全 文 ：中草菊 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第39卷第7期2008年7月·1019·
3．7 重现性试验：取同一供试品(批号060201)约
0．5g，精密称定，称取6份，进样测定，结果淫羊藿
苷的平均质量分数为2．55mg／g，RSD为0．75％。
3．8 稳定性试验：精密吸取同一供试品(批号
060201)溶液20弘L，分别在制备后的0、1、4、6、12、
24h，进样测定淫羊藿苷的峰面积，结果RSD为
2．2％，表明供试品溶液在24h内基本稳定。
3．9加样回收率试验：精密称取同一批样品(批号
061104，含淫羊藿苷1．50mg／g)6份，每份约0．25
g，分别精密加入淫羊霍苷对照品约0．4mg，制备供
试品溶液，进样测定，计算回收率，结果平均回收率
为100．3％，RSD为1．37％。
3．10样品测定：取本品10批，每批2份，制备供试
品溶液，进样测定，用外标法计算样品中淫羊藿苷的
平均质量分数，结果见表1。根据以上10批样品实
验结果来看，为保证产品质量，确定本品含淫羊藿苷
(C33H。。0。s)不得少于0．80mg／g。
4讨论
4．1测定波长的选择：取淫羊藿苷对照品溶液(10
／19／mL)，在200～400nm波长扫描，结果在270nm
波长处有最大吸收，与《中国药典>>2005年版一部淫
羊藿测定项下的测定波长一致。
表1祛痹舒肩丸中淫羊藿苷的测定结果(n----2)
Table1 DeterminationoficariinQubiShujian
PilI(露一2)
批号 淫羊藿苷／(mg·91：批号 淫羊藿苷／(mg·g-1)
060201 2．55 060610 0．91
060202 2．48 061002 1．34
060203 2．48 06i102 1．38
060608 1．00 061104 1．S0
060609 0．99 061107 i．36
4．2流动相的选择：曾尝试①乙腈一水(30：70)、②
乙腈一水(28：72)、⑧甲醇一水(60：40)3种流动相，
实验结果表明①不利于本品中淫羊藿苷峰的分离；
②较适合于供试品中淫羊藿苷的分离；⑧虽可减少
毒性，但杂质分离效果不如②好。综合各流动相的分
离效果，结果确定以②为佳。
4．3 不同色谱柱考察：取同一供试品(批号
060201)溶液进样测定，分别考察使用Diamonsil
C18、Inertsil0DS一3和HypersilC183种色谱柱对淫
羊藿苷测定的影响。实验表明，不同厂家色谱柱对测
定结果的影响很小(RSD为3．77％)。
参考文献：
[1]金向群，刘永刚，随志刚，等．D140大孔树脂分离纯化淫羊藿
黄酮的研究FJI．中成药，2004，26(11)：872—875．
RP—HPLC法测定番荔枝种子中阿诺宁I
李建华1’2，邹节明1’，云强2
(1．北京中医药大学中药学院，北京100102；2．桂林三金药业股份有限公司，广西桂林541004)
摘 要：目的 考察不同产地番荔枝种子中阿诺宁I。方法 采用HPLC法测定。选用C-s色谱柱(150mm×4．6
mm，5肛m)，流动相为乙腈一水(75t 25)，检测波长为220nm，柱温30℃，体积流量1mL／min。药材粉末分别采用正
己烷脱脂和氯仿回流提取，用甲醇溶解即得。结果 阿诺宁I在0．3～3．0ttg与峰面积具有良好的线性关系(，一
0．999)，平均回收率为98．9％，RSD为1．78％。结论建立的定量方法可以用于番荔枝种子中阿诺宁I的质量
控制。
关键词：番荔枝；种子；阿诺宁I；高效液相色谱
中图分类号：R286．02 文献标识码：A 文章编号：0253—2670(2008)07—1019—02
番荔枝的果实是著名的热带水果，在广东、海
南、云南和广西等地有大量种植。番荔属植物的种子
含有丰富的番荔枝内酯，自第一个番荔枝内酯ace—
fogemin化合物紫玉盘辛(uvaricin)[13发现以来，至
今已发现了400个左右的这类化合物[2]。番荔枝内
酯是一类很有希望的新型抗癌药物，其作用机制是
通过抑制细胞线粒体中NADH氧化还原酶，阻止呼
吸链电子的传递，使ADP不能转化成ATP，进而使
细胞因能量耗竭而凋亡[2]。其中阿诺宁I(番荔枝宁
I，annoninI)是其含有的最高的番荔枝内酯类成
分，具有强大的抗肿瘤活性。番荔枝种子已被《广东
省中药材标准》收载，但标准中没有对指标性成分进
收稿日期：2008—02—22
*通讯作者邹节明Tel：(0773)5842588E—mail：sanjin@91．gx．cninfo．net
万方数据
·1020· 中草菊 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第39卷第7期2008年7月
行定量，因此本实验采用HPLC法对不同产地的番
荔枝科植物番荔枝的干燥成熟种子中阿诺宁I进行
考察，所得数据可为其质量评价提供参考。
1材料、仪器与试剂
番荔枝果实予2007年8—9月分别采自海南三
亚、海口、儋洲，广东虎门、东莞，广西北海、防城港，
云南大理，取其种子，干燥。
美国Waters2690色谱仪，996DAD检测器，
Empower液相色谱工作站；阿诺宁I对照品(自制，
HPLC归一化法检测质量分数>98％)；乙腈(色谱
纯)；水(超纯水)。
2方法与结果
2．1 色谱条件：色谱柱：CJ8柱(150mm×4．6mm，5
弘m)；流动相为乙腈一水(75：25)；体积流量1．0
mI．／rain；柱温30℃；检测波长为220nm；进样量为
5弘L。在此条件下阿诺宁I的保留时间为26．19
min；阿诺宁I能与其他成分很好地分开。对照品及
样品的HPLC色谱图见图l。
．0 10 20 3040 500 10 20 30 40 50
t／rain
*一阿诺宁1
*一annoninI
图1 阿诺宁I对照品(A)和番荔枝种子(海南三亚产)
(B)的HPLC色谱图
Fig．1HPLCChromatogramsfannoninI reference
substance(A)andseedsofA．squamosa
fromSanya，HainanProvince(B)
2．2对照品溶液的制备：精密称取阿诺宁I对照品
15．56mg，加甲醇溶解并定容至25mL，作为对照
品溶液。
2．3供试品溶液的制备：精密称取药材干燥粉末
1 g，加正已烷20mL回流提取2次，每次1h，滤过，
取药渣，加氯仿20mI。回流提取2次，每次1h，滤
过，合并提取液，减压回收除去溶剂，用甲醇25mL
溶解，再取1mL溶液，用甲醇稀释至5mL，作为供
试品溶液。．
2．4标准曲线的绘制：分别精密吸取阿诺宁I对照
品溶液0．5、1、2、3、4、5弘L进样测定，以峰面积为纵
坐标，进样量为横坐标，绘制标准曲线，得回归方程
为y=9．719×105X+2．364×103，，．=0．9999。表
明阿诺宁I在0．3～3．0pg与峰面积呈线性关系。
2．5精密度试验：取同一阿诺宁I对照品溶液连续
迸样5次，测其峰面积，计算RSD为0．31％。
2．6重现性试验：取海南三亚产同一批药材6份，
制备供试品溶液，进样，测定阿诺宁I峰面积，计算
质量分数的RSD为1．68％。
2．7稳定性试验：取供试品溶液在1、2、4、8、16、24
h进样测定阿诺宁I峰面积，计算其RSD为
1．01％。表明供试品溶液在24h内稳定性良好。
2．8加样回收率试验：精密称取6份海南三亚产样
品各0．5g，分别精确加入1mL0．60mg／mL阿诺
宁I对照品溶液，制备供试品溶液，进样测定，计算
得阿诺宁I的平均回收率为98．9％，RSD为
1．78％。
2 9样品测定：取8个不同产地的番荔枝种子粉
末，分别制备供试品溶液。同时取阿诺宁I对照品溶
液，各取5肛L进样作HPLC分析，采用外标法计
算，结果见表1。
表1不同产地番荔枝种子中阿诺宁I的测定结果(n一2)
Table1 Determinationof nnoninI seedsofA．
squamosafromvarioushabitats(万一2)
产地 阿诺宁I／％ 产地 阿诺宁I／％
7母嗣_．业 1．225 J尔乐冤0．709
海南海口0．978 广西北海0．682
海南儋洲0．911 广西防城港0．663
广东虎门0．662 云南大理0．407
3讨论
番荔枝种子中含油脂量很高，需进行脱脂处理，
实验中比较了石油醚和正己烷对番荔枝种子脱脂的
效果，结果发现两种溶剂都能脱去药材的大部分油
脂，但石油醚在脱脂过程中能溶解一部分阿诺宁I，
而正己烷对阿诺宁I的溶解度很小，因此，本实验选
择正己烷为脱脂的溶剂。
色谱条件选择时，比较了甲醇一水和乙腈一水系
统，发现前一种流动相的目标峰有拖尾，且与杂质峰
分不开，后一种流动相能使各组份有较好的峰形和
分离度。
不同产地的番荔枝种子中阿诺宁I的差异较
大，由此可推断各地由于气候、土壤等地理条件的不
同，其有效成分的量也有较大差异，因此在人工栽培
时应考虑这些必要的因素。
参考文献：
[13JoladSD，HoffmannJJ，SchramKU，eta1．Uvaricin．a
newantitumoragentfromUvariaaccuminata(Annonaceae)
[J]．JOrgCkem，1982，47：3151—3153．
[2]AlaliFQ，LiuXX，MclaughlinJL．A nonaeeousae to-
genins；recentprogress[J]．JNatProd，1999，62：504—
540．
万方数据
RP-HPLC法测定番荔枝种子中阿诺宁Ⅰ
作者： 李建华， 邹节明， 云强
作者单位： 李建华,邹节明(北京中医药大学中药学院,北京,100102;桂林三金药业股份有限公司,广西
,桂林,541004)， 云强(桂林三金药业股份有限公司,广西,桂林,541004)
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2008,39(7)

参考文献(2条)
1.Jolad S D;Hoffmann J J;Schram K U Uvaricin.a new antitumor agent from Uvaria
accuminata(Annonaeeae) 1982
2.Alali F Q;Liu X X;Mclaughlin J L Annonaeeous acetogenins:recent progress[外文期刊] 1999(3)


本文链接：http://d.wanfangdata.com.cn/Periodical_zcy200807020.aspx