全 文 ：中革黄ChineseTraditionalandHerbalDrugs第39卷第12期2008年12月· 815·
表l山茱萸炮制前后有效成分的比较(万一3)
Table1 QuantitativeanalysisofactivecompositionsincrudeandprocessedFructusCornis(辟一3)
3讨论
5一羟甲基糠醛主要是由己糖经加热分解产生，
广泛存在于含有糖类物质的植物和食品中，一般在
炮制或加热后其量会增加[2]。本实验发现山茱萸酒
蒸品中5一羟甲基糠醛的量较生品中明显增加，这证
实了蒸制能增加5一羟甲基糠醛的量；另外，还发现生
品水煎煮提取物中5一羟甲基糠醛的量也较甲醇超声
提取物中的高出约3倍，而制品则差别不大，这也证
实了加热对5一羟甲基糠醛的量确有很大的影响。
本实验建立了在同一高效液相色谱条件下测定
山茱萸中没食子酸、5一羟甲基糠醛、莫诺苷和马钱素
峰的分析方法，这为进一步研究山茱萸炮制前后指
纹图谱奠定了基础，也为制定山茱萸炮制工艺标准、
探讨其炮制机制提供了依据。
目前普遍认为5一羟甲基糠醛有一定的毒副作
用，但近几年来研究表明它还具有抗氧化、改善血液
流变学等对人体有利的作用心]。本实验室的研究发
现山茱萸二氯甲烷部位具有特异性体液免疫增强作
用，经分离分析得知其主要成分为5一羟甲基糠醛。此
外，药理实验还表明5一羟甲基糠醛对小鼠急性肝损
伤具有保护作用，对H。O。所致血管内皮细胞SOD
活力减低有逆转作用，可保护血管内皮细胞。因此，
5一羟甲基糠醛可以作为山茱萸的一个重要指标活性
成分，这为制定山茱萸炮制工艺标准，研究山茱萸炮
制机制提供了新的思路。
参考文献：
[1]中国药典Fs]．一都．2005．
[2]GengF，WangXJ．Presentsituationofstudyon5一
hydroxymethyl一2一furfural[J]．世界科学技术——中医药现
代化，2005，7(6)t52—56．
总丹参酮不同纯化工艺的比较
吴婉莹，杨 洲，侯晋军，果德安
(中国科学院上海生命科学研究院药物研究所，上海201203)
摘 要：目的 比较总丹参酮不同的纯化工艺，以期寻找到一种有效部位质量分数大于50％，方便可行，适于大生
产的提取工艺。方法 以总丹参酮和丹参酮Ⅱn的质量分数作为考察指标，对水沉和大孔树脂纯化工艺进行考察。
结果 水沉后上大孑L树脂再纯化及直接上大孑L树脂纯化所得总丹参酮质量分数与直接醇提水沉所得结果没有显
著性差异。结论采用醇提水沉即可得到符合要求的总丹参酮。
关键词：丹参；总丹参酮；醇提水沉；大孔吸附树脂；纯化
中图分类号：R286．1 文献标识码：A 文章编号：0253—2670(2008)12—1815一04
丹参为唇形科植物丹参Salviamiltiorrhiza
Bunge的干燥根及根茎，其活性成分为水溶性酚酸
类成分和脂溶性丹参酮类成分，其中脂溶性成分主
要有丹参酮IIA、异丹参酮、隐丹参酮等‘1‘。丹参中脂
溶性成分提取工艺已有相关研究报道‘2’3]，但对于适
于生产的获取高质量分数的丹参酮的研究报道较
少。根据丹参酮的性质，本实验采用95％乙醇提取
后，分别考察了不同的纯化工艺，并以总丹参酮、丹
收稿日期：2008—04．07
基金项目：上海市科委中药现代化专项项目(05DZl9701)
作者简介：吴婉莹(1973一)，女，黑龙江省哈尔滨市人，副研究员，博士。从事新药的研究与开发以及中药制剂及药代动力学的研究，在
该领域已发表论文10余篇。Tel：(021)50805522—2208Fax：(0 1)50272789E—mail：wuwanyin9902@yahoo．com．ca
万方数据
·1816· 中草喃 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第39卷第12期2008年12月
参酮ⅡA为考察指标E4]，制备了质量分数达50％以
上的总丹参酮，为丹参脂溶性有效部位的进一步开
发提供参考。
1仪器与试药
Agilent1100高效液相色谱仪，岛津UV一2401
紫外分光光度计。
丹参产于山东平邑，为唇形科植物丹参S．
miltiorrhizaBunge的干燥根及根茎，经北京大学医
学部天然药物学系韩健鉴定，其中含丹参酮ⅡA
0．43％，含总丹参酮1．71％。丹参酮ⅡA对照品(中
国药品生物制品检定所，批号110766—200417)，X一5
、型大孔吸附树脂(南开大学化工厂)，甲醇为色谱纯，
其余所用试剂均为分析纯。
2方法与结果
2．1总丹参酮的测定[4]：采用紫外分光光度法。
2．1．1对照品溶液的制备：取丹参酮ⅡA对照品适
量，精密称定，加95％乙醇稀释成含丹参酮ⅡA
0．4mg／mI。的溶液，摇匀，即得。
2．1．2供试品溶液的制备：按比例取样品适量，加
95％乙醇定容到5mL，摇匀，即得。
2．1．3标准曲线的建立：取丹参酮IA对照品适
量，精密称定2．03mg，置于5mI。量瓶中，加95％乙
醇至刻度。分别精密移取40、55、70、85、100、115pL
置5mI。量瓶中，在270nm下测定吸光度值。以质量
浓度对吸光度进行拟合，得到标准曲线方程A一
0．0718C+0．0516，R2—0．999。
2．1．4精密度试验：吸取供试品溶液，分别在1日
内重复测定3次，连续3日内重复测定3次，以总丹
参酮质量分数计算得日内RSD值为0．75％，日间
RSD值为1．02％。
2．1．5稳定性试验：吸取供试品溶液，分别在0、2、
4、6、8h测定总丹参酮的吸光度值，计算得吸光度
值的RSD值为1．01％。
2．1．6回收率试验：分别取供试品溶液，精密加入丹
参酮ⅡA对照品适量，制备供试品溶液，依法测定，计
算，平均回收率为98．53％，RSD为1．07％(n一9)。
2．2丹参酮ⅡA的HPLC法测定：参考《中国药典》
2005年版一部丹参项下的高效液相色谱法测定。
2．3纯化工艺的研究：在前期的试验中，进行了醇
提工艺的研究，得到的提取物中总丹参酮的质量分
数约为20％，丹参酮Ⅱ。的质量分数约为5％[5]。为
了能够得到总丹参酮质量分数在50％以上的丹参脂
溶性有效部位，实验进行了纯化工艺的研究与探讨。
2．4水沉工艺考察
2．4．1水沉温度的考察：将50g药材乙醇提取液
浓缩至20mL，加入6倍量的水，搅拌，分别室温(25
‘C)和冷藏(4‘C)静置24h，离心，弃去上清液，沉淀
用95％乙醇溶解，定容。测定，结果见表1。冷藏(4
℃)静置时，总丹参酮得量和质量分数明显好于室温
(25‘C)静置，故水沉时采用冷藏(4‘C)的方法。
表1水沉温度对结果的影响
Table1 Effectsof emperatureonresults
ofwaterp ecipitation
2．4．2水沉工艺正交试验考察：采用正交试验法考
察浓缩液的相对密度、加水倍量、静置时间的影响，
因素水平见表2。取450g药材按最佳工艺提取的提
取液，分成9份，分别浓缩至一定体积，加入不同倍
量的水，搅拌，冷藏(4。C)静置数小时，离心，弃去上
清液，沉淀用95％乙醇溶解，定容，测定，结果见表3。
表2水沉工艺的因素水平
Table2 Factorsandlevelsofwaterprecipitation
表3水沉正交试验结果
Table3 Resultsoforthogonaltestwithwaterp ecipitation
试验号 A B c D 总丹参酮转移率／％
根据直观分析可知各因素对总丹参酮提取率的
影响次序为：A>B>C，因此确定最佳工艺为
A。B。C：。按此最佳工艺进行3组验证试验，结果总丹
2
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万方数据
中草药 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第39卷第12期2008年12月· 817·
参酮的质量分数在55％左右，确证该工艺可以提取
纯化得到符合标准的有效部位。
2．5大孔树脂工艺考察：大孔树脂是目前比较常用
的有效部位纯化方法，丹参醇提物因为水溶性较差，
所以采用拌样法上样，对上样量、拌样量、径高比进
行正交试验考察，因素水平见表4。取450g药材按最
佳工艺提取的提取液，减压浓缩，真空干燥，得干膏。
取一定量干膏与X一5型湿树脂拌样，上柱，收集80％
乙醇洗脱液，定容，测定，结果见表5。方差分析见表6。
表4大孔吸附树脂纯化条件的因素与水平
Table4 Factorsandlevelsofpurityconditions
ofmacroporousresins
表5大孔树脂纯化条件正交试验结果
Table5 Purityresultsoforthogonaltest
withmacroporousresins
试验号 A B c D 总丹参酮转移率／％
A
B
C
D(误差)
2792．69
0．17
O．73
0．55
2 1396．34
2 O．08
2 0．37
2 O．27
5082．99
0．31
1．33
1．00
Fo．05(2，2)一19．00Fo．ol(2，2)一99．00
通过方差分析，因素A的差异具有显著性。通过
直观分析，由极差可知各因素对总丹参酮转移率的
影响次序为：A>C>B，确定最佳工艺为A。B，C：或
C。，按此最佳工艺进行3组验证试验，总丹参酮的质
量分数控制在50％左右，确证该工艺也可以提取纯
化到合格的有效部位。
2．6水沉一大孔树脂工艺联用考察：将水沉工艺考
察中最优工艺筛选后的浸膏干燥后，取两份平行样，
再按大孔树脂工艺考察项下最佳工艺进行纯化，测
定，结果见表7。水沉后的样品再用大孔树脂纯化，总
丹参酮和丹参酮IA的质量分数没有明显提升。
表7丹参水沉样品上大孔树脂前后的比较
Table7 Comparisonofsamplesb foreandafterpurified
withmacroporousresin
3讨论
水提醇沉、醇提水沉及大孔吸附树脂分离技术
作为常用的分离纯化的手段，用于中药有效成分的
粗分与精制、中药及其复方有效部位的制备，去除
糖、氨基酸、多肽等水溶性杂质。近年来，有效部位的
纯化研究多用大孔吸附树脂方法。通过本实验中几
种纯化工艺的比较可以看到：大孔树脂对于总丹参
酮的纯化富集效果并不理想，对有效部位的质量分
数没有实质性提升和改善，而简单的醇提水沉工艺
即可使有效部位的质量分数达到要求。
本实验对天津南开化工厂生产的大孔吸附树脂
AB一8、X一5、NKA一9、NKA、S一8等进行选择。通过树
脂最大比吸附容量试验和分离度考察实验比较发
现，S一8型树脂由于强极性，对总丹参酮的吸附性能
过强，使总丹参酮无法洗脱下来；NKA一9型树脂对
总丹参酮的吸附性能较差，无法与杂质分离；AB一8
型树脂对总丹参酮的保留性能稍强，使洗脱时需要
更多的乙醇；而X一5型和NKA型树脂对总丹参酮的
吸附性能适中，既可以将其与杂质分离，又可以较快
地将总丹参酮洗脱下来，具有较好的纯化性能，同时
考虑X一5型树脂的最大吸附高于NKA树脂，且其富
集效果也稍高于NKA，因此综合考虑，最终选用X一5
型树脂作为纯化用树脂。
总丹参酮作为丹参中的脂溶性有效部位，其在
水中溶解度极小，在工业生产中多用90％乙醇渗漉
提取，生产周期较长，而提取率、质量分数皆较低。本
实验通过丹参脂溶性成分的提取纯化工艺的研究，
以期探索到总丹参酮合理的生产工艺。
参考文献：
[1]严红。高扬。郭伟，等．不同产地丹参药材中丹参酮iA
万方数据
·1818· 中草|s ChineseTraditionalandHerbalDrugs第39卷第12期2008年12月
及丹参素的含量比较[J]．天津药学，2003，15(3)：10—13．
[2]胡志方，郭慧玲．不同提取工艺对丹参酮IA提取率的实验比
较[J]．江西中医学院学报，2005，17(1)：45—46．
[3]王曙．孙毅毅，贾运涛．丹参脂溶性成分提取工艺初探[J]．
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[4]全樟照，祝明。张文婷，等．不同产地丹参水溶性成分和脂溶
性成分指纹图谱测定及相关性研究[J]．中草药，2004，35
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[5]吴婉莹，果德安．丹参中总酚酸的大孔吸附树脂分离纯化与富
集[J]．中草药，2008，39(6)：862—864．
轻身减肥片的质量标准研究
戚雁飞，龚青，鲁敏
(浙江省食品药品检验所，浙江杭州 310004)
摘要：目的制定轻身减肥片的质量标准。方法建立防己、丹参、淫羊藿和黄芪的薄层色谱鉴别方法，并采用
HPI。C法测定大黄中大黄素和大黄酚。结果大黄素进样量在10．54～210．80ng呈良好的线性关系，大黄酚进样
量在11．2～222．40ng呈良好的线性关系；两者的回收率分别为99．1％和i00．3％。结论制订了大黄中大黄素、大
黄酚的定量方法和防己、丹参、淫羊藿和黄芪的薄层色谱鉴别方法，可较好地控制轻身减肥片的质量。
关键词：轻身减肥片；防己；丹参；淫羊藿；黄芪大黄索；大黄酚；高效液相色谱；薄层色谱
中图分类号：R286．1 文献标识码：A 文章编号：0253—2670(2008)12—1818一03
轻身减肥片收载于《中华人民共和国卫生部药
品标准》中药成方制剂第19册，由大黄、防己、丹参、
茵陈、泽泻、山楂、水牛角、淫羊藿、黄芪、白术、川芎
等组成，具有轻身减肥、益气健脾、活血化瘀、宽胸去
积的功效，用于单纯性肥胖。现行质量标准只有大黄
的薄层色谱鉴别，难以有效地综合评价其内在质量。
本实验根据本制剂的功效，选择制定了防己、丹参、
淫羊藿和黄芪的薄层色谱鉴别方法和大黄中大黄
素、大黄酚的定量方法，为有效地控制成品质量提供
重要的参考。
1仪器与试药
HPll00系列高效液相色谱仪(G1322A脱气
机，G1311A四元泵，G1313A自动进样仪，G1316A
柱温箱，G1314A紫外检测器，Chemstation色谱工
作站)；TU一1901型紫外一可见分光光度计(北京普
析通用公司)。
甲醇为色谱纯，水为重蒸水，其他试剂均为分析
纯；粉防己碱(批号110711—200507)、防己诺林碱(批
号110793—200605)、大黄素(批号0756—200110)、大
黄酚(批号0796—200309)、淫羊藿苷(批号110737—
200414)、黄芪甲苷(批号110781—200613)对照品均
由中国药品生物制品检定所提供；丹参对照药材(中
国药品生物制品检定所提供，批号120923—200610)；
轻身减肥片由正大青春宝药业有限公司提供。
2方法与结果
2．1薄层色谱鉴别试验
2．1．1防己的鉴别：取本品10片，除去包衣，研细，
加乙醇50mL，加热回流1h，放冷，滤过，滤液蒸干，
残渣加盐酸溶液(1---，30)15ml。使溶解，加醋酸乙酯
振摇提取3次，每次20mI。。合并醋酸乙酯液备用，水
液用浓氨试液调pH9，再加三氯甲烷振摇提取2次，
每次20mL，合并三氯甲烷液，蒸干，残渣加甲醇
1mL使溶解，作为供试品溶液。另取粉防己碱、防
己诺林碱对照品适量，分别加甲醇制成0．5mg／mL
的混合溶液，作为对照品溶液。吸取上述供试品溶液
10pL，对照品溶液5肛L，分别点于同一硅胶G薄层
板上，以三氯甲烷一甲醇一丙酮一浓氨试液(20：1；
4：4)冰箱冷藏的下层液为展开剂，展开，取出，晾
干，喷以稀碘化铋钾溶液。结果在供试品溶液与对照
品溶液相同位置上显示相同颜色的斑点，见图l。
2．1．2丹参的鉴别：取防己供试品制备中的醋酸乙
酯提取液蒸干，残渣加甲醇10mL使溶解，作为供试
品溶液。另取丹参对照药材0．2g，加乙醇30mL，加
热回流1h，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加盐酸溶液
( —30)15mL使溶解，加醋酸乙酯振摇提取3次，
每次20mL，合并醋酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇
2mL使溶解，作为对照药材溶液。吸取上述两种溶
液各5pL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲
收稿日期：2008—05—05
作者简介：戚雁飞(1973一)．女．浙江杭州人，副主任中药师．1994年毕业于浙江中医学院中药系，1994年至今就职于浙江省食品药品检
验所，从事中药检验．中成药质景标准研究及中药成分研究。Tel：(0571)86459425E—mail：qyf817@163．corn
万方数据
总丹参酮不同纯化工艺的比较
作者： 吴婉莹， 杨洲， 侯晋军， 果德安
作者单位： 中国科学院上海生命科学研究院药物研究所,上海,201203
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2008,39(12)
被引用次数： 5次

参考文献(5条)
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2.胡志方;郭慧玲 不同提取工艺对丹参酮I A提取率的实验比较[期刊论文]-江西中医学院学报 2005(01)
3.王曙;孙毅毅;贾运涛 丹参脂溶性成分提取工艺初探 1996(02)
4.全樟照;祝明;张文婷 不同产地丹参水溶性成分和脂溶性成分指纹图谱测定及相关性研究[期刊论文]-中草药
2004(10)
5.吴婉莹;果德安 丹参中总酚酸的大孔吸附树脂分离纯化与富集[期刊论文]-中草药 2008(06)

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2. 姜喜成.秦培勇.谭天伟.JIANG XiCheng.QIN PeiYong.TAN TianWei 大孔树脂对丹参酮ⅡA的静态吸附研究[期刊
论文]-北京化工大学学报(自然科学版)2009,36(3)
3. 王秀丽.刘永刚.孙茂.李光赜.WANG Xiu-li.LIU Yong-gang.SUN Mao.LI Guang-ze 丹参中丹参酮ⅡA的提取分离
研究[期刊论文]-广东药学院学报2011,27(1)
4. 张霄翔.陈少兵.王艳萍.ZHANG Xiao-xiang.CHEN Shao-bing.WANG Yan-ping 总丹参酮提取与纯化工艺研究[期
刊论文]-中药材2008,31(3)

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1.裴勇 妇康丸制备工艺研究[期刊论文]-中医研究 2011(6)
2.张源源.田友清 总丹参酮超声提取及其主要成分的HPLC法测定[期刊论文]-安徽农业科学 2011(4)
3.康爱荣.闫明.彭英.霍仕霞.彭晓明 高良姜中高良姜素的醇提和纯化工艺研究[期刊论文]-中国中医药信息杂志
2011(5)
4.任钰.孟美.王化宇.张炜煜 丹参中丹参酮提取物纯化工艺的研究[期刊论文]-中成药 2013(8)
5.苏酩.苗建武.田景振 丹参有效成分的提取纯化研究[期刊论文]-齐鲁药事 2010(9)


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