全 文 ：中草菊ChineseTraditionalandHerbalDrugs第39卷第6期2008年6月·901·
·药材与资源·
半夏叶片总RNA四种提取方法及效果的比较
昊林1’2，薛建平h¨，徐有明2，田振东2
(1．淮北煤炭师范学院生物系，安徽淮北235000；2．华中农业大学园艺林学学院，湖北武汉430070，
3．资源植物生物学安徽省重点实验室，安徽淮北 235000)
摘要：目的针对三叶半夏成熟叶片化学成分复杂，富含多糖、酚类及其他多种化学物质的特点．选择优化一种
简便、经济、高效的半夏成熟叶片高质量总RNA提取方法。方法用4种不同的RNA抽提方法如异硫氰酸胍法、皂
土法、CTAB—LiCI法和改进的sDs／酚法提取总RNA．通过电泳、紫外分光光度计检测以及RT—PCR验证等对提取
结果进行分析比较。结果 4种方法均能从半夏成熟叶片中提取到总RNA。其中皂土法的提取过程只需3～4h，是
其他3种提取方法所用时间的一半。提取1g叶片的成本只有其他3种方法的1／13～1／14。此法提取的总RNA18S、
28S带型清晰无弥散，完整性好，无严重的蛋白质和其他杂质污染，A。／A：。。为1．8～2．0．A：。。／A：。。大于2．0，且总
RNA的产率高，为365．744弘g／g鲜重，提取的总RNA适用于RT—PCR试验。结论皂土法提取的RNA完全适用
于DDRT—PCR、Northernblotti g、cDNA文库构建等分子生物学研究，是一种快速、经济，适于抽提半夏总RNA的
好方法。 一
关键词：半夏；RNA提取；皂土法；异硫氰酸胍法；CTAB—LiCl法；SDS／酚法
中图分类号：R282．1 文献标识码：A 文章编号：0253—2670(2008)06—0901一05
ComparisonoffourmethodsandtheirefficiencyfortotalRNAextraction
fromleavesofP跏elliaternata
WULinl”，XUEJian—pin91“，XUYou—min92，TIANZhen—don91
(1，DepartmentofBiology，HuaibeiCoalIndustryTeachers’College，Huaibei235000，Ch na：2．College
ofHorticultureandForestrySciences，HuazhongAgriculturalUniversity，Wuhan430070，China；
3．AnhuiKeyLaboratoryofPlantResourcesandBiology。Huaibei235000。China)
Abstract：ObjectiveToopt mizeasimple，economic．andefficie tm hodfortotalRNAextraction
withhigh—qualityfrommatureleavesofPinelliaternatawhichhasplentyofpolysaccharides，phenols，and
manyotherchemicalsubstances．MethodsFourmethods，i．e．guanidineisothiocyanate，bentonite，
CTAB—LiCl，andthemodifiedSDS／phenol，wereusedtoextracttheotalRNA．Thentheresultsofthe
extractionwerecomparedandanalyzedby lectrophoresis，UVspectrophotometerdetection，andRT—PCR
verification．ResultsAmonga lofthefourmethods，thebentonitemethodtookonlyabout3—4h，
whichwashalftimeoftheotherthreem thods，andtheCOStofextracting1 glearwas1／13—1／14ofthe
otherthree．The18Sand28SbandsofthetotalRNAextractedbybentonitemethodwereclearndno
dispersion。thei tegrityoftheRNAwaswell，andtherewasnoobviouscontaminationwi hpr teinsa d
otherimpuritiesintheRNAextracts．TheratiosfA260／A280wereequalto1．8—2．0andA260／A230over
2．0．theyieldoftotalRNAwashigherat365．744tLg／gfreshweight．ThetotalRNAwasappliedtoRT—
PCRtest．ConclusionThebe tonitemethodiSquick，economic，andefficie tfor hetotalRNA
extractionfr mtheleavesofP．ternata．TheRNAiSsuitableforDDRT—PCR，Northernblotting，cDNA
libraryconstruction，andothermolecularbiologyresearch．
Keywords：Pinelliatern ta(Thunb．)Breit．；RNAextraction；bentonitemethod；guanidine
isothiocyanatemethod；CTAB—LiClmethod；SDS／phenolmethod
收稿日期：2007·09—20
基金项目：国家农业成果转化资金资助项目(05EFN213400124)
作者简介：吴林(1981一)，男。华中农业大学2005级硕士研究生，主要从事植物分子生物学研究。E—mail：wulin206@126．com
*通讯作者薛建平Tel：(0561)3802025E—mail：xuejp2000@yahoo．tom．ca．
万方数据
·902· 中草菊ChineseTraditionalandHerbalDrugs第39卷第6期2008年6月
我国传统中药材半夏为天南星科半夏属多年生
草本植物半夏Pinelliaternata(Thunb．)Breit．的
块茎，其组织中化学成分复杂，富含多糖、酚类及多种
次生代谢物质，药用价值很高[1]。从分子生物学的角
度来研究我国传统中药材已引起人们的高度重视，但
半夏分子生物学领域的研究刚起步，eDNA文库构
建、RNA印迹、基因克隆和基因表达分析等是分子生
物学研究的重要内容，开展这些研究最基本的条件是
抽提出高质量的总RNA。关于植物总RNA抽提方法
已多有报道[2“]，但是植物材料细胞壁厚，细胞内富
含蛋白质、多糖及鞣质、萜烯、色素、酚类等物质，很不
利于总RNA的提取及其逆转录、酶切等实验操作[5]。
不同植物或同一植物的不同组织中内含物组分及量
也有较大差异，因此，没有一种适合于所有植物总
RNA的提取方法，必须针对不同植物材料的特点，对
总RNA的提取方法进行优化选择，才能达到高效提
取高质量总RNA的目的。目前，有关半夏总RNA的
抽提方法未见报道。由于半夏组织中化学成分复杂，
内含物丰富，为此，本研究尝试4种方法从其叶片中
提取总RNA，以期找到一种理想的抽提方法。
1材料和方法
1．1 实验材料：半夏块茎采自安徽省淮北市南湖开
发区高科技农业示范中心国家半夏人工种子中试基
地，由薛建平教授鉴定为天南星科植物半夏P．
ternata(Thunb．)Breit．，于25℃温室培养至成苗，
取其成熟叶片，清洁后吸干水分，于液氮中快速冷冻
并保存于一70℃或直接用于RNA的提取。
实验操作中使用的塑料制品如Eppendorf管、
吸头等用0．1％焦碳酸二乙酯(DEPC)水处理12h，
然后高压灭菌后备用。玻璃器皿于280℃干热灭菌
3h。电泳槽等用去污剂清洗后用3％H：O：处理10
min，再用DEPC处理灭菌水冲洗干净。
1．2主要试剂：异硫氰酸胍、DEPC为Amreseo产
品；RQDNasel、RNasin、M—MLV反转录酶、ng酶
为Promega产品；dNTP、锚定引物、特异引物为上
海生工产品；其余生化试剂均为进口及国产分析纯。
用于总RNA提取的所有配制的溶液(Tris除
外)均需经0．1％DEPC处理12h，高压灭菌后方可
使川；含Tris的溶液用经高压灭菌的0．1％DEPC
处理的水配制；其余试剂高压灭菌后使用。
1．3 总RNA抽提
1．3．1异硫氰酸胍法：(1)在研钵中加入0．8g(或贮
存于一70℃的)新鲜叶片，用液氮研磨；(2)将粉末移
入预冷的50mL离心管中，加入2mL．RNA抽提缓
冲液(4mol／L异硫氰酸胍，25mmol／L柠檬酸钠，
0．5％十二烷基肌氨酸，4％p巯基乙醇)；(3)依次加
入2mol／L醋酸钠(pH4．O)0．5mL，水饱和苯酚
2mL，水饱和氯仿0．5mL，充分混匀，在冰上冷却至
少10min；(4)10000r／rain、4℃离心20min。将水
相移入一新鲜的50mL离心管中，加入等体积异丙
醇，一20℃放置2h以沉淀RNA；(5)10000r／rain、
4℃离,L‘,20min。倾去上清液，用75％乙醇洗涤RNA；
(6)将RNA溶解于800pLDEPC处理水中，再将其
转入2mL4,离心管，然后加入500pL的水饱和苯酚
和600弘L水饱和氯仿，振荡混匀。4℃下以12000r／
min离心15min以便充分沉淀蛋白质；(7)收集上层
相，加入1／lO体积的2mol／L醋酸钠(pH4．o)和等
体积的异丙醇，一20℃沉淀总RNA2h；(8)4℃下
以12000r／rain离心15min，倾去上清液，以1mL
75％乙醇浸泡总RNA30min，倒出乙醇，凉干总
RNA至胶状，最后将沉淀溶解于适量DEPC处理水
中，一70℃深冷冰箱贮藏备用。
1．3．2皂土法：(1)取新鲜叶片0．8g，在液氮中研磨
成粉末并快速转移到预冷的50mL离心管中；(2)加
入2mL皂土提取缓冲液I-z5mmol／L柠檬酸钠(pH
7．0)，10mmol／LEDTA，100mmol／LNaCl，0．5％
SDS，4％p巯基乙醇，0．5％皂土]，剧烈振荡混匀。
加1倍提取缓冲液体积的水饱和酚，继续振荡混匀；
再加1倍提取缓冲液体积的氯仿，振荡混匀，4℃，
12000Xg离心15min；(3)取上清液到一新管，加入
1／2体积的5mol／LKAc(pH4．8)，冰上放置10
min；4℃，13000×g离心10min；(4)取液相到另一
新离心管，加人1／2体积的水饱和酚和1／2体积的氯
仿，振荡混匀，4℃，1000×g离心5min；(5)重复
抽提，直到界面清亮；(6)取上清液再加入等体积的氯
仿抽提1次。将上清液转到新管中，加入等体积的乙
二醇丁醚，一20C放置1h；4℃，14000×g，离心15
min；(7)去液相，沉淀用75％乙醇洗2次。空气中干
燥，溶于适量DEPC处理水中，一70℃保存。
1．3．3CTAB—LiCl法：(1)取0．8g实验材料，在液
态氮中研碎后放入50mL离心管，按固液比1：10
加入2×CTAB液[2％CTAB，0．1mol／LTris—HCl
(pH8．O)，20mmol／LEDTA(pH8．O)，1．4mol／
LNaCl，加入2．o0APVP、4．0％p巯基乙醇(用时再
加)]，65℃水浴中放置10min；(2)加入等体积的氯
仿一异戊醇，搅拌后于室温下8000r／min离心10
min，回收上清液；(3)再一次加入等体积的氯仿一异
戊醇，轻轻搅拌后室温下8000r／min离心10min，
万方数据
中草焉 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第39卷第6期2008年6月·903·
回收上清液并分装入2mL离心管；(4)加入1／3体
积的8mol／L氯化锂，在一20℃放置2h以上，4℃
条件13000r／min离心10min，待沉淀物风干(或真
空干燥)后溶于适量DEPC处理水；(5)然后再分别
用等体积的苯酚一氯仿、氯仿一异戊醇各抽提1次后，
回收水溶液加入1／3体积的8mol／L氯化锂，一20
℃放置2h以上；(6)于4℃条件下13000r／min离
心10min，回收沉淀，用75％乙醇洗净，真空干燥后，
溶于适量的DEPC处理水中，一70℃保存。
1．3．4改进的SDS／酚法：(1)称取约0．8g叶片，液
氮研磨粉碎；(2)加入80℃预热的提取缓冲液3．4
mL(100mmol／LLiCl，100mmol／LTris，50
mmol／LEDTA，1％SDS，使用前加入2％PVP和
4％p巯基乙醇)，充分混匀，冰浴15min；(3)4℃，
12000r／min离心15min，移上清液至一新离心管
中，加入1／3体积5mol／LKAc(pH4．8)，充分混
匀，冰浴10min，移上清液至一新的离心管中；(4)4
℃，12000r／min离心15min，移上清液至一新离心
管中。加入等体积氯仿一异戊醇(24：1)，充分混匀，冰
浴15min；(5)4℃，12000r／min离心15min，移上
清液至一新离心管中，加入等体积的预冷异丙醇，
一20℃放置2h；(6)4℃，12000r／min离心15
min，弃上清液12000r／rain离心15min，弃上清液，
用600弘L重悬缓冲液(2mol／LLiCI；50mmol／L
EDTA)重悬沉淀；(7)4℃，12000r／min离心15
min，弃上清液，75％乙醇清洗沉淀两次，室温下干
燥；(8)沉淀溶于适量DEPC处理水中，一70℃保存。
1．4 总RNA检测
1．4．1总RNA的纯度及完整性检测：分别取不同
方法提取的半夏总RNA样品，在1．0％的非变性琼
脂糖凝胶上电泳检测完整性；RNA样品用灭菌的
DEPC处理水稀释80倍，用紫外分光光度计测定吸
光度(A)，计算样品A。。。／A。。。、A。。。／A：。。的值，并计算
得率[得率(P．g／g)=A260×40(pg·弘L_1)×稀释倍
数xRNA原液体积(弘L)／所取叶片质量]。
1．4．2RT—PCR检测：(1)总RNA中的DNA去除
及纯化：取20～40Pg总RNA用DnaseI去除基因
组DNA，纯化后溶于适量(40弘L)DEPC处理水中。
(2)逆转录反应：取5弘L上述除去DNA的总RNA
分别加入2肛L10／_￡mol／L锚定引物(AAGCT，。G或
AAGCT。。A)，用DEPC处理的无菌水将终体积调整
为11pL，70℃保温10min，迅速置于冰上急冷2min
以上，离心数秒，依次加入4pL5×M—MLVBuffer，
2ttLdNTPs(各10mmol／L)，1肛LRNase抑制剂
(40U／t生L)，加RNasefreedH20至19ttL，混匀后置
于37℃水浴平衡2min，加入1弘LRTaseM—MLV
(RNaseH一)(200U肛L)，然后在37℃水浴反应
1 h，最后70℃保温15min灭活逆转录酶。逆转录产
物进行琼脂糖电泳检测。(3)PCR反应：20弘LPCR
反应体系：逆转录产物1pL、2pL10×PCRBuffer、
2pLMgCl2(25mmol／L)、2弘LdNTPs(2mmol／
L)、0．2pLng聚合酶(5U／t_tL)与逆转录时对应
的锚定引物1pL，10umol／L10met的随机引物1
弘L，补加无菌水至终体积为20pL。在PCR仪上以如
下反应条件进行扩增：94℃、2．5rain；94℃、30s，
38‘C、lmin，72℃、1．5min，35个循环；72℃延伸5
min，4℃保存。扩增产物进行琼脂糖电泳检测。
2结果与分析
2．1不同方法提取总RNA的完整性、纯度与产率：
不同方法提取总RNA经1．0％的非变性琼脂糖凝胶
电泳检测，结果见图1。异硫氰酸胍法、皂土法和
CTAB—LiCI法提取出的总RNA18S、28S带型清晰
无弥散，完整性好，加样孔内干净，说明无蛋白质和
其他杂质污染，但在加样孔附近有微弱条带，有轻微
DNA污染。异硫氰酸胍法提取的总RNA有较高的
5S条带，皂土法提取的5S条带较弱，CTAB—LiCI法
提取的5S条带最弱。紫外分光光度计检测结果显
示，这3种方法的A。。。／A：。。的值均在1．8～2．0，A：。。／
A啪的值均大于2．0，得率均较高(表1)，说明这3种
方法所提的半夏叶片总RNA纯度高，质量好。而改
进的SDS／酚法提取出的总RNA没有明显的18S、
28S条带，条带弥散，总RNA不完整，降解较严重，
另外，在加样孔里有荧光，加样孔附近有明显的条
带，说明蛋白质和DNA污染严重，其A：。。／A：。。大于
2．3(表1)。
’
2．2不同提取方法所用时间及成本比较：从上述分
析结果与多次重复试验表明异硫氰酸胍法、皂土法
和CTAB—LiCI法均能提取出完整的半夏叶片的总
R A。但提取时问和成本各不相同，比较结果见表
1。皂土法最经济方便，提取过程只需3--4h，是其他
3种提取方法所用时间的一半，提取叶片的成本[成
本=(提取液成本+纯化液成本)／所用叶片质量]只
有其他方法的1／13～1／14。所以，皂土法是提取半夏
成熟叶片总RNA的最经济、有效方法。
2．3 RT—PCR：为了验证皂土法提取的总RNA完
全可以用于RT—PCR、差异显示等分子生物学方面
万方数据
·904· 中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第39卷第6期2008年6月
A一异硫氰酸胍法融皂土法C—CTAB-LiCI法n改进的SDS／酚法
A·-guanidinesothiocyanatemethodB—-bentoniteme hodC—-CTAB--LiCImethodD--modifiedSDS／phenolmethod
图1 4种不同方法提取的半夏叶片总RNA电泳检测结果
Fig．1ElectrophorogramofextractedtotalRNAfromleavesofp．ternatabyfourdifferentm thods
裘1 4种不同方法提取的半夏叶片总RNA质■、
效率及成本比较
Table1 Comparisonofquality，efficiency，andcost
ofextractedtotalRNAfromleavesofP．
ternatabyfourdifferentm thods
的研究，以皂土法提取的总RNA为模板进行RT—
PCR试验。
2．3．1 总RNA中的DNA去除及纯化：去除了
DNA后的总RNA经1．0％的非变性琼脂糖凝胶电
泳检测(图2一A)显示：18S和28S条带带型清晰，无
弥散，点样孔内干净，说明总RNA完整性好，无蛋白
质及DNA等杂质，可进行后续试验。
2．3．2 逆转录反应：以皂土法提取消化DNA后的
总RNA为模板，选取AAGCTl。G和AAGCT。。A为
引物，分别进行逆转录反应。逆转录产物经非变性琼
脂糖凝胶电泳检测(图2一B)。结果显示cDNA片段大
小主要集中分布在250～2500bp，由于植物RNA相
对较短，因此在这个范围内的cDNA是很完整的，反
映出提取的总RNA质量较高，降解轻微。
2．3．3PCR反应：随机挑取4个随机引物(GAT—
CTCAGAC、GATCATAGCC、GATCAA—TCGC和
GATCTAACCG)分别与逆转录时的锚定引物
(AAGCT。。G、AAGCT。。A)随机组合进行PCR扩增
反应，扩增结果(图2一C)表明：片段介于100-2000
bp，带型清晰，多态性好。
3讨论
植物总RNA可用多种方法提取，在保证质量的
前提下，选择一种简便、经济、快速的方法对于后续
的分子生物学研究十分必要。本研究根据半夏成熟
叶片中多糖和酚类等物质量较多的特点，选择4种
抽提方法进行了系统比较，异硫氰酸胍法和CTAB—
LiCl法能够提取出完整的、较高产率的半夏叶片总
RNA，但操作步骤繁琐，提取时间长(多于7h)，成
本高。LiCl只能选择性地沉淀高相对分子质量的
RNA，会导致低相对分子质量RNA的丢失，同时样
品中残余的LiCI可能会干扰后续研究。而改进的
SDS／酚法，虽然作了严格操作和相应的调整，但提
取时间较长，抽提出的总RNA质量很差。皂土具有
吸附蛋白质及有效抑制RNase的特性[6]，将一定量
的皂土加人到RNA提取缓冲液中可以在早期抑制
及吸附样品中的RNase等蛋白质，从而减少了后期
用苯酚一氯仿抽提去蛋白的次数，降低了因苯酚一氯
仿抽提造成的RNA损耗，提高了产率，节省了时间，
整个提取过程3～4h完成，大大减少了RNA被内
外源RNA酶降解的机会。半夏叶片中含有较多糖类
和酚类物质，多糖的许多理化性质与RNA相似，在
提取过程中能与RNA共沉淀，很难将它们分开，酚
类化合物在匀浆时极易被氧化成醌类物质，与RNA
不可逆地结合，从而影响总RNA的分离纯化[7]。而
在皂土提取液中加入的较高浓度的p巯基乙醇，可
有效防止酚的氧化，打断多酚氧化酶的二硫键而使
之失活[8J。在沉淀RNA之前加入1／2体积的
5mol／LKAc(pH4．8)，能有效去除样品中的多
糖，从而提高了RNA抽提质量‰引。用50％乙二醇丁
醚来沉淀RNA，可使混于RNA中的多酚溶于其中
万方数据
中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第39卷第6期2008年6月·905·
A一消化DNA后的半夏叶片总RNA／3-反转录产物eDNA(泳道：M一2000DLMaker·1一以AAGCTloG为引物，2-以AAGCTt0A为
引物)C—PCR扩增产物(泳道1～4一锚定引物为AAGCTloG，随机引物分别为GATCTCAGAC、GATCATAGCC，GATCAATCGC
和GATCTAACCGI泳道5～8一锚定引物为AAGCTloA。随机引物与泳道1～4相同：泳道M·2000DLMaker)
A—totalRNAfromP．ternataleaveswasremovedDNAB-reverest anscriptedeDNA(Lanes：M·2000DLMaker，1一aprimefor
AAGCTloG，2-aprimeforAAGCTIoA)C—productsofPCRamplification(Lanes1—4一anchoredprimerisAAGCTIoG，arbitrary
primerisGATCTCAGAC，GATCATAGCC．GATCAATCGC，andGATCTAACCG，respectively；Lanes5—8-anchoredprimer
isAAGCTl0A，arbitraryprimeiss melanes1—4fLaneM一2000DLMaker)
圈2皂土抽提半夏叶片总RNART—PCR电泳检测结果
Fig．2EIectrophorogramofRT—PCRforextractedtotalRNAfromleavesofP．ternatabybentoniteme hod
而被除去[1州。皂土法提取的半夏叶片总RNA纯度[4]LiYY，WangzH，Zhangz·Aneffectivemethodfor
较高，完整性好，排除了多糖、酚类等杂质的污染，能 Bex池tr枷acti蒯ng。gt，ot，8：。翟0。怒?。竺：?⋯““”衄”m·
成功地用于RT—PCR的研究。该方法所用试剂价格[53李宏，王新力．植物组织RNA提取的难点及对策[J]．生
低，用量少，耗材使用量少，大大降低了抽提成本，并 物技术通报，1999·15(1)：36—39·
且操作简便，花费时间短，重复性好。所以，优化后的 口3：嚣乏0i等竺：。二慧：：：亲；，呈’篾．AdT出ranRs。f，e：
皂土法是一种抽提半夏叶片总RNA的好方法。同 2002．30(14)：3026—3033．
时，本研究结果也可为其他草本植物总RNA的提取 [7]LoomisWD·o”ercomingproblemsofphenolicsandquinines
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1
山药微型块茎诱导形成的影响因子研究
李明军h2，刘欣英2，李萍2，张晓丽2，赵喜亭2，柳俊1，谢从华H
(1．华中农业大学园艺林学学院园艺植物生物学教育部重点实验室，湖北武汉430070；
2．河南师范大学生命科学学院，河南新乡453007)
摘要：目的探讨培养方式、碳源、氮源对山药微型块茎诱导形成的影响，以期找到适宜的微型块茎诱导形成的
收稿日期：2007—09—23
基金项目：国家自然科学基金资助项目(30670208)I河南省重点科技攻关项目(0623030700)I河南师范大学青年科学基金资助项目
(2006036)
作者简介：李明军(1962一)，男，河南温县人，教授，博士、硕士生导师，长期从事植物生理学及植物生物技术方面的教学和科研工作．
Tel：(0373)3328189E—mail：limingjun2002@263．net
*通讯作者谢从华Tel：(027)87287381E—mail：xiech@mail．hzau．edu．en
万方数据
半夏叶片总RNA四种提取方法及效果的比较
作者： 吴林， 薛建平， 徐有明， 田振东， WU Lin， XUE Jian-ping， XU You-ming， TIAN
Zhen-dong
作者单位： 吴林,WU Lin(淮北煤炭师范学院,生物系,安徽,淮北,235000;华中农业大学园艺林学学院,湖
北,武汉,430070)， 薛建平,XUE Jian-ping(淮北煤炭师范学院,生物系,安徽,淮北
,235000;资源植物生物学安徽省重点实验室,安徽,淮北,235000)， 徐有明,田振东,XU You-
ming,TIAN Zhen-dong(华中农业大学园艺林学学院,湖北,武汉,430070)
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2008,39(6)
被引用次数： 3次

参考文献(10条)
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8.Chang S;Puryear J;Caimey J A simple and efficient method for isolating RNA from pine trees[外文期
刊] 1993(02)
9.杜中军;徐兵强;黄俊生 一种改进的富含多糖的芒果组织中完整总RNA提取方法[期刊论文]-植物生理学通讯
2005(02)
10.何振艳;徐文忠;杨学习 提取蕨类植物蜈蚣草总RNA的一种有效方法[期刊论文]-植物学通报 2005(02)

本文读者也读过(3条)
1. 宋波涛.田振东.杨文杰.Song Botao.Tian Zhendong.Yang Wenjie sAGP基因增强表达对马铃薯淀粉和还原糖的
影响及安全性评价[期刊论文]-中国马铃薯2006,20(1)
2. 郭秀莲.张正银.田萍.罗绍银.白洁.庄平.GUO Xiu-lian.ZHANG Zheng-yin.TIAN Ping.LUO Shao-yin.BAI Jie.
ZHUANG Ping 杜鹃花叶片总RNA的改良CTAB法提取[期刊论文]-时珍国医国药2010,21(1)
3. 覃芳.王军民.何海旺.何龙飞.李创珍.韦本辉.何虎翼.甘秀芹.Qin Fang.Wang Junmin.He Haiwang.He Longfei.
Li Chuangzhen.Wei Benhui.He Huyi.Gan Xiuqin 山药组织总RNA提取方法的比较与分析[期刊论文]-基因组学与应
用生物学2009,28(4)

引证文献(3条)
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[期刊论文]-中国中药杂志 2010(12)
2.王静芳.曹秋芬.高建平 一种党参高质量总RNA的提取方法[期刊论文]-中国药物与临床 2012(6)
3.林娜.高继海.艾涛波.范林洪.王胜华.陈放 一种新型的油樟叶片总RNA提取方法[期刊论文]-中国生物工程杂志
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