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Determination of Jujubaside A in Semen Ziziphi Spinosae by RP HPLC

反相高效液相法测定酸枣仁中酸枣仁皂苷A的含量



全 文 :反相高效液相法测定酸枣仁中
酸枣仁皂苷 „的含量
李玉娟t o车镇涛u o毕开顺t o徐赞美t o李 敏t
kt q沈阳药科大学 药物分析研究室 o辽宁 沈阳 ttsstx ~u q香港中文大学 中医学院 o香港l
≈摘要  目的 }建立测定酸枣仁中酸枣仁皂苷 „含量的新方法 ∀方法 }反相高效液相法 o采用 ‹¼³¨µ¶¬¯2≤t{柱为
分析柱 o乙睛2水kvsΒzs oς/ ςl为流动相 o检测波长为 usw ±° o流速为 s q{ °¯ #°¬±p t ∀结果 }酸枣仁皂苷 „在 s qszy
∗ s qwxy °ª# °¯ p t与峰面积呈良好的线性关系kρ € s .|||w , ν € yl o平均回收率为 |v qx h ∀结论 }该法简便 !快速 !
重现性好 o适用于酸枣仁中酸枣仁皂苷 „的定量分析 ∀
≈关键词  酸枣仁 ~酸枣仁皂苷 „ ~反相高效液相色谱法
≈中图分类号  • u{w qt ≈文献标识码  … ≈文章编号  tsst2xvsukusstlsx2svs|2su
酸枣仁为中医首选安神药 ∀ 5中国药典6t||x
年版一部收载其为鼠李科植物酸枣 Ζιζιπηυσϕυϕυβα
¬¯¯ q√¤µqσπινοσαk…∏±ª¨ l‹∏ ¬¨ ‹ qƒ q≤«²∏的干燥
成熟种子≈t  ∀其味酸性平 o归肝 !胆 !心经 o主要用
于治疗虚烦不眠 !惊悸多梦 !体虚多汗 !津伤口渴等
症 ∀研究表明酸枣仁皂苷 „ 为酸枣仁镇静催眠的
有效成分之一≈u  ∀迄今为止 o测定酸枣仁皂苷 „ 的
方法主要为一阶导数分光光度法≈v 和薄层扫描
法≈w  ∀本文采用反相高效液相色谱法对酸枣仁中
酸枣仁皂苷 „ 进行含量测定 o与上述方法相比 o具
有简便 !快速 !灵敏度高等优点 o很适合于对其进行
定量分析 ∀
1 仪器及供试品
≤2ts„ 高效液相色谱仪 k日本岛津公司l o
≥°⁄2ts„紫外检测器k日本岛津公司l o≤®¦«µ²°2
¦«µ²°¤·²ªµ¤³«¼数据采集系统 o× Š2vu{型光电分析
天平k上海天平仪器厂l oƒ ±2{x„ 型旋转蒸发仪
k上海医械专机厂l ∀
乙腈 !甲醇k色谱纯 o山东禹王实业总公司化工
厂l o水为重蒸馏水 o石油醚 !正丁醇 !氨水均为分析
纯k沈阳化学试剂厂l o酸枣仁皂苷 „ 对照品购自中
国药品生物制品检定所k纯度为 |y qt h l o酸枣仁生
品药材分别购自辽宁朝阳 !山东济南 !山东泰安 !山
东德州 o经沈阳药科大学生药鉴定研究室许春泉高
级工程师鉴定 ∀其炒品按照5中国药典6t||x年版
≈收稿日期  usss2sz2ut
清炒法k附录 µ⁄l规定 o炒至鼓起 o色微变深 ∀并将
其粉碎 o过 ys目筛 o备用 ∀
2 色谱条件及系统适用性实验
色谱柱 }‹¼³¨µ¶¬¯2≤t{kw qy °° ¬§≅ uss °° ox
Λ°l o流动相乙腈2水kvsΒzsl o检测波长 usw ±° o流
速 s q{ °¯ #°¬±p t o柱温室温 ∀
理论塔板数按酸枣仁皂苷 „计算 o不低于
x yss o酸枣仁皂苷 „与其相邻色谱峰的分离度均大
于 t qx ∀
3 对照品溶液和供试品溶液的制备
精密称取酸枣仁皂苷 „对照品 z qys °ªo置 ts
°¯ 容量瓶中 o用甲醇溶解并定容至刻度 o摇匀 o备
用 ∀精密吸取该溶液 s qus os qws os qys os q{s ot qss o
t qus °¯ 置 u °¯ 容量瓶中 o用甲醇稀释至刻度 o摇
匀 o微孔滤膜过滤 o取续滤液备用 ∀此作为对照品溶
液 ∀
取 {份酸枣仁样品各约 x ªo精密称定置沙氏提
取器中 o加入 tss °¯ 甲醇 o回流提取 tu «后 o将提
取液于旋转蒸发仪上挥干甲醇 o残渣用 vs °¯ 水溶
解 o定量转移至 tux °¯ 分液漏斗中 o加入石油醚萃
取 v次 o每次 ts °¯ o收集水层 o加入水饱和正丁醇萃
取 w次 o每次 ts °¯ o收集正丁醇层 o加入正丁醇饱和
的氨水溶液k取 ws °¯ 浓氨水溶液加水稀释到 tss
°¯ o再用正丁醇饱和 o分取下层液l萃取 v次 o每次
ts °¯ o再收集正丁醇层 o于旋转蒸发仪上挥干醇 o残
渣用甲醇溶解 o定量转移至 x °¯ 容量瓶中 o用甲醇
定容至刻度 o摇匀 o微孔滤膜过滤 o取续滤液备用 ∀
#|sv#
第 uy卷第 x期
usst年 x月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ quy o‘²qx
¤¼ qousst
此作为供试品溶液 ∀
4 ‹°≤ 测定
4 q1 标准工作曲线的绘制
精密吸取酸枣仁皂苷 „各对照液 us Λ¯ o注入高
效液相色谱仪 o记录色谱图 ∀以对照品峰面积为纵
坐标 o以对照品溶液浓度k°ª# °¯ p tl为横坐标 o绘制
标准曲线 o得回归方程 }Ψ € tyt|vu{ Ξ p uu{yx , ρ€
s .|||w ∀酸枣仁皂苷 „在 s qszy ∗ s qwxy °ª# °¯ p t o
Ψ与 Ξ呈良好线性 ∀
4 q2 精密度 !重现性与回收率实验
精密吸取同一份样品溶液k山东德州生品lus
Λ¯ o重复进样 y次 oΡΣ∆ € s q{ h ∀同一份样品 o按样
品制备项下方法平行制备y份 o进样分析 ΡΣ∆ €
u qx h ∀精密称取同一份样品 u qs ªo共 y份 o分别
加入 t qss ot qws ot q{s °¯ 对照品溶液k浓度为 s qz|
°ª# °¯ p tl o按样品测定方法进行分析 o结果见表 t ∀
表 t 酸枣仁样品中酸枣仁皂苷 „回收率测定结果
称样量

含量
r°ª
加入量
r°ª
测得量
r°ª
回收率
r h
平均值
r h
ΡΣ∆
r h
u qssux s qztzz s qz|ss s qzwzv |w qy
t q||{s s qztyt s qz|ss s qzvs{ |u qx
u qssvs s qztz| t qtsy t qsu{ |v qs |v qx

u qst q|||u s qztyx t qtsy t qst{ |u qs
u qssvz s qzt{t t qwuu t qvzz |y q{
u qssuw s qztzz t qwuu t qvtv |u qv
4 q3 样品测定
取 w个产地的生 !炒酸枣仁共 {个样品 o按样品
制备项下方法制备后 o进样分析 o并按外标法计算酸
枣仁皂苷 „的含量 o所得结果见表 u ∀
表 u 酸枣仁样品测定结果
产地 样品
含量
r°ª#ªp t
ΡΣ∆
r h
山东德州 生品 s qvx{w u qx
炒品 s qvxwy u qv
山东济南 生品 s qwtty u qv
炒品 s qws{w u qt
山东泰安 生品 s qvz|x u qu
炒品 s qvwsu u qv
辽宁朝阳 生品 s qwssz u qu
炒品 s qv|tv u qw
5 结果与讨论
5 q1 酸枣仁中化学成分复杂 o且酸枣仁皂苷 „ 结
构中无共轭体系 o紫外吸收波长较短 o检测极易受到
干扰 o本实验采用石油醚脱脂 o用氨水溶液对正丁醇
层进行碱化处理的方法 o取得了很好的分离效果 o且
重现性良好 ∀
5 q2 {个样本的含量测定结果表明 o不同产地的酸
枣仁中 o酸枣仁皂苷 „ 的含量存在一定的差异 o可
能与不同生长条件有关 ∀同一产地酸枣仁的生品和
炒品酸枣仁皂苷 „的含量差别不明显 o说明在炒制
的过程中酸枣仁皂苷 „ 的含量几乎没有发生变化 o
符合生品和炒品都可以入药的说法 ∀
≈参考文献 
≈t  中国药典 q一部 qt||x qvuu q
≈u  • ²²q≥¬¨®º²²q׫¨ ≥·µ∏¦·∏µ¨ ²© ≥³¬±²¶¬± kuδ2 Ο2Β2ª¯∏¦²¶¼¯2¶º µ¨2
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≈v  展雪峰 q一阶导数分光光度法测定酸枣仁中酸枣仁皂甙 „ 的
含量 q中草药 ot||y ouwktsl }xux q
≈w  王 健 o林 晓 q酸枣仁中酸枣仁皂甙 „的含量测定 q中草药 o
t||y ouzkvl }txw q
∆ετερµινατιον οφ ϑυϕυβασιδε Α ιν Σεµεν Ζιζιπηι Σπινοσαε βψ ΡΠ2ΗΠΛΧ
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[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε: ײ §¨ √¨¯²³¤ ±¨ º ° ·¨«²§©²µ·«¨ §¨·¨µ°¬±¤·¬²± ²©∏­∏¥¤¶¬§¨ „ ¬± ≥¨° ±¨ ¬½¬³«¬
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∗ s qwxy °ªq׫¨ ¤√ µ¨¤ª¨ µ¨¦²√ µ¨¼ º¤¶|v qx h qΧονχλυσιον }׫¨ ° ·¨«²§¬¶¤³³µ²³µ¬¤·¨ ©²µ·«¨ §¨·¨µ°¬±¤·¬²± ²©
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[ Κεψ ωορδσ] ≥¨° ±¨ ¬½¬³«¬≥³¬±²¶¤¨ ~∏­∏¥¤¶¬§¨ „ ~°•2‹°≤
≈责任编辑 刘  
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第 uy卷第 x期
usst年 x月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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