全 文 :中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第38卷第2期2007年2月·283·
川产藏药材不同产地红毛五加多糖的比较
刘 圆,孟庆艳,彭镰心,吴远波,安 静
(西南民族大学少数民族药物研究所,四川I成都610041)
红毛五加为五加科五加属植物红毛五加Acan—
thopanaxgiraldiiHarms的干燥茎皮。资源丰富,广
泛分布于四川、甘肃、青海、宁夏等地,其中四川为该
药材的主要产区。其茎皮入药,有祛风除湿、强筋壮
骨之功效。红毛五加含有多种皂苷成分[1],其多糖[21
和挥发油量也较高[3]。主治风寒湿痹、足膝无力
等[4]。对免疫系统、中枢神经系统等均有作用。此外,
还有抗炎、抗病毒、抗肿瘤作用,耐缺氧作用及对实
验性肝损伤的保护作用和对心血管系统的作用[5]。
本实验对川产红毛五加药材利用紫外一可见分光光
度法测定其不同产地样品中多糖的量。
1仪器与药品
UV一752分光光度计(上海第三分析仪器厂),
GoA型电热真空干燥箱(天津市东郊机械加工厂),
RE一52A型旋转蒸发器(上海亚荣生化仪器厂)。
(+)葡萄糖(AR,105℃干燥至恒重);红毛五加皮,
均采自四川雅安及阿坝州,经笔者鉴定为
A.giraldiiHarms的干燥茎皮。试剂均为分析纯。
2方法与结果
2.1 多糖的提取与精制:精密称取红毛五加药材粉
末(过2号筛)100g,置2000mL圆底烧瓶中,加入
石油醚(沸程30~60℃)1200mL,回流6h,滤过,
弃滤液;石油醚洗涤滤渣,挥于石油醚,药渣加入
95%乙醇1200mL,回流6h,滤过,弃滤液;乙醇洗
涤滤渣,挥于乙醇,滤渣精密加入蒸馏水1200mL,
加热提取2次,每次1h,滤过,用水洗涤滤渣,合并
水提液;水提液用3.0%过氧化氢脱色,Sevage法除
去蛋白质后,加入乙醇使其体积分数为80%,静置
16h,抽滤,滤渣依次用无水乙醇、丙酮、乙醚多次洗
涤除杂,40℃真空干燥至恒重,即得红毛五加多糖。
2.2 4.O%苯酚溶液的制备:取苯酚100g,加入
0.1g铝片和0.05g碳酸氢钠,在180~182℃常压
蒸馏,空气冷凝,得白色针状苯酚结晶。称取4.0g
于100mL量瓶中,用蒸馏水稀释至刻度,摇匀,避
光保存。
2.3 葡萄糖对照溶液的制备:精密称取干燥至恒重的
葡萄糖对照品70mg,置100mL量瓶中,加蒸馏水至
刻度,配成质量浓度为700t-tg/mL的对照品溶液。
2.4样品溶液的制备:分别精密称取不同产地的红
毛五加药材粉末(过2号筛)0.3g,置100mL圆底
烧瓶中,加入石油醚(沸程30~60℃)50mL,回流6
h,滤过,弃滤液;石油醚洗涤滤渣,挥干石油醚,药
渣加入95%乙醇50mL,回流6h,滤过,弃滤液;乙
醇洗涤滤渣,挥干乙醇,滤渣精密加入蒸馏水50
mL,加热提取2次,每次1h,滤过,用蒸馏水洗涤滤
渣,合并水提液,置100mL量瓶中,加蒸馏水定容
至100mL,作为样品溶液。
2.5 标准曲线的绘制:分别精密吸取对照品溶液
1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、3.5mL置50mI。量瓶中,稀
释至刻度,再精密吸取2.0mL于带塞试管中。另取
2.0mL蒸馏水作为空白对照。各管加入4.0%苯酚
溶液1.0mL,摇匀,迅速分别滴加浓硫酸7.0mL,摇
匀后放置5rain,置沸水浴中加热15min,取出冷至
室温后,于490rlnl处测定吸光度(A)值。以质量浓度
(c)为横坐标,4值为纵坐标绘制标准曲线,得回归
方程:A一0.0046C一0.0058(r一0.9996)。结果表
明:在2.86~10.01/zg/mL葡萄糖质量浓度与月值
具有良好的线性关系。
2.6换算因子测定:精密称取干燥至恒重的前述多
糖纯品20mg,加水适量溶解,转移至100mL量瓶
中,定容,精密量取1mL于10mI。量瓶中,定容,作
贮备液用。精密吸取2mL,按照2.5项下方法,自
“加苯酚试剂1mL”起,测定A值,求出红毛五加多
糖液中葡萄糖质量浓度,按下式计算换算因子:厂一
W/CD,W为多糖质量(g),c为多糖液中葡萄糖的
质量浓度(g/mL),D为多糖的稀释因素。结果表明
-厂一3.28。
2.7精密度试验:取同一样品溶液,重复测定吸光
收稿日期:2006—06—08
基金项目:四川省青年基金资助项目(2006);四川省教育厅教育教学改革项目(2005);西南民族大学教学改革项目(2005)
作者简介:刘 圆(1968--),女,副教授,博士,从事少数民族药物的研究和教学工作,现在四川大学华西药学院药学博士后流动站工作。
Tel:(028)8552226313808091609
万方数据
·284· 中草菊ChineseTraditionalandHerbalDrugs第38卷第2期2007年2月
度5次,RSD为1.06%。结果表明精密度良好。
2.8重现性试验:取同一批样品溶液,平行测定吸
光度6份,RSD为1.32%,表明重现性良好。
2.9稳定性试验:取样品溶液,照样品测定方法操
作,每隔0.5h测定吸光度值,连续4h,结果吸光度
基本无变化,样品稳定性良好。
2.10加样回收率试验:精密称取已测定多糖量的样
品(1)粉末0.3g,共3份,依次加入不同量的多糖纯
品,置圆底烧瓶中,按照样品的制备方法制备样品,按
照2.5项下方法,自“加苯酚试剂1mL”起,测定吸光
度,并以葡萄糖对照品溶液作对比测定,计算多糖平
均回收率为98.62%,RSD为1。27%(行一5)。
2.11样品测定:精确量取样品液2mL,按照2.5
项下方法,自“加苯酚试剂1mL”起,测定吸光度,按
下式计算多糖的量,结果见表2。
多糖的量一CDf/W×100%
式中c为样品溶液的葡萄糖的质量(pg),D为样品溶液的
稀释倍数,厂为换算因素,Ⅳ为样品的质量(pg)
表1不同产地红毛五加药材中多糖的测定结果(站一3>
Table1 DeterminationofpolysaccharideinA.giraldii
病毒等作用。经过深入细致的研究,有些已成为药
品,如抗癌药物猪苓多糖注射液等。所以,对于红毛
五加多糖的研究就具有很大的应用前景。
3.2众多的多糖测定多采用苯酚一硫酸法,通过紫
外一可见分光光度法定量测定,说明该方法针对于多
糖的测定具有简单可靠、方法成熟的特点,故本实验
亦采用该方法。
3.3 在四川不同产地的红毛五加药材中都有多糖
的存在,其中以四川阿坝州金川I产的量最高为
14.81%,其次以四川阿坝州小金大板村为
12.67%。由于样本数量有限,则该药材的产地(来
源)还有待于进一步研究。
3.4采用石油醚、95%乙醇去除杂质,再用回流法
提取红毛五加多糖,并采用苯酚一硫酸比色法对其多
糖的量进行测定。通过作者的实验研究,以多糖为指
标,对Jl『产红毛五加药材产地(来源)优劣上提供了
可靠的鉴别依据,为该药材的进一步开发利用提供
了基础资料。
References:
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万方数据
川产藏药材不同产地红毛五加多糖的比较
作者: 刘圆, 孟庆艳, 彭镰心, 吴远波, 安静
作者单位: 西南民族大学少数民族药物研究所,四川,成都,610041
刊名: 中草药
英文刊名: CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年,卷(期): 2007,38(2)
被引用次数: 5次
参考文献(5条)
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引证文献(5条)
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