全 文 ：分别精密吸取 015、1、2、3、4、6 mL 置 10 mL 量瓶
中 ,加甲醇稀释至刻度 ,摇匀 ,得质量浓度分别为
4194、9188、19176、29124、39152、59128 μg/ mL 的
对照品溶液。分别进样 10μL ,按上述色谱条件 ,测
定丁香酸葡萄糖苷峰面积积分值 ,结果表明 ,在
4194～59128μg/ mL 丁香酸葡萄糖苷的质量浓度
与峰面积积分值呈良好的线性关系 ,回归方程为
Y = 19 518 X - 42 355 , r = 01999 7。
215 　稳定性试验 :照上述色谱条件 ,每隔 2 h 时进
样一次 ,进样 10μL ,记录峰面积 ,结果表明 ,供试品
溶液在 8 h 内基本稳定 ,峰面积 RSD 为 0112 %。
216 　精密度试验 :按 212 方法制备对照品溶液 ,重
复进样测定 5 次 ,记录峰面积 ,结果表明峰面积
RSD 为 1105 %。
217 　重现性试验 :取同一批样品 (批号 :1) ,按 213
方法平行制备 5 份供试液 ,进样 10μL ,分别进行定
量测定 ,5 份供试液质量分数 RSD 为 1164 %。
218 　加样回收率试验 :精密取已测定的同一批样品
2 g ,共 6 份 (批号 :1 ,质量分数 38191μg/ g) ,分别
精密加入丁香酸葡萄糖苷对照品溶液 (9818 μg/
mL) 1 mL ,按 213 方法制备供试品溶液 ,进样 10
μL ,测定 ,计算回收率。结果丁香酸葡萄糖苷的平
均回收率为 100107 % ,RSD 为 1174 %。
219 　样品测定 :按 213 方法制备供试品溶液 ,取供
试品溶液和对照品溶液 ,分别进样 ,测定 4 批药材样
品中丁香酸葡萄糖苷的量 ,测定结果见表 1。
表 1 　样品中丁香酸葡萄糖苷测定结果
Table 1 　Determination of glucosyringic acid in samples
批号 丁香酸葡萄糖苷/ (μg ·g - 1 ) 批号 丁香酸葡萄糖苷/ (μg ·g - 1 )
1 38191 2 33141
3 29194 4 22173
3 　讨论
311 　测定成分的选择 :化学成分系统提取分离结果
表明 ,短柱肖菝葜中含有许多酚苷类成分 ,其中丁香
酸葡萄糖苷的得量相对比较大 ,且单体化合物体外
抗肿瘤细胞筛选结果表明 ,包括丁香酸葡萄糖苷在
内的酚苷类化合物对人白血病细胞 ( U2937) 有一
定的抑制作用 ,因此选择丁香酸葡萄糖苷作为指标
性成分 ,采用 RP2H PL C 法对其进行了定量分析。
312 　检测波长的选择 :精密称取丁香酸葡萄糖苷对
照品 3 mg ,置 25 mL 量瓶中 ,加甲醇适量 ,超声使
溶解 ,加甲醇至刻度 ,摇匀 ;精密吸取 1 mL 置 10
mL 量瓶中 ,加甲醇稀释至刻度 ,摇匀 ,以甲醇为空
白 ,照紫外2可见分光光度法 (《中国药典》2005 年版
一部附录 V A) ,在 200～400 nm 波长进行光谱扫
描 ,根据扫描结果确定本品测定波长为 255 nm。
参考文献 :
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[2 ] 　Chen C T , Chang S M1 Studies in nature product s (7) . A
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HPLC 法测定苦木药材中铁屎米酮生物碱
吕武清 ,黄卫东 ,宋友昕 3
(江西省中医药研究院 , 江西 南昌 　330077)
摘 　要 :目的 　建立苦木药材中 42甲氧基252羟基2铁屎米酮、4 ,52二甲氧基2铁屎米酮 HPLC 测定方法 ,为苦木质量
分析和评价提供依据。方法 　用 Agilent Hypersil C18色谱柱 ,以乙腈2011 % 磷酸 (35 ∶65) 为流动相 ,210 nm 为
检测波长。结果 　42甲氧基252羟基2铁屎米酮、4 , 52二甲氧基2铁屎米酮与其他生物碱获得较好分离 ,42甲氧基252羟
基2铁屎米酮质量浓度在 1516～156μg/ mL 与峰面积呈良好的线性关系 ( r = 01999 7) ,加样回收率为 98117 % ,
RSD = 11 98 % ;4 , 52二甲氧基2铁屎米酮在 3145～5512μg/ mL 与峰面积呈良好的线性关系 ( r = 01999 8) ,加样回
收率为 98140 % ,RSD = 1190 %。结论 　方法简便、稳定、可靠 ,为控制和评价苦木质量提供了科学依据。
关键词 :苦木 ; HPLC ; 铁屎米酮生物碱 ; 42甲氧基252羟基2铁屎米酮 ; 4 , 52二甲氧基2铁屎米酮
中图分类号 :R28216 　　　文献标识码 :A 　　　文章编号 :025322670 (2009) 0821321203
·1231·中草药　Chinese Traditional and Herbal Drugs 　第 40 卷第 8 期 2009 年 8 月
3 收稿日期 :2008211207　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
基金项目 :国家“十一五”支撑计划项目 (2006BAI06A01201)
作者简介 :吕武清 (1957 —) ,男 ,硕士研究生导师 ,研究员 ,从事中药质量控制技术研究及新药开发。
Tel : (0791) 8512906 　E2mail : jxzyyjs @163. com
　　苦木为苦木科植物苦木 Picrasm a quassioi des
(D. Don) Benn. 的干燥枝及叶。收载于《中国药
典》2005 年版一部。性寒 ,味苦。具有清热 ,祛湿 ,
解毒之功效 ;用于治疗风热感冒 ,咽喉肿痛 ,腹泻下
痢 ,湿疖 ,毒蛇咬伤等症。药材质量标准尚无定量测
定项 ,目前亦未见苦木药材生物碱定量测定研究报
道 ;苦木主要含生物碱、苦味素、苦木内酯等[1 ,2 ] ,为
了有效控制苦木药材质量 ,比较不同药用部位的差
别 ,从药材中分离得到 4 , 52二甲氧基2铁屎米酮 ,42
甲氧基252羟基2铁屎米酮 ,经结构鉴定并进行纯度检
查和质量分数标定 , 以其为对照对苦木药材用
H PL C 法进行定量测定研究。
1 　仪器与试药
　　H P —1100 高效液相色谱仪 (美国 , 包括
1322A 在线脱气机、G1311A 四元梯度泵、G1315B
二极管阵列检测器、HP 化学工作站) ;A G135 十万
分之一电子天平 (梅特勒2托利多仪器上海有限公
司) ,CQ —250 超声波清洗器 (上海船舶电子设备研
究所 ,功率 250 W ,频率 33 k Hz) ,SimplicityTM型超
纯水系统 (Millipore 公司) 。
4 , 52二甲氧基2铁屎米酮 (自制 , HPL C 检测质
量分数 :99118 % ,归一化法) ,42甲氧基252羟基2铁屎
米酮 (自制 , H PL C 检测质量分数 :99113 % ,归一化
法) ,苦木药材采收于江西遂川县堆前镇 ,广东翁源
六里镇、广东英德下太镇 ,经江西中医学院范崔生教
授鉴定为苦木科植物苦木 Picrasm a quassioi des
(D. Don) Benn. 的干燥枝及叶 ,乙腈为色谱纯 ,其
他试剂为分析纯。
2 　方法与结果
211 　色谱条件的选择 :采用 Agilent Hypersill C18
色谱柱 (250 mm ×4. 0 mm , 5μm) ,流动相 :乙腈2
011 % 磷酸 (35 ∶65) ,体积流量 :1 mL/ min ,检测波
长 210 nm ,柱温 :室温 ,对照品及样品 H PL C 图见
图 1。
212 　对照品溶液的制备 :精密称取 42甲氧基252羟
基2铁屎米酮 1516 mg ,置 100 mL 量瓶中 ,加甲醇稀
释至刻度 ,摇匀 ,即得 (156μg/ mL) ;精密称取 4 , 52
二甲氧基2铁屎米酮 1318 mg ,置 100 mL 量瓶中 ,加
甲醇稀释至刻度 ,摇匀 ,取 25 mL 置 50 mL 量瓶
中 ,加甲醇稀释至刻度 ,摇匀 ,即得 (69μg/ mL) 。
分别取 42甲氧基252羟基2铁屎米酮、4 , 52二甲
氧基2铁屎米酮对照品溶液适量 ,混合均匀 ,作为混
合对照品溶液。
213 　供试品溶液的制备 :取苦木药材粗粉约 110
1242甲氧基252羟基2铁屎米酮　224 ,52二甲氧基2铁屎米酮
1242met hoxy252hydroxycant hin262one
224 ,52dimet hoxy2cant hin262one
图 1 　对照品( A)和苦木药材样品( B)色谱图
Fig. 1 　Chromatograms of reference substances ( A)
and Ramulus et Folium Picrasmae ( B)
g ,精密称定 ,置 100 mL 平底烧瓶中 ,精密加入甲醇
50 mL ,称定质量 ,回流提取 115 h ,放冷 ,加甲醇补
足减失的质量。滤过 ,取续滤液适量通过微孔滤膜
(0145μm) ,即得。
214 　线性范围的考察 :精密吸取上述 42甲氧基252
羟基2铁屎米酮对照品溶液 10、8、6、4、2、1 mL ,分置
10 mL 量瓶中 ,加甲醇至刻度 ,制成 156、12418、
9316、6214、3112、1516μg/ mL 的溶液 ;再精密吸取
4 , 52二甲氧基2铁屎米酮对照品溶液 8、6、4、2、1、
015 mL ,分置 10 mL 量瓶中 ,加甲醇至刻度 ,制成
5512、4114、2716、1318、619、3145 μg/ mL 的溶液。
分别吸取上述对照品溶液各 10μL ,注入液相色谱
仪测定峰面积 ,将浓度与峰面积进行回归处理 ,42甲
氧基252羟基2铁屎米酮回归方程为 : Y = 76 . 48 C -
58 . 27 , r = 0 . 999 7 ,样品在 1516～156μg/ mL 与峰
面积呈良好的线性关系 ;4 , 52二甲氧基2铁屎米酮回
归方程为 : Y = 88165 C - 48101 , r = 0 . 999 8 ,样品在
3145～5512μg/ mL 与峰面积呈良好的线性关系。
215 　精密度试验 :精密吸取对照品溶液 10μL ,按
上述色谱条件 ,重复进样 6 次 ,测定 42甲氧基252羟
基2铁屎米酮、4 , 52二甲氧基2铁屎米酮峰面积值 ,计
算峰面积值的 RSD 分别为 0152 %、0177 %。
216 　稳定性试验 :精密吸取供试品溶液 10μL ,按
上述色谱条件 ,每隔 1 h 进样测定峰面积 ,计算供试
品中 42甲氧基252羟基2铁屎米酮、4 , 52二甲氧基2铁
屎米酮峰面积值的 RSD 分别为 0163 %、0172 %。
表明供试品溶液在 8 h 内稳定。
217 　重现性试验 :取苦木药材粗粉约 110 g ,共 6
份 ,精密称定 ,照 213 项下实验方法制成供试品溶
液 ,按上述色谱条件进行测定 ,结果 42甲氧基252羟
基2铁屎米酮、4 ,52二甲氧基2铁屎米酮质量分数的
RSD 分别为 0186 %、1115 %。
218 　加样回收率试验 :取苦木药材粗粉约 015 g ,
共 6 份 ,精密称定 ,置 100 mL 平底烧瓶中 ,各精密
·2231· 中草药　Chinese Traditional and Herbal Drugs 　第 40 卷第 8 期 2009 年 8 月
加入含 42甲氧基252羟基2铁屎米酮 (2618μg/ mL) 、4 ,
52二甲氧基2铁屎米酮 (415μg/ mL) 的混合溶液 50
mL ,按 213 项下方法制成供试品溶液 ,测定质量分数
并计算回收率 ,结果 42甲氧基252羟基2铁屎米酮平均
回收率 98117 % ,RSD 为 1198 %;4 , 52二甲氧基2铁屎
米酮平均回收率为 98140 % ,RSD 为 1190 %。
219 　样品测定 :精密称取 42甲氧基252羟基2铁屎米
酮和 4 , 52二甲氧基2铁屎米酮对照品适量 ,加甲醇
制成 50 和 15μg/ mL 的混合对照品溶液。取不同
产地、不同药用部位苦木药材粗粉 ,制备供试品溶
液 ,依法测定 ,以外标法计算质量分数 ,结果见表 1。
表 1 　苦木药材不同部位、不同产地、不同采收季节
测定结果 ( n = 2)
Table 1 　Determination of Ramulus et Folium Picrasmae 　
in different fractions , habitats , and seasons ( n = 2)
产地 部位
采收
时间
42甲氧基252羟基2铁屎
米酮/ (mg ·g - 1 )
4 , 52二甲氧基2铁屎
米酮/ (mg ·g - 1 )
江西遂川 茎 　 2006211204 41066 0 11536 7
江西遂川 粗枝 2006211204 21709 9 01430 1
江西遂川 细枝 2006211204 01152 2 0
江西遂川 叶 　 2006211204 01101 4 0
江西遂川 茎 　 2006209 11058 6 01847 1
江西遂川 粗枝 2006209 01217 8 01062 8
江西遂川 细枝 2006209 01165 9 01091 9
江西遂川 叶 　 2006209 01562 8 0
广东英德 细枝 2007211222 01099 2 0
广东英德 粗枝 2006208214 21926 2 01688 9
广东英德 茎 　 2007211222 21293 2 01728 6
广东英德 粗枝 2006208214 21250 7 01313 3
3 　讨论
311 　分别比较了 50 % 甲醇、甲醇、乙醇、醋酸乙酯
及其用量对提取结果的影响 ,结果以甲醇提取效果
最好 ;甲醇用量以 50 mL 甲醇亦基本提取完全 ,对
超声提取、回流提取、索氏提取方法进行了比较 ,回
流提取效果最佳 ;分别考察了提取 1、115、2、215 h ,
研究结果表明 ,回流提取 115 h 提取完全。
312 　42甲氧基252羟基2铁屎米酮和 4 , 52二甲氧基2
铁屎米酮未见定量测定研究报道 ,经紫外测定其最
大吸收波长均为 210 nm 末端吸收 ,参考文献[ 3～5 ]分
别采用乙腈2012 % 氨水溶液 (22 ∶78) 、甲醇20101
mol/ L 乙酸铵水溶液 (80 ∶20) 、甲醇20105 mol/ L
KH2 PO4 (加入 015 % 的三乙胺用 H3 PO4 调 p H3)
(30 ∶70) 为流动相进行分离 ,结果生物碱分离效果
不佳 ,以乙腈2011 % 磷酸 (35 ∶65) 为流动相进行
分离 ,以上二化合物与其他峰基线达到完全分离。
313 　测定结果显示 ,苦木药材中主要含 42甲氧基2
52羟基2铁屎米酮 ,4 , 52二甲氧基2铁屎米酮的量较
低 ;不同部位、不同产地、不同采收季节测定结果表
明 ,42甲氧基252羟基2铁屎米酮在茎中的量较高 ,其
次为粗枝 ,细枝和叶的量较低 ,苦木注射液使用茎作
为原料为掠夺式使用资源 ,既破坏了生态环境 ,又不
利于可持续发展 ,因此 ,需从化学、药理作用等多方
面进行深入研究 ,合理利用资源。
参考文献 :
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氧化苦参碱的含量 [J ]1 中国实验方剂学杂志 , 2006 , 12
(2) : 231
关于召开“第 5 届华人药师临床药学专题研讨会”征文的通知
《中国新药与临床杂志》社主办、上海市药学会协办的“第 5 届华人药师临床药学专题研讨会”拟定于 2009 年 11
月下旬在上海市召开。届时将邀请国内各省市和我国台湾、香港地区及欧美、新加坡等地的医学家、药学家参加此次
大会 ,并进行精彩的学术报告和学术交流。热烈欢迎所有相关领域的专家学者和同道踊跃投稿并参加会议 ,现将征
文相关事项通知如下 :
1 　会议主题 :抗肿瘤药物临床药学监护实践。
2 　征文内容 : (1) 抗肿瘤药物静脉注射液配制要求与管理 ; (2) 抗肿瘤药物品种配制的配伍及稳定性 ; (3) 抗肿瘤治疗
方案的解读 ; (4) 各种新问世抗肿瘤药物的介绍 ; (5) 抗肿瘤药物治疗的新思维与进展 ; (6) 药师在姑息疗法中的作用
与地位 ; (7) 抗肿瘤药物临床药学监护实践。
3 　论文要求 :未在国内外公开刊物上发表的论文。论文要有创新性 ,引证资料可靠。字数一般在 5 000 字以内 ,并
附 400 字以内的摘要。请务必附通讯地址、联系电话、手机、E2mail ,以便及时联系。论文入选后 ,将统一编印论
文集。
4 　论文截止日期 :2009 年 9 月 15 日。
5 　投稿方式 :本次大会只接收网上投稿收集论文 , E2mail : xyylcb tougao @126. com ,来稿请注明“CCPF 会议投稿”。
6 　联系方式 :《中国新药与临床杂志》编辑部 , Tel : (021) 61673763 (办) , E2mail : xyylc ldl @126. com
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