全 文 ：·1486· 中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第10期2006年10月
的蒽醌苷元类物质具有较高的富集能力。
通常有机化合物通过树脂的孔穴扩散到树脂的
内表面而被树脂吸附，孔径大的吸附树脂易于吸附
相对分子质量大的物质，孔径较小而比表面积高的
吸附树脂易于吸附小分子的物质，因此树脂吸附能
力大小与蒽醌苷元的相对分子质量和构型有关，从
表6可见吸附量大的树脂S一8具有较大的孔径。在
树脂具有适宜的孔径可确保溶质良好扩散的条件
下，吸附树脂的吸附量随比表面积的增大而增大，几
乎呈线性关系。孔容大小直接影响树脂的体积比表
面积(每】mL湿树脂所具有的比表面，m2／mL)，孔
体积增大引起体积比表面积下降，反而使吸附量降
低。S一8、AB一8树脂孔容小，体积比表面积大，因而吸
附量较大。
树脂的实际应用是由树脂的极性、孔径、比表
面、孔容的综合性能决定的，对其性能的评价要从吸
附量、解吸率和吸附动力学实验的结果综合考虑。在
某些情况下，吸附作用力强不利于解吸，如X一5树
脂吸附量较大但解吸率低，不适用于分离。
通过测定分析6种大孑L吸附树脂对蒽醌苷元的
吸附和解吸特性，综合考虑多方面因素，S一8树脂具
有适当孔径、敲高比表面积，对蒽醌苷元吸附量大，
解吸容易，经树脂纯化后蒽醌苷元的量高，性能优于
其他几种树脂。因此S一8型大孔吸附树脂是一种性
能良好的蒽醌苷元吸附剂。
3．3 S一8型大孑L树脂对决明子总蒽醌苷元的动态
吸附量明显低于静态吸附量，是由于动态吸附过程
中，药液在树脂上停留时间大大缩短，影响了树脂吸
附效果所致。在工业生产过程中，测定动态吸附率对
于控制上样量，提高生产效率具有重要指导意义。
3．4 在大孔树脂对决明子蒽醌苷元纯化能力比较
的实验中，由于20％、50％乙醇极性大于80％乙醇，
洗脱液中含有一定量水溶性杂质，质量分数较80％
乙醇洗脱液低(AB一8型大孔树脂20％乙醇洗脱液
含蒽醌苷元13．99％，50％乙醇洗脱液含25．98％，
80％乙醇洗脱液含34．420／4)，所以80％乙醇洗脱液
中蒽醌苷元的量最高，并且以此作为比较纯化能力
的指标。
3．5 用80％乙醇洗脱各型号(除S一8)大孑L树脂柱
后柱体由黄色变为基本无色，说明吸附在柱上的样
品成分近乎全部被洗脱下来。而80％乙醇却不能把
吸附在S一8型大孑L树脂柱上的绝大部分样品成分洗
脱下来，需用乙醇一5％NaOH(4：1)洗脱后色谱柱
颜色才明显变浅。这说明蒽醌苷元与S一8型大孔树
脂间的氢键吸附力很强，需与NaOH形成更强结合
力的离子化合物才能从色谱柱上被争夺下来，达到
洗脱的目的。
3．6 经本实验研究初步确定决明子总蒽醌苷元的
制备纯化工艺——决明子药粉采用氯仿浸提，上S一
8型大孔树脂柱，水洗至中性，乙醇一5％NaOH(4：
1)洗脱，收集醇碱洗脱液浓缩、酸化处理，从而得到
质量分数较高的总蒽醌苷元(42．62％)。
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大鼠灌胃复方五仁醇胶囊后血清和血浆中
五味子醇甲和五味子乙素的比较
罗 琳1，窦志华2，丁安伟2，王陆军3，张兵3，施 忠3
(1．南通大学，江苏南通226006；2．南京中医药大学，江苏南京210029；3．南通市第三人民医院，江苏南通226006)
摘要：目的 比较复方五仁醇胶囊主要入血成分在大鼠血清和血浆中的量。方法 灌胃给药制备大鼠含药血清
收稿日期：2005—12-i4
基金项目：江苏省中医药局中医药科学技术研究专项课题(H05173)；南通市社会发展科技计划项目($4006)
作者简介：罗琳(1976一)，女，江苏省南通市人，讲师，硕士，主要从事药理学科研教学工作。
Tel：(0513)85051726E-mail：luolin@ntu．edu．cn
万方数据
中草药 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第10期2006年10月·1487·
和含药血浆，HPLC法测定五味子醇甲和五味子乙素。LiehrosphereC18(250mm×4．6mm，5“m)色谱柱，Phe—
nomenexDescriptionC。8保护柱(4．0mm×3．0ram)，甲醇一水梯度洗脱，体积流量1．0mL／min，柱温30℃，检测波
长254nm。结果五味子醇甲、五味子乙索分别在0．0512～0．6144和0．0398～0．4776肛g线性关系良好，低、
中、高3个水平五味子醇甲、五昧子乙素的平均相对回收率分别为96．72％、101．06％、102．05％和99．03％、
】oo．18％、100．28％。血清和血浆中五昧子醇甲平均质量浓度分别为11．0632、 2．8837pg／mL，五味子乙素平均
质量浓度分别为7．4909、12．5908pg／mL。结论复方五仁醇胶囊主要人血成分血浆中的量高于血清。
关键词：复方五仁醇胶囊；五味子醇甲；五味子乙素；含药血清；含药血浆；高效液相色谱
中图分类号：R286．02 文献标识码：B 文章编号：0253—2670(2006)1Q一148 —04
Comparisonof chisandrinandschisandrinBinratserumandplasma
afterigCompoundWurenchunCapsules
LUOLinl，DOUZhi—hua2，DINGAn—wei2，WANGLu—jun3，ZHANGBin93，SHIZhon93
(1．NantongUniversity，Nantong226001，China；2．NanjingUniversityofTraditionalChineseMedicine，
Nanjing210029，China；3．ThirdPeople’SHospitalofNantongCity，Nantong226006，China)
Abstract：ObjectiveTocomparethecontentofmainconstituentsofCompoundWurenchunCapsules
dissolvedinserumandplasmaofrats．MethodsSerumandplasmacontainingdruwerepreparedafterig
thepreparationtorats．LichrosphereC18。(250mm×4．6mm，5弘m)columnandPhenomenexD scription
C18(4．0mm×3．0ram)protectivecolumnwereused．Themobilephaseconsistedofmethanol—water，elut—
edingradientmode．Theflowratewas1．0mL／min．Thecolumntemperaturewas30℃anddetection
wavelengthwas254nm．ResultsThelinearrangesof chisandrinandschisandrinBwere0．0512—
0．6144and0．0398一O．4776／*g．TheaveragerelativerecoveriesofschinsandrinandschisandrinBwere
96．72oA，101．06％，102．05％，and99．03％，100．18％，100．280Ainlow，middle，andhighconcentra—
tions，respectively．Theav ragecont ntsofschisandrininserumandplasmawere11．0632and12．8837
>g／mL，schisandrinBwere7．4909and12．5908p-g／mL，respectively．ConclusionThemaincon titu—
entsofCompoundWurenchunCapsulescontainedplasmaaccountforhigherthantheonesinserum．
Keywords：CompoundWure ehunCapsules；schisandrin；schisandrinB；serumcontainingd ug；
plasmacontainingdru ；HPI．C
复方五仁醇胶囊由五味子、柴胡、叶下珠、三七
4味药组成，用于治疗急慢性肝炎，不但具有组方简
单的特点，而且临床疗效确切[1]，所以笔者选定该制
剂为研究对象进行“血清药理学”与“血清药化学”相
结合的中药复方药效物质基础的方法学探讨。前期
的研究发现，该制剂灌胃给药后大鼠血清中产生8
个制剂原形成分，其中五味子醇甲、五味子乙素的量
较高，可能为主要药效成分。近年来有学者查阅大量
我国发表的有关“血清药理学”的论著，发现绝大部
分其实是“血浆药理学”，只有少部分是真正的血清
药理学[21；同时也有学者从血液生理的角度通过实
验研究认为，某些情况下血浆药理学方法能更好地
再现体内环境中产生的药理效应[3]。本实验对复方
五仁醇胶囊含药血清和含药血浆中五味子醇甲、五
味子乙素进行比较，为下一步制定药理学实验方案
提供依据。
1实验材料
Agilent1100Series高效液相色谱仪(G1311A
QuaternaryPump，G1379ADegasser，G1313A
Autosampler，G1314AVariableWavelengthDe—
rector)，HPChemSation工作站(美国Agilent公
司)。AS20500A超声波清洗器(天津奥特赛恩斯仪
器有限公司)，Xw一80A微型旋涡混合仪(上海沪
西分析仪器厂)，100～1000_uL芬兰可调式移液器
(上海雷勃分析仪器有限公司)，LibrorAel一40SM
电子分析天平(日本岛津公司)。
甲醇(色谱纯，江苏汉邦科技有限公司)，乙腈
(色谱纯，美国TEDIA公司)，纯净水(杭州娃哈哈
集团有限公司)，硫酸铵(分析纯，上海浦口化学试剂
有限公司)。五味子醇甲(批号117 —040208)、五味
子乙素(批号1173—040110)对照品购自江西南昌中
药固体制剂制造技术国家工程研究中心，复方五仁
醇胶囊由南通市第三人民医院提供，批号050505。
SD大鼠，SPF级，体重(248．4土16．3)g，雌雄
各半。南通大学实验动物中心提供，许可证号SYKX
(苏)2002—0022。
万方数据
·1488· 中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第10期2006年10月
2方法与结果
2．1色谱条件：LichrosphereC18色谱柱(250mm×
4．6mm，5肛m)，PhenomenexDescriptionC18保护
柱(4．0mm×3．0mm)；水(A)一甲醇(B)梯度洗脱
(0～15min，40％～70％B；15～20min，7 ％B；
20025rain，70％～85％B；25～35min，8 ％～
90％B；35～45min，90％B)；体积流量：1．0mL／
min；柱温：30℃；检测波长：254nm。
2．2空白血清、空白血浆、含药血清及含药血浆的
制备：取SD大鼠18只，随机平均分成空白血清组、
空白血浆组、含药血清组和含药血浆组。所有大鼠禁
食12h(自由饮水)，含药血清组和含药血浆组每天
按照0．45mL／(100g)体重，分两次分别ig复方五
仁醇胶囊甲醇提取物的0．5％CMC—Na混悬液(给
药剂量相当于临床等效剂量的10倍)，连续3d，空
白组同法ig等体积0．5％CMC—Na溶液。末次给药
后1h用3％戊巴比妥钠0．15mL／(100g)ip麻醉，
颈总动脉取血，血浆组立即3000r／min离心10
rain分离血浆，即为空白血浆、含药血浆；血清组血
液置冰箱4℃冷藏过夜，分离血清，即分别为空白血
清、含药血清。
2．3 供试品溶液的制备：分别取空白血清、空白血
浆、含药血清和含药血浆各1mL，置离心管中，加入
硫酸铵0．36g，置微型旋涡混合仪快速混匀，分次加
甲醇(每次1mL，总计5mL)，同法充分混匀，
16000r／min离心10min，上清液置80℃水浴锅上
蒸干，用微量移液器精密加入甲醇0．5mL，并使残
渣充分溶解，16000r／min离心10min，上清液即为
空白血清、空白血浆、含药血清和含药血浆供试品溶
液，进样前0．45“m微孔滤膜滤过。
2．4线性关系考察：分别精密称取五味子醇甲、五
味子乙素对照品2．56、1．99mg，置10mL量瓶中，
加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品储备
液。取空白血清7份，每份】mL，分别加入稀释10
倍后的对照品储备液0．1、0．2、0．4、0．6、0．8、1．0、
1．2mL，按2．3项下方法处理(相应扣除加入甲醇
的体积)，配制成含五味子醇甲、五味子乙素分别为
、
5．12和3．98、10．24和7．96、20．48和15．92、30．72
和23．88、40．96和31．84、51．20和39．80、61．44和
47．76pg／mI。的系列混合对照品加血清溶液。同法
配制含五味子醇甲、五味子乙素30．72、23．88
_“g／mL的混合对照品加血浆溶液。分别取系列混合
对照品加血清溶液10肛L进样，测定其峰面积值。以
峰面积值对进样量求得直线回归方程。五味子醇甲：
Y=1210．18X+7．39，r一0．9993，线性范围为
0．0512～0．6144弘g；五味子乙素：Y一752．60X+
14．83，r=0．9997，线性范围为0．0398～
0．4776弘g。
2．5方法的专属性考察：分别吸取空白血清、空白
血浆、含药血清和含药血浆供试液20弘L，及含五味
子醇甲、五味子乙素0．03072、0．02388mg／mL的
混合对照品加血清、加血浆溶液各10弘L，注入高效
液相色谱仪，记录色谱图并进行比较。结果显示，可
知内源性物质不干扰测定，在选定的色谱条件下，五
味子醇甲和五味子乙素分离度良好，保留时间分别
为21．1min和34．8min。见图1。
0 5 10 15 20 25 30 35 40
||min
a一空自血消b一空白血浆c一空臼血河+对照品
d一空白血浆+对照品e一含药血清f一含药血浆
1一五味子醇甲 2-五味子乙索
a—controlserumb-controlplasmac—controlserum+
referencesubstanced-controlplasma+reference
substancee—serumcontainingdruf-plasma
containingdrug1-schisandrin2-schisandrinB
图1高效液相色谱图比较
Fig．1ComparisonofHPLCchromatograms
2．6精密度试验：取空白血清3份，按2．4项下系
列混合对照品加血清溶液制备方法制备低、中、高3
个水平的对照品溶液(含五味子醇甲、五味子乙素分
别为lO．24和7．96、30．72和23．88、51．20和
39．80pg／mL，分别进样10弘I。测定峰面积，结果五
味子醇甲3个质量浓度的日内RSD分别为
0．39o／6、0．17％、0．21％(”一5)，日间RSD分别为
0．41％、0．76％、0．63％(门一5)，五味子乙素3个浓
度的日内、日间RSD分别为3．59％、0．66％、
0．67％(胛一5)和3．53％、1．79％、0．48％(行=5)。
2．7回收率试验
2．7．1相对回收率试验：将2．6项下测得的低、中、
高3个水平的对照品溶液峰面积代入当日回归方
程，计算五味子醇甲、五味子乙素，与相应实际量比
较，得低、中、高3个水平五味子醇甲、五味子乙素的
平均相对回收率分别为96．72％、101．06％、
102．05％和99．03％、100．18％、100．28％。
2．7．2 绝对回收率试验：精密量取对照品储备液
0．5mL置5mL量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻
万方数据
中草药ChineseTraditionata丽ndHerbalDrugs第37卷第10期2006年10月·1489·
度，摇匀，分别量取0．2、0．6、1．0mL，蒸干，分别精
密量取甲醇0．5mL充分溶解，配制成低、中、高3
个水平的对照品溶液(含五味子醇甲、五味子乙素分
别为10．24和7．96、30．72和23．88、51．20和
39．80,ug／mL)，分别进样10p．L，测定峰面积并计算
平均值，作为对照组，同时用2．6项下制备的低、中、
高3个水平的对照品溶液分别进样10肛L，测定峰
面积，每个水平重复5次，作为样品组，将样品组峰
面积与对照组峰面积比较，得低、中、高3个水平五
味子醇甲、五味子乙素的绝对回收率分别为
68．11％、68．34％、68．25％和58．01％、55．51％、
54．68％。
2．8样品测定：取含药血清、含药血浆各5份，制备
含药血清、含药血浆供试品溶液，20扯L注入液相色，
谱仪，测定峰面积，计算五味子醇甲、五味子乙素的
质量浓度，结果见表1。
表1 血清和血浆中五味子醇甲和五味子乙素的测定(n一2)
Table1 DeterminationofschisandrinandschisandrinBinserumandplasma(n一2)
样 五味子醇甲 五味子乙索 样 五味子醇甲 五味子乙素
品 质量浓度／(pg·mL一1)RSD／％ 质量浓度／(pg·mL一1)RSD／g品 质量浓度／(pg·mL一1)RSD／g质量浓度／(pg·ml。一1)RsI)／％
1 11．9986 6．9745 1 12．3275 11．99l4
2 1I．6821 8．9795 2 12．2389 13．7208
3 10．0977 6．98 8．1282 14．383 13．2683 4．49 12．8538 11．2l
4 10．8740 7．1635 4 13．0346 l3．9187
5 10．6635 6．2088 5 13．549 10．4694
3讨论
本实验结果表明，复方五仁醇胶囊主要入血成
分五味子醇甲、五味子乙素在血浆中的量均高于血
清，尤其是极性较小的五味子乙素在血浆中的量是
血清的1．68倍，这可能是由于在凝血形成过程中，
纤维蛋白及其网罗的血细胞可能吸附或结合一些中
药成分，特别是极性较小成分的缘故，所以采用含药
血浆进行该制剂药效研究似乎比含药血清更好；而
且理论上讲，血浆药理学也不违背“中药虽成分众
多，但只有那些被消化吸收进入血液的成分或其代
谢产物才有产生药效的可能”的观点。因此从药效成
分量的角度看，推测用含药血浆研究中药药理学可
能更为合理。
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金银花的HPLC药效指纹图谱研究
梁生旺1，崔永霞2，王淑美2，吴明侠2‘
(1．广东药学院中药学院，广东广州 510024；2．河南中医学院，河南郑州450008)
摘 要：目的 找出金银花中与抗炎活性成正相关的化学成分，并以此建立金银花的药效指纹图谱。方法采用
HPLC法分析，获得金银花不同提取部位的指纹图谱，同时选择小鼠耳肿胀抗炎实验测定不同提取部位的药理活
性，以线性回归解释化学信息和药理活性的相关关系。结果 以甲醇提取部位的药理活性最强，故以此部位的
HPLC图谱来制定金银花的“药效谱”。结论采用该方法制定得到的金银花的药效指纹图谱更为科学、合理。
关键词：金银花；抗炎；药效指纹图谱；高效液相色谱
中图分类号：R286．02 文献标识码：B 文章编号：0253—2670(2006)10—1489—05
收稿日期：2005一12一06
作者简介：梁生旺，男，教授，从事中药质量控制研究。
Tel：(020)39352172 E—mail：swlian9371@163．corn
万方数据
大鼠灌胃复方五仁醇胶囊后血清和血浆中五味子醇甲和五味
子乙素的比较
作者： 罗琳， 窦志华， 丁安伟， 王陆军， 张兵， 施忠， LUO Lin， DOU Zhi-hua， DING An-
wei， WANG Lu-jun， ZHANG Bing， SHI Zhong
作者单位： 罗琳,LUO Lin(南通大学,江苏,南通,226006)， 窦志华,丁安伟,DOU Zhi-hua,DING An-
wei(南京中医药大学,江苏,南京,210029)， 王陆军,张兵,施忠,WANG Lu-jun,ZHANG
Bing,SHI Zhong(南通市第三人民医院,江苏,南通,226006)
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2006,37(10)
被引用次数： 9次
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