全 文 :·884· 中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第6期2006年6月
药肿瘤细胞中Ca2+浓度高于非耐药肿瘤细胞,又有
学者证实钙拮抗剂可逆转细胞对药物的耐药性口],
故推测具有钙离子拮抗作用的补骨脂素逆转肿瘤多
药耐药起到的增敏作用是由于降低耐药细胞内
Ca2一浓度的原因。本实验采用1~20t*rnol/L不同
浓度补骨脂素作用HL60和HL60/HT细胞,从静
态的不同时段(24、48、96h)和动态不同时问点
(5、10、15、20、25min)两方面观察其对细胞内Ca2+
浓度的影响,从结果可见:不同时间段和动态不同时
间点补骨脂素对HL60细胞内Ca2+浓度影响不大,
但不同浓度补骨脂素作用HI。60/HT,细胞内Ca“
浓度与作用时间成负相关,由此提示补骨脂素能影
响耐药细胞HL60/HT内Ca2+浓度,补骨脂素10
和20pmol/L作用HL60/HT细胞,Ca2一浓度与扫
描时间呈现负相关,该动态结果说明了补骨脂素具
有影响耐药细胞HL60/HT内Ca2+浓度的趋势,但
上述结果可能在不同细胞类及不同耐药表型中有所
差异,Ca2+浓度的变化可能是补骨脂素逆转耐药机
制之一,也可能是逆转耐药的结果;结合本实验细胞
内HT的量测定结果,可推测补骨脂素降低了耐药
细胞内Ca2。。浓度,故降低耐药细胞内药物HT泵出
胞外;但Ca2+与多药耐药的关系及补骨脂素在多药
耐药逆转中的作用机制还有待深入研究。
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蛴蜡石油醚提取物对人宫颈癌HeLa细胞增殖和凋亡的影响
宋莲莲‘,孙抒“”,李香丹1,金光洙3,垒莉莉3,杨万山1
(1.延边大学医学部病理学教研室,吉林延吉133000;8.延边大学长白山天然资源与功能分子省部共建教育部
重点实验室,吉林延吉133000;3.延边大学药学院植物化学教研室,吉林延吉133000)
摘要:目的研究蛴螬石油醚提取物对人宫颈癌HeLa细胞增殖和凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法MTT
法检测蛴螬石油醚提取物对体外培养的HeLa细胞株增殖抑制作用及细胞毒活性;末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)
介导的脱氧核苷酸缺口末端标记(TdTmediateddUTPnickendlabeling,TUNEI。)法检测细胞凋亡;通过免疫细
胞化学S—P法测定凋亡相关基因产物Bel一8、Bax蛋白与凋亡相关蛋白caspase一8和caspase一3的表达情况。结果
蛴螬石油醚提取物对HeLa细胞的增殖抑制作用呈剂量依赖性和时间依籁性∽<0.01)。蛴螬石油醚提取物作用
细胞后凋亡细胞数目随时间延长而增多;凋亡指数与药物处理呈时间依赖性和剂量依赖性。蛴螬石油醚提取物作
用后Bcl一2蛋白表达均下降.Bax、caspase一8和caspase一3表达上升,4种蛋白表达各组间比较均差异显著佃<
0.0”。结论蛴螬石油醚提取物对HeLa细胞具有抑制增殖及诱导凋亡作用。蛴螬石油醚提取物对HeLa细胞抑
制增殖作用(50tzg/mL作用48h之前)主要以诱导凋亡为主。蛴螬石油醚提取物诱导凋亡作用可能与下调Bel一
2表达,上调Bax、caspase一8和caspase一3表达有关。
关键词:蛴螬石油醚提取物;人宫颈癌HeLa细胞;增殖;细胞凋亡;Bcl2;Bax;caspase8;caspase3
中图分类号:R286.9l 文献标识码:A 文章编号:0253—8670(2006)06—0884—05
EffectofpetroleumetherxtractfromHolotrichiadiomphaliagrubonproliferation
andapoptosisfhumancervicalc rcinomaHeLacells
SONGLianlianl,SUNShul~,LIXiangdanl,JINGuang—zhu3.JINLili3,YANGWan—shanl
(1.DepartmentofPathology,MedicalCollegeofYanjiUniversity,Yanji133000.China;8.Keyl。aboratory
收稿日期:2005一儿一08
基金项目:国家自然科学基金资助项目(30480047)
作者简介:朱莲莲(1979),女,吉林省双辽市^,延边大学医学部病理学教研室,硕士研究生,医师,研究方向为肿瘤分子病理学。
Tel:(0433)2850535E—mail:Jslotus@sohucoDl
*通讯作者 孙 抒Tel:(0433)2660535E—mail}sunshu@ybuedu⋯
万方数据
中草菊ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第6期2006年6月
ofNaturalResourcesofChangbaiMountainandFunctionalMoleculesCo—establishedbyProvince
andMinistryofEducation,YanbianUniversity,Yanji133000,Chinaj3.Department
ofPhytochemistry,CollegeofPharmacy,YanbianUniversity,Yanji133000,China)
Abstract:ObjectiveToinvestigatetheffectofpetroleumetherxtractfromthegrubofHolotrichia
diomphaliaonproliferationandapoptosisfhumancervicalc rcinomaHeLacellsinvitroandexploreits
probablemolecularmechanisms.MethodsThegr wthin ibitionofpetroleumetherxtractfromthe
grubofH.diomphaliaonHeLacellswasmeasuredwithMTTassay.Apoptosiscellsweredeterminedby
theterminaldeoxvnucJeotidvltransferase—mediateddUTPnickend1abeling(TUNEL)method.TheBcl一
2,Pax,easpase一8,andcaspase一3proteinxpressionsweredeterminedbyimmunohistochemicalS—Pstain—
ingtechnique.ResultsPetroleumetherxtractfromthegrubofH.diomphaliasign ficantlyinhibitedth
proliferationofHeLacellsinadose—andtimedependentma ner(P<0.01),Theeffectofpetroleumether
extractfromthegrubofH.diomphaliaincreasedHeLaapoptosisnumbersg eatlywiththetimelasting.
TheapoptosisfHeLacouldbeinducedbythegrubextractinadose—andtime—dependentmanner.After
treatedwiththextract.theBcl一2expressionwasdecreased,whilethePax,caspase一8,andcasp se一3ex—
pressionswereincreased;theexpr ssionsofthefourkindsofproteinweresignificantlyhangedamongthe
differenttreatingswiththegrubextract(P<0.01).ConclusionPetro eumetherxtractfromthegrub
of日,diomphaliacou ds gnificantlyinhibittheproliferationandinducethapoptosisfHel。acellinvitro.
Beforetr ating48honHeI。acellswiththegrubextract(50ug/mL),thein ibitoryeffectonproliferation
anditscytotoxicitywasmainlycompletedbytheind’actionofapoptosis.Themec anismofthegrub
petroleumetherxtractinducingapoptosisforHeLamightberelatedo own—regulationofBcl一2expres
sionandup—regulationofBax,easpase8,andcaspase一3xpressions.
Keywords:petroleumetherxtractfromthegrubofHolotrichiadiomphalia(Bates);humancervical
carcinomaHeLacell;proliferation;apoptosls;Bcl一2;Bax;easpase一8;caspase一3
蛴螬为鳃金龟科昆虫大黑鳃角金龟Holotrichia
diomphalia(pates)的干燥幼虫。在祖国传统中医
药学中有破血、行瘀、散结、通乳等功效,用于折损瘀
痛、破伤风,喉痹、目翳等病症。近年来有报道蛴螬等
多味中药复方药物对人胃癌MGC803细胞株具有
诱导凋亡作用o]。有研究表明蛴螬提取物对人胃癌
MGC一803细胞株具有体外抑瘤活性o]。本实验以人
宫颈癌HeLa细胞为受试细胞,采用MTT比色法
检测蛴螬石油醚提取物体外抑制细胞增殖作用。采
用TUNEI,法以期证明凋亡细胞的形成。通过免疫
细胞化学的方法检测Bcl一2、Bax、caspase一8和cas—
pase3蛋白的表达情况,探讨蛴螬石油醚提取物对
HeLa细胞株的抑制增殖及诱导凋亡作用机制。
1材料与方法
1.1 细胞株、主要试剂和仪器:人官颈癌HeLa细
胞株购于中国科学院上海细胞研究所。RPMI—1640
培养基为Gibco公司产品。新生牛血清:中美合资
兰州民海生物工程有限公司产品。胰蛋白酶
(Tripsin):Difco公司产品。噻唑蓝(MTT):美国
Sigma公司产品。p53、Bel一2、Bax购于北京中杉金
桥生物技术有限公司。caspase一8和caspase一3蛋白
单克隆抗体:购于福州迈新生物技术开发有限公司。
原位细胞凋亡检测试剂盒:罗氏公司产品。酶联免疫
检测仪:美国RT一2100C型。
1.2体外细胞培养:人官颈癌Hel.a细胞贴壁生长
于RPMI1640培养液(含10%新生牛血清、青霉
素100U/mI。、链霉素100U/mL)置于37C、5%
CO:及饱和湿度恒温细胞培养箱中培养。
1.3蛴螬提取物制备和配制:蛴螬购于延边利民药
店,经延边大学药学院医药研究中心刘永镇教授鉴
定为正品。称取蛴螬5kg,粉碎,用甲醇同流提取3
次,在水浴上挥尽溶剂,加水制成混悬液后,依次用
石油醚、醋酸乙酯、氯仿等萃取,得到石油醚萃取物
60.62g,用于本实验。初步化学成分分析实验显示,
蛴螬石油醚提取物中含有甾体化合物及脂肪酸等成
分,其中甾体化合物约占3.5%。石油醚提取物用少
量0.5%羧甲基纤维素钠生理盐水和聚山梨酯80
溶解(聚山梨酯80在药液中的体积分数<
0.01%)[⋯。
1.4 MTT法测定体外细胞毒作用:体外常规培养
HeLa细胞,以MTT法测定蛴螬石油醚提取物
(25、50、i00和200tlg/mL)在处理12、24、36、48h
后的细胞增殖抑制情况。实验重复3次。计算肿瘤
细胞增殖抑制率及半数抑制浓度(IC。。),绘制浓度一
抑制率曲线。
细胞增殖抑制率一(1一A*#/A#_)×100%
万方数据
·886· 中革菊ChineseTraditionalandHerbalDr“gs第37卷第6期2006年6月
1.5 7IUNEI,法检测细胞凋亡:HeLa细胞经25
和50,ug/mI。蛴螬石油醚提取物处理24、48h后.
吹打制成细胞悬液;离心、洗涤细胞2次;4%多聚
甲醛0.1mL固定30min,取细胞悬液均匀涂布于
载玻片上,制成细胞涂片,设立对照组。应用
TUNEL法原位检测试剂盒检测HeLa的凋亡,用
0.1%核固红溶液复染。每次TUNEL染色中以已
知阳性物质的乳腺癌组织切片为阳性对照,以不含
TdT的TdT缓冲液代替TUNEI。反应混合液作阴
性对照。结果判断:细胞凋亡阳性物质呈紫蓝色位于
细胞核内,部分细胞浆也可因核DNA碎片的逸出
呈阳性着色;阴性细胞呈淡红色。每张涂片在400×
高倍镜下观察5个视野,每个视野下分别计数凋亡
细胞和总细胞数并计算凋亡率。
凋亡率一凋亡细胞数/总细胞数×100%
1.6免疫细胞化学染色:取对数生长期的Hel。a细
胞制成1.0×105/mL的细胞悬液,接种于内铺小玻
片的12孔培养板内。待贴擘生长后,分别加入25
和50pg/ml。蛴螬石油醚提取物药液处理24h后,
取出进行免疫细胞化学染色。染色操作按SP试剂
盒说明书进行。染色结果判断:以细胞内见清晰棕色
颗粒为阳性细胞;Bcl一2和Bax在胞质中呈棕黄色
阳性表达;caspase8和caspase3主要在胞质中或
胞质与胞核共表达“3;以细胞未着色或轻微着色为
阴性。每一指标观察3张涂片或细胞爬片,每张片在
400×高倍镜下观察5个视野,每个视野下分别计数
阳性细胞数和总细胞数并计算阳性表达率(阳性表
达率==阳性细胞总数/总细胞数×100%)。caspase一
8和caspase3结果判定采J=fjHscore法,每片观察
5个视野,以i代表染色深浅,共o~3分:0分为不
着色;1分为浅着色,呈淡黄色;2分为中度着色,呈
深黄色;3分为深着色,呈棕色/咖啡色。Pilt表每一
着色程度的细胞所占的比例为0~】oo%,
H—score—EPi(i+1),满分为4分。免疫细胞化学染
色没立阳性对照和阴性对照。
1.7统计学处理:应用SPSSi0.0软件,数据用
z土s表示;MTT法检测的抑制率之间的比较采用t
检验;用相关分析与直线回归计算IC⋯凋亡率之间
的比较采用方差分析多样本均数间q检验;Bcl2、
Bax蛋白表达率组间的比较采用x2检验;caspase8
和caspase3阳性表达统汁分析采用t检验。
2结果
2.1蛴螬提取物对HeLa细胞的增殖抑制作用:从
表1可知.蛴螬石油醚提取物对Hel。a细胞株的增
殖抑制作用具有时间及剂量依赖性。以蛴螬石油醚
提取物(作用24h)质量浓度和肿瘤细胞增殖抑制
率做相关分析和直线回归,得直线方程为:y一
16.080+0.437X.r一0.965。求得作用24h的ICs。
为77.62>g/mL。
表1 蛴螬石油醚提取物对HeLa细胞的增殖
抑制作用(i±s,月=3)
TableInhibitionofpetroleumetherxtractfrom
grubofH.diomphalia0[1proliferation
ofHeLacells(z土j.n一3)
25 12 32i164 21 77438 2474±099 3I{7±I%
∞ 272315 061 34601318。58831091⋯6587±O6j⋯
】00 n731J,051 77.59J-3,75。。瓤0420,∞⋯94,10二0,郎⋯
200 E223±085⋯9682±1%⋯0B50±020⋯eg461022⋯
与前一组比较:。P
TUNEL染色法镜下可见,癌细胞发生两种变化,一
种为细胞凋亡,表现为细胞体积缩小,核固缩,胞浆
减少,可见核内出现大小不等的蓝色颗粒,有的弥散
分布,有的偏侧分布或核膜周边分布。另一种变化为
细胞肿胀,胞膜破裂,内容物流出而坏死。阴性对照
组少见凋亡细胞。给药组随着剂量的增大和作用时
间的延长凋亡细胞数量增加。结果表明HeLa细胞
的凋亡率与蛴螬石油醚提取物质量浓度之间存在剂
量和时间依赖关系,这与MTT检测结果具有一致
性。可见表2。
表2蛴螬石油醚提取物对HeLa细胞凋亡睾的
影响(;±f.月一5)
Table2 Effectofpetroleumetherxtractfromgrub
of日.diomphaliaon poptoticrateofHeLa
cells(x±s,H一5)
与对照组比较:一rd0.01;与前一组比较;ooP<001
‘。P-
光镜下观察:Bcl2蛋白染色位于细胞浆内,对照组
阳性颗粒在胞浆内均匀分布,阳性细胞数居多,实验
组阳性细胞数减少,染色明显变浅;Bax蛋白染色阳
性部位主要见于胞浆,呈细颗粒状均匀分布。实验组
随提取物质量浓度增加,出现越来越多胞体浓缩变
万方数据
中革嚆CWn∞eTraditionalandHerbalDrt gs第37卷第6期2006年6月·887·
圆的细胞,这些细胞可见Bax阳性信号广泛分布于
胞核和胞浆。而这种转位表达于核内的异位表达现
象,只见于那些出现显著染色体和胞浆浓缩的细胞
(凋亡细胞)。其中Bcl一2与Bax细胞爬片中可以见
到细胞浆中出现较大的空泡,细胞膜尚完整。在相同
作用时间后随着提取物作用的质量浓度的增加,
Bcl一2蛋白表达下降,Bax蛋白表达增强。与对照组
相比差异有显著性(P
和caspase一3蛋白表达的影响“±s,”=5)
Table3 Effectofpetroleumetherxtractfromgrub
ofH.diomphaliaonproteinxpressions
ofBcl一2,Bax.caspase一8,andcaspase一3
jnHeLacells(z士s.月一5)
与对照组比较z—J}<001}与前一组比较;6AP
25与50Fg/mL组凋亡相关蛋白caspase8与cas
pase一3均有表达,并且表达具有一致性。视野内的细
胞着色的深浅可以看出表达程度的增加和表达量的
增多。见表3。
3讨论
经MTT法测定表明,蛴螬石油醚提取物对
HeLa细胞增殖具有抑制作用,同时呈剂量依赖性
和时间依赖性。本实验TUNEL法观察结果表明蛴
螬石油醚提取物可以诱导HeI。a细胞凋亡;随着作
用时间延长和质量浓度的提高,凋亡率升高(P<
0.01);表现为时间依赖性和剂量依赖性。由此可推
澳4在蛴螬石油醚提取物作用的48h之内,其抑制增
殖作用主要由诱导凋亡作用而实现,从而完成对肿
瘤细胞的杀伤。
诱导细胞凋亡必要的信号分子是一类半胱氨酸
蛋白酶称为caspases家族。迄今为止发现细胞凋亡
主要经过两条死亡通路“1。一种为死亡受体通路,又
称外源通路,是由肿瘤坏死因子(TNF)受体家族
介导的口1;另一通路为线粒体通路,即内源通路。在
这条通路中Bcl一2家族成员发挥着重要作用一⋯。在
caspases家族中caspase一3是最重要的,与凋亡的关
系最为密切,参与多种因素诱导的细胞凋亡。正常情
况下,细胞质中的caspase3无活性以酶原的形式
存在,当细胞接受凋亡信号刺激后才被系列反应激
活,进而诱导细胞发生捅亡口19]。本实验从蛋白水平
上初步检测了蛴螬石油醚提取物处理前后HeI。a细
胞中caspase8和caspase一3的表达情况。在对照组
中两者均呈弱表达或不表达,而药物处理组两者表
达明显增强,并且两者高表达的同时凋亡指数也升
高。提示两种caspase蛋白的表达改变与本实验中
蛴螬石油醚提取物诱导HeLa细胞发生凋亡有密切
关系;两者参与HeLa细胞的凋亡调控;推测蛴螬提
取物可能通过与细胞膜表面死亡受体结合,然后激
活细胞内caspase级联反应由外源性凋亡通路完成
对HeLa细胞的凋亡诱导作用。今后有待进一步实
验证实Fas及其受体是否参与蛴螬提取物的诱导
凋亡过程。
Bcl一2其主要生物功能为延长细胞寿命,增加细
胞对多种凋亡刺激因素的抗性。已经证明:bcl2/
bel一2同源二聚体可结合于线粒体内膜稳定其通透
性,以防止细胞凋亡末端效应分子caspases的激
活n“,通过阻断细胞凋亡信号传递系统的最后通道
而抑制细胞凋亡,从而调控凋亡的线粒体通路,促进
细胞存活。Pax基因即bcl一2相关X蛋白基因,它与
bel一2具有高度同源性,是凋亡基因家族中的核心成
员之一。本实验中,随药物作用剂量和时间的增加,
Bcl2/Bax蛋白表达比例减小,凋亡指数升高,表明
Bcl—f/Bax参与介导HeLa的凋亡,增强细胞对提取
物中所含诱导凋亡因素刺激的敏感性,促进细胞凋
亡。推测蛴螬石油醚提取物诱导HeLa细胞的凋亡
过程可能经由改变Bcl~2/Bax的蛋白表达,通过凋
亡通路中线粒体途径实现的,其具体机制有待进一
步研究。
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淫羊藿苷伍用三七总皂苷对小鼠免疫功能的调节作用
肖幸丰,王志强,楼宜嘉+
(浙江大学药学院,浙江杭州31.0031)
摘要:目的研究淫羊藿苷(icariin,ICA)伍用三七总皂苷(Panaxnotoginsengsaponins,PNS)对小鼠免疫功
能的调节作用,为该组合药物改善阿尔茨海默病(Alzheimer’sdisease,AD)动物模型空间学习记忆能力的作用机
制提供部分宴验依据。方法采用血清药理学方法观察小鼠连续igICA+PNS[(40上320)、(80+640)、(160十
1280)mg/kg]、单用ICA(80mg/kg)和PNS(640mg/kg)7d制得的含药血清对伴刀豆蛋白A(ConA)和脂多
糖(LPS)诱导的小鼠脾淋巴细胞增殖、IL一2分泌的影响。并观察脏器指数的变化。结果1CA伍用PNS[(80+
640)、(1∞+1280)mg/kg]具有较强的协同作用,其含药血清能明显促进ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞增殖
(尸<0.01、0.05),量效曲线呈倒U形;含药血清对LPS诱导的小鼠脾淋巴细胞增殖无显著促进作用(尸>0.05)。
1cA+PNS[(80+640)和(160—1280)mg/kg]舍药血清能明显促进1L一2生成(P
器指数(P>o.05)。结论ICA伍用PNS对小鼠免疫系统具有一定的选择性调节作用.主要增强T细胞功能。
关键词:淫羊藿苷;三七总皂昔;免疫调节作用;血清药理学
中图分类号:R285.5 文献标识码:A 文章编号:02532670(2006)0688804
Immunoregulationofiear inc mbinedwithPanaxnotoginsengsaponinsinmice
XIA0Xing—feng,WANGZhi—qiang,I。0UYi—jia
(CollegeofPharmaceuticalSciences,ZhejiangUniversity,Hangzhou310031,China)
Abstract:ObjectiveToinvestigatetheregulatoryeffectsoficariin(ICA)combinedwiththePa ax
notoginsengsaponins(PNS)onimmunologicalfun tioninmiceandprovidesomeexperimentalevidences
forthecombinationmechanismimprovingthespatiallearningandmemoryabilitiesofAlzheimer’sdisease
(AD)animalmode ,MethodsBasedon erumpharmacologicalmethod,theICRmicewereindividually
igadministratedwithICA+PNS[(40+320),(80+640),and(160+1280)mg/kg]orIcA(80mg/kg),
andPNS(640mg/kg)onlyfor7d.Drugcontainingserumwaspreparedandeffectson pleenlymphocyte
proliferationofBable/cmiceinducedbyconcanavalin—A(ConA)or¨pop01ysaccharide(I,PS)andoninter一
1eukin一2(II,一2)secretionwereobserved抽vitro.Meanwhile,theimmuno ogicalrgani dexesoftreated
micewereevaluated.ResultsDr gcontainingserumofICA+PNS[(80+640)and(160+1280)mg/
kg]couldimprovethespleenlymphocyteproliferationinducedbyConA(P
groupscouldnotbeenchanced(P>0.05).Drug—containingserumofICA+PNS[(80+640)and(160+
1280)mg/kg]couldimproveIL2production(P<0.01).IcAcombinedwithPNSshowedsynergistic
effectandanupsideownUshapeddose—effectcurve.Comparedwiththcontrolgroup,however,there
werenosignificantdifferencesi theimmunologicalrgani dexesofallgroupsadministratedbyICA,
PNSorthecombinationof hetwo(P>0.05),respectively.ConclusionICAcombinedwithPNSc uld
收稿日期:2005—10—14
基金项目:目家自然科学基金资助项目(30472112);浙江省中医药管理局重点资助项日(2002KF001);浙江省科技厅计划项目
(2004C33106)
作者简介:肖幸丰(J978),男,浙江大学硕十研究生,研究方向为中药药理学。Tel:(0571)87230372Email:xiaoxf21st@sina.com
*通讯作者楼R嘉Tel/Fax:(0571)87217206E—mail:yijialou@z】ued .cn
万方数据
蛴螬石油醚提取物对人宫颈癌HeLa细胞增殖和凋亡的影响
作者: 宋莲莲, 孙抒, 李香丹, 金光洙, 金莉莉, 杨万山, SONG Lian-lian, SUN Shu,
LI Xiang-dan, JIN Guang-zhu, JIN Li-li, YANG Wan-shan
作者单位: 宋莲莲,李香丹,杨万山,SONG Lian-lian,LI Xiang-dan,YANG Wan-shan(延边大学医学部,病
理学教研室,吉林,延吉,133000), 孙抒,SUN Shu(延边大学医学部,病理学教研室,吉林,延
吉,133000;延边大学,长白山天然资源与功能分子省部共建教育部重点实验室,吉林,延吉
,133000), 金光洙,金莉莉,JIN Guang-zhu,JIN Li-li(延边大学药学院,植物化学教研室
,吉林,延吉,133000)
刊名: 中草药
英文刊名: CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年,卷(期): 2006,37(6)
被引用次数: 8次
参考文献(10条)
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本文读者也读过(10条)
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引证文献(8条)
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4.董庆峰.张崇禧.张书锋.张磊.张汉明 蛴螬的化学成分及药理作用研究进展[期刊论文]-药学实践杂志 2008(1)
5.曹蔚.裴克.张雅 蛴螬的药学研究进展[期刊论文]-陕西中医 2013(2)
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7.徐立新.叶云飞.马戎.王海琳 裸小鼠人宫颈癌组织模型的建立及其生物学特性初探[期刊论文]-肿瘤防治研究
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