全 文 ：·1036· 中草黄ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第7期2006年7月
HPLC法测定知柏地黄颗粒中马钱苷
席美凤
(永州市人民医院药剂科，湖南永州425006)
知柏地黄颗粒为收载于《中华人民共和国卫生
部药品标准》中成药分册第5册知柏黄片进行剂改
而成，由知母、黄柏、熟地黄、山茱萸、茯苓、牡丹皮、
山药、泽泻等组方而成，具有滋阴降火之功效，用于
阴虚火旺，潮热盗汗，口干咽痛，耳鸣遗精，小便短赤
等症。原知柏地黄片标准项下未制定定量测定。山
茱萸为本品臣药，具有补益肝肾的作用。鉴于《中国
药典))2005年版一部山茱萸项下以马钱苷定量山茱
萸，故本实验选用马钱苷作为测定指标，拟建立
HPLC法测定知柏地黄颗粒中马钱苷，为该制剂生
产的质量控制提供依据。
1仪器与试药
Agilent1i00高效液相色谱仪，DAD检测器，
HP工作站；B3200S型超声波清洗机；Mettler
AE240型电子分析天平。
马钱苷对照品由中国药品生物制品检定所提
供，批号为111640—200501；乙腈为色谱纯，水为重
蒸水，其他试剂为分析纯。知柏地黄颗粒为湖南中医
药大学实验室产品，规格为每包5．0114g。
2方法与结果
2．1 色谱条件：色谱柱为DoamonsilC18(250mm
×4．6mm，5弘m)不锈钢柱；柱温35℃；流动相为
醋酸盐缓冲液(pH4．5)一乙腈一水(30：15：55)；检
测波长为236nm；体积流量为1．0mL／min；进样量
为10肚L。理论板数按马钱苷计不低于4000。
2．2对照品溶液的制备：精密称取马钱苷对照品
A
4．3mg，置10mL量瓶中，加80％甲醇溶解并稀释
至刻度，摇匀，制成0．043mg／mL的对照品储备溶
液。精密吸取1mL，置10mL量瓶中，加50％甲醇
稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。
2．3供试品溶液的制备：取本品4包，精密称定，研
细，取约0．85g，精密称定，置50mL具塞锥形瓶
中，精密加入50％甲醇25mL，密塞，称定质量，超
声处理(功率100W，频率40kHz)30min，放冷，再
称定质量，用50％甲醇补足减失的质量，摇匀，滤
过，精密吸取续滤液5mL，加在中性氧化铝柱
(100～200目，4g，内径1cm)上，用40％甲醇50
mL洗脱，收集流出液与洗脱液，蒸干，残渣用50％
甲醇溶解，并转移至2mL量瓶中，加50％甲醇至刻
度，摇匀，作为供试品溶液。
2．4 阴性对照溶液制备：取除山茱萸外的其他处方量
药材，按制备工艺制备成缺山茱萸的阴性样品，按供试
品溶液的制备方法制成缺山茱萸的阴性对照溶液。
2．5空白干扰试验：取对照品溶液、供试品溶液、阴
性样品溶液各10弘L，在上述色谱条件下进行测定，
记录色谱图(图1)。结果表明马钱苷与其他组分分
离完全，且峰形良好，阴性样品不干扰测定。
2．6线性关系的考察：精密吸取马钱苷对照品贮备
溶液0．1、0．2、0．5、1．0、2．0、5．0mL于6个10mL
量瓶中，加50％甲醇稀释至刻度，摇匀。精密吸取上
述不同质量浓度的溶液各10pL，注入液相色谱仪，
记录峰面积。以质量浓度对峰面积进行回归分析，得
B
一人，l^一^一
C
⋯足，、／1—
0 25 5 7．5 10 0 25 5 7．5 10 0 2．5 5 7．5 10
*一马钱苷
*一loganin
圈1 马钱苷对照品(A)、知柏地黄颗粒(B)和阴性对照(C)的HPLC色谱图
Fig．1HPLCChromatogramsfog ninreferencesubstance(A)，ZhibaiDihuanggranule(B)，andnegativesample(C)
箨萎品羿：絮霎晶乏111963--)，女，副主任，主管中药师，湖南省中医药学会中药专业委员会委员，从事中药专业工作，发表数篇论文。作者简介 席美风( ，女，副主任，主管中药师，湖南省中医药学会 药专业委员会委员，从事中药专业工作，发表效篇论文·
万方数据
中草菊ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第7期2006年7月
回归方程Y一15．70X+0．14831，r一0．9997。结
果表明马钱苷在4．3～215btg／mL与峰面积呈现良
好的线性关系。
2．7稳定性试验：精密吸取同一马钱苷对照品溶液
和知柏地黄颗粒供试品溶液，分别于配制后0、1、2、
4、8、24h各进样10弘L，记录峰面积，结果供试品溶
液和对照品溶液在24h内稳定，RSD分别为
0．78％和0．89％。
2．8精密度试验：精密吸取质量浓度为43tzg／mL
马钱苷对照品溶液10弘L，连续进样6次，测定峰面
积值，计算得其RSD为0．18％。
2．9重复性试验：取批号为20050703本品4包，研
细，取细粉0．85g，精密称定，共取6份，制备供试品
溶液，测定，结果马钱苷的质量分数为2．982mg／
包，RSD为0．869％。
2．10回收率试验：取批号为20050703本品(含马
钱苷2．982mg／包)约0．6375g，精密称定，共取6
份，各精密加入0．416mg／mL马钱苷对照品溶液
0．6mL，摇匀，制备供试品溶液并依法测定，结果平
均回收率为100．O％，RSD为1．29。
2．11样品测定：取10批样品按上述方法制备供试
品溶液。分别精密吸取供试品溶液、马钱苷对照品溶
液10弘L注入液相色谱仪，测定，计算马钱苷的质量
分数，结果见表1。
根据数批成品的测定结果，暂定本品每包含马
表1 知柏地黄颗粒中的测定结果佃=2)
Table1 ResultsofloganininZhibai
DihuangGranule(万=2)
批号 马钱苷／(mg·包一1)批号 马钱苷／(mg·包_1)
200507023．150 200510232．754
200507032．985 20050912 2．901
200507042．679 20050913 2．532
20051021 3．273 20050914 2．388
200510223．012 20050915 2．823
钱苷不得少于2．22mg。
3讨论
本品中君药为知母，曾摸索测定知母中菝葜皂
苷元，但是由于供试品制备时需要酸水解，操作繁
琐；且通过实验发现样品稳定性、重复性较差；山茱
萸虽为本品臣药，但为名贵中药，常为伪品，故选用
马钱苷作为定量测定指标。
在制备供试品溶液的过程中，样品超声处理后
取续滤液，需进一步上氧化铝柱去除杂质。样品经上
柱处理后，与杂质峰分离度较好，能够准确测得马钱
苷；若样品不经上柱处理，直接进样，则杂质峰较多，
分离不好，重现性较差。
曾参照《中国药典>>2005年版一部知柏地黄丸
项下测定方法，采用有机溶剂混流动相，结果马钱苷
峰形拖尾严重，于是换作缓冲盐溶液作流动相。经筛
选发现流动相pH4．5的醋酸盐缓冲液一乙腈一水
(30：15：55)时分离效果好，峰形对称。
(上接第995页)
CDCl3)，1H—NMR(500MHz，CDCl。)艿：0．83，0．89
(3H，d，J一7Hz，CH3)，1．68(6H，S)，5．40，5．47
(1H，1TI)。13C—NMR(125MHz，CDCl3)a：15．8，
21．3，21．7，23．9，24．5，24．7，26．6，30．5，36．7，
39．1，41．0，121．5，124．1，134．4，136．4。以上数据与
文献报道对照一致[5]，确定该化合物为a一杜松烯。
References：
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万方数据
HPLC法测定知柏地黄颗粒中马钱苷
作者： 席美凤
作者单位： 永州市人民医院药剂科,湖南,永州,425006
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2006,37(7)
被引用次数： 3次

引证文献(3条)
1.南换杰.秦雪梅.武滨.张丽增.郭小青 益智颗粒的薄层定性鉴别[期刊论文]-临床医药实践 2008(10)
2.陆旋.张星海.黄雪梅 HPLC法检测耳聋左慈丸中马钱苷方法研究[期刊论文]-浙江化工 2010(5)
3.何舒澜 知柏地黄丸制备工艺、质量控制及药理作用的研究进展[期刊论文]-海峡药学 2013(7)


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