全 文 ：中草菊 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第7期2006年7月·993·
苷光谱数据一致[5]。
化合物Ⅳ：白色针状结晶(甲醇)，mp303～305
℃(CH。OH—H。O)，碘化铋钾反应呈阳阳。ESI—MS
m／z：136(M+1)，134(M一1)，107，92。IR％KB。。rC1TI～：
3119(yNH)，l675(比：o)，1605(∥c—c)，1310(vc—N)。
1H—NMR(DMSO—d。)艿：12．86(1H，S，H一7)，8．11
(2H，br．S，H一2，8)，7．10(2H，S，NH2—6)。”C—NMR
(DMSO—d。)艿：155．9(C一6)，152．4(C一2)，150．3(C一
4)，138．9(C一8)，118．6(C一5)。以上IR、ESI—MS、
1H—NMR、”C—NMR数据和文献报道腺嘌呤光谱数
据一致[6]。
化合物V：白色针状结晶(甲醇)，mp336～338
‘C，1H—NMR、13C—NMR数据和文献报道一致口]，故
推定为尿嘧啶。
化合物Ⅵ：白色针状结晶(甲醇)，mp300302
。C(CHCl3一CH。OH)。碘化铋钾反应呈阳性。IR、ESI—
MS、1H—NMR、”C—NMR数据和文献报道一致[6]，故
推定为胸腺嘧啶。
致谢：核磁共振、质谱由本校分析测试中心代
测，于淼参与了本研究工作
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银杏叶化学成分及其对磷酸二酯酶5抑制活性研究
尉小慧1～，陈 明3，夏广新1，沈敬山H，嵇汝运1
(1．中国科学院上海生命科学研究院上海药物研究所，上海201203；2．上海中药标准化研究中心，上海201203；
3．南京工业大学材料科学与工程学院，江苏南京 210009)
磷酸二酯酶5(phosphodiesterase5，PDE5)是
磷酸二酯酶家族中的一员，主要分布在哺乳类阴茎
海绵体。阻断或抑制PDE5活性，可引起阴茎动脉内
膜细胞中cGMP水平上升，血管舒张，促阴茎勃起。
PDE5作为治疗勃起功能障碍(ED)药物的靶点日
益引人注目。银杏叶提取物(GBE)可引起阳痿病人
阴茎海绵体舒张，用于ED的治疗口’2]。笔者对GBE
的粗提物进行活性筛选，发现其具有PDE5酶抑制
活性。银杏中主要成分为黄酮类、双黄酮类、萜内酯
类，为研究化合物类型与PDE5抑制活性关系，从上
述3种类型分别选取2～3个代表性化合物，进行活
性测试。结果显示3种类型化合物均有一定的
PDE5抑制活性，其中以双黄酮类活性最强。
1仪器、材料与样品
VarianMercury一400(1H，400MHz)核磁共振
仪；BuchiRotavaporR一114旋转蒸发仪；MAT一
95型质谱仪；Buchi510熔点仪。
PDE5从人血小板提取纯化；磷酸二酯酶[3HI
cGMPS A试剂盒(瑞典AmershamBiosciences)。
银杏叶，购自山东，经鉴定为银杏科银杏属植物
银杏GinkgobilobaLinn．的干燥叶片。
2方法与结果
2．1银杏黄酮类、双黄酮类、萜内酯类的提取和分
离：银杏叶2kg，95％乙醇浸泡，提取物依次用石油
醚、CHCl。、EtOAc、，z—BuOH萃取。CHCl。层经过多
次柱色谱、重结晶和HPLC分离，得化合物I～Ⅷ。
2．2结构鉴定
化合物I：黄色粉末，mp311～315。C。
1H—NMR与文献报道一致[3]，为槲皮素(quercetin)。
化合物Ⅱ：黄色粉末，nap281～283YC。
1H—NMR(400MHz，DMSO—d。，艿)：8．03(2H，d，J一
9．2Hz，H一27，6)，6．92(2H，d，J一9．2Hz，H一37，
收稿日期：2005—12-31
作者简介：尉小慧，女，博士后。
*通讯作者沈敬山Tel：(021)50805891E—mail；jsshen@mail．shone．aC．en 万方数据
·994· 中摹菊ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第7期2006年7月
5’)，6．43(1H，s，H一8)，6．18(1H，s，H一6)。与文献报
道一致[4]，鉴定为山柰酚(kaempfer01)。
化合物Ⅲ：黄色针晶(MeoH)，mp303～304
℃。1H—NMR与文献报道一致[5]，鉴定为异鼠李素
(isorhamnetin)。
化合物Ⅳ：白色针晶(MeOH)，mp>300℃(分
解)。，H—NMR与文献报道一致叫，鉴定为白果内酯
(bilobalide)。
化合物V：白色针晶(MeOH)，mp：>300℃(分
解)。1H—NMR(400MHz，DMSO—d6，艿)：7．47(1H，
dd，OH一10)，6．46(1H，s，OH一3)，6．06(1H，s，H一
12)，5．29(1H，d，J一4．4Hz，H一6)，5．01(1H，d，J=
5．2Hz，H一10)，4．92(1H，dd，OH一1)，4．63(1H，d，
J=7．2Hz，H一2)，4．03(1H，t，J=12，7．2Hz，H—
lB)，2．84(1H，q，J一14，7．2Hz，H一14)，2．1l(IH，
dd，J=14，4．4Hz，H一78)，1．93(1H，dt，J一14，14，
4．4Hz，H一7a)，1．70(1H，dd，J=14，4．4Hz，H一8)，
1．09(3H，d，J=7．2Hz，H一16)，1．01(9H，s，tBu)。
与文献报道一致‘川，为银杏内酯B(ginkgolideB)。
化合物Ⅵ：黄色粉末，mp327～329‘C。
1H—NMR(400MHz，DMSO—d。，艿)：13．05(1H，s，
OH一5)，12．09(1H，s，OH一5”)，10．88(1H，s，OH一
7”)，10．86(1H，s，OH一4”)，8．16(1H，dd，J一9．0，
1．8Hz，H一6’)，8．04(1H，d，J=1．8Hz，H一27)，7．58
(2H，d，J=8．6Hz，H一2”，6”)，7．33(1H，d，J=9．0
Hz，H一5’)，6．90(2H，d，J=8．6Hz，H一3。，5”)，6．89
(2H，s，H一3，3”)，6．47(1H，s，H一8)，6．41(1H，s，H一
6”)，6．18(1H，s，H一6)，3．76(3H，s，HOCH3-7)，3．73
(3H，s，OCH。一4”)。与文献报道一致踟，为银杏素
(genkgetin)。
化合物Ⅶ：黄色粉末，mp228～231℃。
1H—NMR(400MHz，DMSO—d。，艿)：8。19(1H，dd，
，=8．8，2Hz，H一67)，8．07(1H，d，J=2Hz，H一2’)，
7．51(2H，d，，=8．8Hz，H一2”，6”)，7．35(1H，d，J=
8．8Hz，H一5’)，6．93(1H，s，H一3”)，6．70(2H，d，J一
8．8Hz，H一3”，5”)，6．50(1H，d，J=1．6Hz H一8)，
6．41(1H，s，H一6”)，6．21(1H，d，J=1．6Hz H一6)，
3．76(3H，s，OCH。一4”)。与文献报道一致[9‘，为去甲
银杏双黄酮(bilobetin)。
化合物Ⅶ：黄色粉末，mp291～293℃。
1H—NMR(400MHz，DMSO—d。+DMCO，d)：12．99
(1H，s，OH一5)，12．84(1H，s，OH一5”)，8．15(1H，m，
H一67)，8．02(1H，s，H一2’)，7．57(2H，d，J=8．4Hz，
H一2”，6”)，7．34(1H，m，H一5’)，7．29(1H，s，H-3”)，
6．88(2H，d，J=8．4Hz，H一3”，5”)，6．81(1H，s，H一
3)，6．71(1H，s，H一8)，6．66(1H，s，OH一7”)，6．44
(1H，s，H一6”)，6．26(1H，s，H一6)，3．80(3H，s，
OCH3—7)，3．77(3H，s，OCH3—47)，3．72(3H，s，
OCH。一4”)。与文献报道一致[10。，为金钱松双黄酮
(sciadopitysin)。
2．3 PDE5酶抑制活性筛选；参照文献方法[1¨，以
人血小板为原料，采用快速蛋白液相系统(FPLC)提
取纯化PDE5。活性测试采用瑞典Amersham公司
的PDE[3H]cGMPSPA检测试剂盒(TRKQ
7100)。同时以西地那非(Sildenafil)为阳性对照药。
各化合物在10叫mol／L的浓度下的抑制率见表1。
抑制率一(cpm。。。。rol—cpm。。。p1。)／cpm—trol×100％
表1银杏中不同类型化合物PDE5抑制活性结果
Table1 Inhibitoryactivitiesofcompounds
inGinkgobilobaonPDE5
化合物霄 化合物学 化合物呀
西地那非。 99．2槲皮素 7．23银杏素 46．56
白果内酯 9．83山柰酚 5．04去甲银杏双黄酮z7．29
银杏内酯B 11．22异鼠李素18．08金钱松双黄酮 31．87
。IC50=3．686nmol／L，r一0．9924。
3讨论
3．1 银杏中3种类型化合物均有一定的PDE5抑
制活性，其中以双黄酮类活性最好。但3种类型化合
物的活性均明显低于阳性对照药西地那非(伟哥)，
提示GBE可能通过其他途径或多种途径共同发挥
治疗ED的作用，也可能是其他类型成分的作用结
果，有待于进一步的研究揭示。
3．2黄酮类化合物显示较强的PDE5抑制活性，其
活性顺序为银杏素>金钱松双黄酮>去甲银杏双黄
酮，溶解性顺序为银杏素>去甲银杏双黄酮>金钱
松双黄酮，极性顺序为去甲银杏双黄酮>银杏素>
金钱松双黄酮，3个化合物结构上的区别在于其甲
氧基的个数不同，推测其活性可能与分子中甲氧基
的个数及其溶解性能有关。
3．3黄酮类化合物也表现一定的PDE5抑制活性，
其中以异鼠李素活性最高，异鼠李素与槲皮素和山
柰酚结构上最大的区别是37位上甲氧基的引入，联
系双黄酮类化合物的构效关系，推测甲氧基的位置
及个数与PDE5抑制活性的强弱相关。因受试化合
物相对较少，其确切的构效关系，有待增加化合物的
数量进行确认。
’
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香鳞毛蕨化学成分的研究(II)
沈志滨1，张维库2，马英丽3，叶文才2“
(1．广东药学院，广东广州 510224；2．中国药科大学天然药物化学教研室，江苏南京210009；3．黑龙江中医药大学，
黑龙江哈尔滨 150000；4．暨南大学中药及天然药物研究所，广东广州510632)
香鳞毛蕨DryopterisfragransL．为鳞毛蕨科
鳞毛蕨属植物，生长于海拔1000～1700rfl的山坡
或岩石缝中，分布于东北、华北各省。民间广泛用其
治疗多种皮肤病，国内外对其研究较少，只有关于香
鳞毛蕨的抑菌和药效学研究[1~3]。笔者对其化学成
分进行了研究H]，从其乙醇提取物中又分离鉴定出
3个化合物，分别为：绵马酚(aspidinol，I)、十氢一5，
5，8a一三甲基一2一亚甲基一1一萘甲醇乙酸酯(albicany
acetate，Ⅱ)和a一杜松烯(a—cadinene，Ⅲ～)。
1仪器与材料
X一6型熔点测定仪；核磁共振谱用VarianU—
nityINOVA500型核磁共振仪测定；质谱用VG
Autospec一500质谱仪测定；制备HPLC为Agilent
1100series型。薄层色谱和柱色谱硅胶均为青岛海
洋化工厂产品，SephadexLH一20为Pharmacia公司
产品。香鳞毛蕨于2003年9月采自黑龙江省五大连
池，经哈尔滨商业大学药学院金哲雄教授鉴定。
2提取和分离
取香鳞毛蕨粗粉2．5kg，加70％乙醇冷浸2d，
滤过，浓缩，浸膏用水分散，正己烷萃取。正己烷提取
物滤过，浓缩得浸膏，经硅胶、SephadexLH一20柱色
谱及制备HPLC分离，得化合物I～Ⅲ。
3结构鉴定
化合物I：无色针状结晶，mp145～146C，
ESI—MSm／z：225(M+H)+(C12H150。)。1H—NMR
(500MHz，CDCl3)d：0．98(3H，t，J一7Hz，H一11)，
1．73(2H，d，J一7Hz，H一10)，2．01(3H，s，H一12)，
3．06(2H，t，J一7Hz，H一9)，3．82(3H，s，H一7)，5．93
(1H s，H一5)。13C—NMR(125MHz，CDCl。)艿：7．1(C一
12)，14．1(C一11)，18．2(C一10)，46．1(C一9)，55．6(C一
7)，85．6(C一1)，91．5(C一5)，104．8(C一3)，159．5(C一
2)，161．1(C一4)，163．2(C一6)，206．2(C一8)。以上数
据与文献报道对照一致[5]，确定该化合物为绵马酚。
化合物Ⅱ：淡黄色油状物质，[a]D+23．2。(c
1．18，CHCl3)，1H—NMR(500MHz，DCl3)艿：0．75
(3H，s)，0．80(3H，s)，0．88(3H，s)，2．02(3H，s)，
2．40(1H，m，H一7)，4．18(1H，dd，J=11，9．5Hz，H一
11)，4．34(1H，dd，J一4，11Hz，H— )，4．50(1H，s，
H一12)，4．85(1H，s，H一12)。以上数据与文献报道[5]
对照一致，确定该化合物为十氢一5，5，8a一三甲基一2一
亚甲基一1一萘甲醇乙酸酯。
化合物Ⅲ：无色油状物质，[a]D一29．1。(c1．36，
(下转第1037页)
收稿日期：2005—10—28
基金项目：广州市科技局资助项目(200523一E5101)；广东药学院资助项目；
作者简介：沈志滨(1964一)，女，博士，副教授，主要研究方向为中药药效物质基础研究及新药的研究。Tel：(020)39352179
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]
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l=l
心
口
■
口
叩
万方数据
银杏叶化学成分及其对磷酸二酯酶5抑制活性研究
作者： 尉小慧， 陈玥， 夏广新， 沈敬山， 嵇汝运
作者单位： 尉小慧(中国科学院,上海生命科学研究院上海药物研究所,上海,201203;上海中药标准化研
究中心,上海,201203)， 陈玥(南京工业大学材料科学与工程学院,江苏,南京,210009)， 夏
广新,沈敬山,嵇汝运(中国科学院,上海生命科学研究院上海药物研究所,上海,201203)
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2006,37(7)

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