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RP-HPLC法测定三七总皂苷中3种皂苷



全 文 :·218· 中草药 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第2期2006年2月
RP—HPLC法测定三七总皂苷中3种皂苷
胡静1,张铁军2,许浚2
(1.天津中医学院,天津300193;2.。天津药物研究院,天津300193)
三七总皂苷是从五加科植物三七Panax
notoginseng(Burk.)F.H.Chen的干燥根中提取
的总皂苷,为三七活血化瘀的主要有效部位,具有活
血祛瘀、通脉活络、改善血液循环的功效,是许多心
脑血管药的主要原料。其中以人参皂苷Rg,、人参皂
苷Rb。、三七皂苷R。最高,常作为其质量控制指标。
目前有关文献报道测定三七单体皂苷的方法有薄层
扫描法、高效液相色谱法等[1~3]。本实验采用一种更
加快速、简便、准确的方法测定三七总皂苷中人参皂
苷Rg。、人参皂苷Rb。、三七皂苷R。,为有效地控制
三七总皂苷的质量提供依据。
1仪器与试药
Dionex高效液相色谱仪,P680四元泵,170U
紫外检测器,ASI一100自动进样器。Chromeleon色
谱工作站。Sartovius十万分之一电子天平,Mettler
Toledo万分之一电子天平。
对照品:三七皂苷R,,人参皂苷Rg。,人参皂苷
Rb。(中国药品生物制品检定所,批号分别为110745—
200312、110703-200322、110704-200318),三七总皂
苷由云南植物药业有限公司生产。乙腈为色谱纯,购
白天津市康科德科技有限公司,水为去离子水。
2方法与结果
2.1 色谱条件:色谱柱:DikmaC。。柱(200mm×
4.6mm,5pm);流动相:乙腈一水线性梯度洗脱:
O~13min(20:80),13~19min(40:60),19~
30min(20:80);体积流量:1mL/min;检测波长:
203am;柱温:35℃。
2.2 系统适应性试验:在上述液相色谱梯度洗脱系
统条件下,所得液相色谱图(图1)中3种被测组分
分离度符合要求,并能将其他皂苷及干扰组分分离。
2.3对照品溶液的制备:精密称取三七皂苷R。、人
参皂苷Rg。、人参皂苷Rb,对照品各4.31、14.68、
12.58mg,分别置10mL量瓶中,加20%乙腈溶解
并稀释至刻度,摇匀,分别作为人参皂苷Rg,、人参
皂苷Rb。、三七皂苷R。的对照品溶液。精密吸取上
述3种对照品溶液各1mL,置5mL量瓶中,加
收稿日期:2005—04—17
A 3
1 .4j。
O 5 10 15 20
B
1
^.
0
1一三七皂苷Rl2一人参皂苷Rg:3-人参皂苷Rbl
1一notoginsenosideR1 2-ginsenosideRgl3-ginsenosideRbl
图1 混合对照品(A)和三七总皂苷(B)的HPLC图
Fig·1HPLCChromatogramsfmixedreference
substances(A)andtotalsapo ins
ofP.notoginseng(B)
20%乙腈稀释至刻度,摇匀,作为混合对照品溶液。
2.4 供试品溶液的制备:称取三七总皂苷约25
mg,精密称定,置25mL量瓶中,加20%乙腈溶解
并稀释至刻度,摇匀,作为供试品溶液。
2.5线性关系及线性范围:取三七皂苷R。对照品
溶液,分别以2、4、8、12、16、20弘L进样,测定峰面
积。以进样量为横坐标,峰面积为纵坐标,进行线性
回归方程;人参皂苷Rg。、Rb。对照品溶液操作同
上,结果见表1。
表1 3种组分线性关系测定结果
Table1 ResultsoflinearrangesofnotOginsenOside
RI,ginsenosideRgl,andRbl
2.6精密度试验:取上述供试品溶液于测定条件下
进样20弘L,重复进样6次,以3种组分峰面积分别
计算,结果三七皂苷R。、人参皂苷Rg。、Rb。的RSD
万方数据
中草菊 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第2期2006年2月·219·
分别为0.66%、0.79%、1.58%。
2.7稳定性试验:取上述供试品溶液分别于0、1、2、
4、6、8h,进样20弘L,测定各组分峰面积,三七皂苷
R。、人参皂苷Rg。、Rb。的RSD分别为0.35%、
0.14%、0.49%,结果供试品溶液在8h内是稳定的。
2.8重现性试验:精称同一批次三七总皂苷6份,
加20%乙腈溶解,制成1mg/mL的供试品溶液,进
样20弘L,以峰面积外标法计算测定质量分数,结果
三七皂苷R。、人参皂苷Rg。、Rb。的RSD分别为
2.02%、2.250/、2.09%。
2.9加样回收率试验:取同一批次三七总皂苷9
份,约1g,精密加入三七皂苷R。对照品63.69、
78.17、92.64pg,人参皂苷Rg。对照品202、342、
388btg,人参皂苷Rb,对照品246、270、363p.g,按供
试品溶液制备处理,测定,计算回收率,结果三七皂
苷R,的平均回收率为101.o%,RSD为2.2%(以=
9);人参皂苷Rg。的平均回收率为98.5%,RSD为
1.8%(7z一9);人参皂苷Rb,的平均回收率为
100.8%,RS;13为2.0%(,z=9)。
2.10样品测定:5批三七总皂苷原料,每批重复测
定2次,结果见表2。
表2三七总皂苷中有效成分测定结果
Table2 Determinationofactivecomponents
intotalsaponinsofP.notoginseng
批号 三七皂苷R-/%人参皂苷Rgl/%人参皂苷Rbl/%
3讨论
3.1 目前多用薄层色谱法、比色法、高效液相色谱
法检测皂苷类成分,但薄层扫描法影响因素多,结果
误差大且费时较长;比色法多用于总皂苷的测定,但
重现性较差;高效液相色谱法使用的检测器有紫外
和蒸发光检测器,而后者还未能普及,紫外检测虽皂
苷类成分为末端吸收但只要选好色谱条件仍能得到
较好的分离。
3.2 本实验曾用甲醇和30%、40%、50%、60%、
100%乙腈水溶液为溶剂溶解对照品和三七总皂苷
原料,结果以甲醇溶解溶剂峰干扰较大,40%以上乙
腈水液溶解色谱图也出现较大干扰峰(100%乙腈中
不能全溶),20%乙腈色谱峰峰强最大且体积分数越
低样品溶解的越好,因此,最终选择以20%乙腈水
溶液为溶剂。
3.3梯度洗脱与等度条件相比要快速、简便。而由
于梯度条件造成的基线漂移较大,通过调整色谱条
件,可得到满意效果。
References:
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notoginsenosideRlandginsenosideRgl,Rbx contentintotal
notoginsenosideof PanaxnotoginesengandXuesaitong
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Panaxnotoginsengh rbusingreversedphasehigh
performanceliquidchromatographicmethodI-J].ChinJA al
Chem(分析化学)。2003,31(6):713-.734.
HPLC法测定复方姜黄降脂片中姜黄素
于得才,符媛媛,李红英,孔令辉
(包头中药有限责任公司,内蒙古包头014040)
复方姜黄降脂片是由姜黄提取物和牡丹皮提取
物组成的复方5类新药,具有行气活血、化瘀通脉之
功效,用于气滞血瘀之高脂血症。姜黄提取物系用超
临界CO。流体萃取技术提取而得,是一类姜黄酚性
色素类成分,其中除主要含有姜黄素外,尚含有去甲
氧基姜黄素(demethoxycurcumin)和二去甲氧姜黄
素(bisdemethoxycurcumin)。姜黄素具有较好的调
血脂、抗氧化、抑制血小板凝聚和增强纤溶活性Ⅲ。
姜黄提取物在方中为君药,因此,本实验建立了
HPLC法测定姜黄素‘2’3]。该法准确,分离效果好,回
收稿日期:2005—04-20
作者简介:于得才(1973一),男,内蒙古赤峰人,工程师,研发中心主任,1999年毕业于内蒙古医学院,主要从事药物制剂及质量标准方
面的研究。Tel:(0472)4616327Fax:(0472)4614397E--mail:yudeeai3000@263.net
万方数据
RP-HPLC法测定三七总皂苷中3种皂苷
作者: 胡静, 张铁军, 许浚
作者单位: 胡静(天津中医学院,天津,300193), 张铁军,许浚(天津药物研究院,天津,300193)
刊名: 中草药
英文刊名: CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年,卷(期): 2006,37(2)
被引用次数: 8次

参考文献(3条)
1.Wang M;Fang Y G;Gao W F Quantitative determination of notoginsenoside R1 and ginsenoside Rg1,Rb1
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Rd in Panax notoginseng herb using reversed phase high performance liquid chromatographic method
2003(06)

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