全 文 ：化合物Ï:白色针状结晶( EtOAc) , mp 137～
138℃, Liebermann-Burchard 反应呈阳性, Molish
反应呈阴性。与 B-谷甾醇共薄层, Rf值及显色行为
完全一致,混合熔点不下降。IR MKBrmax( cm - 1) : 3 438,
2 934, 2 889, 1 655, 1 640, 1 379, 1 051, 1 020, 955,
798。EI-MS (m/ z) : 415[M+ H] + , 397[M- OH] +。
故确定化合物Ï为 B-谷甾醇。
化合物Ð:白色粉末,极性较大, 难溶于丙酮、甲
醇,易溶于吡啶。浓硫酸乙醇显色为紫红色,与胡萝
卜苷标准品进行 TLC对照, 在多种溶剂系统中 Rf
值均一致,且混合熔点不下降,所以确定其为B-胡萝
卜苷( daucosterol)。1H-NMR数据与文献一致[ 8]。
化合物Ñ:白色粉末。IR、1H-NMR和13C-NMR
数据与文献值[ 7]相比较, 确定化合物Ñ的结构为豆
甾醇。
化合物Ò:白色粉状结晶 (MeOH) , mp 277～
279℃, Liebermann-Burchard 反应和 Molish 反应
均呈阳性。薄层酸水解检出葡萄糖。NMR 数据与文
献中的 $5, 22 豆甾醇-3-O-B-D -吡喃葡萄糖苷对照
基本一致[ 9]。
参考文献:
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业杂志, 1994, 25( 6) : 252-255.
荜茇化学成分的研究(É) ¹
吴　霞1, 于志斌2 ,叶蕴华1 ,周亚伟2*
( 1. 北京大学化学与分子工程学院 生物有机与分子工程教育部重点实验室, 北京　100871;
2. 北大世佳研究中心, 北京　100084)
摘　要:目的　对荜茇P ip er longum的化学成分进行研究, 为阐明其有效成分提供依据。方法　利用硅胶、反相 C18
和凝胶柱色谱对荜茇 95%乙醇提取物的二氯甲烷和醋酸乙酯萃取部分进行化学成分分离, 根据光谱数据和理化性
质鉴定各化合物的结构。结果　分离到 10 个化合物,分别是胡椒碱(É)、methyl piper ate(Ê)、几内亚胡椒碱(Ë)、
苯丙酸 (Ì)、胡椒次碱 (Í)、胡椒新碱(Î )、墙草碱(Ï )、( E) -4-[ ( 2-methypropyl) amino] -4-oxo-2-butenoic acid
(Ð)、pipernona line (Ñ)、B-谷甾醇(Ò)。结论　化合物Ê、Ì、Ð为首次从该种植物中分离得到。
关键词:荜茇;生物碱;苯丙酸
中图分类号: R284. 1　　　文献标识码: A　　　文章编号: 0253- 2670( 2008) 02- 0178- 03
　　荜茇为胡椒科植物荜茇 P iper longum L. 的未
成熟的果穗。收载于《中国药典》2005年版, 主要产
于印度尼西亚、菲律宾、越南,我国云南有野生, 海南
岛有栽培。临床用于胃痛、腹泻、脚气、目盲、龋齿痛
等[ 1]。维吾尔医用于寒性关节骨痛、腰膝酸痛、胃虚
食少、肝脾闭阻, 配合其他药可治癫痫昏迷, 是维吾
尔医常用的药材品种, 收载于《中华人民共和国药品
标准维吾尔药分册》[ 2]。荜茇果实的提取物常用作抗
炎、杀菌剂,早期的研究表明胡椒科的植物中具有杀
菌作用的活性成分为酰胺类化合物[ 3]。近年来的药
理学研究表明, 荜茇的乙醇提取物及其所含的胡椒
碱具有免疫调节和抗肿瘤作用。本实验进行了荜茇
的水及 95%乙醇提取物对小鼠 H 22肝癌实体瘤的影
响实验, 结果表明荜茇 95%醇提取物( 20 g 生药/
kg)对小鼠瘤重与荷瘤对照组比较明显降低, 差异
具有显著性(P < 0. 05) ,抑瘤率为 41. 55%。为了阐
·178· 中草药　Chinese Traditional and Herbal Drugs　第 39卷第 2期 2008 年 2 月
¹ 收稿日期: 2007-08-05作者简介:吴　霞( 1967- ) ,女,安徽省桐城市人,博士,副研究员,主要从事天然产物化学研究。　E -mail : wuxia6710@163. com
* 通讯作者　周亚伟　Tel: ( 010) 62538007　Fax : (010) 62538501　E-mail: ywzhou@pku. edu. cn
明荜茇抗肿瘤的活性成分,本实验对荜茇进行了化
学成分的研究, 从其 95%乙醇提取物中得到 10个
化合物,根据光谱数据和理化性质测定,分别鉴定为
胡椒碱 (É)、methyl piperate (Ê)、几内亚胡椒碱
(Ë)、苯丙酸(Ì)、胡椒次碱(Í)、胡椒新碱(Î)、墙
草碱(Ï)、(E ) -4-[ ( 2-methypropyl) amino] -4-oxo-
2-butenoic acid (Ð)、pipernonaline (Ñ)、B-谷甾醇
(Ò)。其中化合物Ê、Ì和Ð为首次从该种植物中分
离得到。
1　仪器与材料
Yanaco MP- 500型显微熔点测定仪; Bruker
ARX- 400 MHz 超导核磁共振仪, 内标为 TMS;
Finnigan LCQ deca XP Plus 型质谱仪 ( San Jose
CA) ;高效薄层板 GF 254为烟台市化学工业研究所烟
台化工科技开发实验厂产品;柱色谱硅胶( 100～200
目, 200～300 目)均为青岛海洋化工厂产品;反相
C18硅胶为德国Merk公司产品; Sephadex LH-20为
Pharmacia公司产品;所用试剂均为分析纯。荜茇于
2006年 3月购自新疆乌鲁木齐维吾尔药材市场,由
新疆药物研究所刘庆华研究员鉴定为荜茇 P ip er
longum L. 的果穗。
2　提取与分离
荜茇干燥果穗 15 kg, 95%乙醇回流提取 3 次,
每次 1 h, 滤过,合并滤液, 回收乙醇得浸膏 1. 0 kg,
将浸膏溶于适量的水中, 依次用石油醚、二氯甲烷、
醋酸乙酯及正丁醇萃取,对得到的二氯甲烷萃取物
( 252 g)以氯仿-甲醇溶剂系统经硅胶柱色谱、甲醇-
水系统经反相硅胶柱色谱及反复 Sephadex LH-20
柱色谱得到化合物É ( 2. 2 g)、Ê( 500 mg)、Ë ( 2
g)、Ì( 3 g)、Ñ( 300 mg)、Ò( 20 mg)。对醋酸乙酯萃
取物( 65 g)以氯仿-甲醇溶剂系统经硅胶柱色谱、甲
醇-水系统经反相硅胶柱色谱及反复 Sephadex LH-
20 柱色谱和重结晶等手段分离得到化合物Í ( 60
mg)、Î( 60 mg)、Ï( 25 mg)、Ð( 40 mg)。
3　结构鉴定
化合物É:无色方晶(甲醇) , mp 135～136 ℃。
碘化铋钾反应阳性。ESI-MS m/ z: 286[M+ H] + ,
308[M+ Na] + 。1H-NMR(CDCl3 , 400 MHz)D: 6. 43
( 1H , d, J = 14. 6 Hz, H-2) , 7. 40( 1H, m, H -3) , 6. 72
( 1H, m, H-4) , 6. 74( 1H, m, H-5) , 6. 97( 1H, d, J =
1. 4 Hz, H-2′) , 6. 77( 1H, d, J = 8. 0 Hz, H-5′) , 6. 88
( 1H, dd, J = 8. 0, 1. 4 Hz, H-6′) , 5. 96( 2H , s, -O-
CH2-O-) , 3. 57 ( 2H, br . s, H-1″) , 1. 60 ( 2H, m, H -
2″) , 1. 66( 2H , m, H -3″) , 1. 60( 2H, m, H-4″) , 3. 57
( 2H , br . s, H -5″)。13C-NMR ( CDCl 3, 100 MHz) D:
165. 4( C-1) , 120. 0 ( C-2) , 142. 4( C-3) , 125. 3( C-
4) , 138. 2( C-5) , 131. 0(C-1′) , 105. 6( C-2′) , 148. 0
(C-3′) , 148. 0 ( C-4′) , 108. 4 ( C-5′) , 122. 5( C-6′) ,
101. 2( -O-CH2-O ) , 43. 2 (C-1″) , 26. 2( C-2″) , 24. 6
(C-3″) , 26. 2( C-4″) , 46. 7(C-5″)。以上1H-NMR和
13C-NMR数据与文献报道一致[ 3] ,故鉴定为胡椒碱。
化合物Ê:无色针晶(甲醇) , mp 148～150℃。
ESI-MS m/ z: 255[M+ Na] +。1H-NMR(CDCl3, 400
MHz)D: 5. 94( 1H , d, J = 14. 6 Hz, H-2) , 5. 98( 2H,
s, -OCH2O-) , 6. 69( 1H, dd, J = 15. 6, 4. 8 Hz, H-4) ,
6. 74( 1H, m, H-5) , 7. 00( 1H, d, J = 1. 8 Hz, H-2′) ,
6. 79 ( 1H, d, J = 7. 8 Hz, H-5′) , 6. 81 ( 1H, d, J =
15. 6 Hz, H-5) , 6. 92 ( 1H, dd, J = 8. 1, 0. 6 Hz, H-
6′) , 6. 98( 1H, d, J = 0. 6 Hz, H-2′) , 7. 43( 1H, dd,
J = 15. 3, 10. 8 Hz, H-3 ) , 3. 76 ( 3H , s, -OCH3 )。
13C-NMR ( CDCl3, 100 MHz) D: 167. 5( C-1) , 119. 9
( C-2) , 144. 9 ( C-3) , 124. 4 ( C-4 ) , 140. 2 ( C-5 ) ,
130. 5 ( C-1′) , 105. 8 ( C-2′) , 148. 5 ( C-3′) , 148. 2
(C-4′) , 108. 5 ( C-5′) , 122. 9 ( C-6′) , 101. 3
( -O-CH2-O-) , 51. 5 ( -OCH3 )。以 上 1H-NMR 和
13C-NMR数据与文献报道一致[ 4] , 故鉴定为 methyl
piperate。
化合物Ë:白色针晶(石油醚-丙酮 3∶1) , mp
115～ 117℃。碘化铋钾反应阳性。 1H-NMR和
13C-NMR数据与文献报道一致[ 3] ,故鉴定为几内亚
胡椒碱。
化合物Ì:白色腊状物, mp 72～74℃。ESI-MS
m / z: 173[M+ Na] + 。1H-NMR(CDCl3, 400 MHz) D:
7. 30( 2H, m, H-2′, 6′) , 7. 22 ( 3H , m, H-3′, 4′, 5′) ,
2. 96( 2H, t , J = 7. 8 Hz, H -2) , 2. 69( 2H, t , J = 7. 8
Hz, H-3)。13C-NMR(CDCl3, 100 MHz)D: 179. 2(C-
1) , 35. 6(C-2) , 30. 5(C-3) , 140. 1( C-1′) , 128. 2(C-
2′) , 128. 5(C-3′) , 126. 3(C-4′) , 128. 5(C-5′) , 128. 2
(C-6′)。根据1H-NMR和13C-NMR数据及质谱,鉴定
为苯丙酸。
化合物Í:白色针晶(甲醇) , mp 80～82 ℃。碘
化铋钾反应阳性。1H-NMR和13C-NMR数据与文献
报道一致[ 5] ,故鉴定为胡椒次碱。
化合物Î:无色针晶(甲醇) , mp 112～115℃。
碘化铋钾反应阳性。1H-NMR和13C-NMR数据与文
献报道一致[ 3] , 故鉴定为胡椒新碱。
化合物Ï;无色针晶(甲醇) , mp 120～123℃。
碘化铋钾反应阳性。1H-NMR和13C-NMR数据与文
·179·中草药　Chinese Traditional and Herbal Drugs　第 39卷第 2期 2008 年 2 月
献报道一致[ 3] ,故鉴定为墙草碱。
化合物Ð:无色针晶(甲醇) , mp 135～136 ℃。
碘化铋钾反应阳性。ESI-MS m/ z: 170[M- H] +。
1H-NMR( DMSO-d6, 400 MHz) D: 8. 51( 1H, br . s, -
COOH) , 6. 53( 1H, d, J = 15. 5 Hz, H-2) , 7. 01( 1H,
d, J = 15. 5 Hz, H-3) , 3. 01( 2H, t , H-1′) , 1. 74( 1H,
m, H-2′) , 0. 86 ( 6H, d, J = 6. 6 Hz, H-3′, 4′)。
13C-NMR (CDCl3 , 100 MHz) D: 166. 4 (C-1) , 129. 4
( C-2) , 137. 1(C-3) , 163. 0( C-4) , 46. 3(C-1′) , 27. 9
(C-2′) , 20. 0(C-3′, 4′)。以上1H-NMR和13C-NMR数
据 与文 献报道 一致[ 4] , 故 鉴定为 ( E ) -4-[ ( 2-
methypropyl) amino] -4-oxo-2-butenoic acid。
化合物Ñ:白色针晶(石油醚-丙酮 3∶1) , mp
125～ 127 ℃。碘化铋钾反应阳性。1H-NMR和
13C-NMR数据与文献报道一致[ 3] , 故鉴定为 piper -
nonaline。
化合物Ò:白色针晶 (醋酸乙酯) , mp 135～
138 ℃。易溶于氯仿、醋酸乙酯,难溶于甲醇。与对照
品 B-谷甾醇共薄层, Rf 值与显色行为完全一致, 混
合熔点不下降, 故鉴定为 B-谷甾醇。
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高效液相色谱-电喷雾-质谱法分析山茱萸中的化学成分¹
赵新峰1 ,孙毓庆2
( 1. 大连大学医学院, 辽宁 大连　116622; 2. 沈阳药科大学,辽宁 沈阳　110016)
摘　要:目的　建立山茱萸中化学成分的高效液相色谱-电喷雾-质谱分析方法。方法　采用Zorbax SB-C18色谱柱,
乙腈-水二元梯度洗脱; Agilent 电喷雾离子阱多级质谱仪;负离子检出模式。结果　在负离子检出模式下,山茱萸的
总离子流色谱图特征性很强, 通过质谱中的主要碎片对莫罗忍冬苷、山茱萸裂苷、没食子酸、1, 2, 3-三-O-没食子酰
葡萄糖和 1, 2, 3, 6-四-O-没食子酰葡萄糖 5 种主要成分进行了结构解析。结论　在质谱负离子检出模式下,多数化
学成分响应较好, 为山茱萸药材质量控制提供了一种新的方法。
关键词:高效液相色谱-电喷雾-质谱法;山茱萸 ;莫罗忍冬苷;山茱萸裂苷;没食子酸; 1, 2, 3-三-O-没食子酰葡萄糖;
1, 2, 3, 6-四-O-没食子酰葡萄糖
中图分类号: R284. 1　　　文献标识码: A　　　文章编号: 0253- 2670( 2008) 02- 0180- 03
　　山茱萸为山茱萸科植物山茱萸 Cornus of f ici -
nal is Sieb et Zucc. 的干燥果肉, 有补益肝肾、收敛
固脱的功效, 主治头晕目眩、耳聋耳鸣、腰膝酸软、遗
精滑精、小便频数、虚汗不止、妇女崩漏。山茱萸中主
要含有糖苷类、糅质类、有机酸和挥发性成分。苷类
成分主要有番木鳖苷( loganin)、莫罗忍冬苷( mor -
roniside )、7-O-甲基莫罗苷 ( 7-O-methyl-morroni-
side )、山茱萸裂苷( cornuside)等, 有机酸类成分主
要有熊果酸( ursolic acid)、没食子酸( gallic acid)
等。目前,对山茱萸的质量控制有高效液相色谱[ 1, 2]、
毛细管电泳[ 3]等方法,尚未见有液质联用分析方法
的报道。
与传统的紫外检测器、电化学检测器、激光诱导
荧光检测器等相比, 质谱检测器具有信息量更丰富、
应用范围更广等优势,目前在中药分析中得到了广
泛的认可和越来越多的应用[ 4～7]。本实验对山茱萸
进行了 HPLC-MS 分析, 对其中的 6 种化学成分进
行了质谱解析。在质谱负离子检出模式下,多数化学
成分响应较好, 与传统的仅检测某一化学成分相比,
更能真实客观地反映山茱萸的内在质量,为山茱萸
·180· 中草药　Chinese Traditional and Herbal Drugs　第 39卷第 2期 2008 年 2 月
¹ 收稿日期: 2007-06-12作者简介:赵新峰( 1976- ) ,男,博士,主要从事药品的质量控制分析方法研究。　
T el: ( 0539) 5030588　E-mail: zhaoxinfengwy@21cn . com