全 文 ：中草菊ChineseTraditionalandHerbalDrugs第38卷第7期2007年7月
岩黄连注射液的HPLC指纹图谱研究
罗远秀+，文东旭’，蒋受军，蒋及年，许有诚，谢培德，曾祥林
(广西食品药品检验所，广西南宁530021)
摘 要：目的建立岩黄连注射液的HPLC指纹图谱，用于控制产品的质量。方法采用HPLC法。Shim—pack
CLC—ODS色谱柱(150mm×6．0mm，5pm)，乙腈一缓冲溶液(1。1)梯度洗脱，体积流量为1mL／min，检测波长
285am。中药色谱指纹图谱相似度评价系统的操作规范(版本2004A)计算。结果13批岩黄连注射液的相似度均
在0．95以上，确定了12个共有峰，建立了该注射液HPLC指纹图谱。结论本法可作为岩黄连注射液质量控制
方法。
关键词：岩黄连注射液；指纹图谱；高效液相色谱
中图分类号：R286．02 文献标识码：B 文章编号：0253—2670(2007)07—1007一03
HPLCFingerprintofYanhuanglianInjections
LUOYuan—xiu，WENDong—XU，JIANGShou—jun，JIANGJi—nian，XUYou—cheng，
XIEPei-de，ZENGXiang—lin
(GuangxiInstituteforFoodandDrugControl，Nanning530021，China)
Abstract：ObjectiveToes ablishtheHPLCfingerprintforthequalitycontrolofYanhuanglianInjec—
tions．MethodsHPLCChromatographymethodwasused．TheconditionsincludedaShim—packCLC—ODS
column(250mm×6．0mm，5肚m)，thegredientlutionwasadoptedwithacetonitrile—buffersol tion
(1：1)，thedetectionwavelengthwasat285nm，andtheflowratewas1．0mL／min．TheOperatingSta —
a盯ao}SimilartyEvaluationSystemforChromatographicFingerprintofChineseMateHaMedica(Version
2004A)wasusedtocalculate．ResultsSimilarityof13batchesofinjectionswasover0．95，thefinger—
printofYanhuanglianInjectionswase tablished，and12commonpeakswereindicated．CoaclusionThis
methodcanbeappliedtothequalitycontrolofYanhuanglianInjections．
Keywords：YanhuanglianInjectio s；fingerprints；HPLC
岩黄连注射液为广西河丰药业有限公司生产的
全国独家品种，由岩黄连单味药材经提取总生物碱
制成的单方制剂，用于急慢性肝炎属肝胆湿热证
者[1]。为了更好地控制岩黄连注射液的质量，本实验
采用HPLC法对岩黄连注射液进行指纹图谱研究，
建立了岩黄连注射液指纹图谱分析方法。
1仪器与试药
Waters515泵、Waters996二极管阵列检测器、
WatersM32色谱工作站、717自动进样系统。乙腈为
色谱纯，其他试剂均为分析纯。脱氢卡维丁对照品由
广西河丰药业有限公司提供，经HPLC归一化测定
其质量分数为99．32％，岩黄连注射液由广西河丰
药业有限公司提供。
2方法与结果
2．1 色谱条件：色谱柱为Shim—packCLC—ODS柱
收稿
基金
作者
(150mm×6．0mm，5肛m)；流动相：乙腈一磷酸盐
缓冲液[o．05mol／L庚烷磺酸钠一0．05mol／L磷酸
二氢钾(1：1)，含0．2％乙二胺，用磷酸调pH3．01，
线性梯度洗脱，0～130min，乙腈一磷酸盐缓冲液
(20：80)，130～140min，乙腈一磷酸盐缓冲液
(27：73)，140～160min，乙腈一磷酸盐缓冲液(20：
80)；体积流量：1mL／min；检测波长：285nm。
2．2溶液的制备
2．2．1供试品溶液的制备：取岩黄连注射液作为供
试品溶液。
2．2．2 阴性样品溶液的制备：除岩黄连提取物外，
按处方比例称取各辅料，按岩黄连注射液的制备工
艺制成100mL，作为阴性样品溶液。
2．2．3参照物溶液的制备：精密称取脱氢卡维丁对
照品17．74mg，置50mL量瓶中，加pH(3．8士0．5)
日期：2006—09—21
项目；广西科学基金资助项目(0448046)I广西“新世纪十百千人才工程”专项资金资助项目(2003226)
简介：罗远秀(1964一)，女，广西合浦县人，副主任药师，主要从事药品分析检验、药品质量控制方法的制订及新药开发，现调至广
西食品药品监督管理局药品认证审评中心从事认证审评工作。Tel：(0771)5886193E—mail：luoyx@gxfda．gov．ca
现调至广西食品药品监督管理局药品认证审评中心工作
万方数据
·1008· 中草菊、ChineseTraditionalandHerbalDrugs第38卷第7期2007年7月
的水溶液约35mL，热水浴加热溶解，并用pH3．8
的水溶液稀释至刻度，即得。
2．3 阴性样品的影响：取阴性样品溶液10_uL，注
入液相色谱仪，记录180min色谱图，结果在保留时
间5min前有小峰，故使用中药色谱指纹图谱相似
度评价系统的操作规范(版本2004A)处理图谱时，
要扣除保留时间5min前的色谱峰。
2．4记录时间的确定：取供试品溶液10弘L注入液
相色谱仪，记录180min的色谱图，结果140min后
不再出峰，故记录色谱时问定为140min。
2．5方法学考察
2．5．1精密度试验：取批号040803样品，连续注入
液相色谱仪6次，每次10pL，记录色谱图，经中药
色谱指纹图谱相似度评价系统的操作规范(版本
2004A)计算，6张图谱之间的相似度均为1，说明测
定方法的精密度很好。
2．5．2稳定性试验：取批号040803样品，分别于
0、3、6、12、18、24、30、36h测定，测定结果经中药色
谱指纹图谱相似度评价系统的操作规范(版本
2004A)计算，相似度均为1．000，RSD为0，说明本
品启封后在36h内是稳定的。
2．5．3重现性试验：取批号040803样品5份，各取
10肛L注入液相色谱仪，记录140min色谱图，经中
药色谱指纹图谱相似度评价系统的操作规范(版本
2004A)计算，图谱之间的相似度均为1。
2．6 指纹图谱的建立与相似度分析：取注射液13
批，每批2份，各进样10弘L记录140rain色谱图，同
时取参照物溶液10弘L绘制色谱图，把13批注射液
26张色谱图导人中药色谱指纹图谱相似度评价系统
的操作规范(版本2004A)软件，选择时间窗0．9，生
成色谱的方法为平均值，对保留时间5～140min的
色谱峰进行多点校正后，自动匹配，匹配后色谱图见
图1，生成的注射液对照指纹图谱见图2，有12个共
有峰(1～11和S)，其中S为脱氢卡维丁参照峰。各
批注射液与对照指纹图谱比较相似度在0．954～
0．991，平均值为0．977，RSD为1．27％，见表1。
3讨论
本实验采用药典会出版的中药色谱指纹图谱相
似度评价系统的操作规范(版本2004A)软件对色谱
图直接进行相似度计算，与采用人工分析法相比，具
有简便、准确、省时等优点。
色谱柱选择：选用了三根不同生产厂家的色谱
柱：NucleodurC】8G avity(250mm×4．6mm，5
tzm)(德国Macherey—Nagel公司)；LunaC18(2
0 20 40 60 80 100 120 140
t／rain
图1 13批样品匹配后的26张色谱图
Fig·126Matchedehromatograms
for13batchesofsamples
S
。-一互．L黝纽 11㈨．^．一
10 20 40 60 80 100 120
t／min
图2岩黄连注射液的对照指纹图谱
Fig．2HPLCReferencefingerprint
ofYanhuanglianInjections
表1 13批注射液与注射液对照指纹图谱比较的相似度
测定结果(撑一2)
Table1 Similarityof13batchesofinjectionsandrefer—
encefingerprintofYanhuanglianInjections
(挖一2)
批号 相似度 批号 相似度
030602 0．982 040109 0．972
030603 0．991 040204 0．980
030901 0．958 040801 0．991
030902 0．961 040802 0．954
030903 0．979 040803 0．981
031105 0．990 040804 0．989
040107 0．977
(250mmx4．6mm，5肛m)(美国Phenomenenex公
司)；Shim—packCLC—ODS(150mm×6．0mm，
5弘m)(日本岛津公司)进行试验筛选，比较分离度、
峰形和柱效，结果Shim—packCLC—ODS(150mm×
6．0mm，5肛m)较为适合。
流动相的选择：选用了乙腈一水(1：1，内含
0．34％磷酸二氢钾和0．17％十二烷基硫酸钠)、乙
腈一0．05mol／L磷酸二氢钠溶液(用磷酸调pH3．O)
(25：75)，结果峰形和分离度不好，选用乙腈一磷酸
万方数据
中草焉ChineseTraditionalandHerbalDrugs第38卷第7期2007年7月·1009·
盐缓冲液[o．05mol／L庚烷磺酸钠一0．05mol／L磷
酸二氢钾(1：1)，含0．2％乙二胺，用磷酸调pH
2．2、2．5、2．8、3．0、3．5、4．o]不同的比例和不同的梯
度，结果以乙腈一磷酸盐缓冲液[o．05mol／L庚烷磺
酸钠一0．05mol／L磷酸二氢钾(1：1)，含0．2％乙二
胺，用磷酸调pH3．o]按色谱条件的梯度运行洗脱
最好，分离度、峰形和柱效均满意。
检测波长的选择：岩黄连注射液的成分比较
多，已知的成分有脱氢卡维丁等。脱氢卡维丁在
230、270、347nm处有最大紫外吸收峰，其他成分分
别在205、233、240、270、285、290、347、355nm处
有最大紫外吸收峰。取注射液10肛L，注入液相色谱
仪，采用二极管阵列检测器分别检测上述波长，结果
以285nm为检测波长检出的峰数较多，其分离度、
峰形和柱效及出峰的稳定性较为满意，故选择285
nm为检测波长。
注射液的质量与药材、中问体提取物密切相关，
特别是药材的质量，有关注射液与药材及其提取物
中间体指纹图谱的相关性研究正在进行中。
Reference：
[13 RenZX．AnalysisonacupuncturewithYanhuangliani“
treatmentof33caseswithvirushepatitis口]．ClinFocus(临
床荟萃)，2003，18(2)：94．
HPLC法测定参芪颗粒中人参皂苷Rg。和Re
孙艳，张卫同，陈海滨，王羽凝，周晓兵
(解放军总医院药品保障中心，北京 100853)
摘要：目的建立参芪颗粒中人参皂苷Rg。Re的HPLC测定方法。方法采用HPLC法，ChromasilC。。色谱柱
(250mm×4．6ram)，乙腈一0．05％磷酸溶液(21。79)为流动相，体积流量1mL／min，检测波长：203nm。结果在
30min内能基线分离人参皂苷Rg-和Re，平均加样回收率分别为人参皂苷Rg。99．60％，RSD为1．93％(n一5)；人
参皂苷Re98．58％，RSD为2．31％(咒=5)。结论所建立的方法可准确快速地进行定量检测，可用于参芪颗粒的
质量控制。
关键词：参芪颗粒；人参皂苷Rg，；人参皂苷Re；高效液相色谱
中图分类号：R286．02 文献标识码：B 文章编号：0253—2670(2007)07—1009一02
DeterminationofginsenosideRglandReinShenqiGranulabyHPLC
SUNYan，ZHANGWei—tong，CHENHai—bin，WANGYu—ning，ZHOUXiao—bing
(EnsureCenterofDrug，GeneralHospitalofPLA，Beijing100853，China)
Abstract：ObjectiveToes ablishanHPLCmethodf rthedeterminationofginsenosidesR91andRe
inShenqiGranula．MethodsChromasilC】8column(250mm×4．6mm)wasusedwithacetonitrile一
0．05％phosphoricacidsolution(21：79)asmobileph e．Theflowratewas1mL／mina dthedetected
wavelengthwas203nm．ResultsGinsenosidesRg】andRecouldbebaselineseparatedwithin30min．
Theaveragerecoveryrateswere99．60％and98．5％，correspondingRSDwere1．93％and2．31％forgin—
senosideR91andRe，respectively(，z=5)．ConclusionThismethodiSfa tandaccuratendcanbeused
forqualitycontrolofShenqiGranula．
Keywords：ShenqiGranula；ginsenosideR91；ginsenosideRe；HPLC
参芪颗粒是由人参、黄芪、制首乌等药材加工制
备而成的制剂，具有免疫调节作用和抗疲劳作用。为
了控制本品的质量，本实验采用HPLC法测定了人
参皂苷R91、Re。
1实验材料
Agilent1100高效液相色谱仪(含DAD检测
收稿日期：2007—03—12
器、柱温箱)，BPll0S分析天平(德国Sartorius公司
生产)。
人参皂苷Rg。、Re由中国药品生物制品检定所
提供；乙腈为色谱纯，其他试剂均为分析纯。各药材
购自北京同仁堂，参芪颗粒为本院自制制剂。
2方法与结果
万方数据
岩黄连注射液的HPLC指纹图谱研究
作者： 罗远秀， 文东旭， 蒋受军， 蒋及年， 许有诚， 谢培德， 曾祥林， LUO Yuan-xiu，
WEN Dong-xu， JIANG Shou-jun， JIANG Ji-nian， XU You-cheng， XIE Pei-de， ZENG
Xiang-lin
作者单位： 罗远秀,文东旭,LUO Yuan-xiu,WEN Dong-xu(广西食品药品监督管理局药品认证审评中心)
， 蒋受军,蒋及年,许有诚,谢培德,曾祥林,JIANG Shou-jun,JIANG Ji-nian,XU You-
cheng,XIE Pei-de,ZENG Xiang-lin(广西食品药品检验所,广西,南宁,530021)
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2007,38(7)
被引用次数： 2次

参考文献(1条)
1.Ren Z X Analysis on acupuncture with Yanhuanglian in treatment of 33 cases with virus hepatitis
2003(02)

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引证文献(2条)
1.程谊 中药指纹图谱在质量评价中的作用概述[期刊论文]-中国中医药信息杂志 2008(6)
2.黄茂春.谢丽莎.李娉 岩黄连化学成分分析及临床应用研究进展[期刊论文]-中国民族民间医药 2010(9)


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