全 文 ：·1248· 中草菊 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第8期2006年8月
不同产地柴胡药材GC—MS指纹图谱研究
肖 蓉1’2，张志斐1，韩学静3，李德强1，张兰桐p
(1．河北医科大学药学院药物分析教研室，河北石家庄050017；2．北京联合伟华药业有限公司，北京100176；
3．河北省药品检验所，河北石家庄050011)
摘要：目的对不同产地柴胡药材的挥发油成分进行GC—MS指纹图谱比较研究。方法利用GC色谱指纹图谱
的方法，以道地产区河北省主产的7批北柴胡药材为基准，对比不同产地柴胡药材的色谱指纹图谱。色谱条件：HP一
1非极性柱，进样口温度250。C，检测器(FID)温度270℃，程序升温50～270℃，体积流量为0．9mL／min，分流比
为10：1。质谱条件：电离方式为EI，离子源温度300℃，电子能量70eV。结果从7批道地产区柴胡药材挥发油
GC指纹图谱中提取19个共有峰，用质谱分析鉴定出其成分，并对不同产地药材进行相似度的比较。结论’柴胡挥
发油气相色谱指纹图谱中各成分均得到了较好的分离，可作为柴胡药材质量评价的专属性的指纹图谱，并以此评
价不同产地柴胡的品质。
关键词：柴胡药材；挥发油；气质联用；指纹图谱
中图分类号：R282．7 文献标识码：B 文章编号：0253—2670(2006)08—1248—05
GC—MSFingerprintsofRadixBupleurif omvarioushabitats
XIA0Ron91～，ZHANGZhi—feil，HANXue—jin93，LIDe—qian91，ZHANGLan—ton91
(1．DepartmentofPharmaceuticalAnalysis，SchoolofP armacyofHebeiMedicalUniversity，Shijiazhuang050017，
China；2．BeijingUnited—WealthMedicamentLimi edCompany，Beijing100176，China；
3．HebeiInstituteforDrugControl，Shijiazhuang050011，China)
Abstract：ObjectiveToapplyGC—MSfingerprinttOthecomparisonofvolatileoilsinRadixBupleuri
collectedfromdifferenthabitats．MethodsThesamplesfromvarioushabitatswerecomparedby
applicationofGCfingerprinting．GCMethodswereoptimizednor ertogethighqualityGCprofile．The
GCsystemconsistedofAgilent6890andFlD．TheanalysiswaperformedonanHP一1column．The
temperaturesofsampleventandFIDwere250℃and270℃，respectively．Theco umntemp raturewas
sequentiallyelevatedfrom50℃to270℃at3．5℃／min．ThecarriergaswasN2，anditsflowratewas
O．9mL／min．Therefractiveratioofdistillationwas10：1．MScondition：ionizationmodew sEI；source
temperaturewas300℃，andelectronenergywas70eV．ResultsTheGCfingerprintswereestablished
andthe19commonpeakswerefoundandidentifiedwithGC—MSinvolatileoilofsevenbatchesofRadix
Bupleuri．Thecomparisonon imilaritydegreeofthecruderugsfromvarioushabitatshabeencarried
on．ConclusionAg odfingerprintofRadixBupleurihasbeendescribed．Themet odissimpleand
accuratewithgoodreproducibility．TheGCfingerprintingwi hspecificitycanbeappliedtoestimateand
controlthequalityofRadixBupleuri．
Keywords：RadixBupleuri．；volatileoil；GC—MS；fingerprints
柴胡为伞形科柴胡属植物的干燥根，具有解表
和里、舒肝解郁、升提中气之功能，其主要有效成分
为挥发油、皂苷等，为中医治疗少阳症的首选要药，
是河北道地药材之一。《中国药典》2005年版仅规定
北柴胡BupleurumchinenseDC．和狭叶柴胡B．
scorzonerifoliumWil d．(习称南柴胡、红柴胡)为正
品。然而由于我国柴胡属植物品种众多，除海南外，
全国各地均有分布[1]，且以当地所产柴胡作为习惯
用药的现象较为普遍，这就导致了柴胡及其制剂质
量的不稳定性，从而影响其疗效。柴胡属植物的根多
含有挥发油，药理学研究表明柴胡挥发油具有解热、
抗炎、抗肝损伤等作用，在临床广泛应用于外感发
热，柴胡注射液就有较好的退热、解表效果[2]，文献
报道的柴胡挥发油成分分析较多，但目前还未有系
收稿日期：2005一i2—10
基金项目：河北省自然科学基金资助项目(303453)
作者简介：肖 蓉(1980一)，女，湖北麻城人，河北医科大学药学院硕士研究生，主要从事中药开发与指纹图谱研究。
E—mail：xr20008 @163．com
*通讯作者张兰桐Tel：．(0311)86266419E—mail：zhanglantong：@263．net
万方数据
中草菊 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第8期2006年8月·1249·
统、全面的挥发油指纹图谱的报道。本研究对不同产
地柴胡药材的挥发油成分进行了系统的指纹图谱研
究，在此基础上对不同产地柴胡进行了相关的图谱
分析，为评价不同产地柴胡的质量提供客观的依据。
1仪器与试药
1．1 仪器与试剂：HP一6890型气相色谱仪，氢焰
离子化检测器；HP--6890／5973N气一质联用系统
(美国安捷伦公司)。己醛对照品(丰特斯公司，质量
分数大于98％)，正己醇(色谱标准，中外合资绿色
特种化学品有限公司，质量分数大于99％)，a一蒎烯
对照品(供定量测定用，批号897—200001)由中国药
品生物制品检定所提供，其他试剂均为分析纯。
1．2样品：不同产地柴胡药材样品来源见表1，经
河北医科大学药学院生药学教研室聂凤提教授和邯
郸市药品检验所孔增科主任药师鉴定。将收集的28
个不同产地不同品种的柴胡药材样品(其中1～7号
表1柴胡样品及来源
Table1 OriginsofRadixBupleurisamples
样品名 样品来源 拉丁名
1 河北承德野生(北柴胡)
2 河北武安市马家庄乡野生
3河北涉县野生1
4 河北涉县野生秋季现采
5河北涉县野生2
6 河北宽城县野生
7 河北武安市馆陶乡野生
8 河北涉县家种(银州柴胡)
9张家口阳原野生(黑柴胡)
10宁夏家种(秦岭柴胡)
BupleurumchinenesDC．
B．yinchowenseShanetY．Li
B．$171ithiiWolff
B．10ngicauleCall．exDC．
var．giraldiiWolff
山西北部野生(银州柴胡)
山西南部野生(北柴胡)
四川雅安(竹叶柴胡) B．marginatumWall．exDC．
邯郸家种日本柴胡(阿尔泰柴胡)B．falcatumL．
甘肃5月前采野生(小叶黑柴胡)B．smithiiWolffvar．pamifolium
ShanetY．Li
甘肃6月后采野生(锥叶柴胡)B．bicauleHelm
青海6月后采野生(小叶黑柴胡)
青海5月前采野生(小叶黑柴胡)
安徽毫州(竹叶柴胡)
甘肃柴胡
21 内蒙野生红柴胡(软苗)
22甘肃家种银柴胡
23山西硬柴胡
24 山西软硬苗柴胡(锥叶柴胡)
25河北安国家种
26四JII家种
27 陕西汉中地区家种(北柴胡)
28 张家口崇礼县亚湾子镇硬苗柴胡
(小叶黑柴胡)
B．m口r∥n耐口mWall．exDC．
B．chinenseDC．f．uanheurckii
(Muell．一Arg．)ShanetY．Li
B．sf0，M棚i“mWild
B．chinenseDC．f．vanheurckii
(Muell．一Arg．)
B．chinenseDC．f．vanheurckii
(Muell．一Arg．)ShanetY．Li
B．sichuanenseS．L．PanetHSU
样品为道地北柴胡)切成小段，置烘箱内，于60℃烘
干4h，取出，粉碎，过20目筛，备用。
2实验方法
2．1 实验条件：气相色谱条件：色谱柱：HP一1柱
(Crosslinkeddim thylpo ysiloxane，50 m×
320p．m×0．25肛m)；柱温：50℃，以3．5。C／min升
至270℃；载气：N2，0．90mL／min；分流比为10：
1；进样口温度：250℃；检测器(FID)温度：270℃；
进样量：1弘L。以己醛的色谱峰为对照。质谱分析条
件：在相同色谱条件下，电离方式为EI，离子源温度
300℃，电子能量70eV；采集方式：扫描，扫描质量
范围0～800mAU；载气为He。
2．2对照品溶液的制备：取己醛对照品适量，精密
称定，加正己烷制成3．50mg／mL的溶液，作为对照
品溶液。
2．3供试品溶液的制备：取柴胡药材适量，过20目
筛，取约200g，精密称定，置5000mL圆底烧瓶中，
加8倍量水浸润20h，与挥发油提取器连接，于挥发
油提取器水层上方精密加取正己烷3mL，回流提取
6h，分取正己烷层，用无水硫酸钠脱水并滤过置
5mL量瓶中，用正己烷洗涤并定容，摇匀，即得供试
品溶液(密封冷藏)。
2．4测定方法：分别精密吸取对照品溶液与供试品
溶液各1弘L，注入气相色谱仪，测定并记录色谱图，
以己醛峰为参照物峰，计算各峰的相对保留时间和
相对峰面积值。
2．5方法学考察口“1
2．5．1空白与对照试验：精密吸取空白溶剂正己
烷、供试品溶液及对照品溶液各1弘L，注入气相色
谱仪，记录60min内的色谱峰，并进行基线补偿。基
线补偿后基线平稳，且确定10min以前的色谱峰为
正己烷的溶剂峰，在相关数据的计算时应排除在外。
己醛对照峰与样品中的2号峰(11．3min)对应。
2．5．2稳定性试验：取1号样品药材粉末，精密称
定，按2．3项下制备供试液，分别于0、2、4、6、8、12、
24、36、48h检测指纹图谱。结果表明，各主要色谱
峰相对保留时间和峰面积占总峰面积5％以上峰的
峰面积比值均无明显变化，其RSD均小于3％，符
合指纹图谱技术要求，稳定性良好。
2．5．3精密度试验：取同一供试品溶液，重复进样
6次，记录指纹图谱。结果表明，各主要色谱峰相对
保留时间和峰面积占总峰面积5％以上峰的峰面积
比值均无明显变化，其RSD均小于3％，符合指纹
图谱技术要求，精密度良好。
万方数据
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2．5．4重现性试验：取1号样品药材粉末6份，精
密称定，按2．3项下制备供试液，分别进样，记录指
纹图谱。结果表明，各主要色谱峰相对保留时间和峰
面积占总峰面积5％以上峰的峰面积比值均无明显
变化，其RSD均小于3％，符合指纹图谱技术要求，
重现性良好。
3 结果
3．1 柴胡GC色谱指纹图谱和共有峰的建立：柴胡
GC指纹图谱中可分离出80个左右主要峰，经比较
7批道地北柴胡样品所有的记录和测定的色谱图
后，从中选定19个共有峰作为构成柴胡指纹图谱的
稳定的特征峰，标准指纹图谱见图1。为易于辨认和
分析，指纹图谱可分为3个区：10rain之前为溶剂
峰；保留时间10～35rain(I区)，为主要特征区，出
现29个特征峰，‘均基本达到基线分离，包括内参照
峰己醛峰在内(2号峰)，大部分样品的指纹峰在此
区域内均能重合，只是峰面积比值有所差别；保留时
间35～50min(Ⅱ区)为指纹密集区，不同产地柴胡
，／rain
图1柴胡气相指纹图谱
Fig·1GCFingerprintofRadixBupleuri
产地柴胡的指纹图谱在此有不同程度的缺失。其中
2号峰己醛峰为最强峰，作为内参照物，以其相对保
留时间及峰面积为1，计算各共有特征峰的相对保
留时间及峰面积比值。
3．2主要色谱峰的鉴定：在相同色谱条件下，利用
GC—MS(HP一6890／5973N气一质联用仪)进行图谱
的解析，其图谱与本研究结果一致。经分析，检出80
多个峰，鉴定了39种化合物，占总组成的81．68％，
各峰的鉴定主要通过NIST98质谱数据库检索并与
有关标准图谱资料核对鉴定口]，并以面积归一化法
的指纹图谱在此区域内有很大的差异。保留时间 测得挥发油各组分的质量分数，结果见表2。
50～60min(Ⅲ区)主要为一些细小的指纹区，不IS]3·3 不同产地柴胡GC指纹图谱的比较：应用相同
表2柴胡挥发油化学成分鉴定
Table2 ChemicalConstituentsofvolatileoi sxtractedfromRadixBupleurisamples
编号t／min 化合物名称 质量分数／％ 编号t／rain 化合物名称 质量分数／％
1 10．322戊醇 2．07 21 35．766十二醛 1．48
2 11．276己醛 17．82 22 36．1574，5-二甲基，2，3，6，7，8，8a，8b一八氢亚联苯基1．29
3 13．8961一己醇 7．13 23 36．420与25同分异构体 1．86
4 15．029庚醛 4．78 24 36．517反式一6一十三烯一4炔 3．82
5 17．155反式一2一庚烯醛0．84 25 36．697顺式一6一十三烯一4炔0．73
6 17．379Ⅱ一蒎烯 2．55 26 37．078雪松烯 1．26
7 18．000庚醇0．9427 37．140二氢化一5一己基一2(3H)呋喃酮 1．63
8 19．124p一蒎烯 3．06 28 39．228germacreneD 0．50
9 19．2402-戊基呋喃 6．85 29 39．871(R)一1一甲基一4一(1，2，2-三甲基环戊基)苯 1．26
lo 21．546反式一2一辛烯醛 1．41 30 42．228(一)一Spathulenol 1．16
11 21．753苯乙酮 3．92 31 45．902反式一7一十五烯一5炔0．49
12 23．637(反，反)2，4-辛二烯醛 1．04 32 47．3724-苯乙烯哒嗪 1．39
13 24．074十一烷 2．78 33 51．741石竹烯0．43
14 25．841反式一2一壬烯醛 1．19 34 52．199(顺)一(一)3-羟基一1，9一十七二烯4，6一二炔0．28
15 27．993(反，反)2，4-壬二烯醛0．9035 52．691荐草烯一(v1)0．20
16 29．8474a一羟基一八氢化萘0．5136 54．660与34同分异构体0．26
17 30．019顺式一2一癸烯醛0．4537 55．4915，8，11一十七三炔酸甲酯0．24
18 31．256(反，顺)2，4一癸二烯醛0．8638 57．517与34同分异构体0．63
19 32．12l(反，反)2，4-癸二烯醛 3．21 39 59．8601H一2一丁基一3一己基一茚并0．17
20 33．9722一十一烯醛0．29
I
条件分析不同产地柴胡药材，并与道地药材指纹图
谱对比，见图2。从图中可以看出不同产地柴胡药材
与道地药材指纹图谱相比，既有很好的相关性，又有
一定的差异，从而导致其质量及疗效的差异。
3．4共有模式的生成及相似度计算：以7批道地药
材作为共有模式的研究对象，将其实验数据导入中
药色谱指纹图谱相似度评价系统2004A版软件，设
定参照图谱，将谱峰自动匹配，通过软件得出道地柴
胡药材指纹图谱的共有模式(即对照图谱)，各样品
与该共有模式比较，其相似度结果见表3。
4讨论
4．1 为使该方法可行，建立中药样品的指纹图谱应
万方数据
中草菊 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第8期2006年8月·1251·
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Il、IlI区
S1～S22一样品7～28(表1)
SI--$22一SampleNo．7～28(samea Table1)
图2不同产地柴胡气相指纹图谱
Fig·2GCFingerprintsofRadixBupleurisamplesfromvarioussources
表3与共有模式比较的相似度结果
Table3 SimilaritiesamongsamplesofRadix
Bupleuricomparedwithmutualmode
样品号 相似度 样品号 相似度
l O．994 15 0．684
2 0．975 16 0．972
3 0．978 17 0．582
4 0．986 18 0．834
5 0．992 19 0．986
6 0．989 20 0．990
7 0．918 21 0．986
8 0．806 22 0．056
9 0．990 23 0．985
10 0．738 24 0．968
11 0．983 25 0．941
12 0．926 26 0．911
13 0．504 27 0．925
14 0．948 28 0．929
体现以下3个原则：指纹谱信息量大，指纹谱稳定性
好，指纹信息特征。根据这3个要求笔者对柴胡挥发
油指纹图谱的建立条件进行了优化选择。在色谱条
件的优化中，分别考察了极性柱和非极性柱，柱温
50、70、90。C和不同的程序升温等条件，结果以石英
毛细管非极性柱和程序升温的方法较为理想，色谱
峰形较好，且较稳定，在60rain内可使样品全部色
谱峰流出，且大部分得到基线分离。
4．2通过系列方法学考察建立了柴胡GC色谱指
纹图谱的共有模式，方法简单，可操作性强，可用于
柴胡药材的鉴别与品质评价，且指纹图谱提供的信
息较为丰富，可作为与混伪品区别的标准模式，以避
免同科属近缘种的伪充，为中药标准指纹谱库的建
立提供基础。
4．3 柴胡GC色谱指纹图谱的分析、比较和辨认是
建立在有大量样品的基础上，寻找出可以构成柴胡
挥发油指纹的特征峰，以便抓住主要特征，而不是选
出所有的峰，这样更有利于色谱指纹图谱的“整体
性”和“模糊性”的评价。不同产地各样品之间均具有
相应的主成分峰，其主要差别在于各峰面积比值不
同，还有个别样品出现严重的峰缺失，这些差别可以
用相似度值来进行评价。从表3中可以看出，22号
样品甘肃家种柴胡的相似度很低，其指纹峰有严重
的峰缺失现象，32min以前基本没有峰，与标准样
品差别较大；而相似度在0．90以下的样品大多是不
同种属的柴胡，它们与道地北柴胡在质量上有一定
的差别，比如15、17、18号样品均属于小叶黑柴胡，
13号样品为来自四川的春柴胡，还有10号样品宁
夏的秦岭柴胡，其相似度均较低，这与药材本身的种
属有很大关系。由于道地北柴胡来源较为固定，且与
标准样品图谱比较，整体性更强，故各样品之间相似
度较高，整体面貌非常相似，而日本引种的三岛柴胡
从指纹图谱相似度上分析更接近道地北柴胡。从指
纹图谱的峰差异及整体性评价可以看出，不同产地
之间药材既有较好的相关性，又有区别。因此要保证
药材质量稳定，固定药材的产区是主要手段之一。
4．4用中药色谱指纹图谱相似度评价系统2004A
版软件进行指纹图谱相似度的计算，获得了较满意
万方数据
·1252· 中草菊 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第8期2006年8月
的效果。该方法数据处理过程简便快速，在定性对比
多张色谱指纹图谱时具有优势，且与药材的道地性
和生药学鉴定结果相结合，为药材质量的评价提供
了更可靠的依据。
4．5指纹图谱中蕴藏了很多特征的指纹信息，这些
特征信息在中药的质量控制中将起着重要作用。为
了阐明指纹图谱的内在本质，挖掘其中的特征指纹
信息，本文利用GC／MS对28个样品进行了分析，
确定了共有的19个特征指纹峰，并对样品中峰强度
较高的特征峰进行了质谱鉴定，确定了其化学成分，
为柴胡GC指纹图谱的分析比较提供了更全面的信
息，为进一步的谱效结合研究奠定了基础。
4．6气相色谱与质谱的联用为指纹图谱中各峰的
归属提供了强有力的支持，但在组分复杂，成分较多
(如芳香性植物药的挥发油)的情况下，色谱条件即
使尽量优化也难以保证各个成分都得到良好的分
离，峰的重叠和包埋往往影响到化学归属的准确。作
为指纹图谱判断，不必要求“一步到位”，对潜在的化
学归属的不准确性可以“模糊”对待，即能构成指纹
特征即可，直至将来这种“模糊”被明朗，并对判断产
生了关键性影响。
4．7实验结果显示，气相色谱分离化合物有着很高
的效率，质谱检测器可以提供更多的化合物的信息，
提高指纹图谱的可信度，是FID检测器较好的补
充。两者联用为药材的分析提供了全面可靠的依据，
是指纹图谱研究必要的手段。
致谢：河北医科大学药学院生药学教研室聂凤裢教
授和邯郸市药品检验所孔增科主任药师帮助鉴定药
材样品。
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马钱子药材HPLC指纹图谱的研究
王月辉，乔斌，蒋建兰。，元英进
(天津大学化工学院制药工程系，天津300072)
摘要：目的建立马钱子药材的HPLC指纹图谱分析方法，为马钱子的质量控制提供新方法。方法以甲醇一水一
浓盐酸(50；50：1)为提取溶剂，超声波震荡30min，制备马钱子药材样品溶液；采用RP-HPLC(DAD)法，选用
KromasilKRl00—5C18色谱柱(250mm×4．6mm，5pm)，体积流量1．0mL／min，检测波长254nm，流动相为乙腈
(B)一0．2％三乙胺一0．2％乙酸水溶液(A)，线性梯度洗脱：0min时8％：92％，30min时17％：83％，60min时
60％：40％。结果对10批马钱子药材进行测定，以士的宁为参照物，确定了马钱子药材指纹图谱中的12个共有
峰；通过方法学考察，精密度、稳定性、重现性试验RSD均小于3％；采用相似度作为指纹图谱的评判参数，计算了
不同批次与对照指纹图谱之间的相似度，均大于0．9，表明10批药材质量均一、稳定。结论该方法适用于马钱子
药材的质量控制。
关键词：马钱子；指纹图谱；HPLC；质量控制
中图分类号：R282．7 文献标识码：A 文章编号：0253—2670(2006)08—1252—04
HPLCFingerprintofSemenStrychni
WANGYue—hui，QIAOBin，JIANGJian—lan，YUANYing—jin
(DepartmentofPharmaceuticalEngineering，SchoolofChemicalEngineeringandTechnology，
TianjinUniversity，Tianjin300072，China)
Keywords：SemenStrychni；fingerprint；HPLC；qualitycontrol
收稿日期：2005—12-12
作者简介：王月辉(1980一)，女，天津人，硕士研究生，主要研究方向为中药指纹图谱研究。
*通讯作者蒋建兰Tel：(022)27400388E—mail：jian90202@126．corn
万方数据
不同产地柴胡药材GC-MS指纹图谱研究
作者： 肖蓉， 张志斐， 韩学静， 李德强， 张兰桐， XIAO Rong， ZHANG Zhi-fei， HAN Xue-
jing， LI De-qiang， ZHANG Lan-tong
作者单位： 肖蓉,XIAO Rong(河北医科大学药学院,药物分析教研室,河北,石家庄,050017;北京联合伟华
药业有限公司,北京,100176)， 张志斐,李德强,张兰桐,ZHANG Zhi-fei,LI De-qiang,ZHANG
Lan-tong(河北医科大学药学院,药物分析教研室,河北,石家庄,050017)， 韩学静,HAN Xue-
jing(河北省药品检验所,河北,石家庄,050011)
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2006,37(8)
被引用次数： 7次

参考文献(5条)
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3.张婷婷.高珊.贺建华 小叶黑柴胡化学成分与药理作用研究进展[期刊论文]-中药材 2013(9)
4.邓寒霜.李筱玲 柴胡药材质量标准研究[期刊论文]-安徽农业科学 2008(28)
5.张志斐.宫立红.张兰桐.郭炜.王巧.王春英 河北道地药材酸枣仁脂肪油GC-MS指纹图谱研究[期刊论文]-河北医科
大学学报 2008(3)
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