全 文 ：多指标正交试验优选酸枣仁最佳提取工艺
王筱亮 o张玉杰 3 o陈明霞 o王泽凤
k北京中医药大学 中药学院 o北京 tsstsul
≈摘要  目的 }分别以酸枣仁中总皂苷量 !酸枣仁皂苷 „ o…总量 !总黄酮量为检测指标对酸枣仁进行提取工艺
优选 ∀方法 }采用单因素考察和正交试验相结合的方法 o正交试验中以乙醇含量k Αl !提取次数k Βl !提取时间k Χl !
溶剂用量k ∆lw个因素 o每个因素选取 v个水平进行试验 ∀结果 }因素 Α , Β对检测指标均有显著性影响 o因素 Χ, ∆
为不显著因素 o可结合生产实际进行选择 ∀结论 }以 ys h乙醇 o{倍量提取 v次 o每次 t1x «为最佳提取工艺 ∀
≈关键词  酸枣仁 ~总皂苷 ~酸枣仁皂苷 „ o… ~总黄酮 ~正交试验 ~提取工艺
≈中图分类号  • u{v ≈文献标识码  „ ≈文章编号  tsst2xvsukussxlts2szxv2sv
≈收稿日期  ussw2s|2su
≈通讯作者  3 张玉杰 oר¯ }kstsl ywzttt||2ysuz o∞2°¤¬¯}
 ‹ ≠uuz ƒ tuy1¦²°
酸枣仁为鼠李科植物酸枣 Ζιζιπηυσ ϕυϕυβα
¬¯¯ q√¤µqσπινοσαk…∏±ª¨ l ‹∏ ¬¨ ‹ q ƒ q ≤«²∏的干
燥成熟种子 ∀具有补肝 !宁心 !敛汗 !生津的功效 o主
要用于虚烦不眠 !惊悸多梦 !体虚多汗 !津伤口
渴≈t  ∀皂苷类和黄酮类是酸枣仁的主要活性成分 ∀
本试验选取总皂苷量 !酸枣仁皂苷 „ o…总量 !总黄
酮量为指标 o首先单因素考察确定了适宜的提取方
法 o后采用 |kvwl正交试验优选了提取条件 o可给
酸枣仁有效部位制备和生产提供参考 ∀
1 仪器与试药
≤≥ p |sss型薄层扫描仪k日本岛津公司l !˜ p
usss型紫外分光光度计k日本日立公司l !∞• p
t{u„型分析天平k日本 „ i ⁄公司l o≤≥tst p „…型
电热鼓风干燥箱k重庆试验设备厂l o硅胶 Š板k青
岛海洋化工厂l ∀
酸枣仁皂苷 „ o…对照品k中国药品生物制品检
定所l ~酸枣仁药材购自江苏华康医药股份有限公
司 o经本校生药教研室张贵君教授鉴定为鼠李科植
物酸枣 Ζ1 ϕυϕυβα √¤µ1 σπινοσα的干燥成熟种子 ~其
他试剂均为分析纯 ∀
2 方法与结果
211 酸枣仁总皂苷和酸枣仁皂苷 „ o…测定方法的
建立≈u 
21111 对照品溶液的配制 精密称取酸枣仁皂苷
„ o…对照品适量 o加甲醇配成 t °ª#°p t的溶液 ∀
21112 样品的提取 取酸枣仁药材 xs ª o捣碎 o分
别按水煮 !水煮醇沉及 ys h 乙醇回流提取法处理
k加溶媒量 {倍 o提取时间 u «o提取 u次l o浓缩至
xs °∀
取酸枣仁药材 t{份 o每份 xs ªo捣碎 o正交条件
进行正交试验 o回流液回收乙醇浓缩至 xs °∀
21113 供试品的制备及含量测定 取样品浓缩液
u份 o每份 ts °分别置分液漏斗中 o用石油醚萃取
v次 o每次 us °o弃去醚层 o合并水层后加入 x h的
氢氧化钾 vs °o用水饱和的正丁醇提取 w次 o每次
us °o合并正丁醇提取液 o用正丁醇饱和的水洗涤
v次 o每次 ts °o洗液弃去 o正丁醇层水浴蒸干 o一
份加甲醇溶解 o过滤 o将甲醇液蒸干 o得酸枣仁总皂
苷 o于 tsx ε 恒重 o称定 ~另一份加甲醇溶解 o定容至
ts °o作为供试品溶液 ∀分别取对照品溶液 t ou
ˏo供试品溶液 u ow ˏo交叉点于硅胶 Š薄层板上 o
以正丁醇2冰醋酸2水kwΒtΒx o上层l上行展开 o展距
为 { ∗ | ¦° o取出晾干 o喷 u h香草醛硫酸乙醇液于
tss ε 烘 u ∗ v °¬±o至酸枣仁皂苷 „ o…显色清晰 o取
出 o稍凉 o盖上洁净玻璃板 o用胶带封固 ∀单波长反射
法锯齿扫描 oΚ¶€ yus ±° o≥÷ € v o狭缝 t1ux °° ≅
t1ux °° o计算含量 o结果见表 t及正交试验结果 ∀
212 酸枣仁总黄酮测定方法的建立≈v 
21211 标准曲线的制备 精密称取黄芩苷对照品
适量 o加甲醇配成 s1t °ª#°p t的溶液 ∀精密吸取
对照品溶液 s os1u os1x ot ot1x ou °o分别置 ts °
量瓶中 o用甲醇定容 o随行试剂空白 o在 vux1s ±°
处测定吸光度 o以含量k Χl与吸光度k Αl进行直线
#vxz#
第 vs卷第 ts期
ussx年 x月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯1vs oŒ¶¶∏¨ ts
¤¼ oussx
回归 o得回归方程为 Α € p s1sxw z n vv1zwx | Χoρ
€ s1||| z ∀在 s ∗ s1su °ª#°p t线性关系良好 ∀
21212 总黄酮含量测定 精密取 21112 中浓缩液
u °置蒸发皿中蒸干 o用甲醇定容至 xs °量瓶
中 o取 t °置 ts °量瓶中 o用甲醇定容至刻度 o
摇匀 o作为供试品溶液 ∀按标准曲线制备项下操作 o
测定黄酮含量 o结果见正交试验结果表 ∀
213 酸枣仁提取方法的选择
取 21112 中样品 o以总皂苷量 !酸枣仁皂苷 „ o…
总量 !总黄酮含量为指标测定 o按上述测定方法测
定 o结果见表 t ∀
表 t 酸枣仁不同提取方法的比较
提取方法
总皂苷量
r°ª
皂苷 „ o…总含量
k ≅ ts p ulr h
总黄酮含量
k ≅ ts p ulr h
水煮 tvz1v w1svy tv1tu
水煮醇沉 txy1x w1uzt t|1{z
ys h乙醇回流 vvt1| ts1tsu wx1v{
从表 t可知 o上述 v种提取方法中以 ys h乙醇
回流提取各项指标性成分提取效率明显高于其他 u
种方法 o故选择用 ys h乙醇回流提取 ∀
214 醇提正交试验
21411 正交试验设计 为进一步考察乙醇回流的

提取工艺 o对影响提取效果的主要因素乙醇含量 !回
流次数 !提取时间 !溶媒用量进行 w因素 v水平正交
试验 o因素与水平安排见表 u ∀
表 u 因素水平
水平
Α
乙醇含量
r h
Β
回流次数
r次
Χ
提取时间
r«
∆
溶媒用量
r倍
t ws t t y
u ys u t1x {
v {s v u ts
21412 正交试验结果和分析 用 |kvwl正交表进
行试验设计优选 o结果见表 v o方差分析见表 w ∀
表 v 正交试验结果
‘²1
酸枣仁总苷
r°ª
Ξt Ξu mΞ
酸枣仁皂苷 „ o…
总含量k ≅ tspulr h
Ψt Ψu mΨ
总黄酮含量
k ≅ tspulr h
Ζt Ζu hΖ
t utv1{ uss1z usz1v y1txs x1t|s x1yz uz1wz uu1{w ux1ty
u uxy1v uwu1u uw|1v y1vvs x1xws x1|vx vs1vy vv1sv vt1zs
v uv{1| uzw1t uxy1x y1yzs y1xws y1ysx vu1tw vw1ws vv1uz
w vvt1x vtu1s vut1{ {1|{s |1w{s |1uv vx1xt vz1{w vy1y{
x vxz1y vvw1u vwx1| ts1xz |1yus ts1s| ws1zv wu1{x wt1z|
y vyz1y wsz1{ v{z1z tt1{t ts1vv tt1szz xs1u| xs1{{ xs1x|
z vsz1| vvs1v vt|1t {1tts z1|ws {1sux wu1tz wv1ut wu1y|
{ vtt1y u{y1v u||1s z1yys {1uus z1|ws wz1ww wy1{t wz1tv
| vxz1w vsv1| vvs1z {1uzs {1s{s {1tzx xs1st xv1yv xt1{u
表 w 方差分析
考察指标 方差来源 离均差平方和 自由度 方差 Φ Π
总皂苷 Α ws |t{1uzw u us wx|1tvz wx1twx  s1st
Β x w{|1vyt u u zww1y{t y1sxy  s1sx
Χ uzs1t{{ u tvx1s|w s1u|{  s1sx
∆ u xxt1vut u t uzx1yyt u1{t{  s1sx
误差 w sz{1zsx | wxv1t{|
皂苷 „ o… Α w|1xsv u uw1zxu {w1vtx  s1st
Β u1|u| u t1wyx w1|w|  s1sx
Χ s1{uy u s1wtv t1wsy  s1sx
∆ s1yus u s1vts t1sxy  s1sx
误差 u1ywu |s1u|w
总黄酮 Α |yt1zty u w{s1{x{ twz1{{y  s1st
Β vuv1yyt u tyt1{vt w|1zzs  s1st
Χ {1zuz u w1vyw t1vwu  s1sx
∆ uv1syv u tt1xvu v1xwz  s1sx
误差 u|1uyw | v1uxu
注 }Φs1stku o|l € {1su ~Φs1sxku o|l € w1uy
通过方差分析表可知 o乙醇含量 !回流次数对皂
苷含量有显著性影响 o且影响程度为乙醇含量 回
流次数 o从总皂苷和酸枣仁皂苷 „ o…这 u个指标得
出最佳工艺条件为 Αu Βv Χv ∆u ~从总黄酮含量这一
指标来看 o乙醇含量 !回流次数对其有显著性影响 o
得出最佳工艺为 Αv Βv Χt ∆u o综合这 v个指标可知 o
乙醇含量和回流次数均为显著性因素 o其中从回流
次数上看 v个指标一致 o从乙醇含量上看 o增加乙醇
含量有利于总黄酮的提取 o从表 v可看出用 ys h和
{s h乙醇 v个指标含量差别不大 o乙醇含量增加 o脂
#wxz#
第 vs卷第 ts期
ussx年 x月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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¤¼ oussx
类成分提出过多 o生产成本也会增加 o所以选择
ys h乙醇提取 ~提取时间 !溶媒用量均为不显著因
素 o可结合生产实际进行选择 o最终确定最佳提取工
艺为 Αu Βv Χv ∆u o即乙醇含量为 ys h o提取 v次 o每
次回流 u «o加 {倍量溶剂 ∀
215 验证试验
为进一步考察优选工艺的可靠性及稳定性 o取
v份药材按上述最佳提取工艺进行验证试验 o操作
方法同前述 o测定结果见表 x ∀
表 x 验证试验结果
样品
总皂苷量
r°ª
皂苷 „ o…总含量
k ≅ ts p ulr h
总黄酮含量
k ≅ ts p ulr h
t v|s1t tt1ut xw1v|
u v{x1y ts1{| xs1yv
v v|y1t tt1|z x|1tz
结合表 v ox可看出 o该优选工艺可靠且稳定 ∀
3 讨论
311 在进行提取方法选择的试验中 o水煮液较黏
稠 o使得浓缩定容和萃取均不易操作 o且萃取中乳化
现象严重 o造成了一定的测量误差 o与水煮醇沉工艺
的测定结果产生了一定的偏差 o因此说水煮和水煮
醇沉 u种工艺之间相差不大 ∀
312 在用乙醇回流提取酸枣仁有效成分皂苷类和
黄酮类成分时 o乙醇含量和回流次数对二者均有显
著影响 ∀但用 ys h的醇提取皂苷类最佳 o{s h的醇
提取黄酮类最佳 o为避免脂类成分过多和降低生产
成本 o所以选择用 ys h的醇提取 ∀
≈参考文献 
≈t  中国药典 1 一部 1 usss1 vss1
≈u  王 建 o林 晓 1 酸枣仁中酸枣仁皂苷 „ 和 …的含量测定 1
中草药 ot||y ouzkvl }txw1
≈v  丁慎德 1 枣仁有效成分的研究 1 淄博师专学报 ot||x okwl }xy1
Οπτιµιζατιον στυδψ ον εξτραχτιον τεχηνολογψ οφ τηεσεεδ οφ
Ζιζιπηυσϕυϕυβα ϖαρ1 σπινοσα βψ ορτηογοναλ δεσιγν ωιτη µ υλτι2ταργετσ
• „‘Š ÷¬¤²2¯¬¤±ªo ‹ „‘Š ≠∏2­¬¨ o≤ ‹∞‘ ¬±ª2¬¬¤o • „‘Š  2¨©¨ ±ª
( ∆επαρτµεντ οφ Χηινεσε Πηαρµ αχψ , Βειϕινγ Υνιϖερσιτψ οφ Τραδιτιοναλ Χηινεσε Μεδιχινε , Βειϕινγ tsstsu , Χηινα)
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε: ײ ²³·¬°¬½¨ ¬¨·µ¤¦·¬²± ·¨¦«±²¯²ª¼ ²©·«¨ ¶¨ §¨²© Ζιζιπηυσϕυϕυβα √¤µ1 σπινοσα º¬·«·«¨ ·¤µª¨·¶²©·«¨
·²·¤¯ ¶¤³²±¬±o·²·¤¯ ­∏­∏¥²¶¬§¨ „ ¤±§…¤±§·²·¤¯ ©¯¤√²±²¬§¶1 Μετηοδ : Œ±·«¨ ° ·¨«²§²©²±¨ 2º¤¼ ¤±§²µ·«²ª²±¤¯ ·¨¶·¶o ·¨«¤±²¯ ¦²±¦¨±2
·µ¤·¬²± o¤°²∏±·²© ·¨«¤±²¯ o ¬¨·µ¤¦·¬²±·¬°¨¤±§ ¬¨·µ¤¦·¬²±·¬° ¶¨º µ¨¨ ·«¨ ©¤¦·²µ¶¬± ²µ·«²ª²±¤¯ ·¨¶·o¤±§ ¤¨¦«©¤¦·²µº¬·«·«µ¨¨¯¨ √¨¯¶1
Ρεσυλτ : ∞·«¤±²¯ ¦²±¦¨±·µ¤·¬²± ¤±§ ¬¨·µ¤¦·¬²±·¬° ¶¨«¤§¶¬ª±¬©¬¦¤±·¨ ©©¨ ¦·²± ¤¯¯·«¨ ·¤µª¨·¶o²·«¨µ©¤¦·²µ¶¶«²∏¯§¥¨ ¶¨¯¨ ¦·¨§¬± ¤¦¦²µ2
§¤±¦¨ º¬·«³µ²§∏¦·¬²± ³µ¤¦·¬¦¨1 Χονχλυσιον : × «¨ ¥¨¶·¨ ¬·µ¤¦·¬²± ·¨¦«±²¯²ª¼¬¶·² ¬¨·µ¤¦·©²µ·«µ¨¨·¬° ¶¨ º¬·«{ ©²¯§ ·¨«¤±²¯ ¶²¯∏·¬²±
kys h l o¤±§t1x « ¤¨¦«·¬° 1¨
[ Κεψ ωορδσ] ¶¨ §¨²© Ζιζιπηυσϕυϕυβα √¤µ1 σπινοσα~ °∏¯·¬·¤µª¨·~¶¤³²±¬±¶~­∏­∏¥²¶¬§¨¶„ ¤±§…~©¯¤√²±²¬§¶
≈责任编辑 刘  
k上接第 zwv页l
‹¤¬µ¼ µ²²·¶º µ¨¨ ²¥·¤¬±¨ §¥¼¬±©¨¦·¬±ª·«¨ §¬©©¨ µ¨±·¨ ¬³¯¤±·¶²© Χ1 ροσευσ1 ≤∏¯·∏µ¨ ¦²±§¬·¬²±¶²©«¤¬µ¼ µ²²·º µ¨¨ ²³·¬°¬½¨ §1 Ρεσυλτ :
× «¨ ¥¨¶··µ¤±¶©²µ°¤·¬²± ¦²±§¬·¬²± º¤¶¯¨ ¤©¬±©¨¦·¨§¥¼·º²2§¤¼. ¶³µ¨2¦∏¯·∏µ¨ ¤±§·º²2§¤¼χ¶¦²2¦∏¯·∏µ¨ ¤±§¤§¬·¬²±¤¯ „¶k«¼§µ²¬¼¤¦¨2
·²¶¼µ¬±ª²±¨ l tss °ª#p t1 × «¨ ¬±§∏¦¬±ªµ¤·¨ ²© «¤¬µ¼ µ²²·º¤¶∏³·² {y1ux h 1 × «¨ ¥¨¶·¦²±§¬·¬²± ²© «¤¬µ¼ µ²²·¦∏¯·∏µ¨ º¤¶  ≥
° §¨¬∏° º¬·«¶∏¦µ²¶¨ ¤¶¦¤µ¥²± °¤·¨µ¬¤¯ ¤±§ ¤¯¦·¤¯¥∏°¬± ¤¶±¬·µ²± °¤·¨µ¬¤¯1 × «¨ ¤±¤¯¼¶¬¶µ¨¶∏¯·¶«²º §¨·«¤··«¨ ¦²±·¨±·¶²©·²·¤¯ ¤¯®¤2
²¯¬§¶¬± «¤¬µ¼µ²²·¶º µ¨¨ «¬ª«¨µ·«¤± ¬¨³¯¤±·¶¤±§¦¤¯ ¬¯1 Χονχλυσιον : ‹¤¬µ¼µ²²·²© Χ1 ροσευσ º¬¯¯ ¥¨ ∏¶¨©∏¯ ©²µ·«¨ ³µ²§∏¦·¬²± ²©¤¦·¬√¨
¦²°³²±¨ ±·¶¬± Χ1 ροσευσ1
[ Κεψ ωορδσ] Χατηαραντηυσ ροσευσ~«¤¬µ¼ µ²²·~¤¯®¤¯²¬§¶
≈责任编辑 王康正 
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