全 文 ：中草芮ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第5期2006年5月·713·
nm，士的宁的A。；为254nm，两种生物碱对照品混
合溶液的A。。，为256nm，供试品溶液的k。为265
nm，故选择260nm为测定波长。
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HPLC法测定桑姜感冒片中连翘苷
王慧琛1，吴贵华2，吕曙华2
(1．天津市津南区药品检验所，天津300350；2．天津市药品检验所，天津300070)
桑姜感冒片为常用感冒药，收载在《中华人民共
和国卫生部药品标准》中药成方制剂第6册中，由桑
叶、菊花、紫苏、连翘、苦杏仁、干姜6味药材组成，具
有散风清热、祛寒止咳等功效，用于治疗感冒、咳嗽、
头痛、咽喉肿痛症状。连翘具有清热解毒、消肿散结
的功能，与处方功效相佐，故实验中以连翘苷为定量
指标进行HPLC法测定。该方法专属性强、灵敏度
高、重现性好，可作为本品质量控制指标。
1仪器与试药
岛津LCIOAD高效液相色谱仪，SPDloAV紫
外检测器，SILl0A自动进样器，CR54数据处理机。
连翘苷对照品(中国药品生物制品检定所，批号
0821—200104)，桑姜感冒片由山西景和华禹制药有
限公司提供；GDX一104大孔吸附树脂(60～80目，批
号030221，天津市化学试剂二厂)。中性氧化铝
(100～200目，中国医药集团上海化学试剂公司)。
乙腈为色谱纯，甲醇为分析纯，水为重蒸馏水。
2方法和结果
2．1 色谱条件：色谱柱：PhenomenexC18柱(250
mm×4．6mm，5肛m)；流动相：甲醇一乙腈一水(12：
18：70)；体积流量：1mL／min；检测波长：277nm；
柱温：40℃；进样量：10肛L。
2．2对照品溶液的制备：取连翘苷对照品适量，精
密称定，加甲醇制成15／Mg／mL的溶液，即得。
2．3供试品溶液的制备：取本品10片，精密称定，
研细，取0．7g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加
入甲醇20mL，称定质量，超声处理50min，放冷，再
称定质量，用甲醇补足减失的质量，摇匀，滤过，精密
吸取续滤液5mL，加水至约15mL，通过已处理好
收稿日期：2005—08—09
的大孔吸附树脂柱(1．3g，内径8mm)，用45％甲
醇40mL洗脱，弃去洗脱液，继用70％甲醇40mL
洗脱，收集洗脱液，洗脱液通过中性氧化铝柱(0．5
g，内径8ram)，用70％甲醇20mL洗脱，合并样品
液及洗脱液，减压浓缩至干，残渣加甲醇使溶解，移
至10mL量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。
2．4 阴性样品液的制备：按处方配比，取除连翘的
其他药材，按本品制法项下的工艺制成颗粒，再按供
试品溶液的制备制得阴性样品液。
2．5专属性试验：分别精密吸取对照品溶液、供试
品溶液及阴性对照品溶液各10扯L，注入液相色谱
仪中，测定。阴性对照样品在连翘苷相应的保留时间
无色谱峰干扰。见图1。
曼 客
A彗 B 熹 C一_一h一土L
*一连翘苷
*一forsythingenin
图1连翘苷对照品(A)、桑姜感冒片(B)和缺连翘的
阴性对照(C)的HPLC图谱
Fig．1HPLCChromatogramsffOrsythingenin
referencesubstance(A)，SangjiangGanmao
Tablets(B)，andnegativesample(C)
2．6 标准曲线的制备：精密称取连翘苷对照品
10．44mg，置100mL量瓶中，加甲醇使溶解并稀释
至刻度，摇匀。精密吸取3mL，置20mL量瓶中，加
甲醇至刻度，摇匀，分别精密吸取5、10、20、25、30、
33肛L注入液相色谱仪，测定色谱峰面积。以连翘苷
进样量为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，
万方数据
·714· 中草药 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第5期2006年5月
得回归方程Y=628366．0X+775．86，r=
0．999。连翘苷在0．078～0．5168gg与峰面积呈
良好的线性关系。
2．7 精密度试验：取同一供试品溶液，精密吸取
10肛L进样，连续进样6次，结果连翘苷峰面积的
RSD为0．84％。
2．8稳定性试验：取同一供试品溶液，精密吸取lo
pL进样，分别在0、4、8、12、16、20h进样，测定连翘
苷峰面积，结果其RSD为0．53％，表明供试品溶液
在20h内稳定。
2．9重现性试验：取同批号(批号040516)5份，制
备供试品溶液，测定连翘苷的质量分数，结果平均质
量分数为0．7463mg／g，RSD为1．42％。
2．10回收率试验：取桑姜感冒片(批号为040516)
0．35g，各5份，精密称定，分别精密加入6．078弘g／
mL连翘苷对照品溶液20mL，制备供试品溶液，测
定，结果连翘苷的平均回收率为98．9％，RSD为
1．47％。
2．11样品的测定：取桑姜感冒片6批样品，制备供
试品溶液，测定，结果见表1。
表1 桑姜感冒片中连翘苷的测定结果(辟一2)
Table1 ResultsofforsythingtnininSa gjiang
GanmaoT blets(n一2)
批号 连翘苷t(mg·g-1)批号 连翘苷／(mg·91)
040204 0．42 040515 0．88
040205 0．60 040516 0．75
040514 0．80 040517 0．63
3讨论
3．1 波长的选择：经紫外光谱扫描，连翘苷在277
nm和230nm均有最大吸收。经对样品的高效液相
色谱图进行对比，采用27712m波长测定，无杂质干
扰，分离度符合规定，故选用277nm为检测波长。
3．2 流动相的选择：文献报道采用乙腈一水(25；
75)和甲醇～乙腈一水(12：18：70)为流动相，通过实
验发现，后者较前者分离效果相对较好，能使连翘苷
峰与杂质峰的分离度符合规定，故选用甲醇一乙腈一
水(12：18：70)为流动相。
3．3提取方法的选择：桑姜感冒片中药味较多，其
他药味及连翘本身的其他成分对连翘苷的分析影响
很大。连翘苷在甲醇、乙醇中有很好的溶解性，同时
亦溶于醋酸乙酯、三氯甲烷、乙醚，采用液液萃取分
离杂质效果不好。曾采用超声处理后直接进样分析、
采用氧化铝柱分离后进样分析、采用醋酸铅沉淀分
离杂质后进样分析，结果本品超声后直接进样分析
时，干扰很大，前沿的杂质峰大，连翘苷峰远达不到
基线分离。采用中性醋酸铅沉淀的方法，连翘苷可被
沉淀裹加一同沉淀，使测定结果偏低。试验中分别选
用氧化铝、聚酰胺、大孔吸附树脂柱处理的办法去除
杂质，结果表明，单纯采用以上方法都存在一定的不
足。采用中性氧化铝柱分离时，前沿杂质多，未完成
达到基线分离。采用大孑L吸附树脂柱处理后的样品，
杂质明显降低，缩短了分析时间，但连翘苷峰前有一
凸坡使连翘峰未达到基线分离。故选用大孔吸附树
脂柱和氧化铝柱处理，可去除大多数杂质，连翘苷峰
也分离到基线。同时，试验中摸索了不同体积分数甲
醇作为洗脱液对测定的影响，结果表明，采用大孔树
脂柱分离时，用45％甲醇40mL洗脱，可去除前沿
的大多数杂质，又不影响被测物质；继续采用70％
甲醇40mL洗脱时，可将被测物质洗脱下来。采用
中性氧化铝柱分离时，用70％甲醇洗脱后，可除去
凸坡的影响，达到基线分离。
HPLC法测定复方咳嗽枇杷颗粒中甘草酸
李海燕1，黄能章2
(1．佛山科技学院医学院，广东佛山528000；2．广东怡康制药有限公司，广东广州510520)
复方咳嗽枇杷颗粒处方含枇杷、桔梗、苦杏仁、
甘草等药材，具有止咳平喘功效，用于上呼吸道感染
的治疗。枇杷叶是方中君药，但无明显的定量测定指
标；桔梗药材主要含总皂苷，但苦杏仁、甘草等均含
有苷类成分，对其构成干扰，缺少专属性；而甘草中
含有甘草酸等成分，在方中无干扰成分，故本实验以
甘草酸单胺盐为指标进行HPLC定量测定方法研
究，以便更好地控制制剂质量。
收稿日期：2005—12一16
作者简介：李海燕(1974一)，女，药学讲师，主要从事天然药物化学成分研究及中药制剂质量标准研究工作。
万方数据
HPLC法测定桑姜感冒片中连翘苷
作者： 王慧琛， 吴贵华， 吕曙华
作者单位： 王慧琛(天津市津南区药品检验所,天津,300350)， 吴贵华,吕曙华(天津市药品检验所,天津
,300070)
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2006,37(5)
被引用次数： 1次

引证文献(1条)
1.史国举 HPLC法测定桑姜感冒片中绿原酸的含量[期刊论文]-中国当代医药 2012(6)


本文链接：http://d.wanfangdata.com.cn/Periodical_zcy200605030.aspx