全 文 ：中草喃ChineseTraditionalandHefoalDrugs第39卷第9期2008年9月·1285·
结果以；士j表示，每个浓度3个复孔，对照组的浓度分别为0．1和1tamol／L
以t检验计算统计学意义，与对照组比较：。P
Statisticals gnificancew sdeterminedbyStudent’ste t．。尸
Fig．3EffectsofcompoundI—VORUMR106cellALPactivity
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复方五仁醇胶囊血清药化学研究(Ⅱ)
丁安伟1，窦志华2，罗 琳3，居文政‘
(1．南京中医药大学，江苏南京210029I2．南通大学附属南通第三医院，江苏南通226006I
3．南通大学，江苏南通226006，4．南京中医药大学附属医院，江苏南京210029)
摘要：目的对复方五仁醇胶囊含药血清中的药源性成分作进一步鉴定，并测定主要成分的量。方法HPLC—DAD
和UPLC．MS／MS检测相结合进行成分鉴定．HPLC—UV法测定主要木脂素类的量。结果HPLC—DAD检测鉴定出
含药血清中8个制剂原形成分中的7个，分别为五味子醇甲、戈米辛J、五味子醇乙、去氧五味子素、戈米辛N、五味子乙
素和五味子丙素，5个代谢产物的紫外光谱图具有联苯环辛烯类木脂素的吸收特征；UPLC—MS／MS检测结果显示含
收稿日期：2007—11—03
基金项目：江苏省中医药局中医药科学技术研究专项课题(H05173)I江苏省高校研究生科技创新计划项目(140)，江苏省南通市社会发
展科技计划项目($40006)
作者简介；丁安伟(1950一)．男，江苏南京人，教授，博士生导师，主要从事中药炮制与复方研究工作．
Telt(025)85811523E—mail：awdin9105@163．com
万方数据
·1286． 中草菊 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第39卷第9期2008年9月
药血清中除存在五味子醇甲等7个木脂素类成分外，还含有五味子酯甲，含药血清中五味子醇甲、五味子醇乙、去氧五
味子素、五味子乙素的质量浓度分别为(8．1453-I-1．0202)、(6．6045士1．341)、(o．5601士 ．1375)、(5．933O士
0．966)／-glmL。结论复方五仁醇胶囊含药血清中的药源性成分主要有木脂素及其代谢产物。
关键词：复方五仁醇胶囊；血清药化学；木脂素
中图分类号：R284．I 文献标识码：A 文章编号：0253—2670(2008)09—1285—04
SerumpharmacochemistryofCompoundWurenchunCapsula(Ⅱ)
DINGAn—weil，DOUZhi—hua2，LU0Lin3，JUWen—zhen94
(1．NanjingUniversityofTraditionalChineseMedicine，Nanjing210029，China；2．NantongThirdAffiliatedHospital，
NantongU iversity，Nantong226006，China，3．NantongUniversity，Nantong226006，China；4·Affilated
Hospital，NanjingUniversityofTraditionalChineseMedicine，Nanjing210029，China)
Abstract：ObjectiveToidentifythedrug—inducedconstituentsinraserumcontainingdruof
CompoundWurenchunCapsulaandeterminethecontentoftheseconstituents．MethodsIden ification
ofthedrug—inducedconstituentsinserumhasbeencarriedoutbycombinativemethodofHPLC—DADand
UPLC—MS／MS．ThecontentoffourlignansinserumhasbeendetectedbyHPLC—UV．ResultsSevenof
eightoriginalformcompoundsinserumhavebeenidentifiedasschisandrin，gomisinJ，schisandrolB，
deoxyschizandrin，gomisinN，schisandrinB，andschisandrinC．TheUVspectrogramffivemetabolites
showedtheabsorptioncharacterofdibenzocyclooctadienelign ns．EightlignanswereidentifiedbyUPLC—
MS／MS，besideschisantherin，therearesevenlignan—likeonesdetectedbyHPLC-DAD．Thecontentof
schisandrin，schisandrolB，deoxyschizandrin，andschisandrinBi serumwas(8．1453土1．020)，
(6．6045土1．341)，(O．5601士O．1375)，and(5．9330土0．966)gg／mL，respectively．Conclusion
Lignansdtheirmetabolitesarecomposedofthemaindrug—inducedconstituentsinratserum．
Keywords：CompoundWure chunCapsula；serumpharmacochemistry；lignans
中药血清药化学是以传统药物化学方法为基
础，综合应用多种现代技术，分析鉴定I=l服中药后血
清中有效成分，研究其药效相关性，确定中药药效物
质基础的方法‘11。与中药中的化学成分相比，因经过
胃肠道的处理、筛选和滤过，成分的种类和数目已大
大减少，这样不仅大大简化了中药复杂体系，而且对
血清中所含化学成分进行进一步分析、鉴定，把得到
的成分与原中药再次进行药效学比较，就有可能揭
示产生复方药效的成分[2’3]，甚至可以成为创制新药
的基础Ⅲ。因而，如何通过口服给药后血清中成分分
析，确定中药及复方的体内直接作用物质，将成为
快速、准确地研究中药药效物质基础的有效的
途径‘1。。
复方五仁醇胶囊是一种经过长期临床实践总结
而研制的治疗慢性肝炎的制剂[5]，由五味子、三七、柴
胡、叶下珠4味中药组成，临床疗效确切[6]。先期的研
究发现，大鼠灌胃给药该制剂后血清中产生药源性成
分13个，其中8个为制剂原形成分，5个为代谢产物，
通过对照品比对初步认定8个原形成分中包括五味
子醇甲、去氧五味子素、五味子乙素‘川。本实验的主要
目的是进一步鉴定含药血清中药源性成分，并测定主
要成分的量，为下一步用体外化合物模拟血清中的比
例与含药血清进行药效比较奠定基础。
1实验材料
1．1仪器：WatersAlliance高效液相色谱系统，包
括2695分离单元、2996二极管阵列检测器、
Empower色谱工作站(美国Waters公司)；Waters
液相色谱一质谱联用仪(UltraperformanceLC，
QuattraP emier质谱仪，Masslynx4．0软件，美国
Waters公司)；LIBRORAEL一40SM电子分析天
平(日本岛津)。
1．2试剂：甲醇(色谱纯，江苏汉邦科技有限公司)，
乙腈(色谱纯，德国Merk公司)，纯净水(杭州娃哈
哈集团有限公司)。
1．3对照品与药品：五味子醇甲、五味子乙素购自江
西南昌中药固体制剂制造技术国家工程研究中心，五
味子醇乙购自天津一方科技有限公司，五味子酯甲，
去氧五味子素购自中国药品生物制品检定所，复方五
仁醇胶囊由南通大学附属南通第三医院提供。
1．4动物：SD大鼠，SPF级，体质量(248．4士
16．3)g，雌雄各半。南通大学实验动物中心提供，许
可证号SYKX(苏)2002—0022。
万方数据
中草喃ChineseTraditionalandHerbalDrugs第39卷第9期2008年9月·1287·
2实验方法
2．1溶液的制备
2．1．1供试品溶液的制备：按文献方法[71制备含药
血清、空白血清及其供试品溶液、制剂供试品溶液。
2．1．2对照品溶液的制备：精密称取以上5种对照
品，甲醇溶解，配成0．08-0．2mg／mL的混合溶液，
供HPLC—DAD检测用；另外精密称取5种对照品，
甲醇溶解并稀释至35pg／mL的混合溶液，供
UPLC—MS／MS检测用；精密称取五味子醇甲、五味
子醇乙、去氧五味子素、五味子乙素适量，加入空白
血清，按含药血清供试品溶液制备方法处理，配成
30．75～135．0／-g／mL的混合溶液，供含药血清中
木脂素类成分测定用。
2．2含药血清药源性成分的HPLC—DAD检测
2．2．1色谱条件：色谱柱、流动相、流速、柱温均同
文献报道[7]，190～400llm扫描检测。
2．2．2检测方法：分别吸取各供试品溶液及对照品
溶液各10弘L，注人液相色谱仪，DAD检测，运行70
min，提取主要吸收峰的光谱图，通过对照品和供试
品光谱图比较，结合文献资料，对含药血清中的色谱
峰进行成分鉴定或推测。
2．3含药血清中木脂素类成分UPLC—MS／MS检测
2．3．1检测条件：超高效液相色谱条件为Acquity
UPLCBEHCl8色谱柱(50mm×2．1mm，1．7弘m)；
A(乙腈)一B(H：O，0．1％甲酸)梯度洗脱(O～15min，
5％～95％A)；体积流量0．5mL／min；分流后进入
质谱；柱温40℃。质谱条件：ES+；毛细管电压：3．0
kV；锥孔电压：40V；离子源温度：120℃；氮气流
量：400L／h；质量扫描范围为300---,1200m／z。
2．3．2 检测方法：以上条件下分别吸取对照品溶
液、含药血清及空白血清供试品溶液各2弘L，注入液
相色谱一质谱联用仪进行分析，运行15min，记录总
离子流色谱图，通过提取离子流色谱图及相应保留
时间离子峰的质谱图比对分析，进行成分鉴定。
2．4含药血清中4种木脂素类成分的测定
2．4．1 色谱条件：色谱柱、流动相、体积流量、柱温
均同2．2．1，检测波长217Rm。
2．4．2测定方法：以上条件下吸取不同体积对照品
溶液进样测定，以峰面积对进样量建立回归方程，供
试品进样20pL，外标法计算含药血清中五味子醇
甲、五味子醇乙、去氧五味子素及五味子乙素的量。
3结果与讨论
3．1 含药血清药源性成分的HPLC—DAD检测：波
长203nm时检测到前期研究[8]标定的制剂指纹图
谱26个共有峰(图1一A)，与空白血清比较(图1一D)，
大鼠灌胃复方五仁醇胶囊后血清中产生13个药源
性成分(图1一B)，其中包括制剂图谱的6、7、9、17、21、
23、24、26号峰，经比对，两者保留时间及紫外光谱
图一致，提示这8个成分为制剂原形成分，其余5个
成分(图1一B中M1～M5)为体内产生的新成分，与
文献报道[9]比对发现，其紫外光谱图均具有联苯环
辛二烯类木脂素的吸收特征，提示这5个成分为五
味子类木脂素的代谢产物。前期研究结果[101及相关
对照品比对(图1一C)表明，6、7、9、21、23、24、26号峰
分别为五味子醇甲、戈米辛J、五味子醇乙、去氧五味
子素、戈米辛N、五味子乙素和五味子丙素，该结论
得到以下UPLC—MS／MS检测的进一步验证。
0 lO 20 30 40 50 60 70
t／min
a一五味子醇甲 b一五味子醇乙c一五味子酯甲
d一去氧五味子素e一五味子乙索
a—schisandrinb—schisandrolB c—schisantherin
d—deoxy3chisandrine-schisandrinB
图1复方五仁醇胶囊(A)、含药血清(B)、对照品(C)
及空白血清(D)HPLC色谱图
Fig．1HPLCChromatogramofCompoundWurenchun
Capsula(A)，serumcontainingdru (B)，re-
ferencesubstances(C)，andblankserum(D)
3．2 含药血清中木脂素类成分的UPLC—MS／MS
检测：总离子流色谱图显示，对照品5种木脂素类成
分的保留时间均小于5min，空白血清对此类成分的
检出基本没有干扰。对照品总离子流色谱图中保留
时间1．79、2．11、3．01、3．76、4．12的色谱峰分别为
五味子醇甲、五味子醇乙、五味子酯甲、去氧五味子
素和五味子乙素，流出顺序与前面HPLC检测结果
及文献报道吻合。
通过对供试品提取离子流色谱图及各色谱峰对
应的质谱图分析，结合HPLC检测结果和文献报道，
鉴定出含药血清所含的8种木脂素类成分：五味子
醇甲、戈米辛J、五味子醇乙、五味子酯甲、去氧五味
万方数据
·1288· 中草喃ChineseTraditionalandHerbalDrugs第39卷第9期2008年9,el
子紊、戈米辛N、五味子乙紊和五味子丙素，其中五
味子醇甲等7个成分验证了HPLC—DAD检测结果。
由于方法的灵敏度等原因，五味子酯甲没有被
HPLC—DAD检测出来。分析结果见表1。
裹1 UPLC—MS／MS分析结果
Table1 ResultsofUPLC-MS／MSanalysis
3．3含药血清中4种木脂素类成分的测定：以峰面
积对进样量求得回归方程，五味子醇甲：y=4921 7
X+143005，，．一0．9997，线性范围为0．1536～
0．7680／lg；五味子醇乙：Y=3978969X+
125625，1-一0．9996，线性范围为0．162O～O．8100
pgI去氧五味子素：Y=7698902X一33501，，．=
0．9998，线性范围为0．0369～0．1845pg；五味子
乙素：Y=3261879X一74154，r=0．9996，线性范
围为o．1194～o．5970pg。对5批含药血清进行了
测定，结果五味子醇甲、五味子醇乙、去氧五味子素、
五味子乙素4种成分的平均质量浓度分别为：
(8．1453士I．020)、(6．6045士1．3414)、
(O．560I士O．1375)、(5．9330士0．966)Fg／mL。
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萱草根化学成分的分离与结构鉴定(If)
杨中铎1，李涛1，彭程2
(1．兰州理工大学生命科学与工程学院，甘肃兰州 730050}2．西北民族大学化工学院，甘肃兰州730030)
擒 要：目的研究萱草Hemerocallisfu va根的化学成分。方法用色谱方法进行分离纯化萱草根的氯仿和正丁
醇提取物，根据化合物的理化性质和光谱数据进行结构鉴定。结果从董草根的氯仿和正丁醇提取物中分离鉴定
了10个化合物：蒺藜嚷(terresoxazine，I)，11一氧代～p乳香酸(I)、何伯烷一6口，22一二醇(1)、海可皂苷元(Jv)、谷
甾一4．烯一3p醇(V)、谷甾一4一烯一3一酮(Ⅵ)、ll卜阿魏酰氧酸(¨-feruloyloxyacid，Ⅶ)、3，4-二羟基反式肉桂酸(VII)、对甲
基反式肉桂酸(IX)、香草酸(x)。结论化合物l～IV、l／I为首次从该属植物中分得．
关键词：百合科}董草属；萱草根}黄花菜
中圈分类号：R284．1 文献标识码：A 文章编号：0253—2670(2008)09—1288—03
IsolationandidentificationofchemicalconstituentsinHemerocallisfu va(Ⅱ)
YANGZhong—du01，LITa01，PENGChen92
(1．CollegeofLifeScienceandEngineering，LanzhouUniversityofTechnology。Lanzhou730050，Chinal
2．InsitituteofCh micalEngineering，NorthwestUniversityforNa ionalities，Lanzhou730030，China)
Abstract：ObjectiveTostudythchemicalconstituentsintherootsofHemerocallisfulva．Methods
萋叁堡目：兰州理工大学科研发展基金资助项目(SB08200605)
作者简介：杨中铎(1976--)，男，甘肃省临洗人．副教授．副主任药师，博士，现兰州理工大学生命科学与工程学院工作．主要从事天然产
塑传兰成分、有效成分提取分离，天然酶抑制荆先导化合物的发现研究．在该领域发表论文11篇，其中scI收录6篇，申请国
幂发明专利2项．Tell(0931)2976387E—mail：yangzhortgduo@126．com
万方数据
复方五仁醇胶囊血清药化学研究(Ⅱ)
作者： 丁安伟， 窦志华， 罗琳， 居文政， DING An-wei， DOU Zhi-hua， LUO Lin， JU Wen-
zheng
作者单位： 丁安伟,DING An-wei(南京中医药大学,江苏,南京,210029)， 窦志华,DOU Zhi-hua(南通大
学附属南通第三医院,江苏,南通,226006)， 罗琳,LUO Lin(南通大学,江苏,南通,226006)
， 居文政,JU Wen-zheng(南京中医药大学附属医院,江苏,南京,210029)
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2008,39(9)
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4. 邢东明.潘卫松.炎彬.向兰.陆群.杜力军 从创新中药角度认识血清药化学[期刊论文]-中国中西医结合杂志
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5. 窦志华.丁安伟.王陆军.罗琳.张兵.施忠.DOU Zhi-hua.DING An-wei.WANG Lu-jun.LUO Lin.ZHANG Bing.SHI
Zhong 复方五仁醇胶囊血清药化学研究[期刊论文]-中草药2006,37(8)
引证文献(1条)
1.魏元锋.张宁.冯怡.林晓 中药血清药物化学在中药药效物质基础研究中的应用[期刊论文]-中草药 2009(9)
本文链接：http://d.g.wanfangdata.com.cn/Periodical_zcy200809002.aspx