全 文 ：中草115ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第12期2006年12月·1813·
验，pH8．6时，峰形对称，分离度高，保留时间20
min左右，故选用pH8．6。
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当归的炮制对当归补血汤中活性成分的影响
赵奎君1，钟 萌1，杨恩来1，董婷霞2，詹华强2
(1．首都医科大学附属北京友谊医院，北京100050；2．香港科技大学生物系香港)
当归补血汤为金元四大家之一的李东垣所创，
至今已有近800年的历史，由当归与黄芪两味中药
按照质量比1：5组成，具有补气生血的功效。主治
血虚发热或妇女经期、产后血虚发热头痛之症。原方
中当归要用酒制(酒洗)才可入药。然而现代研究中，
不论是当归补血汤方剂还是由此衍生的成药，如当
归补血丸、当归补血胶囊、当归补血口服液中，当归
都没有要求炮制使用。当归所含阿魏酸、藁本内酯、
当归多糖，黄芪中所含黄芪甲苷、芒柄花素、毛蕊异
黄酮、黄芪多糖为当归补血汤中补血的有效成
分[1’2]。为探讨酒制当归对该方剂的影响，本实验对
当归炮制前后当归补血汤中阿魏酸、藁本内酯、黄芪
甲苷、芒柄花素、毛蕊异黄酮5种活性成分和总多糖
进行了测定，以探讨古方中当归酒制的合理性。
1仪器与试药
日本岛津LC一10Avp高效液相色谱仪，包括
LC一10Avp泵、DADSP —M10Avp紫外一可见光
检测器，C—R6A数据处理机。722G型分光光度计
(上海光学仪器厂)。
黄芪甲苷对照品(中国药品生物制品检定所)，
阿魏酸对照品(Sigma公司)，芒柄花素、毛蕊异黄
酮、藁本内酯对照品由北京大学药学院屠鹏飞教授
提供。右旋糖苷(相对分子质量1×104～2×104，
Sigma公司)。乙腈为色谱纯，其他试剂均为分析纯。
黄芪采自山西，当归采自甘肃岷县，分别经过笔
者鉴定为蒙古黄芪Astragalusmembranaceus
(Fisch．)Bungevar．mongholicus(Bunge)P．K．
Hsiao和当归Angelicasinensis(Oliv．)Diels的干
燥根。
2方法与结果
2．1酒制当归的制备：取生当归饮片200g，加黄酒
20mL，拌匀，文火炒干，得酒制当归180g，得率为
90％。
2．2 生品当归与酒制当归人药的当归补血汤的制
备：将黄芪、生当归和酒制当归粉碎成粗粉，分别按照
质量比1：5混合，总量约30g。加水240mL，加热，
沸腾后保持40min。煎煮2次，滤过，滤液离心，合并
2次上清液，冰冻干燥，即得生当归和酒制当归制备
的当归补血汤样品。另取生当归、酒制当归和黄芪粗
粉同法制备生当归、酒当归、黄芪单味药提取物。
2．3 色谱条件：NOVA—PAKC。8(150mm×3．9
mm，4肚m)色谱柱；流动相：乙腈一水，梯度洗脱。黄
芪甲苷测定：0～15min，8％～30％乙腈；15～45
min，30oA～75％乙腈。芒柄花素、毛蕊异黄酮、阿魏
酸、藁本内酯测定：o～20min，o～6o／／乙腈；20～30
min，6oA～20％乙腈；30～50min，20％～98％乙腈；
体积流量：1mL／min；检测波长：黄芪甲苷为203
nm，芒柄花素、阿魏酸、藁本内酯为280nm，毛蕊异
黄酮为256am；柱温：室温。在选定条件下，上述5
种成分与样品中其他组分色谱峰可达基线分离，相
邻色谱峰分离度大于1．5，当归与黄芪相互无干扰。
色谱图见图1。
2．4对照品溶液的制备及对照品质量分数检查：精
密称取五氧化二磷减压干燥36h的黄芪甲苷、芒柄
花素、毛蕊异黄酮、阿魏酸、藁本内酯对照品适量，分
别加甲醇制成1mg／mL的溶液。将芒柄花素、毛蕊
异黄酮、阿魏酸、藁本内酯对照品溶液稀释10倍，备
用。分别吸取黄芪甲苷对照品溶液及后4种对照品
收稿日期：2006—08—08
作者简介：赵奎君(1959一)，男，满族，辽宁省抚顺市人，教授，硕士研究生导师，长期从事生药学教学及科研工作，在该领域发表论文40
余篇，出版专著3部，获省部级以上奖6项。Tel：(010)63138520E—mail：zha01959@hotmail．com
万方数据
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0 5 10 15 20 25 30
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t／min
1一黄芪甲苷 2一阿魏酸 3一芒柄花素 4一藁本内酯 5一毛蕊异黄酮
1-astragalosideIV 2-ferulicac d3 formononetin4～ligustilide5一calycosin
图1 混合对照品(A)、当归补血汤(生当归)(B)、当归补血汤(酒制当归)(c)、黄芪(D)和生当归(E)HPLC图谱
Fig．1HPLCChromatogramsfmixedreferencessub tances(A)，DangguiBuxueD coct onw thnon—processed
RadixAngelicaeSin nsis(B)，DangguiBuxueDecoctionw thwineprocessedRadixAngelicaeSin nsis(C)，
Astragalusmembranaceusvar．mongholicus(D)，andRadixAngelicaeSin nsis(E)
稀释液、空白试剂各20肛L，注入液相色谱仪，记录色 50mL离心管中，加甲醇20mL，超声提取40min，
谱图。除去甲醇溶剂峰后，按峰面积归一化法计算各 离心后收集上清液，重复提取1次，合并两次提取
对照品质量分数，各对照品质量分数均在99％以上。 液，回收甲醇至干，精密加甲醇2mL溶解，供测定
另精密称取右旋糖苷(105oC干燥至恒重)0．1g，定 芒柄花素、毛蕊异黄酮、阿魏酸、藁本内酯用。
容至100mL量瓶中，得0．1％右旋糖苷储备液。 另精密称取生当归、酒制当归的当归补血汤样
2．5供试品溶液的制备：精密称取生当归、酒制当 品及生当归、酒制当归单味药提取物各0．5g，加水
归的当归补血汤样品及黄芪单味药提取物各2g，溶 2mL溶解，再加95％乙醇使其体积分数达85％。静
解在20mL热水中，用水饱和的正丁醇萃取(20置24h，抽滤。滤饼用70％乙醇洗涤5次，然后溶解
mI．×5)，合并正丁醇萃取液，用氨试液洗涤(80在60℃水中，2000r／rain离心5rain，收集上清液
mI，×2)，再用水洗(100mL×2)，弃去氨试液及水加水定容至100mL量瓶中，供多糖测定。
层，正丁醇液蒸干，残渣精密加甲醇1mL溶解，供 2．6线性关系考察：分别精密吸取黄芪甲苷对照
测定黄芪甲苷用。 品溶液及芒柄花素、毛蕊异黄酮、阿魏酸、藁本内酯
另精密称取生当归、酒制当归的当归补血汤样 对照品稀释液2、4、8、16、32、64肛L，依次注入高效
品及生当归、酒制当归、黄芪单味药提取物各1g，置 液相色谱仪，按上述色谱条件测定峰面积。以峰面积
万方数据
中草菊ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第12期2006年12,El·1815·
积分值为纵坐标，各成分的质量为横坐标，绘制标准
曲线；另精密吸取右旋糖苷储备液0．10、0．50、
1．00、2．00、3．00、4．00、5．00mL分别置100mL量
瓶中，加水至刻度，摇匀，得各系列对照品溶液。精密
吸取系列对照品溶液2．50mL于10mL具塞试管
中，加入5．00mL0．2％蒽酮一浓硫酸显色剂，摇匀，
置沸水浴中加热10min，取出，放至室温，于625nm
波长处进行测定。另取2．5mL蒸馏水同样操作，作
空白对照。各对照品的回归方程、相关系数及线性范
围分别为黄芪甲苷：Y一21496x一29767，r一
0．9997，线性范围0．005～0．2mg／mL；芒柄花素：
y一2×107X+4×106，r一0．9998，线性范围0．01～
0．5mg／mL；毛蕊异黄酮：Y一3×107X+337627，
r一0．9991，线性范围0．01～0．5mg／mL；阿魏酸：
y一1×108X+15675，，．一0．9981，线性范围
0．002～0．1mg／mL；藁本内酯：Y一4×107x+1×
106，，．一0．9964，线性范围0．02～1．0mg／mL；右旋
平行制备供试品溶液5份，进样，测定黄芪甲苷、芒
柄花素、毛蕊异黄酮、阿魏酸、藁本内酯峰面积积分
值。另取生当归制的当归补血汤样品0．5g，平行制
备供测定多糖用的供试品溶液5份，测定多糖的质
量分数。各指标的RSD：黄芪甲苷3．9％，芒柄花素
4．4％，毛蕊异黄酮2．8％，阿魏酸4．7％，藁本内酯
4．6％，多糖3．8％。
2．9稳定性试验：取各供试品溶液，分别于配制后
0．5、1、I．5、2、3、4、6、8、10、12h测定并计算各成分
的质量分数。结果供试品溶液中黄芪甲苷、芒柄花
素、毛蕊异黄酮、阿魏酸、藁本内酯质量分数在12h
内基本稳定，多糖质量分数在2h内稳定，RSD分
别为1．54％、1．23％、0．82％、0．50％、2．12％。
2．10回收率测定：精密称取3批已知各成分量的生
当归制备的当归补血汤样品各5份，其中供测多糖的
样品每份0．5g，测黄芪甲苷的样品每份2．0g，测其
余4个成分的样品每份1．0g。样品分别加入右旋糖
糖苷：y一7．07×10_3X+6．72×10～，，．一0．9994， 苷对照品4．0mg、黄芪甲苷及芒柄花素、毛蕊异黄
线性范围0．01～o．11mg／mL。 酮、阿魏酸、藁本内酯对照品各1．0mg，制备供试品
2．7精密度试验：分别精密吸取黄芪甲苷对照品溶 溶液，测定，计算回收率。结果各成分的平均回收率分
液及芒柄花素、毛蕊异黄酮、阿魏酸、藁本内酯对照 别为右旋糖苷97．5％，黄芪甲苷96．8％，芒柄花素
品稀释液20肚L，重复进样6次，测定各成分峰面99．1％，毛蕊异黄酮98．3％，阿魏酸97．6％，藁本内
积。另取当归补血汤多糖测定样品液2．50mL，重复 酯99．6％，RSD在0．82％～3．23％。
进样5次，测定吸光度值。结果黄芪甲苷、芒柄花素、 2．11样品测定：分别精密吸取对照品和供试品溶
毛蕊异黄酮、阿魏酸、藁本内酯峰面积的RSD分别 液，注入液相色谱仪，测定黄芪甲苷及芒柄花素、毛
为2．6％、2．5％、1．7％、1．9％、1．87％，多糖吸光度蕊异黄酮、阿魏酸、藁本内酯峰面积，按外标法计算，
值的RSD为2．8％。 即得。精密量取供试品溶液2．50mL，比色测定，计
2．8重现性试验：取生当归制的当归补血汤样品， 算样品中多糖的量。结果见表1。
表1 当归补血汤中各活性成分的测定结果(mg·g-i生药，拜一5)
Table1 Determinationof ctivecompositionsinDa gguiB xueD coction(mg·g—crudedrug，露一5)
供试品 黄芪甲苷 芒柄花素 毛蕊异黄酮 阿魏酸 藁本内酯 总多糖
。与生当归制备的当归补血汤相比，具有显著性差异(Pdo．01)
。DifferencebycomparingtoDBTwithunprocessedRadixAngelicaeSin nsisi significant(P
结果表明，当归酒制后，其阿魏酸和总多糖的量 本内酯的量均明显降低。中医认为，挥发油类物质性
明显上升，而藁本内酯的量显著降低。而采用酒制当 燥，对人体具有刺激性。藁本内酯是当归挥发油中的
归入药的当归补血汤中黄芪甲苷、芒柄花素、毛蕊异 主要成分，当归炮制后入药，藁本内酯的量下降，可
黄酮、阿魏酸、总多糖的量均有提高，其中，黄芪甲 以减少其对身体的刺激性，更有利于当归补血汤的
苷、毛蕊异黄酮、阿魏酸、总多糖的量与生当归入药 补气生血作用的发挥。
的当归补血汤相比，具有显著性差异。 从上述实验结果看，李东垣在当归补血汤中使
*oo
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pO
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)，制生酒汤汤血血
归补补归当
归归当制芪当当生酒黄
万方数据
·1816· 中草菊ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第12期2006年12月
用酒制当归是合理的。因此，建议当归补血汤及其制
剂应该遵循古人的用药经验，使用酒制当归。
仅仅从活性物质的量上研究炮制对当归补血汤
的意义尚不全面。为此，笔者利用细胞生物学方法对
当归酒制前后当归补血汤的生物活性做了比较，结
果将在后续论文中报道。
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Chem(分析化学)，2006，34(2)：196—199．
正交试验优选元宝枫果壳中鞣质的提取工艺研究
陈大全h2，王昌利1，王剑波2，王四旺2
(1．陕西中医学院药学系，陕西咸阳712046；2．第四军医大学药物研究所，陕西西安710023)
元宝枫Acert uncatumBunge系槭树科槭树属
植物，在我国黄河中下游广为分布。民间用于除湿祛
风，治疗关节疼痛、骨折、跌打损伤等。元宝枫种皮和
果翅中的鞣质具有明显的镇静、催眠、镇痛、抗凝血
和止泻作用[1]。元宝枫果皮、种皮含缩合鞣质约
60％。元宝枫鞣质作为抗脑血栓新药的研究具有广
阔前景，因此本实验对元宝枫中鞣质的提取工艺进
行研究。
1仪器和材料
德国SartoriusR200D十万分之一电子分析天
平，250LH超声波清洗仪(上海科岛超声仪器有限
公司)。
元宝枫果壳药材由陕西杨凌元宝枫药业公司提
供，经自然干燥后，用粉碎机研成细粉，过50目筛，
室温保存备用，药材经西北农林科技大学王性炎教
授鉴定。丙酮等试剂均为分析纯。
2方法和结果
2．1 因素和水平的确定：根据预试验和鞣质对热的
不稳定性特点，选取不同体积分数的丙酮水溶液
(A)、加入溶剂的倍量(B)、回流提取时间(C)和提取
次数(D)为因素，每个因素各设置3个水平，见表1。
表1因素与水平
Table1 Factorsandlevels
2．2 干膏收率的测定：取正交试验所得提取液适量
置已干燥至恒重的100mL蒸发皿中，水浴蒸干后，
置烘箱内105。C干燥3h，取出置干燥器内冷却30
min，迅速精密称定质量，计算，即得。
2．3鞣质的测定[2’3]：精密称取除杂的干浸膏，加去
离子水约150mL，80℃水浴上加热30min，精密吸
取1mol／L醋酸锌溶液20mL，置500mL量瓶中，
加氨水14mL，摇匀，使白色沉淀溶解，35‘C水浴温
热30min。取出冷却至室温，摇匀后滤过，弃去初滤
液。取上述滤液，精密吸取20mL于500mL三角烧
杯中，加去离子水300mL，氨一氯化铵缓冲液(pH
10)25mL，铬黑T指示剂少量，摇匀，用标定过的
EDTA一2Na标准液滴定至溶液由紫红色变为蓝绿
色，结果再做空白校正，计算鞣质的提取率。
鞣质的提取率一0．1556×25×(yl—Vz)×M／W×100％
0．1556为滴定的锌离子的消耗量与鞣质量的关系常数，V，
为空白对照所消耗的EDTA一2Na的体积，yz为样品所消耗
的EDTA一2Na的体积，M为EDTA一2Na标准溶液的质量浓
度，Ⅳ为元宝枫果壳取样量
2．4正交试验结果：取元宝枫果壳10g，9份，每
份平行设置2份，按L。(34)正交设计表条件进行试
验，以干膏收率和鞣质的提取率作为指标，结果见表
2。方差分析见表3。
方差分析表明，因素D(提取次数)为主要影响
因素，具有显著性，因素C(回流提取时间)次之，因
素A(提取溶剂的体积分数)和因素B(溶剂用量)不
明显，无显著性；干膏收率影响因素依次为D>C>
A>B，鞣质提取率影响因素顺序依次为D>C>
收稿日期：2006—02—10
作者简介：陈大全(1981一)，男，山东潍坊人，在读硕士，从事中药新技术与新剂型研究。
Tel：(029)38183793E—mail：cdql981@126．con
万方数据
当归的炮制对当归补血汤中活性成分的影响
作者： 赵奎君， 钟萌， 杨恩来， 董婷霞， 詹华强
作者单位： 赵奎君,钟萌,杨恩来(首都医科大学附属北京友谊医院,北京,100050)， 董婷霞,詹华强(香
港科技大学,生物系,香港)
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2006,37(12)
被引用次数： 3次
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本文读者也读过(10条)
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qi 当归炮制历史沿革研究[期刊论文]-中国实验方剂学杂志2010,16(3)
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与临床 2008(6)
2.田霞 丹莪妇康煎膏对人工流产术后疗效及联合用药情况分析[期刊论文]-医学信息（中旬刊） 2010(10)
3.陈慧珍 当归的研究进展[期刊论文]-海峡药学 2008(8)
本文链接：http://d.wanfangdata.com.cn/Periodical_zcy200612021.aspx