全 文 ：·1168· 中草菊 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第8期2006年8月
山茱萸中马钱苷和莫诺苷对照品的制备
李小娜1’2，霍长虹1，殷玮1，张兰桐p
(1．河北医科大学药学院，河北石家庄050017；2．华北煤炭医学院药学系，河北唐山063000)
摘要：目的研究从山茱萸中制备马钱苷和莫诺苷对照品的方法。方法 结合大孔树脂富集、硅胶柱色谱、制备
HPLC法对山茱萸水提醇沉提取物进行分离纯化，通过UV、1H—NMR、”C—NMR、MS波谱学方法对其分离产物进
行结构鉴定。结果所得马钱苷和莫诺苷用归一化法定量，质量分数均大于98％。结论本法简便，制备成本低，所
得马钱苷和莫诺苷可作为中药定性、定量分析使用的对照品。
关键词：山茱萸；马钱苷；莫诺苷；对照品；制备
中图分类号：R286．02 文献标识码：B 文章编号：0253—2670(2006)08—1168—03
PreparationofloganinandmorronisidereferencesubstancesfromFructusCorni
LIXiao—nal～，HUOChang—hon91，YINWeil，ZHANGLan—ton91
(1．SchoolofPharmacy，HebeiMedicalUniversity，Shijiazhuang050017，China；2．DepartmentofPharmacy，
NorthC inaCoalMedicalCo lege，Tangshan063000，China)
Abstract：ObjectiveToestablishaseparationmethodofloganinandmorronisidereferencesubstance
fromFructusCorni．MethodsAfterxtractedwithhotwaterandprecipitatedwithalcohol。theextractof
FructusCorniwasisolatedanpurifiedbymacroporousresin，silicagelcolumnchromatography，and
preparativeHPLC．LoganinandmorronisidewereidentifiedbyUV，1H—NMR，13C—NMR，andMS．
ResultsThecontentsofloganinandmorronisidewashigherthan98％bynormalizationmethodof
HPLC．ConclusionThedevelopedmethodiSsimplewithlowercost，bywhichloganinandmorroniside
canbeusedasreferencesubstancesforthequalitativendquantitativeanalysisofChineseherbalmedicine．
Keywords：FructusCorni；loganin；morroniside；referencesubstance；preparation
山茱萸为山茱萸CornusofficinalisSieb．et
Zucc．的干燥成熟果肉，为我国传统珍贵中药材，有
补肝肾、涩精气、固虚脱的功效[1]。马钱苷(109anin)
和莫诺苷(morroniside)同属环烯醚萜苷类，为山茱
萸中主要药效成分。马钱苷具有调节免疫、抗炎和抗
休克作用，莫诺苷具有苦补健胃和预防糖尿病性血
管病的作用[2~5]。《中国药典>>2005年版规定以测定
马钱苷的量控制山茱萸药材的质量。目前关于马钱
苷和莫诺苷提取分离方法的研究报道较少，且仅限
于硅胶柱色谱系统分离。马钱苷价格较贵，市场上更
无莫诺苷对照品出售，限制了对山茱萸进一步的开
发与研究。本实验结合大孔树脂富集、硅胶柱色谱分
离、制备HPLC法对山茱萸水提醇沉提取物进行分
离纯化，制备马钱苷和莫诺苷对照品，为山茱萸药材
及其复方中药分析提供标准物质。
1仪器与药品
美国Waters高效液相色谱仪(Waters1525
Pump，Waters2996 PhotodiodeArrayDetector，
Waters2487dual入AbsorbanceDedetector)；
Empower软件；ChristAlpha2--4LSC型冷冻干燥
机；Heidolph2旋转蒸发仪；LGl6一W型离心机(北
京医用离心机厂)。
山茱萸药材购于河南省南阳市并经本院生药学
教研室鉴定；马钱苷、莫诺苷对照品(河北医科大学
药学院提取、精制，经归一化法测定质量分数大于
99．3％)；甲醇、乙腈为色谱纯(美国Tedia试剂公
司)，其他试剂均为分析纯；CMC—Na、薄层色谱硅
胶、柱色谱硅胶(100～200目，青岛海洋化工分厂)，
AB一8大孑L吸附树脂(天津光复精细化工研究所)。
2方法与结果
2．1生药的提取：称取山茱萸粗粉(60目)500g，6
倍水浸泡过夜，煎煮提取2次，每次1h，滤过，合并
滤液，浓缩，加入4倍量乙醇，搅匀，冷藏过夜，滤过，
滤液回收乙醇，减压浓缩至无乙醇味，即得山茱萸提
收稿日期：2005—12—28
基金项目：河北省药学重点学科资助项目；河北省科技厅资助项目(012761176)
作者简介：李小娜(197l一)，女，在读博士，主要从事中药药效物质基础与药动学研究。
*通讯作者张兰桐Tel：(0311)86266419 E—mail；zhanglantong@263．net
万方数据
中草菊 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第8期2006年8月·1169·
取液约300mL。
2．2化合物的分离
2．2．1 大孔树脂富集苷类卟]：AB一8大孑L吸附树脂
500g，用乙醇浸泡2d，倾去上浮物后湿法装柱，用
乙醇洗至流出液与水混合不呈现白色乳浊现象即
可，然后以大量蒸馏水洗净柱中乙醇，水浸泡备用；
再生时用90％乙醇洗脱至流出液无色，以大量水洗
去醇即可。如果树脂颜色较深，用一定浓度的酸或碱
除去吸附性杂质，最后再用水洗至流出液呈中性。
取山茱萸提取液300mL吸附于大孔树脂柱，先
用2000mL蒸馏水洗脱，后用30％乙醇2500ml。
洗脱，取30％乙醇洗脱部分浓缩，得约15g浸膏。
2．2．2马钱苷和莫诺苷的制备]：硅胶(100～200
目)600g干法装柱，取富集所得浸膏，加等量硅胶
拌样，上样后柱色谱分离，用氯仿一甲醇溶剂系统以
9：1、8：1、7：1、6：1、5：l、4：1梯度洗脱，分别
收集氯仿～甲醇5：1和4：1馏份，根据薄层色谱检
查，合并相同的斑点部分，其中马钱苷部分浓缩后用
甲醇清洗即得白色结晶约0．7g；莫诺苷部分通过制
备型高效液相色谱分离纯化，收集液冷冻干燥后得
白色粉末约0．3g。制备色谱条件：WatersSymme～
tryPrepTMC18色谱柱(300mm×7．8ITlm，7弘m)；
流动相：甲醇一水(32：68)；柱温：30。C；体积流量：3
mL／min；检测波长：239nm；进样量：100肛L。收集
保留时间为5min的组分，见图I。
。’’I。’’l。一l1。1一’r一一—T一’0 2 4 6 8 10
r／min
图1 莫诺苷的制备高效液相色谱图
Fig．1PreparativeHPLCchromatogram
ofmorroniside
2．3结构确定
2．3．1 马钱苷：白色结晶，易溶于甲醇、水，UV：
A磐H235．8mm。MS：m／z408+(M+NH4)，449一
(M—H+HAc)。1H—NMR谱(500MHz，CH3SOCD3)
d：7．362(1H，S，3-H)，5．135(1H，d，1一H)；
13C—NMR谱(500MHz，CD3SOCD。)d：167．143
(11一C)，150．706(3一C)，112．213(4一C)，96．152(1一
C)，NMR数据与文献报道[8]一致，确定其结构为马
钱苷。
2．3．2 莫诺苷：白色结晶，易溶于甲醇、水，UV：
A攀H239．4nm。MS：re／z425+(M+NH4)，405一
(M—H)。1H—NMR谱(500MHz，CD。SOCD3)艿：
7．492(1H，S，3一H)，5．768和5．706(7-a，7一B，
1H，d，1一H)；”C—NMR谱(500MHz，CD3SOCD3)
d：i66．461(1i-C)，152．914(3-C)，110．574和
109．803(4一C)，95．139和94．285(1-C)，NMR数
据与文献报道[8]一致，确定其结构为莫诺苷。
2．4定性鉴定和定量测定
2．4．1薄层色谱法：将制备所得马钱苷和莫诺苷分
别点样于硅胶G板上，以马钱苷和莫诺苷对照品溶
液为对照，氯仿一甲醇(7：3)为展开剂，展开，晾干，
以10％硫酸乙醇溶液为显色剂，105℃加热10
min，结果马钱苷供试品为一个紫红色斑点，Rf值为
．45，莫诺苷为一个黄棕色斑点，Rf值为0．55。
2．4．2高效液相色谱法：色谱条件：DiamonsilC。。
色谱柱(250mm×4．6mm，5肛m)；流动相：甲醇一
水(32：68)、乙腈一甲醇一0．2％甲酸(12：8：82)、乙
腈一水(梯度洗脱)；体积流量：1mL／min；检测波长
分别为236nm和239nm；柱温：30。C。在不同色谱
条件下，马钱苷和莫诺苷对照品均为一个主峰，改变
流动相分析未见异常峰，用HPLC面积归一化法计
算两者的质量分数均达98％以上。其中乙腈一水梯
度洗脱时，莫诺苷保留时间为11．6min，马钱苷的
保留时间为16．3min，见图2。
，
o一。1’；一一15一一?5‘
l}rain
l一莫诺苷2一马钱苷
1一morroniside2-109anin
图2马钱苷和莫诺苷对照品的高效液相色谱图
Fig．1HPLCChromatogramoflog ninand
morronisidereferencesubstances
3讨论
3．1 马钱苷和莫诺苷均为山茱萸的活性成分，量较
高，性质稳定，用上述制备方法进行提取、分离、纯
化、操作方便，重现性好，符合对照品的纯度要求，因
而可作为对照品使用，供山茱萸药材及其复方中药
的定性、定量分析。
3．2大孔树脂精制苷类具有吸附容量大、洗脱效率
高等优点，使马钱苷和莫诺苷的量提高，在预处理的
前提下不失为一种提取苷类的优良吸附剂。把富集
后的样品通过硅胶柱色谱处理，可以去除样品中大
量的杂质，进一步分离纯化，此时可以得到马钱苷粗
万方数据
·1170· 中草药 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第8期2006年8月
品，甲醇清洗后即可。硅胶柱色谱分离得到的莫诺苷
粗品含有多种杂质，很难结晶且纯度达不到对照品
的要求，故进一步进行制备高效液相色谱分离纯化。
3．3 曾将硅胶柱色谱后得到的莫诺苷粗品进行薄
层色谱制备，未能得到莫诺苷结晶且纯度不够；制备
高效液相色谱分离后经冷冻干燥得到质量分数达
99％的莫诺苷白色的结晶。
致谢：华北制药集团新药中心牛长群老师帮助
测定质谱和核磁共振谱。
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大孔树脂吸附法富集野菊花总黄酮的工艺研究
盛 萍1，帕丽达·阿不力孜2，刘 波1，刘宏炳1
(1．新疆医科大学中医学院，新疆乌鲁木齐830054；2．新疆医科大学药学院，新疆乌鲁木齐830054)
摘 要：目的 研究大孔树脂吸附法富集野菊花总黄酮的工艺条件及参数。方法 以野菊花总黄酮为考察指标，考
察大孑L树脂富集野菊花总黄酮的最佳工艺条件。结果野菊花提取液(50mg生药／mL)5mL上大孔树脂柱(150
mmX10ram)，吸附30min后，先用100mL蒸馏水洗脱除去杂质，然后用70％乙醇100mL洗脱，洗脱速度为2
mg／mL，洗脱剂用量为9倍量树脂，树脂可重复使用3次，采用此条件为最佳工艺。结论AB一8型大孔树脂在所确
定的工艺条件下，可较好的吸附分离野菊花总黄酮。其70％乙醇洗脱物中总黄酮质量分数达4．34％以上，总黄酮
收率为84．47％以上。采用此法可以较好的富集野菊花中的有效成分。
关键词：野菊花；总黄酮；大孔吸附树脂
中图分类号：R284．2；R286．02文献标识码：B 文章编号：0253—2670(2006)08—1170—04
Enrichmentprocessingoftotalf avonefChrysanthemumindic
withmacroporousadsorptionresi
SHENGPin91，PALi—da·ABu—Lizi2，LIUB01，LIUHong—bin91
(1．CollegeofTraditionalChineseMedicine，XinjiangMedicalUniversity，Urumqi830054，China；
2．CollegeofPharmacy，XinjiangMedicalUniversity，Urumqi830054，China)
Keywords：啜rysanthemumindicunL．；totalf avone；macroporousadsorptionresi
野菊花为菊科植物野菊Chrysanthemum
indicumL．的干燥头状花序，具有疏风清热、消肿
解毒的功效[】]。现代药理研究表明野菊花总黄酮是
其降压、抗菌、抗病毒的主要有效成分心]。大孔吸附
树脂是一种具有多孔立体结构人工合成的聚合物吸
附剂，是在离子交换剂和其他吸附剂的应用基础上
发展起来的一类新型树脂，是依靠它和被吸附分子
收稿日期：2005—11—20
之间的范德华力，通过它巨大的比表面积进行吸附
而工作的。合成吸附剂有大的比表面积和类似活性
炭颗粒的内细孑L结构，这些多孔特性使之从水溶液
中有效地吸附有机化合物，且具有选择性吸附有机
化合物的能力，可用于皂苷、黄酮、蒽醌、生物碱、水
溶性酚性成分等的富集，其吸附性能、吸附条件参数
因化合物的理化性质不同而不同[3]。本实验采用该
万方数据
山茱萸中马钱苷和莫诺苷对照品的制备
作者： 李小娜， 霍长虹， 殷玮， 张兰桐， LI Xiao-na， HUO Chang-hong， YIN Wei， ZHANG
Lan-tong
作者单位： 李小娜,LI Xiao-na(河北医科大学药学院,河北,石家庄,050017;华北煤炭医学院,药学系,河
北,唐山,063000)， 霍长虹,殷玮,张兰桐,HUO Chang-hong,YIN Wei,ZHANG Lan-tong(河北
医科大学药学院,河北,石家庄,050017)
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2006,37(8)
被引用次数： 2次
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本文链接：http://d.wanfangdata.com.cn/Periodical_zcy200608019.aspx