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野生与人工栽培岩黄连药材的比较



全 文 :·770· 中草菊 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第39卷第5期2008年5月
野生与人工栽培岩黄连药材的比较
黄玮,陆兔林。,王巧晗,毛春芹
(南京中医药大学,江苏南京210046)
摘要:目的研究野生与人工栽培岩黄连中总生物碱及脱氢卡维丁量的差异。方法 采用紫外分光光度法对药
材中总生物碱进行定量测定,用高效液相色谱法测定岩黄连药材中脱氢卡维丁的量,并对测定方法进行了系统的
方法学考察。结果人工栽培的岩黄连药材中总生物碱的量达到3.20%以上,脱氢卡维丁的量在0.80%以上。野生
的岩黄连药材中总生物碱的量在0.75%左右,脱氢卡维丁的量均在0.20%左右。结论野生岩黄连药材中总生物
碱及脱氢卡维丁的量比人工栽培的要低。
关键词:岩黄连;生物碱;脱氢卡维丁
中图分类号:R282.21 文献标识码:A 文章编号:0253—2670(2008)05—0770-03
岩黄连系罂粟科紫堇属植物石生黄堇Corydalis
saxicolaBunting的全草及肥大的根茎部。因其功效
近似黄连且生长于石缝中或岩石旁而得名,又叫岩
连(四川、云南),菊花黄连、鸡爪连、土黄连(广西),
岩胡(贵州)[1]。岩黄连味苦,性凉,功能清热利湿、散
瘀消肿,临床上可用于治疗急性黄疸型肝炎、肝硬
化、肝癌、疮疖肿毒、急性肠胃炎等。
岩黄连全草主要含有脱氢斯氏紫堇碱(tetra—
dehydroScoulerine)、脱氢阿卟卡维丁(dehydr—
oapocavidine)、脱氢异阿卟卡维丁(dehydro—
isoapocavidine)、黄连碱(coptisine)、脱氢卡维丁
(dehydrocavidine)等生物碱类化合物[21,其中以脱氢
卡维丁量最高。本实验通过比较野生与人工栽培岩黄
连药材中总生物碱和脱氢卡维丁的量,来反映岩黄连
内在质量,为岩黄连质量控制提供依据。
1仪器与试剂
752型紫外一可见分光光度计(上海光谱仪器有
限公司);Agilentll00高效液相色谱仪(美国安捷伦
公司);FAll04型电子分析天平(上海精密科学仪
器有限公司)。
脱氢卡维丁对照品(批号111667—200401)由中
国药品生物制品检定所提供,供定量测定用。乙腈为
色谱纯;水为重蒸水(自制);其他试剂均为分析纯。
人工栽培岩黄连药材购自广西东兰县农业局(批号
20070302、20070305、20070309)。野生岩黄连于广西
采摘。经本校鉴定教研室鉴定为罂粟科植物石生黄
堇CorydalissaxicolaBunting的全草。
2方法与结果
2.1 紫外可见分光光度法测定岩黄连总生物碱的量
2.1.1对照品溶液的制备:精密称取脱氢卡维丁对
照品适量,用1%盐酸甲醇溶液配成970/zg/mL的对
照品贮备液。
2.1.2供试品溶液的制备[3]:精密称取过20目筛
的岩黄连药材粉末0.2g,置具塞锥形瓶中,精密加
入25mL1%盐酸甲醇溶液,称定质量,超声1h,冷
却后补足减失的质量,摇匀,滤过,取续滤液作为供
试品溶液。
2.1.3测定波长的选择:以1%盐酸甲醇溶液为对
照,将对照品溶液、供试品溶液和空白对照液在
00~800nm波长内进行扫描。结果显示对照品溶
液和供试品溶液在347nm处均有最大吸收,适合定
量测定,故选择347nm作为定量测定的波长。
2.1.4标准曲线的绘制:精密量取对照品贮备液
(970tzg/mL),以1%盐酸甲醇溶液为溶剂,分别配制
成为3.88、4.85、5.82、6.79、7.76、9.7/卫g/mL的溶
液,以1%盐酸甲醇溶液为空白,在347nm波长处测
定吸光度(4),以A为纵坐标,对照品质量浓度(C)为
横坐标,绘制标准曲线。回归方程:A=0.0724C+
.0069,,.=0.9999(刀=6),结果表明岩黄连总碱在
3.889.7#g/mL呈良好的线性关系。、
2.1.5精密度试验:取9.7/-g/mL对照品溶液于
347nm处测定A值,重复测定6次,结果RSD为
0.85%(以=6)。
2.1.6稳定性试验:取同一供试品溶液依次于0、1、
2、3、4h测定4值,结果表明供试品溶液在4h内稳
定,RSD为0.53%(,l=5)。
收稿日期:2007—09—10
作者简介:黄玮(1984一),女,江苏常州人,南京中医药大学2006级硕士研究生,主要研究方向为中药质量控制及新药开发研制。
E—mail:huangwei312@126.com
*通讯作者陆兔林Tel;(025)85811513E—mail:lutulin92005@126.com

万方数据
中草菊ChineseTraditionalandHerbalDrugs第39卷第5期2008年5月·771·
2.1.7重现性试验:精密称取同一批岩黄连药材粉
末(批号20070309)0.2g,共6份,按“供试品溶液的
制备”项下制备供试品溶液,测定A值,计算岩黄连总
碱的平均质量分数为3.O%,RSD为1.6%(行=6)。
2.1.8 回收率试验:精密称取已知总碱量的药材(批
号20070309)0.1g,共9份,置25mL量瓶中,分别加
入对照品贮备液(970弘g/mL)2.5、3.0、3.5mL,各3
份,按“供试品溶液制备”项下制备样品,测定以值。结
果平均回收率为98.8%,RSD为1.1%(行一9)。
2.2 HPLC法测定岩黄连中脱氢卡维丁的量
2.2.1色谱条件H]:色谱柱为KromasilC18柱(250
mm×4.6mm,5卢m);流动相:乙腈一0.01mol/L磷
酸二氢钾(pH----5)(25:75);波长:347am;进样量:
10pL;柱温:30℃;体积流量:1mL/min;理论板数
按脱氢卡维丁计算应不低于3000。
2.2.2对照品溶液的制备:精密称取脱氢卡维丁对
照品适量,用1%盐酸甲醇溶液配成970pg/mL的对
照品贮备液。
2.2.3供试品溶液的制备:将岩黄连药材粉碎,过
20目筛,精密称取0.2g药材粉末,置50mL量瓶
中,加1%盐酸甲醇溶液约40mL,超声40min,冷却
后定容,摇匀,取过微孔滤膜(O.45肛m)的续滤液作
为供试品溶液。
2.2.4标准曲线的绘制:精密量取对照品溶液(970
pg/mL),用1%盐酸甲醇溶液为溶剂,分别配制成为
19.4、38.8、77.6、97.0、116.4pg/mL的溶液,分别
吸取上述对照品溶液10pL注入高效液相色谱仪,进
行分析测定。以峰面积为纵坐标,对照品质量浓度
(Pg/mL)为横坐标做标准曲线,求得回归方程Y一
45414X一52.178,r一0.9996(挖一5),表明脱氢卡
维丁在0.194~1.164pg呈良好的线性关系。
2.2.5精密度试验:精密吸取97.0pg/mL对照品
溶液,按上述色谱条件,连续进样6次,每次10pL,
测定脱氢卡维丁的峰面积,计算其峰面积的RSD为
0.25%(,l一6)。
2.2.6稳定性试验:取同一供试品溶液分别在0、1、
2、4、8、12h进样测定,计算得脱氢卡维丁峰面积的
RSD为0.30%,结果表明供试品溶液在12h内稳定
性好(恕=6)。
2.2.7重现性试验:精密称取同一批岩黄连药材粉
末(批号20070309)6份,按“供试品溶液的制备”项
下制备供试品溶液,并按上述色谱条件测定,测得脱
氢卡维丁平均质量分数为0.83%,RSD为1.23%
(,l=6)。
2.2.8加样回收率试验:精密称取岩黄连药材粉末
(批号20070309)0.1g,共9份,置50mL量瓶中,分
别加入脱氢卡准丁0.582、0.776、0.970mg,按“供
试品溶液的制备”项下制备样品,测定质量分数,结
果平均回收率为98.80%,RSD为1.35%(扎=9)。
2.3样品测定
2.3.1岩黄连药材总生物碱测定:分别取3个批号
人工栽培和野生岩黄连药材各0.2g,按2.1.2项下
制成供试品溶液,测定A值,计算岩黄连总生物碱的
质量分数,结果见表1。
2.3.2岩黄连药材脱氢卡维丁测定:分别取3个批
号人工栽培和野生岩黄连药材各0.2g,按2.2.3项
下制成供试品溶液,精密吸取10弘L注入色谱仪,记
录色谱图。计算脱氢卡维丁的质量分数,结果见表1。
色谱图见图1。
表1岩黄连总生物碱和脱氢卡维丁测定结果(开=3)
Table1 Determinationoftotalkaloidsan
dehydrocavidineinC.saxicola(n-----3)
r—丁—而—-Tn扩—丁—可rln
timin
-一脱氢卡维丁
*一dehydrocaVidine
圈1脱氢卡维丁对照品(A)和岩黄连(B)的HPLC图
Fig.1HPLCChromatogramsofdehydrocavidine
referencesubstance(A)andC.saxicola(B)
3讨论
试验结果表明,野生与人工栽培岩黄连药材中
总生物碱及脱氢卡维丁的量存在明显差异,野生的
量低,人工栽培的量高。可见,不同的生长环境对岩
黄连药材中总生物碱及脱氢卡维丁的量影响很大,
导致这种差异的原因可能与植物的生长环境、温度、
湿度等多种因素有关。提示应选择最适宜生长条件
的地域建立岩黄连药材GAP的生长基地,控制药材
质量的稳定性,生产出高质量的中药材,实现中药材
资源的可持续利用。

万方数据
·772· 中草菊 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第39卷第5期2008年5月
参考文献: [3]
113江苏新医学院.中药大辞典(下册)[M].上海:上海科学技
术出版社,2001.
1-23柯珉珉,张宪德。吴练中,等.岩黄连有效成分的研究口]. [4]
植物学报,1982,24(3):289.
黄小平,张毅,钟国跃.不同产地和生长年限黄连的总生
物碱含量测定[J].现代中药研究与实践,2004.18(1):42—
43.
李慧粱.岩黄连活性成分系统研究及藜芦毒性成分研究
[D].上海;第二军医大学,2006:110—114.
不同产地龙葵药材中澳洲茄碱量的分析研究
袁海建h2,贾晓斌¨,陈彦¨,刘中秋3,邵振中1
(1.江苏省中医药研究院江苏省现代中药制剂工程技术研究中心,江苏南京210028,2.江苏大学药学院,
江苏镇江212013,3.南方医科大学药学院,广东广州510515)
摘 要:目的测定龙葵中澳洲茄碱的量以评价不同产地龙葵药材质量。方法采用AgilentZorbaxSBC-s色谱柱
(150mm×4.6mm,5肚m),以乙腈一1%磷酸溶液为流动相梯度洗脱,体积流量1.0mL/min,柱温30℃,检测波长
205am。结果6个不同地区龙葵茎叶中澳洲茄碱的平均量在0.5445~1.5049mg/g;果实中澳洲茄碱的平均量
在0.8555~3.4408mg/g。连云港灌南地区龙葵茎叶和果实中澳洲茄碱的量最高,分别为1.5049、3.4408mg/g;
南京栖霞地区茎叶中量最低,为0.5445mg/g,南京江宁地区果实中量最低,为0.8555mg/g。结论同一时期、不
同产地龙葵药材茎叶和果实中澳洲茄碱量差异较大。
关键词:龙葵;澳洲茄碱;反相高效液相色谱法 .
中图分类号:R282.6 文献标识码:A 文章编号:0253—2670(2008)05—0772一03
龙葵SolanumigrumL.是茄科植物龙葵的干
燥地上部分,民间常用于抗炎、抗病毒。近来研究表
明,龙葵具有很好的抗肿瘤活性,其中的药理活性物
质是甾体生物碱类成分[1],主要包括澳洲茄碱
(solasonine)、澳洲茄边碱(solamargine)等,苷元为
澳洲茄胺。研究表明澳洲茄碱在体外抗肿瘤实验中
表现出很好的抗肿瘤活性[2]。
目前文献报道除了梁生旺等[33用薄层扫描法对
龙葵中澳洲茄胺做定量分析外,尚未见使用反相高
效液相色谱法对龙葵中甾体生物碱类成分进行定量
分析的研究报道。本研究建立了龙葵药材中澳洲茄
碱的反相高效液相色谱的分析方法,测定了不同产
地龙葵药材中澳洲茄碱的量,以期为龙葵药材的质
量控制提供科学依据。
1仪器与试药
1.1 仪器:Agilent1200高效液相色谱仪(美国
Agilent公司)包括柱温箱、在线脱气机、四元泵、二
极管阵列检测器及ChemStation色谱工作站;Buchi
旋转蒸发仪。
1.2 试药:澳洲茄碱对照品(郑州牧业工业高等专科
学校化学教研室提供,经高分辨质谱鉴定并用HPLC
法检测质量分数>98%);龙葵药材分别采自南京江
宁、南京栖霞、泰州泰兴、连云港灌南、徐州新沂、镇江
丹徒(采收时间在2007年10月16-20日),经南京中
医药大学吴德康教授鉴定为茄科茄属龙葵Solanum
n grumL.干燥地上部分,乙腈、磷酸(TEDIA公司,
色谱纯);纯净水;其他试剂均为分析纯。
2方法与结果
2.1色谱条件:AgilentZorbaxSBC18色谱柱(150
mm×4.6mm,5pm);流动相:乙腈(A)一1%磷酸溶
液(B),梯度洗脱条件为:0~5min,A:22%,B:
78%;5~20rain,A:22%~25%,B:78%~75%;
20~25rain,A:25%,B:75oA;体积流量:1.0mE/
min;进样量:20pL;检测波长:205nm:
2.2对照品溶液的制备:精密称取澳洲茄碱对照品
10.75mg,置10mL量瓶中,用10%醋酸溶解并稀
释至刻度,摇匀,制成1.075mg/mL对照品溶液。
2.3供试品溶液制备:取连云港灌南产龙葵药材粉
末1.0g(40目),精密称定,加入5%醋酸一甲醇溶液
50mL,称定质量,超声提取30min,再称定质量,用
提取液补足质量,摇匀,滤过,滤液置50mL量瓶中,
用提取液定容至刻度。从中精密量取25mL溶液减
收稿日期:2007—09,10
基金项目:江苏省中医药领军人才基金项目(2006);江苏省中医药局项目(H05021)
作者简介:袁海建(198l一),男,在读硕士生,研究方向为中药新剂型与新技术。E—mail:yuanjianSl01@163.eom
*通讯作者贾晓斌陈彦Tel/Fax:(025)85637809

万方数据
野生与人工栽培岩黄连药材的比较
作者: 黄玮, 陆兔林, 王巧晗, 毛春芹
作者单位: 南京中医药大学,江苏,南京210046
刊名: 中草药
英文刊名: CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年,卷(期): 2008,39(5)
被引用次数: 2次

参考文献(4条)
1.江苏新医学院 中药大辞典 2001
2.柯珉珉;张宪德;吴练中 岩黄连有效成分的研究 1982(03)
3.黄小平;张毅;钟国跃 不同产地和生长年限黄连的总生物碱含量测定[期刊论文]-现代中药研究与实践 2004(01)
4.李慧梁 岩黄连活性成分系统研究及藜芦毒性成分研究[学位论文] 2006

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3. 吴昭晖.罗佳波.游文玮.WU Zhao-hui.LUO Jia-bo.YOU Wen-wei 甘草药材HPLC指纹图谱研究[期刊论文]-中草药
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4. 杨进.李晓玲.李宁.何安涛.陈菽.YANG Jin.LI Xiao-ling.LI Ning.HE An-tao.CHEN Shu 栽培种金银花和野生
种金银花染色体核型的比较分析[期刊论文]-湖北农业科学2011,50(2)

引证文献(2条)
1.吴杲.陆兔林.毛春芹.王静 岩黄连生物碱提取工艺研究[期刊论文]-中国药师 2010(1)
2.毛春芹.谢辉.池玉梅.陆兔林.王静.胡芳.李争艳 高效液相色谱法测定岩黄连药材中3种生物碱[期刊论文]-中成
药 2011(8)


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