全 文 ：( t , CH2)。根据以上数据,确定化合物Ⅷ为邻羟基
苄醇。
化合物Ⅸ: 无色针状结晶(石油醚-丙酮) ; 分子
式: C14H14O 3; EI-MS ( 70 eV ) m/ z ( % ) : 230 [ M ] +
( 5) , 212[ M - H2O]
+
( 32) , 124[ HOC6H4CH2OH]
+
( 19) , 107[ C6H4CH 2OH]
+
( 100) , 77( 19) ; U V KMeOHmax
( logE) : 275. 5( 3. 63) , 215. 0( 4. 03) , 203. 0 ( 4. 22)
nm; IR MKBrmax ( cm - 1 ) : 3 303, 3 031, 2 907, 2 866,
1 610, 1 594, 1 490, 1 457, 1 404, 1 355, 1 267,
1 221, 1 183, 1 108, 1 068, 1 035, 1 016, 980, 928;
1
H-NMR( 400 MHz, CDCl3 ) D: 7. 24 ( 2H , m, H-4) ,
7. 08( 2H, d, J= 7. 4 Hz, H-6) , 4. 72 ( 4H , s, CH2 ) ,
6. 87 ( 2H, m , H-3) , 6. 85 ( 2H, m, H-5) ;
13
C-NMR
( 100 MHz, CDCl3) D: 122. 2( s, C-1) , 155. 8( s, C-2) ,
116. 4 ( d, C-3) , 123. 0 ( d, C-4 ) , 120. 3 ( d, C-5) ,
129. 3( d, C-6) , 70. 6( t , CH2)。以上数据与化合物Ⅷ
相对照,可推断化合物Ⅸ为两分子邻羟基苄醇脱去
一分子水形成的缩合物,即双( 2-羟苄基)醚, 为首次
从天然产物中获得。
参考文献:
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从毛茛中分离鉴定的三个简单内酯
王榕乐1 ,周光雄2* ,谭毓治1,叶文才2,姚新生2X
( 1. 广东药学院药科学院, 广东 广州　510224; 2. 暨南大学药学院中药及天然药物研究所, 广东 广州　510632)
摘　要 :目的　研究毛茛Ranunculus j ap onicus 提取物的化学成分。方法　采用硅胶和Sephadex LH-20 柱色谱进行
成分分离, 通过光谱分析鉴定所分离成分的结构。结果　分离获得一个油状样品。该样品经正、反相薄层色谱均为
单一斑点,经GC-MS 及反相HPLC 柱色谱分析均为单一峰。但ESI-MS 和 1D、2D NMR 谱学分析确定其为毛茛苷
元( r anunculinin,Ⅰ)、异毛茛苷元( isor anunculinin,Ⅱ)和二氢毛茛苷元( dihydro ranunculinin, Ⅲ) 3 个组分以2∶1∶
1 比率的混合物。结论　所有化合物均为从该植物中首次分离得到, 其中化合物Ⅱ和Ⅲ为首次从天然中分离得到。
关键词: 毛茛;毛茛苷元; 异毛茛苷元;二氢毛茛苷元
中图分类号: R284. 1　　　文献标识码: A　　　文章编号: 0253 2670( 2008) 01 0015 03
Three simple lactones from Ranunculus j aponicus
WANG Rong-le
1 , ZHOU Guang-x iong
2, T AN Yu-zhi
1, YE Wen-cai
2 , YAO Xin-sheng
2
( 1. Co llege o f Pharmacy, Guangdong Pharmaceutical Univer sity , Guangzhou 510224, China ; 2. Inst itute o f T r aditional
Chinese Medicine and Natura l P roducts, Co llege o f Pharmacy, Jinan Univ ersity, Guangzhou 510632, China)
Abstract: Obj ective　To study the chemical const ituents in the ext ract from Ranunculus j ap onicus.
Methods　Silica gel and Sephadex LH-20 open columns chromatog raphy w ere used to iso late the cons-
t ituents f rom 85% alcoholic ext ract of the t it le plant . The st ructur es o f the isolated const ituents were
ident if ied on the basis of spect ral analy ses. Results　An oil sample w as obtained, w hich showed a single
spot by T LC w ith var iety o f the developing solvent systems. T he oil w as detected as a sing le peak by both
·15·中草药　Chinese Traditional and Herbal Drugs　第39卷第 1期 2008 年1 月
X 收稿日期: 2007-03-14基金项目:广东科技厅课题( 2004B30101002) ;广东省中医药管理局课题( 1040083)作者简介:王榕乐( 1982- ) ,男,硕士研究生,研究方向为药物筛选与新药研究。　E-mail: w ang rongle2004@ 163. com
* 通讯作者　周光雄　E-mail: guangxzh@ sina. com
GC-M S and RP-HPLC. How ever, analystic data of ESI-M S, 1D and 2D NMR revealed that the sample
w as the m ixture o f three compounds: r anunculinin (Ⅰ) , isor anuncul inin (Ⅱ) , and dihydroranunculinin
(Ⅲ) in the rat io of 2∶1∶1. Conclusion　All of three compounds are obtained from the plant for the f irst
t ime. Among them, compounds Ⅱ and Ⅲ ar e isolated as the natural products fo r the first t ime.
Key words : Ranunculus j ap onicus Thunb. ; ranunculinin; isoranunculinin; dihydr oranunculinin
　　毛茛 Ranunculus j ap onicus T hunb. ,又名鱼疗
草、野芹菜等,是毛茛科毛茛属多年生草本植物,生
长于河沟、池沼、水堤旁及阴湿的草丛中, 全国各地
都有分布, 资源丰富。毛茛可以治疟疾, 黄疸,偏头
痛,胃痛, 风湿关节痛等[ 1] ;其醇提取物可以舒张血
管平滑肌[ 2]和子宫平滑肌 [ 3] , 在心血管疾病中可能
具有潜在的开发和应用价值。至今,对毛茛的化学成
分研究报道有限, 主要报道其含毛茛苷成分。笔者对
毛茛化学成分进行了研究,从其乙醇提取物中分离
得到了一油状样品,经ESI-MS 和1D、2D NMR 谱学
分析确定其为毛茛苷元( ranunculinin, Ⅰ)、异毛茛
苷元( isoranunculinin, Ⅱ)和二氢毛茛苷元 ( dihy-
dro ranunculinin,Ⅲ) 3个组分以2∶1∶1质量比的
混合物。其中,所有化合物均为从该植物中首次分离
得到。化合物Ⅱ和Ⅲ为从天然中首次分离得到。
1　仪器和材料
BRUKER AV-400 FT 型核磁共振仪; F inni-
gan LCQ Advantage MAX 质谱仪; 岛津 HPLC 色
谱仪系统, Finnig an 公司(美国) T hermo Trace GC-
M S系统。反相硅胶薄层预制板为: T LC aluminum
sheets ( 20 cm×20 cm ) RP-18 F254 , M er ck 公司(德
国)产品; Sephadex LH-20, Amersham Biosciences
(瑞士)产品。
毛茛全草采自江西省九江县, 原植物由广东医
药学院刘基柱教授鉴定。
2　提取和分离
毛茛全草2 kg ,晾干切碎,过80 目筛,用85%乙
醇14 kg 回流提取3次,合并提取液, 减压回收溶剂,
浓缩至1. 05 kg。加入等体积的醋酸乙酯萃取4 次至
醋酸乙酯层为浅绿色。下层(水层)蒸干溶剂,得膏状
物200 g。取膏状物约7 g 进行硅胶柱色谱分离, 经氯
仿-甲醇( 3∶1～1∶1)梯度洗脱,得34个流份, 合并
2～4流份;再行硅胶柱色谱分离,氯仿-甲醇( 40∶1
～10∶1)梯度洗脱,得到一个油状物( 18 mg )。
GC-M S 条件: 色谱柱为 DB5 石英毛细管柱
( 0. 2 Lm×30 m×0. 25 Lm)。柱温采用程序升温,即
先60℃保温2 m in,然后10 ℃/ min 升至250℃, 保温
10 min。进样口温度260℃。分流进样。载气为高纯
He, 柱内流量为 1. 2 mL/ m in。质谱条件: 离子源为
电子轰击( EI)源,电子能量70 eV。
3　结构鉴定
该油状物经正、反相 TLC 等多个溶剂系统(正
相硅胶板溶剂系统为CHCl3-CH3OH 10∶1, EtOA c-
EtOH 1∶1, 反相硅胶板溶剂系统为 CH3OH-H2O
7∶3～5∶5)展开, 并经Kedde 试剂和硫酸-香草醛
试剂显色仅见1个斑点,故直接送做核磁谱。从氢谱
可看到比较正常的峰面积比。H-H COSY 谱(图1)
显示有3 个自旋体系存在,结合氢谱的峰面积积分
和偶合常数分析,这3 个自旋体系相应的氢信号如
表1中的Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ所示, 其相连的碳信号经HSQC
谱分析也得到指定。因在HMBC谱中, DC180. 3与DH
2. 29, 2. 11、1. 59相关, DC 175. 7与 DH 7. 67, 6. 21 相
关,而DC 165. 0与DH 7. 02, 6. 02, 4. 47, 4. 31相关, 故
DC 175. 7, 165. 0, 180. 3 等羰基碳分别与自旋体系
Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ的C-2相连。其C-1与C-4(Ⅰ和Ⅲ)或C-5
(Ⅱ)通过氧原子形成五元或六元内酯环, 也由HM-
BC谱中其他相关信号的分析(图1)及酯基碳的化学
位移得到确证。Ⅰ比Ⅱ的酯羰基碳化学位移大10个
单位是由于Ⅰ具有六元环结构,环张力小,而Ⅲ比Ⅱ
的酯基碳化学位移大15个单位在于Ⅱ具有A, B不饱
和体系的存在。3个自旋体系中氢、碳原子及其相连
的羰基与其他体系的氢、碳之间未见任何相关信号,
因此, 初步确定彼此之间没有相连。ESI-MS 给出
m / z 137 [ M Ⅰ(Ⅱ)+ N a] +、139[ M Ⅲ+ Na] +显然支持
上面的推论, 此油状物为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ 3 组分的混合
物。即Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ有下列所示结构。从氢谱上DH7. 67、
7. 02、3. 60各组信号的积分面积比较可知, 该化合
物中Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ有近似 2∶1∶1的比率。化合物Ⅰ、
Ⅱ、Ⅲ中各有一个手性中心, 其绝对构型还有待确
定。
由于早先的研究表明,毛茛苷极易水解, 故笔者
分离得到的3个内酯是完全天然存在的成分还是其
各自的苷水解产生还不清楚。但值得注意的是,早先
都认为毛茛苷水解产生的毛茛苷元不稳定,易形成
原白头翁素,并缩合成白头翁素。笔者成功得到毛茛
·16· 中草药　Chinese Traditional and Herbal Drugs　第39卷第 1期 2008 年1 月
苷元(Ⅰ, 即C-hydroxymethyl-A, B-butenolide[ 4～6] ) ,
可见毛茛苷元还是可以比较稳定地存在。Ⅱ虽是Ⅰ
的异构体, 但通常A, B不饱和五元内酯环比较稳定,
一般不易开裂。因此,Ⅱ是否为由Ⅰ异构化而来也很
难断定。Ⅲ可能是由Ⅰ经生物体内氢化而形成。若
如此,Ⅲ与Ⅰ的手性中心应有相同的构型。在此3个
化合物中,Ⅱ为毛茛苷元异构体,故命名为异毛茛苷
元 (即 5-hydroxy-5, 6-dihydro-pyr an-2-ones) , Ⅲ为
二氢毛茛苷元( 即C-hydroxymethylbutanolide , 或
C-hydroxymethyl-C-butyro lactone[ 7] )。Ⅱ和Ⅲ虽有
合成, 但从天然中为首次分离鉴定。此3个化合物都
是从本植物中首次分离鉴定。
图 1　化合物Ⅰ～Ⅲ的HMBC相关信号
Fig. 1　HMBC Correlation of compounds Ⅰ- Ⅲ
表1　化合物Ⅰ～Ⅲ的1H-NMR( 400 MHz)和13C-NMR( 100 MHz)数据( CDCl3 为测试溶剂)
Table 1　1H-NMR ( 400 MHz) and 13C-NMR ( 100 MHz) Data of compounds Ⅰ- Ⅲ ( in CDCl3)
碳位 Ⅰ
DC DH( J in Hz )
Ⅱ
DC DH( J in Hz)
Ⅲ
DC DH (J in Hz)
1 　 175. 7 　 165. 0 　 180. 3
2 123. 0 6. 21 ( dd, 5. 7, 2. 0) 122. 0 6. 02 ( dd, 9. 9, 0. 7) 29. 5 2. 59 ( t , 7. 3)
3 156. 6 7. 67 ( dd, 5. 7, 1. 6) 148. 9 7. 02 ( dd, 9. 9, 4. 0) 24. 2 2. 11 ( m) , 2. 29 ( m )
4 86. 3 5. 18 ( m) 61. 3 4. 37 ( ddd , 4. 9, 4. 0, 3. 8) 82. 8 4. 63 ( m)
5 62. 4 3. 90 ( dd, 12. 3, 4. 6) 73. 3 4. 47 ( dd, 10. 7, 3. 8) 64. 5 3. 78 ( dd, 12. 4, 3. 0)
3. 74 ( dd, 12. 3, 4. 6) 4. 31 ( dd, 10. 7, 4. 9) 3. 60 ( dd, 12. 4, 4. 4)
　　　　碳谱和氢谱数据由HSQC和HMBC谱分析指定。
　　　　13C-NM R and 1H-NM R Data w ere ass igned on the analysis of b y HSQC and HMBC
　　笔者试图以GC-M S 和HPLC 分离进一步证实
该油状样品为上述 3个组分的混合物, 但经多个条
件尝试, 并未实现3个组分的有效分离。原因可能是
该3 组分相对分子质量相同或相差极少, 极性也极
为相近,因此,不能得到有效分离。
致谢: 九江县森林植物标本馆馆长谭策铭帮助
采集药材;佛山德众药业有限公司代为进行初提取;
暨南大学分析测试中心吴老师代测GC-M S;暨南大
学中药及天然药物研究所李茜博士代测核磁,唐金
山代测质谱。
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《中草药》杂志被确认为允许刊载处方药广告的第一批医药专业媒体
　　据国家药品监督管理局、国家工商行政管理局和国家新闻出版总署发布的通知,《中草药》杂志作为第一
批医药专业媒体, 允许发布“粉针剂、大输液类和已经正式发文明确必须凭医生处方才能销售、购买和使用的
品种以及抗生素类的处方药”广告。
电话: ( 022) 27474913　23006821　　传真: 23006821　　联系人:陈常青
·17·中草药　Chinese Traditional and Herbal Drugs　第39卷第 1期 2008 年1 月