全 文 ：中革葫 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第38卷第10期2007年10月
八味丹参茶中丹参酮ⅡA和总黄酮的测定
毕跃峰1，艾国民2，麻兵继3，曾金斌3，刘宏民1
(1．郑州大学新药研究开发中心，河南郑州450052}2．中国农业大学农学与生物技术学院．北京100094
3．河南农业大学中药材系，河南郑州450002)
八味丹参茶是一味集传统经典方丹参饮方、地
仙丹方、二精丸方之精华于一体自主研发的保健品，
由河南方城道地药材裕丹参以及山楂为主等8味名
贵野生药材精制面成，具有明显的防治高血脂、离血
压以及脂肪肝等作用。丹参、山楂中富含降血脂、降
血压作用的丹参酮、丹参酚酸、黄酮等有效物质群。
本实验采用高效液相法、分光光度法对八味丹参茶
中丹参酮I^、总黄酮进行了定量测定，为其质量控
制标准的制定及其进一步的推广应用提供依据。
l仪器、试剂与材料
日本岛津LC一10ATvp型高效液相色谱仪，
SPD一10Avp可见一紫外检测器及威玛龙V5．21一
PLUS+色谱工作站JASCOV一550UV／Vis紫外
分光光度计；KQ--100B超声波清洗器(昆山市超声
仪器有限公司)；AE260分析天平(Mettle—TOL
EDO仪器公司)；R～200旋转蒸发仪(德国Buchi
公司)。
丹参酮IA对照品(中国药品生物制品检定所，
批号：110766—200416)；芦丁对照品(中国药品生物
制品检定所，批号：080—9303)；95％乙醇、NaN02、
Al(NO；)；、NaOH、CHCl3等均为分析纯。甲醇为色
谱纯，水为超纯水。
八味丹参茶样品由河南省方城县裕隆科技发展
有限公司生产并提供。
2丹参酮Ⅱ．的HPLC法测定“。1
2．1色谱条件：色谱柱为Shim—packCLCODS
(150mmX4．6mm，5mm)柱；流动相为甲醇一水
(75：25)；体积流量1．0mL／min；波长270nm，柱
温30℃，进样量10止。理论板数按丹参酮I一峰计
算应不低于2000。
2．2对照品溶液的制备：精密称取丹参酮I一对照
品20mg，置50mL棕色量瓶中，加甲醇至刻度，摇
匀。精密量取10mL置25mL棕色量瓶中，加甲醇
至刻度，摇匀，即得(含丹参酮IA160pg／mL)。
2．3标准曲线的绘制及线性范围：取对照品溶液，
分别进样2、6、8、16、20止，测定，记录色谱峰及峰
面积。以丹参酮I．进样量为横坐标，峰面积为纵坐
标，绘制标准曲线，得回归方程为c一0．ZZ36A一
2．776，r=0．9996，线性范围为0．32～3．2腿。
2．4供试品溶液的制备：精密称取八昧丹参茶0．5
g，加入75％甲醇(每次20mL)，加热回流2次，每
次1h，过0．45vm滤膜滤至50mL量瓶中，以75％
甲醇补充至刻度，待用。
2．5精密度试验：取八味丹参茶样品，制备供试品
溶液，连续进样6次，测定计算得丹参酮Ia峰面积
的RSD为0．5％。
2．6稳定性试验：取八味丹参茶样品，制备供试品
溶液分别在0．5、6、9、12、24、36、48h进行测定，计
算得丹参酮I一峰面积的RSD为0．7％，表明样品
在48h内稳定。
2．7重现性试验：取八味丹参茶样品，平行制备6
份供试品溶液，进行测定，结果丹参酮Ⅱ一质量分数
的RSD为z．6％。
2．8加样回收试验：取八味丹参茶样品6份，每份
0．2g，分别精密加入丹参酮Ⅱn对照品溶液10mL，
制备供试品溶液测定，得平均回收率为100．3％，
RSD为2．6％。
2．9样品测定：取5批八味丹参茶样品制备供试品
溶液进行测定，并计算丹参酮I一的质量分数，结果
见表1，色谱图见图1。
表l八昧丹参茶中丹参酮I·蹦定结果
Table1 DeterminationoftanshioneII^
inBaweiDanshenT a
批号 丹参酮I^／％ 批号 丹参酮I^／“
1 0．14 4 0．15
2 0．16 5 0．13
3 013
3总黄酮的测定‘“．]
●
巽萋暑羿：翟芸盎乞臻9一)，女，河南郑州市人。博士，嗣教授．硬±导师。研究方向：天然药物化学及新药开发
Tel：(0371)61917506Fax：( 371)67787200E—mail#Z000时f@sinn．com
万方数据
中革蒋ChineseTraditionalandHerb Drugs第38卷第10期2007年10月·1503·
t／ml“
*一丹参酮I“
-一tanshioneI‘
圈1丹参酮I·对照品(A)与样品的色谱圈(B)
Fig．1BPLCChromatogramoftanshioneJ^reference
substanceCA)andBawefDanshenT a(B)
3．1供试品溶液的制备：准确称取八味丹参样品约
1g于50mL具塞圆底烧瓶中，量取75％乙醇15
mL于烧瓶中，浸泡0．5h，然后超声提取0．5h，滤
过至50mL量瓶中，滤渣再用75％乙醇10mL超
声提取0．5h，滤过；滤渣再用75％乙醇10mL超声
提取20min。合并3次滤液，用75％乙醇定容至刻
度，即得。
3．2标准曲线的绘制：准确称取芦丁对照品14mg
于50mL量瓶中，用75％乙醇定容至刻度。精密量
取对照品溶液0、0．5、1．0、1．5、2．0、2．5、3．0mL，分
别置于10mL量瓶中，加人5％NaN02溶液0．4
mL，摇匀，放置6min，再加入10％Al(NO。)：溶液
0．4mL，摇匀，放置6min，加入4％NaOH溶液4．0
mL，75％乙醇定容，摇匀，15min后，于505nm波
长处测定吸光度。以溶液质量浓度为横坐标，吸光度
为纵坐标进行直线回归，并求出回归方程为
C一83．6502A+2．8613，r=0．9996．线性范围为
14．0～84．0pg／mL。
3．3精密度试验：同一供试品溶液重复测定6次．
测得总黄酮质量分数的RSD为0．61％。
3．4重现性试验：同一批样品平行取6份，制备供
试品溶液测定，得总黄酮的平均质量分数为
5．88％，RSD为1．2％。
3．5稳定性试验：将同一供试品溶液每隔2h测定
1次，在12h内结果稳定，总黄酮的RSD为2．2％。
3．6加样回收率试验：精密称取适量八味丹参(含
总黄酮5．88％)6份，分别加入等量的总黄酮(以芦
丁计)，制备供试品溶液，计算结果总黄酮的加样回
收率为98．7％，RSD为1．9％。
3．7样品测定：取lmL样品提取液于10mL量瓶
中，75％乙醇稀释至刻度，取2mL稀释于10mL量
瓶中，加入5％NaNO。溶液0．4mL，摇匀，放置6
min，再加入10％A1(NO。)；溶液0．4mL，摇匀，放
置6min，加入4％NaOH溶液4．0mL，75％乙醇定
容，摇匀。15min后，于505nm波长处测定吸光度，
根据回归方程计算出样品总黄酮质量分数，取其平
均值(n一3)，测得结果为5．88％。
4讨论
由于中药复方成分复杂，特别本品中含有丹参
酮、黄酮等化合物，紫外吸收干扰大，故必须选择合
适的显色剂，以有利于方便、快速、准确地测定。经过
试验研究表明：经200～600nm波长扫描，发现样
品在500nm左右无明显吸收，利用亚硝酸钠+硝酸
铝法显色后505nm出现较大的吸收峰；丹参酮I一
和芦丁显色前均在370nm处有最大吸收，而丹参
酮I一经亚硝酸钠一硝酸铝法显色后的最大吸收峰
仍在270nm处，芦丁经显色后却在505nm处有最
大吸收，故确定用亚硝酸钠一硝酸铝法在波长505
nm处测定总黄酮。
本研究建立了高效液相法和比色法测定八昧丹
参茶中丹参酮l“总黄醌的方法，结果表明八味丹
参茶中含有较为丰富的丹参酮、黄酮等有效物质，并
且这两种方法简便易行、快速、稳定，因此可为八味
丹参茶质量控制标准的制定和质量评价提供有意义
的参考价值。
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万方数据
八味丹参茶中丹参酮ⅡA和总黄酮的测定
作者： 毕跃峰， 艾国民， 麻兵继， 曹金斌， 刘宏民
作者单位： 毕跃峰,刘宏民(郑州大学,新药研究开发中心,河南,郑州,450052)， 艾国民(中国农业大学
农学与生物技术学院,北京,100094)， 麻兵继,曹金斌(河南农业大学,中药材系,河南,郑州
,450002)
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2007,38(10)

参考文献(4条)
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4.Nian H;Zhang Q Y;Zhen H C Determination of total flavonoids and icariin in Erxian Decoction[期刊论
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志2002,43(8)
3. 宋晓坤.杜春双.娄建石.SONG Xiao-kun.DU Chun-shuang.LOU Jian-shi HPLC法测定乳痛丸中丹参酮ⅡA[期刊论
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