全 文 ：中草喃 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第39卷第9期2008年9月·1345·
合对照品溶液，制备供试品溶液，各水平平行操作3
份，在上述色谱条件下进样分析，计算回收率。结果
白术内酯I、I、I的平均回收率分别为97．92％、
103．15％、100．78％，RSD分别为0．67％、0．68％、
4．64％。
2．10样品测定：取各自术炮制品制备供试品溶液，
进行测定，进样量为10pL，以外标法计算白术内酯
I、I、I的质量分数，结果见表1。白术饮片经炮制
后各成分变化各异：加辅料炮制后白术内酯I、I呈
增长趋势，白术内酯I则减少；炮制后，内酯总量增
加明显。尤其是土炒白术最高，但炮制样品中自术的
变化规律有待进一步考察。
寰1白术不同炮制晶中自术内酯I、I、Ⅲ的测定结果
(捍一3)
Table1 Determinationof ractyIenolideI， I，andI
In置舡zomaAtractylodisMacrocephalae
bydifferentprocessings锄=3)
3讨论
本实验利用DAD检测器能同时采集多个波长
数据的便利条件，样品在同一色谱条件下进行一次
分析同时得到3个成分的图谱；出峰时间适中，峰形
对称，分离度符合要求；所用样品测定提取方法的方
法学考察符合要求，简化了白术测定的繁琐步骤，为
探索制订完善的白术原药材、炮制饮片的质量标准
提供了依据。
经过Agilent1100DAD三维图谱分析，白术内
酯I、I在220nm处有最大吸收，白术内酯I在
276nm处有最大吸收，为了能在一个条件下检测，
因此选择同时检测两个波长信号。
本实验曾试过乙腈一水、甲醇一水等不同的流动
相系统，发现甲醇一水系统可获得较好峰形和适合的
极性范围；为了能同时测定3个内酯成分，尝试了不
同的流动相比例，结果以本实验流动相梯度洗脱程
序，获得较好的分离，3个成分的分离度均大于1．5，
拖尾因子在0．95～1．05。
分别考察了甲醇、乙醇、醋酸乙酯、丙酮等不同
提取溶剂，超声、回流等不同提取方式，并进行了提
取时间为30min、1h、2h，提取次数为1、2次的考
察，结果表明，以甲醇超声30min一次即可提取完
全，与长时间的提取结果相差很小，因此确定该提取
方法。
参考文献：
E1]中国药典[s]．一部．2005．
[23EndoK，ToguchiT，ToguchiF，矗u1．Antiinflammatory
principleofAtractylodesrhizomE$[J]．CkmP；№mnBull，
1979，2712954．
[3]龚千锋．中药炮制学[M]．北京：中国中医药出版社．2004．
HPLC法测定抗骨增生软胶囊中淫羊藿苷
叶英响1，石森林2．，高敏2
(1．义乌市中心医院，浙江义乌32200012．浙江中医药大学药学院，浙江杭州310053)
抗骨增生软胶囊由淫羊藿、鹿衔草、鸡血藤、熟
地黄等中药组成，具有补肾、活血、止痛之功效，用于
肥大性脊椎炎、颈椎病、跟骨刺、增生性关节炎、大骨
节病。为了控制抗骨增生软胶囊内在质量，本实验对
方中主要活性成分淫羊藿苷进行了测定，结果方法
简便、准确，重现性好，可作为该制剂的测定方法。
1仪器与试药
Agilentll00液相色谱仪，浙江大学N2000色
谱工作站；SartoriusBP211D电子天平，JL一
180DTH超声波清洗器。
抗骨增生软胶囊和缺淫羊藿阴性样品(自制)；
淫羊藿苷对照品(批号110737—200111)购自中国药
品生物制品检定所。乙腈为色谱纯(FisherChemi—
cals)，水为重蒸馏水，其余试剂均为分析纯。
2方法与结果
2．1 检测波长的选择：对淫羊藿苷对照品溶液进行
紫外扫描(200一--400nm)，结果淫羊藿苷在270am
波长处有最大吸收，因此选择270nm作为检测
收稿日期：2008—01一II
作者简介：叶英响，男，主管中药师。
*通讯作者石森林Tel；(0571)86613524E—mail：pjstone@163．eom
万方数据
·1346· 中草菊ChineseTraditionalandHerbalDrugs第39卷第9期2008年9,El
波长。
2．2色谱条件：ZorbaxSBC18色谱柱(150mmX
4．6mm，5肛m)，流动相为乙腈一水一冰醋酸(24：
76：0．1)，体积流量为1．0mL／min，柱温为40℃，
检测波长为270nm，进样量为10pL。理论塔板数
按淫羊藿苷计算应不低于2000。
2．3对照品溶液的制备：精密称取淫羊藿苷对照品
9．03mg，置25mL量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻
度，摇匀；精密量取上述溶液10mL，置100mL量
瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得36．1Pg／mL淫羊
藿苷对照品溶液。
2．4供试品溶液的制备
2．4．1提取方法和提取溶剂的考察：比较水浴加热
回流60min和超声处理30rain提取样品，结果无
明显差异，由于超声简便易行，故选用。淫羊藿苷的
提取溶剂多用50％乙醇或甲醇，试验结果表明采用
甲醇较50％乙醇提取的杂质峰少，故采用甲醇。
2．4．2提取时间的考察：精密取样3份，用甲醇作
为溶剂，分别超声处理20、30、40rain，测定淫羊藿
苷的质量浓度。结果超声处理30min的提取液的测
定结果与40min的结果基本一致，故确定超声提取
时间为30rain。
2．4．3供试品溶液的制备：取本品装量差异检查项
下的内容物，混匀，取约2．0g，精密称定，置i00mL
量瓶中，精密加甲醇25mL，称定质量，超声提取30
rain，取出放冷，用甲醇补足减失的质量，振摇，滤
过，取续滤液用0．45弘m微孔滤膜滤过，即得。
2．5 阴性对照溶液的制备：取缺淫羊藿阴性样品
2．0g，按供试品溶液的制备方法制备缺淫羊藿的阴
性对照溶液。
2．6专属性试验：取对照品溶液、供试品溶液、阴性
对照溶液分别进样分析，结果阴性对照在供试品溶
液相应位置上无干扰，说明抗骨增生软胶囊中其他
药味对淫羊藿苷的测定没有干扰。
2．7 线性关系考察：精密称取淫羊藿苷对照品
8．20mg，置10mL量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻
度，摇匀，作为对照品溶液。分别吸取淫羊藿苷对照
品溶液0．1、0．3、0．5、0．8、1．0、1．5mL置10mL量
瓶中，加甲醇稀释至刻度，分别进样10pL，测定淫
羊藿苷峰面积。以峰面积为纵坐标，进样质量为横坐
标，得回归方程：y=1×106X一2865．2，7-----0．999。
结果表明淫羊藿苷在0．082-1．230pg与峰面积呈
良好的线性关系。
2．8精密度试验：精密吸取36．1pg／mL淫羊藿苷
对照溶液和供试品溶液，分别进样10pL，连续进样
5次，测定淫羊藿苷峰面积，计算得其RSD值分别
为1．29％、0．87％。
2．9稳定性试验：精密吸取36．1pg／mL淫羊藿苷
对照品溶液和供试品溶液，于0、2、4、8、16h分别进
样10pL，测定淫羊藿苷峰面积，计算得其RSD值
分别为1．14％、1．09％，表明对照品溶液和供试品
溶液中淫羊藿苷均在16h内稳定。
2．10重现性试验：取同一批样品，共5份，制备供
试品溶液，分别进样10弘L进行测定，结果淫羊藿
苷的平均质量分数为0．39mg／g，RSD为1．81％。
2．11回收率试验：采用加样回收法。取同一批含淫
羊藿苷0．39mg／g的样品约1．0g，6份，精密称定，
精密加入淫羊藿苷对照品0．3096、0．3870、0．4644
mg，制备供试品溶液，进样测定，计算回收率。结果
平均回收率为99．9％，RSD为1．48％。
2．12样品测定：取3批抗骨增生软胶囊样品，制备
供试品溶液，按上述色谱条件分别进样lopL，每批
测定2次。另取淫羊藿苷对照溶液适量，进样测定，
外标法计算样品中淫羊藿苷的质量分数，结果见
表1。
表I抗骨增生软胶囊中淫羊藿苷的测定结果
Table1 DeterminationofieariinKanggu
ZengshengSoftPills
批号 淫羊藿苷／(mg·粒-1)
O．25
O．20
O．22
3讨论
抗骨增生软胶囊中含柚皮苷、生物碱等成分较
多，极易发生干扰，而且含糖较多，因此在比较了多
种提取方法后，采用甲醇提取，结果表明，在超声提
取30rain后不仅可提取完全，而且减少了糖的
干扰。
采用HPLC法测定淫羊藿苷的文献报道较多，
考虑到淫羊藿苷的柱效和分离情况，考察了乙腈一水
(30t 70)、乙腈一水(25：75)、乙腈一水一冰醋酸(24。
76：0．1)为流动相；结果乙腈一水一冰醋酸(24：76。
0．1)为流动相分离效果满意，淫羊藿苷峰可达基线
分离，峰形对称，缺淫羊藿阴性对照无干扰。因此选
用乙腈一水一冰醋酸(24。76t 0．1)为流动相。
万方数据
HPLC法测定抗骨增生软胶囊中淫羊藿苷
作者： 叶英响， 石森林， 高敏
作者单位： 叶英响(义乌市中心医院,浙江,义乌,322000)， 石森林,高敏(浙江中医药大学药学院,浙江
,杭州,310053)
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2008,39(9)
被引用次数： 2次

引证文献(2条)
1.宋根伟.汪选斌.姚霜.毕文杰.刘佳.李洪亮.熊先明 高效液相色谱法测定黄龙止咳颗粒中淫羊藿苷含量[期刊论文
]-现代中西医结合杂志 2011(31)
2.郑林.刘毅.卢锦辉 HPLC法测定前列舒乐颗粒中淫羊藿苷[期刊论文]-中草药 2010(7)


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