全 文 ：中草115ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第8期2006年8月·1175·
三七不同炮制品中皂苷类成分的测定
覃洁萍1，张广征2，张替祷H，卫锡锦2，张炜¨，刘 雯p
(1．广西中医学院，广西南宁530001；2．广西药物研究所，广西南宁530022)
三七为五加科植物三七Panaxnotoginseng
(Burk．)F．H．Chen的干燥根，为临床常用贵重中
药材，其主要成分有人参皂苷Rg，、Rb。及三七皂苷
R，等多种皂苷类成分，另含止血活性成分三七氨酸
及少量黄酮类成分[1]。在民问及历代医方本草和炮
制专著中记载有多种三七的炮制方法，如油炸法、蒸
制法等。传统中医及民间对三七均有“生撵熟补”之
说，即认为生三七有止血祛瘀、消肿活血、镇痛之效，
而熟三七则有补气补血、强身健体、促进发育之
功乜~4]。本课题研究小组通过多种药效学实验模型
研究证实，用蒸制法炮制的三七饮片具有较好的补
血强身作用，并通过药效学实验筛选出了具有最佳
补血强身作用的三七炮制工艺条件为105℃高温、
高压蒸制1．5h。
本实验采用高效液相色谱法测定了不同炮制工
艺的三七炮制品中人参皂苷Rg，、Rb，及三七皂苷
R。3种皂苷类成分，并对不同炮制方法对三七皂苷
类成分的影响进行了对比分析，为不同三七炮制饮
片质量标准的制定和f|缶床应用提供科学依据。
1仪器与试药
Agilent1100高效液相色谱仪，含在线真空脱
气机(G一1322A)、高压四元梯度泵(G一1311A)、标
准自动进样器(G一1313A)、智能化柱温箱(G一
1316A)、可变波长紫外检测器(G一1314A)、二极管
阵列紫外检测器、Agilent1100series色谱工作站。
Millipore超纯水系统；LGl6一w型离心沉淀机(dk
京医用离心机厂)。
三七产自广西靖西县，经南宁市药材站陆善旦
副主任药师鉴定，并按传统炮制方法进行炮制[4]。人
参皂苷Rg，对照品(批号0703—200221)、三七皂苷
R。对照品(批号110745—200312)及人参皂苷Rb。对
照品(批号110704—200216)均由中国药品生物制品
检定所提供。乙腈为色谱纯，甲醇为分析纯。
2方法与结果
2．1色谱条件及色谱适用性试验：色谱柱：日本岛
津Shim—PackCLC一0DS(150mm×6．0mm)；柱
温：25℃；检测波长：203nm；体积流量：1．0mL／
rain；进样量：20肚L；流动相为乙腈(A)一水(B)，采用
梯度洗脱，0～70rain，A—B(19：81)，70～80min，
A—B(36：64)。理论塔板数以人参皂苷Rg，峰计不
少于8000。色谱图见图1。
2．2供试品溶液的制备：取不同方法炮制的三七药
材样品粉末(过四号筛)约0．6～1g，精密称定；精密
加入甲醇25mL，称定质量，置80℃水浴上回流2
h，放冷，再称定质量，用甲醇补足减失的质量，摇匀，
离心，微孔滤膜(o．45肛m)滤过，取续滤液，即得。
2．3混合对照品储备溶液的制备：精密称取干燥至
恒重的人参皂苷Rg，、Rb。和三七皂苷R。对照品
10．29、8．14、2．10mg置lomL量瓶中，加甲醇溶
解并稀释至刻度，摇匀，作为混合对照品储备溶液。
2．4线性关系考察：分别精密吸取混合对照品储备
液2、3、5、7、10、15、18、20弘L，在上述色谱条件下进
样测定。以进样量(x)对蜂面积的积分值(y)进行线
性回归，结果三七皂苷R，在0．4203．15弘g与其
峰面积之间呈良好的线性关系，其线性回归方程为：
y一295．6x一5．077，r一0．9999；人参皂苷Rgl在
2．06～18．5P-g与其峰面积之间呈良好的线性关
系，其线性回归方程为：Y一338．2X+9．393，r一
0。9995；人参皂苷Rb，在1．63～16．3lug与其峰面
积之间呈良好的线性关系，其线性回归方程为：y=
260．6X+5．963，r一0．9996。
2．5精密度试验：取同一份105℃蒸1．5h的三七
炮制品(批号E20040321)供试品溶液，连续进样6
次，每次20肛L，进样测定，结果人参皂苷Rg，、人参
，和三七皂苷R。峰面积的RSD分别为
1．3％、1．7％和1．4％。
2．6稳定性试验：取同一份105℃蒸1．5h的三七
炮制品(批号E20040321)供试品溶液，在0、3、7、
收稿日期：2005—10-20
基金项目：广西科技厅科技攻关项目(桂科攻0322024—4A)
作者简介：覃洁萍(1962一)，女，教授，主要研究方向是中药分析与质量控制。
Tel：(0771)2219877E—mail：chinaqip6380@yahoo．com．ell
*广西中医学院中药专业研究生
万方数据
·1176· 中草菊 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第8期2006年8月
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1一三七皂苷Rl2一人参皂苷Rgl3-人参皂苷Rbl
1一notoginsenosideRI 2-ginsenosideRgl3-ginsenosideRbl
图1 混合对照品(A)、三七生品(B)、油炸品(C)、黑豆汁蒸制7h炮制品(D)、常压蒸制4h炮制品(E)和105℃
高温高压蒸制1．5h的炮制品(F)的HPLC图谱
Fig．1HPLCChromatogramsofmixedreferencesubstance(A)，rawP．notoginseng(B)，deep—fry
processedP．notoginseng(C)，P．notoginsengsteamedwithblackb anjuicefor7h(D)，
P．notoginsengst amedfor4hundernormalpressure(E)，andP．notoginseng
steamedfor1．5hat105℃underhightemperaturendhighpressure(F)
12、19、24h分别进样测定，结果人参皂苷Rg，、人参 苷R，、人参皂苷Rg。及Rb，3种皂苷类成分的质量
皂苷Rb，和三七皂苷R，峰面积的RSD分别为分数，结果见表1。
1．5％、2．2％和2．0％，表明供试品溶液常温下在24 表1样品测定结果(辟一3)
h可保持稳定。Table1 Resultsofsampledetermination(露一3)
2．7重复性试验：取同一批105。C蒸1．5h的三七
炮制品(批号E20040321)6份，制备供试品溶液，测
定，结果三七皂苷R。、人参皂苷Rg。和人参皂苷Rb。
的平均质量分数分别为3．22、15．53、17．90mg／g，
RSD分别为1．8％、1．5oA、2．3％。
2．8加样回收率试验：精密称取干燥至恒重的三七
皂苷R。、人参皂苷Rg，及人参皂苷Rb。对照品
1．97、9．97、12．13mg置10mL量瓶中，加甲醇溶
解并稀释至刻度，摇匀；精密吸取上述溶液5mL，加
甲醇稀释至10mL，摇匀，作为混合对照品溶液备
用。精密称取已知三七皂苷R，、人参皂苷Rg。和人
参皂苷Rb。质量分数的三七炮制品(批号
E20040321)细粉适量，分别准确加入上述混合对照
品溶液2．5、3．0、3．5mL，制备供试品溶液，测定，计
算回收率。结果得人参皂苷Rg，、人参皂苷Rb，和三
七皂苷R，平均回收率分别为98．9％、98．7％和
98．5％，RSD分别为2．4％、1．3％和2．6％(咒一9)。
2．9三七不同炮制品中主要皂苷类成分的测定：分
别取各种不同的三七炮制品样品粉末(过四号筛)适
量，精密称定，制备供试品溶液。分别取供试品溶液
和稀释后的混合对照品溶液20肛L，注入高效液相
色谱仪，根据测得的相应峰面积计算样品中三七皂
2．10三七不同炮制品主要皂苷类成分的相对质量
分数对比：将以上各种不同三七炮制品中三七皂苷
R，、人参皂苷Rg。及Rb，3种皂苷类成分进行对比，
可见三七经炮制后各种皂苷类成分总体均有不同程
度降低，但其中人参皂苷Rg，及Rb，的量与三七皂
苷R，量相比，其相对质量分数却有不同程度提高；
对比相关药效学实验结果，可见三七经蒸制后补益
作用增加与炮制后人参皂苷Rg。及Rb。相对质量
分数的增加具有一定相关性，见表2。
3讨论
三七药材所含成分复杂，特别是其所含皂苷成
分结构相似，等度洗脱分离效果较差，故采用梯度洗
脱方式。经过多次实验摸索，确定采用乙腈一水系统，
梯度洗脱方式；在此色谱条件下，80rain内可使大
万方数据
中草菊 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第8期2006年8月·1177·
表2三七不同炮制品中主要皂苷类成分的
相对质■分数对比
Table2 Comparisonofrelativesaponinsindifferent
processedpro uctsofP．notoginseng
部分色谱峰得到基线分离，并且得到的色谱峰形较
好，结果较为稳定。
实验结果显示，经炮制后三七中主要皂苷类成
分三七皂苷R，、人参皂苷Rg。及Rb。的量均有不同
程度降低，但炮制后人参皂苷Rg。及Rb。相对质量
分数增加。其中高温高压蒸制(如105℃蒸制1．5h
及110℃蒸2h)或常压蒸制时间越长(如常压蒸制
8．5h)，主要皂苷类成分的量降低越多；但用油炸或
黑豆汁蒸制的炮制法皂苷类成分的量降低相对较少。
将不同三七炮制品的HPLC图谱与未经炮制
的三七生品的HPLC图谱进行比较，可见油炸、黑
豆汁蒸制7h、常压蒸制4h的三七炮制品的HPLC
图谱多出了2个小峰；而105℃蒸制1．5h的三七
炮制品的HPLC图谱比三七生品的HPLC图谱多
出了3个小峰，其色谱图与其他炮制品的图谱相比
也有较大差别。这些成分的产生以及蒸制后皂苷类
成分的变化与药效学实验结果证实其具有最佳补血
强身作用，三七炮制条件及传统中医认为的三七“生
撵熟补”之说可能存在一定的联系，待进一步探讨。
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正交设计优选罗布麻叶中总黄酮提取工艺
杨志芳1’3，王维娜2，杨坤3，吴琳琳2，杨新波4，黄正明3+
(1．军事医学科学院，北京 100850；2．中国科学院生态环境研究中心，北京100850；3．中国人民解放军302医院
药学部，北京100039；4．中国人民解放军总医院老年医学研究所，北京100853)
罗布麻ApocynumvenetumL．为夹竹桃科植
物，又名红麻，是生长在盐碱沙荒地区的野生植物。
我国罗布麻的资源非常丰富，用罗布麻叶作茶饮及
药用有悠久的历史。《中国药典>>2005年版也有记
载：“平肝安神，清热利水，用于肝阳眩晕，心悸失眠，
浮肿尿少，高血压，神经衰弱，肾炎浮肿”。现代药理
学研究认为其可预防和治疗老年高血压、感冒、气管
炎，对增强机体抗病能力有一定的作用，为延年益
寿，养生之药口]。罗布麻叶中主要含有金丝桃苷、异
槲皮素、槲皮素一3—0一槐糖苷、芸香苷、槲皮素等黄酮
类成分[2]，为进一步开发和利用野生植物资源，本实
验进行了罗布麻叶中总黄酮最佳提取工艺的研究。
1仪器与试药
罗布麻叶购于北京绿野药业公司，经安徽天科
药物研究所王先荣教授鉴定为夹竹桃科植物罗布麻
叶A．venternL．的干燥叶，粉碎，备用。芦丁对照品
购于中国药品生物制品检定所(批号0080—9705)。
试剂均为分析纯。
FA一2004电子天平(上海天平仪器厂)，UV一
3400紫外分光光度计(日本日立公司)，752型紫外
分光光度计(上海第三分析仪器厂)。
2方法与结果
2．1 因素及水平考察：根据罗布麻总黄酮的理化性
质，选择提取次数、乙醇体积分数、提取时间和乙醇
收稿日期：2005—12—08
作者简介：杨志芳(198l一)，女，山西朔州怀仁县人，军事医学科学院硕士研究生，研究方向为中药药理及新药研发。
E—mail：yangzf710@126．com
*通讯作者黄正明Tel：(010)66933233E—mail：Huang—zhengming@sohu．tom
万方数据
三七不同炮制品中皂苷类成分的测定
作者： 覃洁萍， 张广征， 张赟赟， 卫锡锦， 张炜， 刘雯
作者单位： 覃洁萍,张赟赟,张炜,刘雯(广西中医学院,广西,南宁,530001)， 张广征,卫锡锦(广西药物
研究所,广西,南宁,530022)
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2006,37(8)
被引用次数： 2次

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术-中医药现代化 2013(2)
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