药大学，四川成都610075；2．温州医学院，浙江温州325035)
摘要：目的采用HPLC法建立温莪术药材的指纹图谱。方法用KromasilODS一1(250mitt×4．6mm，5pm)色
谱柱，乙腈和水为流动相，采用梯度洗脱，体积流量：0．8mL／min，柱温35℃。检测波长244nm。结果建立了HPLC
指纹图谱共有模式，并对不同产区的温莪术药材进行了相似度比较。结论温莪术药材中各成分均得到了较好的
分离，可作为温莪术药材专属性的指纹图谱。
关键词：温莪术；HPLC；指纹图谱
中图分类号：R282．7 文献标识码：A 文章编号：0253—2670(2008)06—0920一03
《中国药典))2005年版一部莪术的来源为姜科
植物蓬莪术CurcumaphaeocaulisVa ．、广西莪术C．
kwangsiensisS．G．LeetC．F．Liang或温郁金
C．wenyujinY．H．ChenetC．Ling的干燥根茎。
后者习称“温莪术”[1]。温莪术为我国商品莪术的主
流品种之一，浙江省著名的道地药材。其味辛、苦，性
温，归肝、脾经，具有行气破血、消积止痛之功效，主
要成分为挥发油和姜黄素两大类成分，挥发油中所
含p榄香烯、吉马酮、莪术二酮、莪术酮等成分具有
较强的生理活性，在抗肿瘤、抗菌、抗病毒等方面有
较好的作用[2]。根据指纹图谱技术要求，采用HPLC
法建立温莪术药材的指纹图谱，可作为其内在质量
控制的评价方法。
1实验材料
1．1 样品来源：见表1。样品经成都中医药大学中药
鉴定与药用植物教研室李敏教授鉴定均为姜科植物
温郁金C．wenyujinY．H．ChenetC．Ling的干燥
根茎。
1．2 仪器与试药：VARIAN高效液相色谱仪。吉马
酮对照品(中国药品生物制品检定所提供，批号
111665—200401)；莪术二酮对照品(澳门大学李绍平
教授提供，质量分数>98％)。乙腈为色谱纯，水为重
蒸水，其余试剂均为分析纯。
2方法与结果口~51
2．1 色谱条件：KromasilODS一1(250mm×4．6
mlTl，5弘m)色谱柱；检测波长：244nm；体积流量：
0．8mL／min；柱温：35℃；流动相：乙腈一水。梯度洗
脱(o～20min乙腈比例为20％～55％；20～40min
表1样品来源
Table1 Sourcesofsamples
乙腈比例为55％～65％；40～60min乙腈比例为
65％～100％)。
2．2对照品溶液的制备：精密称取吉马酮对照品、
莪术二酮对照品适量，加甲醇制成吉马酮60pg／
mL，莪术二酮0．25mg／mL的溶液，即得。
2．3供试品溶液的制备：取温莪术细粉0．5g，精密
称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25mL，称定
质量，超声提取1h，静置放冷，再称定质量，加甲醇
补足减失的质量，摇匀，静置，取上清液用微孔滤膜
滤过，即得。
2．4测定方法：分别吸取对照品溶液和供试品溶液
各20pL，注入液相色谱仪，结果见图1、2。空白溶剂
对温莪术指纹图谱的检出无干扰。
2．5方法学考察
收藕日期：2007—09—29
基金项目：浙江省科学技术厅重大科技项目(2005C13019)
作者简介：兰泽伦(1982一)，男。四川省成都市人，硕士。2007年毕业于成都中医药大学药学院，主要研究方向为中药品种与质量研究。
*通讯作者李敏Tel：13980038316E—mail：0281imin@163．corn
万方数据
中草菊 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第39卷第6期2008年6月·921·
0．00 10．1420．2930．4340．5850．7260．5771．0I
t／mln
D1一吉马酮D2一莪术二酮
D1一gerrnacroneD2-curdione
圈1对照品色谱图
Fig．1Chromatogramofreferencesubstance
．．kU忆b．I．1．I J一。
0．00 10．1420．2930．4340．5850．7260．8771．OI
t／rain
圈2供试品色谱田
Fig·2Chromatogramofsampletested
2．5．1精密度试验：取供试品溶液(批号1)，连续进
样6次，考察色谱峰保留时间的一致性，各主要色谱
峰保留时间的RSD值均小于2％，同时考察各色谱
峰的相似度，用相似度评价软件计算，测得的色谱指
纹图谱与其所得的共有模式图的相似度分别为：
0．996、0．997、0．995、0．997、0．997、0．998，均大于
0．99，表明精密度良好。
2．5．2稳定性试验：取供试品溶液(批号1)，分别在
0、2、4、6、8、12、24h进行检测，考察各色谱峰保留
时间的一致性，各主要色谱峰保留时间的RSD值均
小于2％，同时考察各色谱峰的相似度，用相似度评
价软件计算，测得的色谱指纹图谱与其所得的共有
模式图的相似度分别为：1．000、0．998、0．996、
0．999、0．997、0．996、0．998，均大于0．99，表明供试
品溶液在24h内稳定。
2．5．3重现性试验：取温莪术药材(批号1)5份，制
备供试品溶液5份，依法检测，考察各色谱峰保留时
间的一致性，各主要色谱峰保留时问的RSD值均小
于2％，同时考察各色谱峰的相似度，用相似度评价
软件计算，测得的色谱指纹图谱与其所得的共有模
式图的相似度分别为：0．997、0．998、0．997、0．998、
0．996，均大于0．99，表明重现性好。
2．6指纹图谱的建立：取温莪术药材15批，制备供
试品溶液，依法检测，得到244nm的HPLC指纹图
谱，采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统A版进
行全谱的相似度评价及共有图谱拟合，参照《中药注
射剂指纹图谱研究的技术要求(暂行)》，确定了11
个特征峰构成温莪术的指纹图谱，其中84峰为莪术
二酮，104峰为吉马酮。药材1～15号中位数相关系
数依次为0．950、0．936、0．971、0．904、0．974、0．965、
0．948、0．973、0．933、0．908、0．942、0．954、0．970、
0．963、0．966，均大于0．90，相关性良好。色谱图见
图3、4。
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t／rain
S1～s15-1～15批温莪术药材R一共有模式图
S1--S15-RhizomaCurcu e1—15R-commonpattern
圈3 15批药材HPLC指纹图谱
Fig．3HPLCFingerprintof15batches
ofRhizomaCurcumae
6
5
11卜一．n一1f卜
0．00 10．15 20．30 30．45 40．60 57．75 60．90 71．01
t／rain
图4共有模式图
Fig．4Commonpattern
2．7不同采收期温莪术HPLC指纹图谱比较：采用
相似度评价软件对11、12月不同采收期温莪术药材
4批(12、13、14、15号)进行相似度评价，中位数相关
系数依次为0．939、0．980、0．991、0．992，均大于
0．90，相关性良好。色谱图见图5。
3结论与讨论
3．1本研究首次建立了温莪术HPLC指纹图谱，并
采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统A版对不同
万方数据
·922· 中簟蒋ChineseTraditionalandHerbalDrugs第39卷第6期2008年6月
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t／rain
s1～S4一温莪术药材12～15号R一共有模式图
S1--$4一RhizomaCurcumae1——15R-commonpattern
图5不同采收期温莪术HPLC指纹图谱
Fig．5HPLCFingerprintofRhizomaCurcumae
fromdifferentcollectionperiods
产地的温莪术药材的HPLC指纹图谱进行相似度评
价，结果表明其指纹图谱相互间较为吻合，虽然由于
样品的个体差异，特征峰的相对量存在一定的差异，
但整体轮廓均符合共有特征。同时从药材整体色谱
图人手，选取了11个特征峰构成了温莪术的指纹图
谱，以共有模式作为温莪术的鉴别标准，能提供更全
面的质量控制信息。实验证明该方法操作性强，重现
性好，可以作为温莪术内在质量控制的评价方法，同
时也可作为莪术主成分制剂指纹图谱研究的基础。
3．2不同产地温莪术药材指纹图谱的相关系数均
大于0．90，相关性良好，表明虽然产地不同，但化学
成分却相对稳定，反应了其具有较高的遗传稳定性。
3．3不同采收期温莪术样品虽然成分的量有差异，
但其色谱概貌一致，符合温莪术药材的指纹特征。
参考文献：
E1]中国药典ES3．一部．2005．
[23李敏．中药材规范化生产与管理(GAP)方法及技术[M1．
北京：中国医药科技出版社，2004．
[3]谢培山．中药色谱指纹图谱[M]．北京，人民卫生出版社．
2004．
[4]李敏，周娟．中药材质量与控制[M]．北京：中国医药
科技出版杜，2005．
[5]李敏．李校垄．中药材市场动态与应用前景[M]．北京t
中国医药科技出版社，2005．
不同种源鱼腥草中甲基正壬酮变异规律研究
吴令上1，斯金平H，周 慧1，诸 燕1，蓝云龙2
(1．浙江林学院天然药物研发中心，浙江临安311300)2．丽水市林业科学研究所，浙江丽水323000)
摘要：目的揭示全国主产区鱼腥草种质资源甲基正壬酮量变异规律，为鱼腥草优良品种选育提供基础。方法
用气相色谱法测定23个种源鱼腥草中甲基正壬酮的量，并分析形态特征、地理位置、生长性状与甲基正壬酮的关
系。结果不同种源鱼腥草中甲基正壬酮存在显著差异，与纬度呈正相关，与植物形态存在一定的关系，与植株高
度和地径没有显著的相关性。结论 鱼腥草种质资源甲基正壬酮的量存在一定的变异规律，针对鱼腥草甲基正壬
酮选择新品种时，应优先考虑在纬度高、生长快的种源中选择。
关键词：鱼腥草；种源；甲基正壬酮；气相色谱法
中围分类号：R282．2 文献标识码：A 文章编号：0253—2670(2008)06—0922—04
鱼腥草Houttuyniacord taThunb．具有清热
解毒、消痈排脓、利尿通淋等功能，用于肺痈吐脓、痰
热喘咳、热淋、热痢、痈肿疮毒等症[1]，是常用的大宗
药材。建立鱼腥草GAP基地是保证原料供应及成药
“安全、有效、稳定、可控”的关键，而开展鱼腥草种质
资源遗传多样性研究，选育有效成分量高且稳定的
优良品种是建立GAP基地的基础。本实验用气相色
谱法对立地条件、栽培时间、田间管理、施肥种类、施
肥时间与数量、采收与加工方法等方面均一致的23
个全国主产区鱼腥草种源药材中甲基正壬酮进行测
定，评价全国鱼腥草主产区种质资源，并研究其遗传
变异规律，为选育鱼腥草优良品种提供依据。
1材料与方法
1．1 材料
1．1．1供试样品：试验用的鱼腥草包括江西、贵州、
福建、云南、浙江、河南、湖南、广西、重庆、四川、安徽
等省23个种源，根据生长期的主要形态特征(表1)，
可将其分为两个类型(表2)；类型1主要表现为生长
收稿日期：2007．09—21
蕹喜番异：羹琴皇搿技奠翌墨只浙(20江05平c阳32人05，2硕)984 士研究生，从事药用植物遗传育种。 E—mail：shan92002012@163．eolll作者简介：吴令上(1 一 ，女，浙江平阳人，硕士研究生，从事药用植物遗传育种。 一 2@
*通讯作者斯金平E—mail：lssjp@163．com
万方数据
温莪术HPLC指纹图谱研究
作者： 兰泽伦， 李敏， 李校堃， 刘德军， 贾君君， 张钰苓
作者单位： 兰泽伦,贾君君,张钰苓(成都中医药大学,四川,成都,610075)， 李敏(成都中医药大学,四川
,成都,610075;温州医学院,浙江,温州,325035)， 李校堃,刘德军(温州医学院,浙江,温州
,325035)
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2008,39(6)
被引用次数： 3次

参考文献(5条)
1.中华人民共和国药典(一部) 2005
2.李敏 中药材规范化生产与管理(GAP)方法及技术 2004
3.谢培山 中药色谱指纹图谱 2004
4.李敏;周娟 中药材质量与控制 2005
5.李敏;李校堃 中药材市场动态与应用前景 2005

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1.廖婉.章津铭.傅舒.林俊芝.高飞.傅超美 醋莪术饮片HPLC指纹图谱研究[期刊论文]-中药材 2012(10)
2.崔洋.王巧.张兰桐.孔德志.段坤峰 河北道地药材连翘的高效液相色谱指纹图谱研究[期刊论文]-中草药 2010(2)
3.祝明.张鹏.唐登峰.陈碧莲.陆静娴.方丽 莪术油的HPLC指纹图谱研究[期刊论文]-中草药 2011(1)
4.祝明.张鹏.唐登峰.陈碧莲.陆静娴.方丽 莪术油的HPLC指纹图谱研究[期刊论文]-中草药 2011(1)


本文链接：http://d.wanfangdata.com.cn/Periodical_zcy200806040.aspx