全 文 ：t umor activity of a polysaccharide f rom S t rongy locent rotus
nudus eggs [J ]. Carbohy dr Pol y m , 2007 ,67 (3) :3132318.
[ 6 ] 　高 　婷 ,白家峰 ,罗 　霞 ,等. 亮菌多糖对小鼠免疫功能的影
响[J ] . 四川大学学报 :自然科学版 ,2005 ,42 :3952399.
[7 ] 　Nair P K P , Rodriguez S , Ramachandran R , et al . Immune
stimulating properties of a novel polysaccharide f rom t he me2
dicinal plant Tinos pora cordi f oli a [J ] . I nt I mmunopharma2
col , 2004 , 4 :164521659. [ 8 ] 　Cameiro L A M A , Freitas B D , Iacomini M. Cytocoxic effectagainst HeLa cells of polysaccharides f rom t he lichen Ramali2na celast ri [ J ] . J S ubmicrosc Cytol Pathol , 1997 , 29 :5032509.[ 9 ] 　Zhao C , Li M , Luo Y F , et al . Isolation and st ruct ural char2acterization of an immunostimulating polysaccharides f rom fu2zi , A conitum carmichaeli [J ] . Carbohy drat Res , 2006 ,341 :4852491.
HPLC2ELSD 法测定酸枣仁滴丸中酸枣仁皂苷 A、B和白桦脂酸
张彦青1 ,2 ,解军波1 ,2 ,张明春1 ,2 ,赖长江生2 3　
(1. 天津市食品生物技术重点实验室 ,天津 　300134 ; 2. 天津商业大学 制药工程系 ,天津 　300134)
摘　要 :目的 　建立酸枣仁滴丸中酸枣仁皂苷 A、B 和白桦脂酸的测定方法。方法 　应用超声提取和高效液相色
谱2蒸发光散射检测器 ( HPL C2EL SD)检测。Hypersil C18色谱柱 (250 mm ×416 mm ,5μm) ;流动相 :乙腈2水 (011 %
醋酸) ,梯度洗脱 ;体积流量 :110 mL/ min ;柱温 :30 ℃;进样量 :20μL ; EL SD 参数 :雾化温度 :45 ℃;气体流量 :210
L/ min。结果 　制剂中酸枣仁皂苷 A、B 和白桦脂酸达到基线分离且线性关系良好 ,线性范围分别为 1514～154
μg/ mL ,2218～228μg/ mL 、28. 0～280μg/ mL ,平均加样回收率分别为 98117 %、99121 %、97189 %。结论 　该方法
快速简便、精密度好、灵敏度高 ,可用于酸枣仁滴丸剂中酸枣仁皂苷 A、B 和白桦脂酸的同时测定。
关键词 :酸枣仁滴丸剂 ;酸枣仁皂苷 A ;酸枣仁皂苷 B ;白桦脂酸 ;高效液相色谱2蒸发光散射检测器
中图分类号 :R286102 　　　文献标识码 :A 　　　文章编号 :025322670 (2009) 0220234202
　　酸枣仁为鼠李科枣属植物酸枣 Zi z i p hus j u j u2
ba Mill . var . s pi nosa (Bunge) Hu ex H. F. Chow
的干燥种子 ,宁心安神、益阴敛汗 ,为镇静安神的传
统药物之一[ 1 ] 。目前酸枣仁的临床应用仅限于汤
剂、口服液和复合胶囊剂。汤剂有临时煎煮、味苦难
服、携带不便、易霉败变质 ,口服液口感较差 ,胶囊剂
吞服不易等缺点。中药滴丸剂是在中药丸剂的基础
上发展起来的 ,避免了传统中药生物利用度低、服用
不方便、起效慢的缺点 ,同时发扬了传统中药安全性
好、不良反应小的优点。为了克服酸枣仁现有剂型
的缺点 ,笔者利用 PEG 6000 和泊罗沙姆 188 作为
主要辅料制备了酸枣仁滴丸剂。酸枣仁中所含的酸
枣仁皂苷 A、B 与白桦脂酸为三萜皂苷类成分 ,紫外
吸收差 ,不宜采用 UV 法检测 ,而 EL SD 检测器为
质量型通用检测器 ,可检测挥发性低于流动相的化
合物。目前关于酸枣仁及其相关制剂仅见酸枣仁皂
苷 A、B 的测定报道[2～4 ] 。本实验建立了 HPL C2
EL SD 法用于测定酸枣仁滴丸中主要有效成分酸枣
仁皂苷 A、B 和白桦脂酸 ,为酸枣仁滴丸质量标准的
制定提供参考。
1 　仪器与试药
安捷伦 1100 型高效液相色谱仪 ,Agilent 1100
色谱工作站 , EL SD 检测器 ,Sartorius BP211D 电子
天平 , KQ - 218 型超声波清洗器 (江苏省昆山市超
声仪器有限公司) 。
酸枣仁滴丸 (自制 ,35 mg/ 丸) ,酸枣仁皂苷 A
对照品 (中国药品生物制品检定所 ,批号 1107342
200408) ,酸枣仁皂苷 B、白桦脂酸对照品 (上海顺勃
生物工程技术中心 ,质量分数大于 98 %) ,甲醇、乙
腈、冰醋酸均为色谱纯 ,其他试剂均为分析纯。
2 　方法与结果
211 　色谱条件[2～4 ] : Hypersil C18色谱柱 (250 mm ×
416 mm ,5μm) ;流动相 :乙腈2水 (011 %醋酸) ,梯度
洗脱 ;体积流量 :110 mL/ min ;柱温 :30 ℃;进样量 :
20μL ; EL SD 参数 :雾化温度 :45 ℃,气体流量 :210
L/ min。
212 　对照品溶液的配制 :分别精密称取酸枣仁皂苷
A、B 和白桦脂酸对照品 1154、2128、2180 mg ,置 10
mL 量瓶中 ,加甲醇溶解并稀释至刻度 ,摇匀后即得
混合对照品溶液。
·432· 中草药　Chinese Traditional and Herbal Drugs 　第 40 卷第 2 期 2009 年 2 月
3 收稿日期 :2008207214　　　
基金项目 :天津市科技支撑计划项目 (07ZCKFNC00300 )
213 　供试品溶液的制备 :称取酸枣仁滴丸适量 ,置
研钵中研磨 ,取适量研碎 ,精密称量粉末 110 g ,置于
25 mL 量瓶中 ,定量加入 70 %乙醇 25 mL ,超声震
荡溶解 (超声功率 100 W ,时间 10 min) ,冷却至室
温 ,0145μm 针筒式微孔滤膜滤过 ,即得 ,备用。
214 　标准曲线的制备 :分别精密吸取混合对照品溶
液 015、110、210、310、410、510 mL ,分别置 510 mL
量瓶中 ,加甲醇稀释至刻度 ,摇匀 ,进样 20μL ,进样
测定峰面积。以进样质量浓度的常用对数值为横坐
标 ,峰面积常用对数值为纵坐标 ,进行线性回归 ,得
回归方程。酸枣仁皂苷 A : Y = 11836 9 X - 01188 1 ,
r = 01999 1 ,在 1514～154μg/ mL 呈良好的线性关
系 ;酸枣仁皂苷 B : Y = 11 550 3 X - 01010 4 , r =
01999 2 ,在 2218～228μg/ mL 呈良好的线性关系 ;
白桦脂酸 : Y = 11345 3 X + 01711 8 , r = 01999 2 ,在
2810～280μg/ mL 呈良好的线性关系。
215 　精密度试验 :批号 20080617 酸枣仁滴丸制备
供试品溶液 , 进样 20μL ,连续进样 5 次 ,测定峰面
积 ,计算得酸枣仁皂苷 A、B 和白桦脂酸峰面积积分
值 的 常 用 对 数 值 的 RSD 分 别 为 1118 %、
0179 % ,1127 %。
216 　稳定性试验 :批号 20080617 酸枣仁滴丸制备
供试品溶液 ,分别于 0、2、4、6、8 h 进样 20μL 进行
分析 ,测定色谱峰面积 ,计算得酸枣仁皂苷 A、B 和
白桦脂酸峰面积积分值的常用对数值的 RSD 分别
为 1129 %、0186 %、1176 % ,表明供试品溶液在 8 h
内稳定。
217 　重现性试验 :取批号 20080617 酸枣仁滴丸 5
份 ,制备供试品溶液 ,进样测定 ,计算得酸枣仁皂苷
A、B 和白桦脂酸质量分数的 RSD 分别为 1157 %、
2115 %、1168 %。
218 　加样回收率试验 :精密称取 20080617 批酸枣
仁滴丸粉末 110 g ,精密加入 112 mL 混合对照品溶
液 ,制备供试品溶液 ,依法测定 ,结果酸枣仁皂苷 A、
B 和白桦脂酸的平均加样回收率分别为 98117 %、
99121 %、 97189 % , RSD 分 别 为 2116 %、
1190 %、2157 %。
219 　样品测定 :取 3 批酸枣仁滴丸 ,制备供试品溶
液 ,进样测定峰面积 ,每批重复测定 3 次 ,按回归方
程计算酸枣仁皂苷 A、B 和白桦脂酸的质量分数 ,色
谱图见图 1 ,结果见表 1。
12酸枣仁皂苷 A 　22酸枣仁皂苷 B 　32白桦脂酸
12jujuboside A 　22jujuboside B 　32betuIinic acid
图 1 　对照品( A)和酸枣仁滴丸( B)的 HPLC色谱图
Fig. 1 　HPLC Chromatograms of reference substance
( A) and Suanzaoren Dropping PiIIs ( B)
表 1 　酸枣仁滴丸中酸枣仁皂苷 A,酸枣仁皂苷 B与
白桦脂酸的测定结果( n = 3)
Table 1 　Determination of jujuboside A, jujuboside B,
and betulinic acid in Suanzaoren Dropping
Pil Is ( n = 3)
批　号
酸枣仁皂苷 A
/ (μg ·g - 1)
酸枣仁皂苷 B
/ (μg ·g - 1)
白桦脂酸
/ (μg ·g - 1)
20080617 188179 268118 256139
20080618 187109 283194 249199
20080618 197195 281108 264107
3 　讨论
酸枣仁中所含的酸枣仁皂苷 A、B 与白桦脂酸
为三萜皂苷类成分 ,紫外吸收差 ,不宜用 UV 法检
测 ,而 EL SD 检测器为质量型通用检测器 ,可检测挥
发性低于流动相的化合物 ,且化合物的响应值接近 ,
因而峰面积比例亦近乎各组分的质量之比 ,同时灵
敏度及稳定性亦能符合测定的要求 ,正逐步成为分
析无紫外吸收类成分的有力工具。
本研究采用乙腈2水 (011 %醋酸) 梯度洗脱 ,得
到较好的分离度 ,且保留时间适当。方法学考察发
现本方法可以很好地测定酸枣仁滴丸中酸枣仁皂苷
A、B 与白桦脂酸 ,可以为酸枣仁滴丸的质量控制提
供参考和依据。
参考文献 :
[ 1 ] 　彭智聪 ,朱建军. 酸枣仁化学成分及药理研究进展[J ] . 时珍国
医国药 ,2001 ,12 (1) :86287.
[ 2 ] 　李会军 ,李 　萍. 高效液相色谱法蒸发光散射检测器测定酸
枣仁中酸枣仁皂苷 A 及 B 的含量 [J ] . 药物分析杂志 ,2000 ,
20 (2) :82284.
[ 3 ] 　隋　宏 ,周慧玲 ,陈建峰 ,等. HPLC2EL SD 测定酸枣仁合剂中
酸枣仁皂苷 A 的含量 [ J ] . 现代食品与药品杂志 , 2007 , 17
(6) :35237.
[ 4 ] 　张志斐 ,袁志芳 ,张兰桐 ,等. 河北道地药材酸枣仁 HPLC2
EL SD 指纹图谱研究[J ] . 中草药 ,2007 ,37 (8) :124721250.
·532·中草药　Chinese Traditional and Herbal Drugs 　第 40 卷第 2 期 2009 年 2 月