全 文 ：●中草菊ChineseTraditionalandHerbalDrugs第38卷第3期2007年3月·379·
0．89％、1．36％。
2．7．6稳定性试验：取供试品溶液间隔3h进样，
共6次，结果葛根素、芍药苷、黄芩苷峰面积RSD分
别为0．62oA、1．36％、1．42％。
2．7．7加样回收率试验：取批号021284抗脑衰胶
囊0．400g，精密称定，准确加入适量葛根素、黄芩
苷、芍药苷对照品，制备6份供试品溶液，进样测定，
计算回收率，结果葛根素平均回收率为99．68％，
RSD为1．23％；芍药苷平均回收率为99．05％，
RSD为1．06％；黄芩苷平均回收率为98．56％，
RSD为1．56oA。
2．7．8样品分析：取6批抗脑衰胶囊，制备供试品
溶液，进样分析，计算其中葛根素、黄芩苷、芍药苷的
质量分数，每批制剂平行测定2份，结果见表3。
表3抗脑衰胶囊中指标成分的测定结果
Table3 Determinationof ctivecomponents
inKangnaoshuaiCapsula
3讨论
对流动相甲醇一0．4％磷酸溶液、乙腈一0．6％冰
醋酸溶液、甲醇一乙腈一0．6％冰醋酸溶液和甲醇一
0．6％冰醋酸溶液梯度洗脱体系进行考察，结果以甲
醇一0．6％冰醋酸溶液体系得到的色谱峰峰形和分离
度较好。比较了190～400nm波长下的色谱图，结
果280nm波长是色谱峰信息较多，分离情况良好；
考察了不同体积流量对色谱分离的影响，体积流量
为0．9mL／min时，色谱峰信息量分布均匀，所有色
谱峰均在60min，符合要求。
根据抗脑衰胶囊不同成分的理化性质和生产工
艺条件，分别对提取方法、甲醇体积分数、提取时间
按L。(3‘)正交表进行试验，其中选用50％甲醇、
80％甲醇、无水甲醇作为溶剂，采用超声提取、回流
提取、索氏提取3种方法，提取时间分别为30、45、
60min，利用较好的色谱分离条件对其中葛根素、黄
芩苷、芍药苷的量进行测定，利用直观分析法确定最
佳供试品溶液制备方法为80％甲醇作为溶剂，回流
提取60min。
对于不同批号的抗脑衰胶囊的指纹图谱进行相
似度分析发现，2001、2002年批号的制剂相似度不
足0．8，2003年以后批次相似度均大于0．9，说明指
纹图谱在共有峰的定性上，能够反映其质量成分的
重现性；在峰面积的相对定量上，各批次胶囊质量之
间指标成分的量不稳定，离散度较大，说明从原药材
的选择、提取、干燥工艺的某一个环节存在问题。因
此，利用定量测定与特定指纹图谱分析相结合方法
评价抗脑衰胶囊质量是一种有效、可控、稳定的质量
标准体系。
微波法提取丹参中丹酚酸B的研究
孙秀利，秦培勇，谭天伟。
(北京化工大学生命科学与技术学院北京市生物加工过程重点实验室，北京100029)
摘要：目的采用微波提取技术提取丹参。方法以丹酚酸B为指标，采用单因素方法考察了影响其收率的因
素：提取溶剂体积分数、微波辐照时间、加热温度、微波输出功率、液固比、预浸泡时间及丹参粒径和提取次数。结果
最佳工艺为30％乙醇为提取溶剂，按10。1的液固比，微波输出功率650W，70℃，辐照7rain，预浸泡90rain，提
取3次，丹酚酸B收率可达到7．92％。该微波法提取5rain比热回流法提取5h的丹酚酸B收率还高。结论微波
提取技术提取丹参不仅缩短了提取时间而且节省了生产成本。
关键词：丹参；丹酚酸B；微波提取
中图分类号：R284．2；R286．02文献标识码：B 文章编号：0253—2670(2007)03—0379—04
收稿日期：2006—07—20
基金项目：国家自然科学基金资助项目(20325622；20576013；50373003)I国家“十五”攻关项目(2004BA41IB05)，博士点基金资助项目
(20030010004)；北京市科委科技计划重大项目(D0205004040211)
作者简介；孙秀利(1980一)，女。吉林省榆树人，硕士研究生，主要从事天然产物提取方面的研究。Tel：(olo)64450590
Email：2004000825@grad．butt．edu．On
*通讯作者谭天伟Tel：(010)64416691E-mail；twtan@mail．buct．edu．cn
万方数据
·380· 中草菊ChineseTraditionalandHerbalDrugs第38卷第3期2007年3月
Microwave—assistantextractionofsalvianolicacidBfromSalviamiltiorrhiza
SUNXiu—li，QINPei—yong，TANTian—wei
(BeijingBioprocessK yLaboratory，CollegeofLifeScienceandTechnology，BeijingUniversity
ofChemicalTechnology，Beijing100029，China)
Keywords：SalviamiltiorrhizaBunge；salvianolicacidB；m rowave—assistantextraction
丹参中主要有水溶性成分酚酸类化合物和脂溶
性成分丹参酮类化合物。丹参中水溶性成分以丹酚
酸B的量最高。目前，工业上提取丹参有效成分主
要以热回流法为主[1]，但是该方法提取时间长且收
率低。Pan等凹3利用微波提取技术对丹参中的丹参
酮类成分进行提取，证实了微波法与热回流法、索式
提取法相比，具有提取高效、快速、节省时间、溶剂和
能源等优点。本实验以丹参中水溶性成分丹酚酸B
为指标成分，对丹参的微波提取法采用单因素实验
优化，探求了微波提取丹酚酸B的最佳工艺条件，
并比较了微波法和传统的热回流提取法，为微波提
取丹参的工业化生产提供了依据。
1仪器与材料
HWC3L—A型微波萃取设备(天水华圆制药
设备有限责任公司)，台式离心机(上海安亭科学仪
器厂)，美国Alltech高效液相色谱。
丹参饮片购自北京同仁堂医药股份有限公司，
由北京仟草厂中药饮片有限公司质检科倪晓红鉴
定，符合《北京市中药饮片标准))2000年版和《中国
药典))2005年版，经实验室加工制成丹参切片和粉
碎机粉碎过筛得到丹参细粉(60目)。无水乙醇、冰
醋酸(分析纯，北京化工厂)，甲醇(色谱纯，北京百灵
威化学技术有限公司)，丹酚酸B对照品(中西器材
大全，质量分数≥98％)。
2方法与结果
2．1微波法提取丹酚酸B：称10g丹参细粉，加入
提取溶剂100mL，置于微波提取罐中，进行微波提
取，改变提取溶剂体积分数、微波辐照时间、微波输
出功率、提取温度和液固比，将其离心分离得到的上
清液，即为提取液。
2．2丹酚酸B的HPI，C法分析E3,43
2．2．1色谱条件：色谱柱：ODSC，。反相柱(250mm×
4．6mm，5弘m)；流动相：1％甲醇一1％醋酸(60：
40)；体积流量：1mL／min；检测波长：280nm；进样
量：20pL。结果丹酚酸B的保留时间约为25．5min。
2．2．2标准曲线的绘制：准确配制0．4mg／mL丹
酚酸B对照品溶液，分别取出2、4、6、8mL定容于
10mL量瓶中，配成0．08、0．16、0．24、0．32、0．4
mg／mL丹酚酸B对照品溶液，进样测定。以丹酚酸
B峰面积对进样量绘制标准曲线，得标准曲线的方
程为Y一695122X一229312，r=0．9997，线性范
围为1．6～8．0gg。
2．2．3供试品溶液的制备：将离心分离得到的提取
液用0．45btm微孔滤膜滤过，得到滤液，精密吸取
滤液1mL置于10mL量瓶中，定容摇匀后即得。
2．2．4测定：精密吸取供试品溶液，注入液相色谱
仪，测定峰面积，按标准曲线方程计算丹酚酸B的
质量浓度。
2．3 丹酚酸B收率的计算：按照《中国药典>>2005
年版一部丹参项下的方法测得丹参药材中丹酚酸B
的质量分数为8．05％。
丹酚酸B的收率=提取液中丹酚酸B的质量／
丹参药材的质量×100％
2．4各因素对丹酚酸B收率的影响
2．4．1 溶剂体积分数对丹酚酸B收率的影响：丹
酚酸B易溶于水溶液，因此本实验采用乙醇水溶液
可以将其提取出来。lOg丹参细粉，150mL溶剂，
微波辐照4min，加热温度70℃，微波输出功率450
W提取，结果见图1。结果表明，随乙醇体积分数的
增加，丹酚酸B的收率逐渐增大，当乙醇体积分数
达到30％时，收率达到最大，随后收率随乙醇体积
分数的增加逐渐减少。所以少量醇的加入更有利于
增大水溶性成分丹酚酸B的收率。
O lO20 3040 50 6070
乙醇体积分数／％
图1 乙醇体积分数对丹酚酸B收翠的影响
Fig．1Effectofethanolc ncentrationonextract
’ yieldofsalvianolicacidB
2．4．2微波辐照时间对丹酚酸B收率的影响：10g
丹参细粉，150mL溶剂，乙醇体积分数为30％，加
热温度70℃，微波输出功率450W，结果见图2。物
料中有效成分受辐照时间的影响较大。丹酚酸B的
收率随微波辐照时间的增大，收率逐渐增大；但增大
万方数据
中草菊ChineseTraditionalandHerbalDrugs第38卷第3期2007年3月·381·
到一定程度后随辐照时间的增加，收率反而有所降
低。这是因为丹酚酸类物质在高温下长时间受热容
易造成分解，故微波辅助提取时间不宜过长，以不超
过7min为宜。
6．4r
芝6·2f
姗6．0}
擎5．8L
5．60L
微波辐照时间／rain
圈2微波辐射时间对丹酚酸B收辜的影响
Fig．2Effectofmicrowave—assistantextractiontime
onextractyieldofsalvianolicacidB
2．4．3加热温度对丹酚酸B收率的影响：10g丹
参细粉，150mL溶剂，乙醇体积分数为30％，微波
辐照7‘min，微波输出功率450W，结果见图3。表
明，当温度迅速升至70℃时，丹酚酸B的收率最
高，这是因为微波加热可以在短时间内迅速升温，避
免了丹酚酸B在加热过程中的分解。而传统的热回
流提取工艺，热的供给由蒸汽传导给提取溶剂，传热
速度慢，不能将溶剂在短时间内升高到提取所需的
温度，造成丹酚酸B在加热过程中分解。此后随温
度的升高，丹酚酸B的收率下降，温度越高，收率越
低。所以，加热温度过高也会使丹酚酸类物质发生分
解，所以微波提取也要选择合适的加热温度。
7
6
《
糌5
擎
4
3
30 40 50 60 70 80 90 100
微波加热温度／C
圈3加热温度对丹酚酸B收率的影响
Fig．3Effectofmicrowave—assistantextractiontempera-
tureOnextractyieldofsaivianolicacidB
2．4．4微波输出功率对丹酚酸B收率的影响：10g
丹参细粉，150mL溶剂，乙醇体积分数为30％，微
波辐照7min，加热温度70℃，结果见图4。随微波
输出功率的增加，收率增大；此后，随微波输出功率
的增加收率逐渐减小。这是因为，微波输出功率太低
(450W)达到设置温度的时间长，丹酚酸B的提取
不完全；微波输出功率太高(大于650W)达到设置
温度的时间缩短，在总的辐照时间不变的前提下，延
长了受热时间，会使丹酚酸B发生分解。微波迅速
升温达到所需温度对一些热不稳定性物质提取非常
有利，可以避免其在长时间或高温下的分解。用微波
法提取热不稳定性物质时，要选择合适的微波输出
功率，充分发挥微波辅助提取丹酚酸类热不稳定性
物质的最大优点。
450 600 750 900
微波输出功率／-
图4徽波输出功率对丹酚酸B收率的影响
Fig．4Effectofmicrowavepow ronextract
yieldofsalvianolicacidB
2．4．5 液固比对丹酚酸B收率的影响：10g丹参
细粉，乙醇体积分数为30％，微波辐照7min，加热
温度70℃，微波输出功率650W，结果见表1。随液
固比的增加，收率逐渐增大，这是因为丹酚酸B为
水溶性物质，溶于水。随液固比的增加，丹参药材得
到完全浸润，使得有效成分很好的溶出；液固比10：
1，丹酚酸B收率达到最大；此后，随液固比的增加，
收率下降，这是因为较高的液固比使得微波在一定
的能量下需加热更多的溶液，所需时间延长，收率反
而下降。考虑到溶剂利用的经济效益，在合适的范围
内选择较小的液固比较合适，而且较高的液固比给
后期的溶液处理也带来了一定的麻烦。
袭1提取溶剂和液固比对丹酚酸B收率的影响
Table1 Effectofliquid／solidratio0111extract
yieldofsalvlanolicacidB
液固I七／(g·mL‘1)收率／0A 液固比／(g·mL’1)收率／％
8 l 1 5．10 20l 1 5．80
10I 1 6．01 25l 1 5．77
15l 1 5．99
2．4．6预浸泡时间对丹酚酸B收率的影响：10g
丹参细粉，100mL溶剂，乙醇体积分数为30％，微
波辐照7min，加热温度70℃，微波输出功率650
W，结果见图5。收率随预浸泡时间的增加而增加，
这是因为通过浸泡的方法提高了丹参细粉中的含水
量，在微波辐照下，丹参的细胞组织内部产生局部的
高温、高压，压迫了丹参的细胞组织，加快了目标成
分由组织向溶剂中的传递过程。由此可见，室温下预
浸泡时间对提高丹酚酸B的收率有利。
上述实验确定了微波辅助法提取丹酚酸B的
最佳工艺条件：将丹参细粉(60目)预浸泡90min、
10倍量30％乙醇提取7min、加热至70℃、在微波
输出功率为650W时提取3次，其收率可达到
}I●，．IL∞1，
6
5
4
3
2
1
6
6
5
5
6
6
《坍擎
万方数据
·382· 中草菊ChineseTraditionalandHerbalDrugs第38卷第3期2007年3月
6．6
女6．4
锝
辎6．2
表2提取次数对丹酚酸B收率的影响
Table2 Effectofvariousextractingt meson
extractyieldofsalvianolicacidB
2．5微波工艺与传统热回流工艺的比较：10g丹
参细粉，在提取溶剂体积分数(30％乙醇)、液固比
(15：1)、提取温度(70℃)等条件基本相同的情况下
采用实验优选的最佳微波工艺与热回流提取进行比
较，结果见表3。可见微波提取5min比热回流提取
5h得到丹酚酸B的收率还要高一些。此外，生产成
本也明显降低，节省了能源。
表3微波提取与热回流提取丹参中丹酚酸B的比较
Table3 Comparisonbetweenmicrowave-assistant
extractionandhotrefluxonextracting
ofsalvianolicacidBfromS．miltiorrhiza
3讨论
研究了微波提取溶剂体积分数、辐照时间、加热
时间、微波输出功率、液固比、预浸泡时间及丹参粒
径和提取次数对丹参中丹酚酸B收率的影响，确定
了最佳的提取工艺路线：30％乙醇为提取溶剂，按
10：1的液固比，微波输出功率650W，70℃，辐照
7min，提取3次得到丹酚酸B的收率为7．92％。传
统的热回流提取工艺，热的供给由蒸汽通过传导给
提取溶剂，传热速度慢，不能将溶剂的温度在短时间
内由室温升高到提取温度，造成提取物中丹酚酸B
，在逐渐加热过程中的分解。微波提取法由于具有快
速提取的优点，减少了提取物在高温下的受热时间，
对于在高温下长时间的受热易分解的丹酚酸B类
物质的提取是十分有利的。微波辅助法提取丹酚酸
B与传统的热回流法相比，大大缩短了提取的时间，
节省了生产成本。
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敬 告 读 者
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万方数据
微波法提取丹参中丹酚酸B的研究
作者： 孙秀利， 秦培勇， 谭天伟， SUN Xiu-li， QIN Pei-yong， TAN Tian-wei
作者单位： 北京化工大学生命科学与技术学院,北京市生物加工过程重点实验室,北京,100029
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2007,38(3)
被引用次数： 2次

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