全 文 ：·1184· 中草115ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第8期2006年8月
指标越小越好，所以较好的提取方法应为
C：D。B。A。，即煎煮120min、125。C、粉碎粒度为
8mm×3．5mITl、加水8倍。
2．5验证试验：为进一步考察上述优选工艺的稳定
性，选用上述优化条件，取50g药材，采取用水8倍
量、煎煮120rain、125℃、粉碎粒度8mm×3．5
mm、重复3次，结果所得秦皮甲素的质量分别为
5．44、5．38、5．67mg。
3讨论
秦皮始载于《神农本草经》，列为中品。秦皮甲素
为秦皮的有效成分，具香豆素类母体结构，收载于
《中国药典92005版一部中，采用HPLC法测定秦皮
甲素和秦皮乙素的总量为控制标准，方法较繁锁。有
关文献对秦皮进行测定分别有HPLC法、容量法、
紫外分光光度、纸色谱比色法、电泳一光密度计法、薄
层色谱一荧光法等法[1’2|。经多种条件比较，实验用改
良的HPLC法测定秦皮甲素。
曾考虑将秦皮乙素一起测定，但由于提取效果
不佳，出峰结果不理想而放弃，有待于今后继续
研究。
References：
[1]SunDM，FanSL，TuYS．Determinationof esculinin
QinpiGranulebyHPLCEJ3．TraditCh nDrugResClin
Pharmacol(中药新药与临床药理)，2000，11(3)：172．
I-z]LiangYA，ZhuJJ．Quantitativede erminationof esculinin
CortexFraxiniCaulisbysecond—derivativedifferentialpulse
polarographyI-J1．PharmJChinPLA(解放军药学学报)，
2000，16(5)：254．
HPLC法测定养血当归精合剂中芍药苷
吴瑾瑾1，石森林2，徐菲拉3
(1．杭州市第四医院，浙江杭州 310003；2．浙江中医药大学，浙江杭州310000；
3．金华市中心医院，浙江金华312000)
养血当归精合剂由当归、J1I芎、熟地、黄芪、白
芍、阿胶、甘草等组成，具有补虚益气、养血调经的功
效，主要用于妇女气血两虚所致月经不调、闭经及痛
经等病症。该品目前有15家企业生产，但是临床疗
效不稳定。究其原因，是原生产工艺较粗糙，缺少量
化质量控制标准。为保证药品质量，进一步修订药品
质量标准，本实验采用HPLC法测定养血当归精中
芍药苷。
1材料与仪器
AgiLent1100高效液相色谱仪、UV检测器(美
国AgiLent公司)，CQ250型超声波清洗器(上海超
声波仪器厂)，PL5124型纯水机(美国PALL公
司)，C。。固相萃取小柱(江苏汉邦科技有限公司)，
AB一204一N电子天平(梅特勒一托利多)，lOlA一2
电热鼓风箱(上海市实验仪器总厂)，SX2—4～10箱
式电阻炉(沈阳市节能电炉厂)。
芍药苷对照品(批号0736—200117，中国药品生
物制品检定所)，甲醇为色谱纯，其他试剂均为分析
纯，养血当归精合剂(150mE／瓶)由浙江中医药大
学药学院提供。
2方法与结果
收稿日期：2006一01—1】
2．1 色谱条件：ZorbaxXDB—C18(150mm×3．9
mm，5弘m)色谱柱；流动相：甲醇一水一磷酸(35：65：
0．1)；检测波长：230nm；柱温：室温；体积流量：0．8
mL／min。理论板数按芍药苷峰计算不低于3500。
2．2溶液的配制
2．2．1供试品溶液的制备：准确移取养血当归精合
剂4．0mL于50mL量瓶中，加入甲醇36mL，密
塞，摇匀，冰箱放置6h以上，滤过，残渣用少量甲醇
洗涤，合并滤液，滤液水浴蒸干，残渣用蒸馏水溶解
于5mL量瓶中，以蒸馏水稀释至刻度，密塞，摇匀，
准确吸取该溶液300肛L于C，。固相萃取小柱(15
mm×8mm，500mg)上，分别用蒸馏水3．0mL、
35％甲醇5．0mL洗脱，收集35％甲醇洗脱液于5
mL量瓶中，并用流动相稀释至刻度，密塞，摇匀，过
0．45肛m微孔滤膜，即得供试品溶液。
2．2．2对照品溶液的制备：芍药苷对照品真空干燥
24h后，取约17mg，精密称取，置10mL量瓶中，
用甲醇溶解并稀释至刻度，密塞，摇匀，即得对照品
储备液。精密吸取此对照品储备液40弘L于10mL
量瓶中，用流动相稀释至刻度，密塞，摇匀，即得对照
品溶液(含芍药苷6．8ttg／mL)。
万方数据
中草菊 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第8期2006年8月·1185·
2．2．3阴性供试品溶液的制备：按组方比例取除去
自芍的各原料药材适量，按制剂工艺制备空白样品
合剂，即得缺白芍的阴性样品。取该阴性样品，按供
试品溶液的制备方法制得阴性供试品溶液。
2．3 系统适用性与空白试验：该色谱条件下对照品
溶液、供试品溶液与阴性供试品溶液的色谱图见图
1，可见养血当归精合剂中其他成分对芍药苷的测定
没有影响。
二～一八
0 2 4 6 8 10 12 14
0 2 4 6 8 10 12 14
t|rain
*一芍药苷
*一paeoniflorin
图1 芍药苷对照品(A)、养血当归糟合剂(B)
和缺白芍的阴性对照(c)的HPLC图谱
Fig．1HPLCChromatogramsofpaeoniflorinreference
substance(A)，YangxueDangguijingMistura
(B)，andnegativesample(C)
2．4标准曲线的制备：分别精密吸取对照品储备液
20、40、80、160、240、320、400弘L置10mL量瓶中，
流动相定容，摇匀，进样20弘L，测定芍药苷峰面积。
以芍药苷峰面积为纵坐标，进样量为横坐标拟合标
准曲线，得回归方程Y=1651830．5197 X，r一
0．999，结果表明芍药苷在0．0679～1．3580 P-g
与峰面积有良好的线性关系。
2．5精密度试验：精密吸取芍药苷对照品溶液20
肚L，连续进样测定6次，记录芍药苷峰面积，结果峰
面积RSD为O．47％。
2．6稳定性试验：精密吸取同一供试品溶液，分别
在0、0．5、1、2、3、4、6、8、24h进样20弘L测定，结果
芍药苷峰面积RSD1．23％，可见样品在24h内稳
定性良好。
2．7重现性试验：分别准确移取同一批养血当归精
合剂6份，制备供试品溶液，每份重复3次，进样20
肛L，结果芍药苷质量浓度的RSD为3．44％。
2．8加样回收试验：精密取养血当归精合剂6份，
分别加入精密加入芍药苷对照品约0．3mg，制备供
试品溶液，测定，结果加样回收率在95．05～
97．20％。
2．9样品测定：取样品，按上述方法制备供试品溶
液，精密吸取对照品溶液20肛L、供试品溶液20pL，
按上述色谱条件测定芍药苷峰面积，按外标法计算
芍药苷的质量浓度，结果见表1。
表1养血当归精合剂中芍药苷的测定结果(一=3)
Table1 Determinationofpae iflorininYangxue
DangguijingMistura(辟一3)
3讨论
本处方中君药为当归、阿胶，阿魏酸为当归中主
要有效成分，但川芎中也含有该成分，因此把阿魏酸
作为定量指标进行考察，专属性不够，因此该方法未
列入定量测定项中。白芍为本品处方中的臣药之一，
芍药苷是该药的主要有效成分，以芍药苷为指标进
行测定，可控制成品的质量。
测定波长的选择：将芍药苷对照品溶液与供试
品溶液分别用紫外分光光度计在200600nm扫
描，最大吸收波长与文献报道[1](230nm)一致，因
此选择检测波长为230nm。
流动相的选择：本实验用甲醇一水一磷酸(35：
65：0．1)、乙腈一水一磷酸(15：85：0．1)、甲醇一0．05
moL／L磷酸二氢甲溶液一异丙醇一冰醋酸(67：
173：4：4)为流动相进行试验，结果后两者中芍药
苷与其他组分未能达到基线分离，而甲醇一水一磷酸
(35：65：0．1)分离度最好，保留时间较合适，故本
实验选用该流动相。
Reference：
I-1]LiuJH，WangSF．Determinationofpaeoniflorincontenti
WujibaifengTabletsbyHPLC口]．ChinTraditHerbDrugs
(中草药)，2002，33(4)：325．
，1^1_____，_____r_，_，_‘___、_●J_I
l＼、
一cL
万方数据
HPLC法测定养血当归精合剂中芍药苷
作者： 吴瑾瑾， 石森林， 徐菲拉
作者单位： 吴瑾瑾(杭州市第四医院,浙江,杭州,310003)， 石森林(浙江中医药大学,浙江,杭州
,310000)， 徐菲拉(金华市中心医院,浙江,金华,312000)
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2006,37(8)
被引用次数： 2次

参考文献(1条)
1.Liu J H;Wang S F Determination of paeoniflorin content in Wujibaifeng Tablets by HPLC[期刊论文]-中
草药 2002(04)

引证文献(2条)
1.吴胜君.叶月华 HPLC法测定健脑灵片中芍药苷的含量[期刊论文]-中国医药导报 2009(11)
2.靳淑敏.杨维.王伟华.刘伟娜.刘曼.张兰桐.王巧 多波长RP-HPLC法测定抗感宁合剂中绿原酸、葛根素和芍药苷
[期刊论文]-中成药 2009(1)


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