全 文 ：中草菊ChineseTraditionalandHerbalDrugs第38卷第3期2007年3月·375·
裹4 10批样品相似度评价结果
Table4 Similaritiesfortenbatchesofsampl船
样品 相似度 样品 相似度
1 0．994 6 0．992
2 0．995 7 0．986
3 0．992 8 0．992
4 0．908 9 0．987
5 0．980 10 0．988
3讨论
本实验对供试品溶液的制备、色谱条件进行了
优化选择。通过对不同提取溶剂、提取方法进行实验
比较，拟定上述供试品的制备方法，所得指纹图谱出
峰数较多。经比较，甲醇和0．1％磷酸水溶液一起组
成流动相进行梯度洗脱分离效果较好，能较好地使
样品中各色谱峰分离且出峰最多。分析时间85
min，样品170min图谱显示85min后无特征峰出
现，故定分析时间为85min。取决明子各供试品溶
液，进样20弘L，进行200---800nm的全波长全梯度
扫描，并对各波长下的色谱图进行分析比较。结果表
明，在280nm下，各峰分离良好，特征峰明显且峰
型较好，因此选定280am为指纹图谱测定波长。
不同产地决明子饮片的比较10批决明子样品
指纹图谱中主要峰群的整体图貌基本一致，虽然不
同产地样品中各成分含量的相对比值有较大的差
别，但相似度计算结果表明，10批样品种内相似度
除河南禹州决明子(相似度0．908)外，其余均在
0．98以上。比较河南禹州决明子与10批决明子样
品对照模版的指纹图谱可知，前者大黄酚(15号峰)
的色谱峰面积明显低于后者，而后者11、12、13号峰
的峰面积明显大于前者，导致了它们相似度的差别。
本实验对决明子HPLC指纹图谱的构建进行
了探讨，可为决明子饮片的品质评价、质量标准的制
定提供科学依据。
ReferencesI
[1]ChP(中国药典)Is]．VolI．2005．
[23XiaoPG．ModemChineseMateriaMedica(新编中药志)
[M]．Vol2．Beijing：ChemicalIndustryPress，2002．
定量测定与特定指纹图谱分析相结合方法
用于抗脑衰胶囊制剂质量评价
王凤玲，韩淑珍，王 勇，袁博，冯 莉
(天津商学院生物技术与食品科学学院测试中心，天津300134)
摘 要：目的 建立抗脑衰胶囊色谱指纹图谱，并对关键成分进行测定，作为抗脑衰胶囊制剂质量评价的依据。方
法采用HPLC法。色谱条件；KromasilODSC-8柱(250mm×4．6mm，5弘m)，甲醇一0．6％醋酸水溶液系统梯度
洗脱，体积流量0．9mL／min，检测波长280am，柱温25℃。采用标准曲线法对其中葛根素、黄芩苷、芍药苷进行测
定。结果指纹图谱中28个共有吸收峰为抗脑衰胶囊内在物质的指纹特征，方法学考察的精密度、稳定性、重现性
试验较好。不同批次抗脑衰胶囊指纹图谱的相似度评价和指标成分有差异。结论定量测定与特定指纹图谱分析
相结合方法可作为评价抗脑衰胶囊制剂质量的标准。
关键词：抗脑衰胶囊；指纹图谱；质量标准；相似度
中圈分类号：R284．4}R286．02文献标识码：B 文章编号：0253—2670(2007)03—0375一05
Combinationofquantitativeanalysiswithfingerprintstudyused
forqualityevaluatingofKangnaoshuaiCapsula
WANGFeng—ling，HANShu—zhen，WANGYong，YUANBo，FENGLi
(TestCenter，CollegefBiot chnologyandF odScience，TianjinUnivercityofCommerce，Tianjin300134，China)
Abstract：ObjectiveToestablishchromatographicfingerprintandquantitativenalysisof
KangnaoshuaiCapsulabyHPLCmethodforevaluatingthequalityofthepreparation．MethodsThe
optimalHPLCconditionforKangnaoshuaiCapsula：ODSC18column(250mmX4．6mm，5弘m)，the
mobilephasewascomposedofmethanoland0．6％aceticacidwithalinearg adientelution，theflowrate
was0．9mL／minwithDADdetectedat280nm，thecolumntemperaturewasmaintainedat25℃．
收稿日期：2006—06—10
作者简介：王凤玲(1965～)，女，硕士，天津人，高级实验师，研究方向为分析检测．
Tell(022)81720727E—mail：wiling@tjcu．edu．cll
万方数据
·376· 中草焉 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第38卷第3期2007年3月
Quantitativeanalysisofpaeoniflorin，puerarin，andbaicalinwerec rriedOutbythestandardcurveasa
contr01．ResultsTotalofshared28chromatographicpe ksweredeterminedasinnercharactersof
KangnaoshuaiCapsula．ThemethodologicalstudiesndicatedthathisHPLCfingerprintisofhigh
precision，strongrepeatabilityandgoodstability；Thesimilarityandcontentfromvariousbatchesof
samplesshowedsomedifferences．ConclusionThemeth dcanbeusedscientificallyandeffectivelytO
evaluatethequalityofKangnaoshuaiCapsula．
Keywords：KangnaoshuaiC psual ；fingerprint；qualitystandard；similarity
抗脑衰胶囊是由人参、葛根、制何首乌、黄芩、麦
冬、熟地黄、白芍等经水煮和乙醇提取，干燥粉碎后
制成胶囊剂，是国家中药保护品种。主治神经衰弱，
记忆力衰退，老年性痴呆等症。久服能增强思维能
力，保持精力充沛，提高人体免疫功能，延缓衰老。为
了控制抗脑衰胶囊的质量，本实验按照国家药典委
员会关于“中药注射剂指纹图谱的技术研究要求(暂
行)的通知”的要求，对抗脑衰胶囊进行HPLC指纹
图谱研究和主要活性成分葛根素、黄芩苷、芍药苷测
定，作为对抗脑衰胶囊质量评价的依据，为中药制剂
行业提高自身技术含量，参与国际竞争，扩大国际市
场，实现中药现代化提供必要的方法上的参考。
1仪器和材料
Agilent高效液相色谱仪：四元泵，DAD检测
器，HPll00色谱工作站。提取用甲醇为分析纯，流
动相配制用甲醇、乙腈为色谱纯，冰醋酸为优级纯，
水为娃哈哈饮用纯净水。葛根素(批号0752—
200209)、黄芩苷(批号715—200010)、芍药苷(批号
110736—20042)对照品购自中国药品生物制品检定
所，葛根、白芍、黄芩药材和抗脑衰胶囊均由石家庄
四药股份有限公司提供。
2方法与结果
2．1色谱条件：色谱柱为天河KromasilODSC18柱
(250mm×4．6mm，5ttm)；流动相：甲醇一0．6％醋酸
水溶液系统梯度洗脱，0rain，10：90；60min，90：
10；体积流量：0．9mL／min；柱温：25℃；检测波长：
280nm，进样量：20pL。
2．2供试品溶液的制备：胶囊内容物研细，80℃干
燥30min，精密称取0．1500g，加入80％甲醇50
mL，称定质量，回流处理60rain，冷却后补足质量，
滤过，取滤液，以0．45tim膜滤过，即得。
2．3指纹图谱的建立：取各供试品溶液20弘L，注
入高效液相色谱仪，测定，得各样品的高效液相色谱
指纹图谱，经比较分析，确定28个色谱峰为各批次
样品共有峰，见图1。
2．4样品中共有峰与药材的关系：通过成药、药材、
标准物对照品和相应药材阴性的对比研究，确定了
O lO 20 30 40
t／rain
图1抗脑衰胶囊的HPLC指纹图谱
Fig．1HPLCFingerprintofKangnaoshuaiCapsula’
保留时间21．3min为葛根素(9号峰，图2)，保留时
间为23．2min为芍药苷(12号峰，图3)，保留时间
为36．7min为黄芩苷(19号峰，图4)。
O lO 20 30 40 50
t／rain
l一葛根紊对照品 2一葛根药材3一缺葛根阴性样品
4一抗脑衰胶囊
1-puerarinreferencesubstance2-RadixPuerariae3-negative
samplewithoutRadixPuerariae4一KangnaoshuaiCapsula
图2抗脑衰胶囊与葛根的HPLC共有峰
Fig．2HPLCFingerprintsofcommonpeaksbetween
KangnaoshuaiCapsulandRadixPuerariae
20 30 40 50
t／mm
1一芍药苷对照品 2一白芍药材 3一缺白芍阴性样品
4一抗脑衰胶囊
1-paeoniflorinreferencesubstance2-RadixPaeoniaeAZ6口
3-negativesamplewithoutRadixPaeoniaeAlba
4-KangnaoshuaiCapsula
圈3抗脑衰胶囊与白芍的HPLC共有峰
Fig．3HPLCFingerprintsofcommonpeaksbetween
KangnaoshuaiCapsulandRadixPaeoniaeAlba
2．5方法学考察
2．5．1精密度试验：取批号021284抗脑衰胶囊内
万方数据
中草焉ChineseTraditionalandHerbalDrugs第38卷第3期2007年3月·377·
t／rain
1一黄芩苷对照品2一黄芩药材3一缺黄芩阴性样品
4一抗脑衰胶囊
1-baicalinreferencesubstance2一RadixScutellariae
3-negativesamplewithoutRadixScutellariae
4-KangnaoshuaiCapsula
图4抗脑衰胶囊与黄芩的HPLC共有峰
Fig．4HPLCFingerprintsofcommonpeaksbetween
KangnaoshualCapsu andRadixScutellariae
容物，制备供试品溶液，连续进样4次，以19号峰作
为参考，计算共有峰的相对保留时间和相对峰面积，
结果共有峰的相对保留时间的RSD小于0．12％，
相对峰面积RSD在1．39％以下，说明仪器的精密
度较好。
2．5．2重现性试验：取批号021284抗脑衰胶囊内
容物4份，制备供试品溶液，分别进样，以19号峰作
为参考，计算共有峰的相对保留时间和相对峰面积，
结果共有峰的相对保留时间的RSD小于0．33％，
相对峰面积的RSD小于2．42％，说明实验方法的
重现性较好。
2．5．3稳定性试验：取批号021284抗脑衰胶囊内
容物供试品溶液，间隔3h进样，共5次，以19号峰
作为参考，计算共有峰的相对保留时间和相对峰面
积，结果共有峰的相对保留时间RSD小于0．14％，
相对峰面积RSD小于1．86％，说明供试品溶液在
12h内稳定。
2．6 指纹图谱相似度评价：采用国家药典委员会
《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》计算软件(版
本：2004A，研究版)评价10个批次样品指纹图谱的
相似度。该软件通过样本图谱数据导入(AIA格
式)、设参照图谱、多点校正、自动匹配、对照图谱生
成、数据匹配、相似度评价结果，以批号031173样品
图作为参照图谱，利用中位数法进行多点校正生成
对照图谱R，见图5。结果7批样品的相似度大于
0．9，见图6。共有峰的相对保留时间见表1，相对峰
面积见表2。
O 20 30 40 50
t／min
图5 10批抗脑衰胶囊的指纹图谱相似度评价
Fig．5Similarityevaluationoftebatchesof
KangnaoshualCapsu afingerprint
图6 10批抗脑衰胶囊的HPLC指纹图谱相似度
计算结果
Fig．6ResultsofHPLCfingerprintsimilarity
evaluationoftebatchesofKangnao-
shuaiCapsula
表1 10批样品测定的相对保留时间
·Table1 Relativeretentionmeoftenbatchesofsamples
批号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14
010105
020553
020850
021284
030527
030853
031173
040428
040537
0．0530．1100．1420．1770．2170．2500．2980．4090．5240．5490．5680．6150．6420．662
0．0530．1120．1400．1770．2150．2480．2970．4100．5230．5460．5660．6140．6390．662
0．0530．1010．1420．1780．2160．2520．2970．4100．5240．5490．5680．6130．6430．664
0．0530．1100r1410．1780．2170．2490．2990。4070．5230．5470．5710．6130．6420．661
0．0520．108O-140．1730．2160．2450．2930．4050．5230．5460．5660．6140．6360．662
0．0530．1100．1400．1770．2170．2430．2920．4090．5240．5490．5680．6150．6420．662
0．0520．1070．1420．1740．2150．2460．2940．4060．5240．5450．5680．6140．6360．662
0．0520．1090．1410．1750．2140．2470．2950．4070．5230．5470．5680．6130．6370．663
0．0520．1090．1410．1750．2140．2470．2950．4070．5230．5470．5680．6130．6370．663
0412870．0520．1080．1420．1750．2150．2470．2980．4060．5230．5480．5680．6130．6370．662
平均值 o．0530．108佛1410．1780。2150。248o．2920．4080．5230．5470·568o．6140．6390．663
RSD／％ o．0680．285m014 0．1570．0190．2390．2460．1780．0140．1330．1240．0180．2590．082
巡警霉
万方数据
·378· 中草葛ChineseTraditionalandHerbalDrugs第38卷第3期2007年3月
表2 lO批样品共有峰的相对峰面积
批号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14
2．7抗脑衰胶囊中3个成分的HPLC测定
2．7．1色谱条件：同2．1项。
2．7．2供试品的制备：同2．2项。
2．7．3标准曲线的绘制：取一定质量浓度的葛根
素、黄芩苷、芍药苷对照品溶液分别进样，以色谱峰
面积为纵坐标，进样量质量浓度为横坐标，绘制标准
曲线，结果葛根素在2．16,--,108．0pg／mL线性关系
良好，线性回归方程为y--29164X一1032．1，，．=
0．999；芍药苷在6．3～180．0／zg／mL线性关系良
好，回归方程Y一8504．7X+12435，，．=0．9998；黄
芩苷在9．6,-,-96．0／-g／mL线性关系良好，线性回归
方程为Y=24610X一20514，／-=0．9996。
2．7．4精密度试验：取葛根素、芍药苷、黄芩苷对照
品溶液，连续迸样6次，分别测定峰面积值，结果其
RSD值分别为0．61％、0．46％、0．099％。
2．7．5重现性试验：取同一批抗脑衰胶囊样品，制
备6份供试品溶液，分别进样，测定峰面积，结果葛
根素、芍药苷、黄芩苷的RSD分别为1．97％、
万方数据
●中草菊ChineseTraditionalandHerbalDrugs第38卷第3期2007年3月·379·
0．89％、1．36％。
2．7．6稳定性试验：取供试品溶液间隔3h进样，
共6次，结果葛根素、芍药苷、黄芩苷峰面积RSD分
别为0．62oA、1．36％、1．42％。
2．7．7加样回收率试验：取批号021284抗脑衰胶
囊0．400g，精密称定，准确加入适量葛根素、黄芩
苷、芍药苷对照品，制备6份供试品溶液，进样测定，
计算回收率，结果葛根素平均回收率为99．68％，
RSD为1．23％；芍药苷平均回收率为99．05％，
RSD为1．06％；黄芩苷平均回收率为98．56％，
RSD为1．56oA。
2．7．8样品分析：取6批抗脑衰胶囊，制备供试品
溶液，进样分析，计算其中葛根素、黄芩苷、芍药苷的
质量分数，每批制剂平行测定2份，结果见表3。
表3抗脑衰胶囊中指标成分的测定结果
Table3 Determinationof ctivecomponents
inKangnaoshuaiCapsula
3讨论
对流动相甲醇一0．4％磷酸溶液、乙腈一0．6％冰
醋酸溶液、甲醇一乙腈一0．6％冰醋酸溶液和甲醇一
0．6％冰醋酸溶液梯度洗脱体系进行考察，结果以甲
醇一0．6％冰醋酸溶液体系得到的色谱峰峰形和分离
度较好。比较了190～400nm波长下的色谱图，结
果280nm波长是色谱峰信息较多，分离情况良好；
考察了不同体积流量对色谱分离的影响，体积流量
为0．9mL／min时，色谱峰信息量分布均匀，所有色
谱峰均在60min，符合要求。
根据抗脑衰胶囊不同成分的理化性质和生产工
艺条件，分别对提取方法、甲醇体积分数、提取时间
按L。(3‘)正交表进行试验，其中选用50％甲醇、
80％甲醇、无水甲醇作为溶剂，采用超声提取、回流
提取、索氏提取3种方法，提取时间分别为30、45、
60min，利用较好的色谱分离条件对其中葛根素、黄
芩苷、芍药苷的量进行测定，利用直观分析法确定最
佳供试品溶液制备方法为80％甲醇作为溶剂，回流
提取60min。
对于不同批号的抗脑衰胶囊的指纹图谱进行相
似度分析发现，2001、2002年批号的制剂相似度不
足0．8，2003年以后批次相似度均大于0．9，说明指
纹图谱在共有峰的定性上，能够反映其质量成分的
重现性；在峰面积的相对定量上，各批次胶囊质量之
间指标成分的量不稳定，离散度较大，说明从原药材
的选择、提取、干燥工艺的某一个环节存在问题。因
此，利用定量测定与特定指纹图谱分析相结合方法
评价抗脑衰胶囊质量是一种有效、可控、稳定的质量
标准体系。
微波法提取丹参中丹酚酸B的研究
孙秀利，秦培勇，谭天伟。
(北京化工大学生命科学与技术学院北京市生物加工过程重点实验室，北京100029)
摘要：目的采用微波提取技术提取丹参。方法以丹酚酸B为指标，采用单因素方法考察了影响其收率的因
素：提取溶剂体积分数、微波辐照时间、加热温度、微波输出功率、液固比、预浸泡时间及丹参粒径和提取次数。结果
最佳工艺为30％乙醇为提取溶剂，按10。1的液固比，微波输出功率650W，70℃，辐照7rain，预浸泡90rain，提
取3次，丹酚酸B收率可达到7．92％。该微波法提取5rain比热回流法提取5h的丹酚酸B收率还高。结论微波
提取技术提取丹参不仅缩短了提取时间而且节省了生产成本。
关键词：丹参；丹酚酸B；微波提取
中图分类号：R284．2；R286．02文献标识码：B 文章编号：0253—2670(2007)03—0379—04
收稿日期：2006—07—20
基金项目：国家自然科学基金资助项目(20325622；20576013；50373003)I国家“十五”攻关项目(2004BA41IB05)，博士点基金资助项目
(20030010004)；北京市科委科技计划重大项目(D0205004040211)
作者简介；孙秀利(1980一)，女。吉林省榆树人，硕士研究生，主要从事天然产物提取方面的研究。Tel：(olo)64450590
Email：2004000825@grad．butt．edu．On
*通讯作者谭天伟Tel：(010)64416691E-mail；twtan@mail．buct．edu．cn
万方数据
定量测定与特定指纹图谱分析相结合方法用于抗脑衰胶囊制
剂质量评价
作者： 王凤玲， 韩淑珍， 王勇， 袁博， 冯莉， WANG Feng-ling， HAN Shu-zhen， WANG Yong
， YUAN Bo， FENG Li
作者单位： 天津商学院生物技术与食品科学学院测试中心,天津,300134
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2007,38(3)

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