全 文 ：现代药物与临床 Drugs & Clinic 第 30 卷 第 8 期 2015 年 8 月 ·943·
HPLC 法测定前列康复胶囊中大车前苷、朝藿定 C 和淫羊藿苷
李 征 1，罗 晶 2，潘延宁 3
1. 辽阳市食品药品检验所，辽宁 辽阳 111000
2. 抚顺市食品药品检验所，辽宁 抚顺 114000
3. 朝阳市食品药品检验所，辽宁 朝阳 122000
摘 要：目的 建立同时测定前列康复胶囊中大车前苷、朝藿定 C、淫羊藿苷的 HPLC 法。方法 安捷伦 Zorbax C18色谱柱
（250 mm×4.6 mm，5 µm）；以乙腈–0.1%磷酸水溶液为流动相，梯度洗脱；柱温 35 ℃；检测波长为 0～30 min，330 nm（测
定大车前苷），30～50 min，270 nm（测定朝藿定 C、淫羊藿苷）；体积流量 1.0 mL/min。结果 大车前苷、朝藿定 C、淫羊
藿苷分别在 10.08～201.60 ng、18.43～368.60 ng、52.25～1 045.00 ng 线性关系良好；平均回收率分别为 100.6%、97.2%、
97.2%，RSD 值分别为 1.5%、1.3%、1.2%。结论 该方法操作简单，重复性好，可有效的控制前列康复胶囊的质量。
关键词：前列康复胶囊；大车前苷；朝藿定 C；淫羊藿苷；高效液相色谱
中图分类号：R286.02 文献标志码：A 文章编号：1674 - 5515(2015)08 - 0943 - 03
DOI:10.7501/j.issn.1674-5515.2015.08.008
Determination of plantamajoside, epimedin C, and icariin in Qianlie Kangfu
Capsules by HPLC
LI Zheng1, LUO Jing2, PAN Yan-ning3
1. Liaoyang Institute for Food and Drug Control, Liaoyang 111000, China
2. Fushun Institute for Food and Drug Control, Fushun 114000, China
3. Chaoyang Institute for Food and Drug Control, Chaoyang 122000, China
Abstract: Objective To establish a method for simultaneous determination of plantamajoside, epimedin C, and icariin in Qianlie
Kangfu Capsules. Methods The determination was carried out on Agilent Zorbax C18 column (250 mm × 4.6 mm, 5 µm). The mobile
phase consisted of acetonitrile - 0.1% phosphoric acid solution with gradient elution at a flow rate of 1.0 ml/min. The column
temperature was set at 35 ℃ and the detection wavelengths were 330 nm in 0 — 30 min (determination of plantamajoside) and 270
nm in 30 — 50 min (determination of epimedin C and icariin). Results Plantamajoside, epimedin C, and icariin had good linearity
in the ranges of 10.08 — 201.60 ng, 18.43 — 368.60 ng, and 52.25 — 1 045.00 ng, respectively. The average recoveries were
100.6%, 97.2%, and 97.2% with RSD 1.5%, 1.3%, and 1.2%, respectively. Conclusion The method is simple and repeatable, which
can be applied to the quality control for Qianlie Kangfu Capsules.
Key words: Qianlie Kangfu Capsules; plantamajoside; epimedin C; icariin; HPLC

前列康复胶囊由淫羊藿、车前草、虎杖、土鳖
虫、枳壳、黄芪、川牛膝 7 味中药制成，为辽阳市
中心医院生产的医院制剂，具有补肾、益气、温阳、
化瘀、通淋、利水的功效，临床用于治疗肾虚、气
滞血瘀，症见腰膝疲软无力、尿频、排尿延缓、尿
后余沥等症，亦可用于慢性前列腺炎见上述症候者。
本实验参考《中国药典》2010 年版一部车前草、淫
羊藿[1]项下的含量测定方法，以及查阅相关文献报
道[2-6]，采用 HPLC 法同时对处方中虎杖、淫羊藿中
的 3 个特征性成分大车前苷、朝藿定 C、淫羊藿苷
进行测定，结果表明该方法可节约分析时间，提高
前列康复胶囊的质量可控性，为前列康复胶囊质量
控制提供依据。
1 仪器与试药
Agilent 1260 高效液相色谱仪，由 G1311A 四元
泵、G1314B 可变波长检测器（VWD）、G1322A 在

收稿日期：2015-06-11
作者简介：李 征（1978—），女，辽宁省辽阳市人，副主任药师，从事药品质量标准研究。Tel:15941916663 E-mail: 1819802731@qq.com
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线脱气机组成。Sartorius R200D 型电子天平，
Phenomen HU10260B 型超声波清洗器。
大车前苷（批号 111914-200703）、朝藿定 C（批
号 111780-201302）、淫羊藿苷（批号 110737-200415）
对照品均购自中国食品药品检定研究院。前列康复
胶囊由辽阳市中心医院提供，规格 0.3 g/粒，批号
为 150301、150302、150303。
甲醇、乙腈均为色谱纯，水为二次重蒸水，其
他试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 色谱条件及系统适用性
安捷伦 Zorbax C18 色谱柱（250 mm×4.6 mm，
5 µm）；以乙腈（A）–0.1%磷酸水溶液（B）为流
动相，梯度洗脱：0～5 min，10% A，5～30 min，
10% A→30% A；30～50 min，30% A；柱温 35 ℃；
检测波长为 0～30 min，330 nm（测定大车前苷），
30～50 min，270 nm（测定朝藿定 C、淫羊藿苷）；
体积流量 1.0 mL/min。理论塔板数按大车前苷计算
应不低于 3 000，各峰的分离度均大于 1.5。
2.2 溶液的制备
2.2.1 混合对照品溶液的制备 取大车前苷、朝藿
定 C、淫羊藿苷的对照品适量，加甲醇溶液制成
10.08、18.43、52.25 µg/mL 的混合对照品溶液。
2.2.2 供试品溶液的制备 取装量差异项下的前列
康复胶囊内容物，研细，取约 1 g，精密称定，精密
加入甲醇 25 mL，称定质量，超声处理（功率 300 W，
频率 50 kHz）处理 30 min，放冷，称定质量，用甲
醇补足减失的质量，滤过，取续滤液，即得。
2.3 专属性试验
按处方工艺及处方量，分别制备缺车前草、缺
淫羊藿的阴性样品，并按供试品溶液的制备项下方
法操作，制备阴性样品溶液。在上述色谱条件下进
样测定，结果样品中其他成分对 3 种成分的测定无
干扰，见图 1。
2.4 线性关系考察
取混合对照品溶液，分别进样 1、2、5、10、
15、20 µL，记录色谱图。分别以峰面积为纵坐标，
进样量为横坐标，进行线性回归，结果大车前苷在
10.08～201.60 ng 线性关系良好，回归方程为 Y＝
1 273.6 X＋20.235，r＝0.999 6；朝藿定 C 在 18.43～
368.60 ng 线性关系良好，回归方程为 Y＝1 012.0 X－
1.742，r＝0.999 9；淫羊藿苷在 52.25～1 045.00 ng
线性关系良好，回归方程为 Y＝1 056.1 X－15.433，


1-大车前苷 2-朝藿定 C 3-淫羊藿苷
1-plantamajoside 2-epimedin C 3-icariin
图 1 混合对照品（A）、前列康复胶囊（B）、缺车前草阴性
样品（C）和缺淫羊藿阴性样品（D）的 HPLC 图谱
Fig. 1 HPLC chromatograms of mixed reference substances
(A), Qianlie Kangfu Capsules (B), negative sample
without Plantaginis Herba (C), and negative sample
without Epimedii Folium (D)
r＝0.999 9。
2.5 精密度试验
精密吸取批号 150301 前列康复胶囊样品，制备
供试品溶液，重复进样 6 次，测定峰面积，结果大
车前苷、朝藿定 C 和淫羊藿苷峰面积的 RSD 值分
别为 0.2%、0.5%和 0.2%。





A
1
1
2
2
B
C
0 10 20 30 40 50
t /min
D
1
2
3
3
3
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2.6 稳定性试验
精密吸取批号 150301 前列康复胶囊样品，制备
供试品溶液，分别于配制后 0、3、6、9、12、15 h
测定峰面积，结果大车前苷、朝藿定 C 和淫羊藿苷
峰面积的 RSD 值分别为 0.5%、0.6%、0.2%，表明
供试品溶液中 3 个待测成分在室温放置 15 h 内基本
稳定。
2.7 重复性试验
取批号 150301 前列康复胶囊样品共 6 份，约 1
g，精密称定，制备供试品溶液，注入液相色谱仪中，
测定色谱峰面积，计算质量分数，结果样品中大车
前苷、朝藿定 C 和淫羊藿苷质量分数分别为 1.322、
1.494、4.041 mg/g，RSD 值分别为 1.0%、0.7%、0.9%。
2.8 回收率试验
精密称取批号 150301 前列康复胶囊样品 6 份，
约 0.5 g，置具塞锥形瓶中，精密加入含大车前苷
0.132 5 mg/mL、朝藿定 C 0.1516 mg/mL、淫羊藿苷
0.407 2 mg/mL 混合对照品溶液 5 mL，再精密加入
甲醇 20 mL，制备供试品溶液，进样测定样品中大
车前苷、朝藿定 C、淫羊藿苷的质量分数，计算回
收率。结果大车前苷、朝藿定 C、淫羊藿苷的平均
回收率分别为 100.6%、97.2%、97.2%，RSD 值分
别为 1.5%、1.3%、1.2%。
2.9 样品测定
取不同批号前列康复胶囊样品，制备供试品溶
液，每批样品平行试验 2 份。分别精密吸取混合对
照品溶液、供试品溶液各 5 µL 注入液相色谱仪，进
样，测定峰面积值，按外标法计算前列康复胶囊中
大车前苷、朝藿定 C 和淫羊藿苷的质量分数，结果
见表 1。
表 1 前列康复胶囊中大车前苷、朝藿定 C、淫羊藿苷的测
定结果（n = 2 ）
Table 1 Determination of plantamajoside, epimedin C, and
icariin in Qianlie Kangfu Capsules (n = 2 )
批号
大车前苷/
(mg·g−1)
朝藿定 C/
(mg·g−1)
淫羊藿苷/
(mg·g−1)
150301 1.322 1.494 4.041
150302 1.280 1.612 3.895
150303 1.352 1.623 3.957

3 讨论
3.1 提取条件的选择
分别采用加热回流、超声提取方法对 3 个成分
的提取效率进行考察，结果表明超声提取法效率更
高，且简便易行；提取溶剂考察了水、50%甲醇水
溶液、甲醇、醋酸乙酯等，结果表明，甲醇对 3 个
成分综合提取效率最高；同时对甲醇用量 15、25、
50、100 mL 以及超声时间 15、30、45 min 进行考
察，最终确定采用甲醇 25 mL 超声处理 30 min 作为
提取条件。
3.2 检测波长的选择
取供试品溶液，按上述色谱条件在 200～400
nm 进行二极管阵列检测，兼顾 3 个活性成分紫外
最大吸收波长，最终确定检测波长为 0～30 min，
306 nm（测定大车前苷），30～50 min，270 nm（测
定朝藿定 C、淫羊藿苷）。
3.3 流动相的确定
分别考察了甲醇–水、乙腈–水、乙腈–0.1%
磷酸水溶液作为流动相，结果采用乙腈–0.1%磷酸
水溶液时峰型较好，基线平稳，分离效果较理想，
最终选择乙腈–0.1%磷酸水溶液。参照《中国药典》
2010 版一部中车前草、淫羊藿含量测定的色谱条
件，以及查阅相关文献，最终确定梯度洗脱条件。
本实验采用HPLC梯度洗脱法在 50 min内完成
对大车前苷、朝藿定 C、淫羊藿苷 3 个活性成分的
同时分析测定，大大缩短了分析时间。
参考文献
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