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荒漠肉苁蓉石油醚提取物化学成分及其细胞周期抑制活性



全 文 :·506· 中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第4期2005年4月
表3江苏“Scotch”留兰香精油和美国“Scotch”留兰香精油的气相色谱分析结果
Table3 Resultofessentialo lfrom“Scotch”M.spicatainJiangsuProvinceandUnitedStatesbyGC
峰号 组分
质量分数/%
峰号 组分 霍量分数7%
江苏 美国 江苏 美 国
1 2一己基一呋喃0.029 0.0739 23 反一水桧烯0.0690 0.1974
2 口一蒎烯0.7204 0.7214 24 4一松油醇0.1667 0.2476
3 3一甲基一丁醛0.1475 0.0977 25 反一2一己烯醇0.0994 0.1233
4 肛蒎烯0.7459 0.6495 26 芳樟醇0.6746 0.8760
5 桧烯0.4933 0.4407 27 二氢香芹酮0.8953 1.7806
6 月桂烯0.9981 1.3626 28 顺一二氢香芹酯0.1119 0.2944
7 d一松油烯0.0403 0.0971 29 反一二氢香芹酯0.1342 0.2799
8 柠烯 15.0047 15.1093 30 8一松油醇0.2653 0.2588
9 1,8-桉叶油素 1.4395 1.4199 31 二氢香芹醇0.1060 0.0918
10 反式一罗勒烯0.0519 0.0529 32 大根香叶烯0.0612 0.0686
11 对一伞花烯0.0298 0.0934 33 反式~p金合欢烯0.4213 0.0833
12 y-松油烯0.0334 0.0494 34 薇草烯0.0493 0.6837
13 松油烯0.0669 0.0941 35 a一松油醇0.9316 0.8787
14 3-辛醇0.2426 0.1818 36 新二氢香芹醇0.1186 0.1071
15 薄荷酮 2.3186 1.6446 37 L一香芹酮 69.2857 66.7068
16 异一薄荷酮 1.0137 0.8888 38 荜澄茄烯0.1372 0.2862
17 己烯醇0.0823 0.3799 39 反一香芹醇0.1107 0.2208
18 乙酸一3一辛酯0.0884 0.0632 40 顺一香芹醇0.1156 0.1095
19 p波旁烯0.1863 0.2031 41 茉莉酮0.1305 0.1533
20 水桧烯0.1455 0.1034 42 绿花白干层醇0.5282 0.3684
21 p石竹烯0.0934 0.1076 43 丁香酚0.2767 0.2972
22 乙酸一新一薄荷酯0.8947 1.1589 44 百里香酚0.2518 0.0733
的“Scotch”留兰香精油中头香总组分(柠烯以前的
组分,含柠烯组分)均为18.18%,其主要成分L一香
芹酮的质量分数均较高,底香组分(1一香芹酮以后的
组分)分别为1.55%(江苏)和1.51%(美国)。从整
个精油的香气及组分来分析,两种“Scotch”留兰香
精油的香气及组分协调,具有清甜柔和微凉、透发力
强、香气稳定、留香持久的特点,质量好,与质量高的
“801”留兰香精油的香气及组分也较接近,是牙膏、
软饮料、糖果食品等香精的又一高质量原料,具有重
要的应用前景。
致谢:本研究所用的美国“Scotch”留兰香精油,
由A.M.Todd公司提供。
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荒漠肉苁蓉石油醚提取物化学成分及其细胞周期抑制活性
卢克刚,刘红兵,顾谦群
(中国海洋大学海洋药物与食品研究所海洋药物教育部重点实验室,山东青岛266003)
肉苁蓉CistanchedeserticolaY.C.Ma又名荒
漠肉苁蓉,为列当科肉苁蓉属植物,其带鳞叶的干燥
肉质茎作为中药肉苁蓉使用,是《中华人民共和国药
典》收载的正品。肉苁蓉味甘、性温,具有“补肾阴益
精血,润肠通便”之功效,可用于治疗男子阳痿、女子
不孕、腰膝冷痛、血枯便秘等[1]。
近年来中药肉苁蓉因具有显著的改善记忆、抗
衰老、抗疲劳、增强机体免疫等功能而备受人们关
注,其化学成分及药理作用报道较多[2’3]。而文献检
索表明,新鲜荒漠肉苁蓉的相关研究则较少,仅屠鹏
飞等人研究过其鲜花序的正丁醇萃取物的化学成
分[4]。笔者在对新鲜肉苁蓉化学成分的系统研究中,
收稿日期:2004—08—13
作者筒介:顾谦群(1951一),女,教授,博士生导师,主要从事天然产物化学研究工作,发表文章50余篇。
Tel:(0532)2032065E-mail:guqianq@mail.OUC.edu.en
万方数据
中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第4期2005年4月·507·
发现其石油醚提取物和醋酸乙酯提取物均具有一定
的抗肿瘤活性。本实验用GC—MS对石油醚提取物
的化学成分进行分析鉴定,同时用流式细胞术检测
其对小鼠乳腺癌tsFT210细胞的周期抑制活性。
1实验部分
1.1 仪器、试剂及样品:GC—MS联用仪英国VG公
司,FisonsMD800GC/MS型。采用小鼠乳腺癌ts—
FT210细胞。流式细胞术采用美国BD公司Van—
tage型流式细胞仪,细胞在细胞周期各时相中的分
布利用ModFitLT软件分析计算。胎牛血清(FBS)
和RPMI一1640细胞培养基分别为Hyclone公司
(Cat.No.STF721)和Gibcobrl公司产品,碘化丙
啶(PI)和TritonX一100均为Sigma公司产品。新
鲜肉苁蓉药材采于内蒙古阿拉善盟,经中国海洋大
学海洋药物与食品研究所刘红兵老师鉴定为肉苁蓉
C.deserticolaY.C.Ma带鳞叶的肉质茎。
1.2样品的提取:新鲜荒漠肉苁蓉药材450g切碎
后,用沸程30~60℃的石油醚2000mL渗滤,低温
减压回收溶剂,再经无水硫酸钠干燥,得黄色透明液
体,密封保存于一10℃冰箱中备用。收率为0.93%。
1.3 石油醚提取物的GC—MS分析:气相色谱条
件:色谱柱为30QC2/AC5石英毛细管柱(30m×
0.32ram);柱温80~280℃,程序升温3oC/min;分
流比30:1;气化室温度240℃;柱前压82.8kPa;
载气为高纯N:。
质谱条件:EI—MS,电子能量70eV;离子源温
度200。C;灯丝电流4.1A;质量范围35~450m/z;
扫描周期1S;数据处理用LAB—BASE系统,使用美
国国家标准局NBS库检索,并参考文献加以确认。
1.4抗肿瘤活性测试:参照文献方法[5],利用流式
细胞术检测荒漠肉苁蓉石油醚提取物对tsFT210
细胞的周期抑制活性。
2 结果
2.1 石油醚提取物化学成分鉴定:经GC—MS联用
仪分析鉴定,荒漠肉苁蓉的石油醚提取物共检出46
个峰,用美国国家标准局NBS库检索,并参考文献
加以确认,共鉴定出25个化合物,占峰面积的
75.03%,结果见表1。结果显示,酯类和烷烃类化合
物为肉苁蓉石油醚提取物的主要成分。其中质量分
数最高的是14一甲基一十五烷酸甲酯(13.61%),其次
为十六烷酸乙酯(12.39%)和2,5,6一三甲基一辛烷
(7.60%)。
2.2抗肿瘤活性:流式细胞术检测结果表明,荒漠
肉苁蓉石油醚提取物在10yg/mL时对tsFT210细
胞有明显的G。/C,期抑制活性(图1)。
表1新鲜肉苁蓉石油醚提取物的化学成分
Table1 Constituentsofpe roleumetherxtract
fromfreshC.deserticola
60
50
{40
姜30
黑20
匾10
0
; .黧 纛I-i
与对照组比较:‘P’P图1 肉苁蓉石油醚提取物在10pg/mL时
对tsFT210细胞周期的抑制作用
Fig.1Inhibitoryeffectofpetroleumetherxtract
at10pg/mLontsFT210cellcycle
3讨论
目前,肉苁蓉的生物活性研究主要集中在改善
记忆、抗衰老、增强机体免疫功能等方面,在抗肿瘤
方面尚无报道。本实验首次利用流式细胞术初步评
价了新鲜荒漠肉苁蓉石油醚提取物对小鼠乳腺癌
tsFT210细胞周期抑制活性,并利用GC—MS对其
化学成分进行分析。在荒漠肉苁蓉石油醚提取物中,
主要为烷烃类和烷酸酯类及少量的酚类和环己酮
万方数据
·508· 中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第4期2005年4月
类化合物,关于这些化合物的抗肿瘤活性尚未见报
道。因此,关于荒漠肉苁蓉石油醚提取物中的抗肿瘤
活性成分,还有待进一步研究才能确定。
致谢:GC—MS由昆明植物所丁靖垲教授测定。
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光轴苎叶药酰胺类生物碱成分的研究
肖新霞1,钱伏刚2,解静2,潘胜利卜
(1.复旦大学药学院生药教研室,上海200032;2.上海医药工业研究院中药室,上海200040)
光轴苎叶茹Piperboehmeriaefolium(Miq.)
C.DC.var.tonkinenseC.DC.,中药名十八症,主
要分布于我国广东、广西、云南、海南、福建等地。茎
叶药用,有祛风散寒、舒筋活络、消瘀散肿、镇痛之功
效,可用于胃寒、经痛、闭经、风湿骨痛、跌打损伤n]。
张可[z1等从光轴苎叶茹地上部分甲醇浸膏中分离得
到11个化合物;笔者在对华南地区胡椒属药用植物
抗抑郁活性的筛选过程中,发现其根及根茎乙醇提
取物的醋酸乙酯萃取部位有显著的抗抑郁活性。本
实验对光轴苎叶药的上述部位进行了化学成分研
究,从中分离到5个酰胺类生物碱:香豆酰酪胺(Ⅳ一
coumaroyltyramine,I),10一氨基一6一羟基一2,3,4~三
甲氧基一菲一1一羧酸内酰胺(stigmalactam,Ⅱ),9一(3,
4垭甲基二氧基苯基)一8E一壬烯酸吡咯烷(tric—
holein,Ⅲ),9一(3,4一亚甲二氧基苯基)一2E,8E一壬二
烯酸吡咯烷(brachyamideB,IV),7一(3,4一亚甲二氧
基苯基)一2E,6E一庚二烯酸吡咯烷(sarmentosine,
V)。以上化合物均首次从光轴苎叶蒴中分离得到,
其中化合物Ⅱ为首次从胡椒科植物中分离得到。
化合物Ⅱ为黄褐色针晶,mp276~278℃,E1一
MSm/z:325(M+),UV入翌拳Hnm:234,253,314。
13C—NMR及1H—NMR显示其含有18个碳,15个氢
(含有奇数个氮原子),其中有3个甲氧基,1个羰
基,结果相对分子质量还多余16(一个氧原子),说
明分子中可能还含有一个羟基,综上推测化合物Ⅱ
分子式为C。。H。。NO。,不饱和度为12,除了3个甲氧
基外,其余碳氢化学位移多处于低场(6c>100.0,
醅>7.00),并且剩下六个氢原子中一个氨基氢,一
个羟基氢,其余四个可能为芳氢,推测Ⅱ结构中有2
或3个苯环相联,一个羰基,并可能形成酰胺结构,
结合文献E3],故1I应属于胡椒属中常见的马兜铃内
酰胺类化合物。经HMBC、HMQC确证为stig—
malactam。此化合物仅Chia等E422000年从番荔枝
科瓜馥木属植物中分离到。其1H~NMR及13C—NMR
数据与作者所测基本一致,但C一1的化学位移存在
较大差异。文献E2]中此类化合物cepharanoneA、
cepharanoneB的8c一1均位于119.0,Ⅱ中因2位甲
氧基取代所造成的屏蔽作用应使C一1向高场移动,
结合HMBC谱氨基氢艿10.37(1H,S)分别与167.7
(C—O)、132.9(C一10)、126.8(C一10a),111.0(C一1)
相关,8c一1为111.0;而文献中占c一,为126.8[4],明显不
合情理,可能是杂质峰形成的却错指为Ⅱ中的碳。
1仪器和材料
熔点仪由Reichert显微熔点仪测定,温度计未
校正;紫外光谱仪为UV一8500型;EI—MS使用
MAT一212磁氏质谱仪;核磁共振仪为Varian
INOVA一400型,TMS为内标;薄层色谱用的是烟
台市芝罘黄务硅胶开发试验厂所产HSGF254高效
板;柱色谱用硅胶为青岛海洋化工有限公司所产化
学纯硅胶H;光轴苎叶药根及根茎购自广西荔浦,并
经本室潘胜利教授鉴定为:光轴苎叶茹P.boehme—
riarfolium(Miq.)C.DC.var.tonkinenseC.DC
收稿日期:2004—07—08
*通讯作者Tel:(021)54237454E—mail:panshengli@online.sh.cn
万方数据
荒漠肉苁蓉石油醚提取物化学成分及其细胞周期抑制活性
作者: 卢克刚, 刘红兵, 顾谦群
作者单位: 中国海洋大学海洋药物与食品研究所,海洋药物教育部重点实验室,山东,青岛,266003
刊名: 中草药
英文刊名: CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年,卷(期): 2005,36(4)

参考文献(5条)
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