全 文 :中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第4期2005年4月·543·
[3]ChiD,LiuAR,XuLX,eta1.Determinationofthree
ginkgolidesinGinkgotnlobaleavesbyHPLC[J].Chind
PharmAnal(药物分析杂志)1998,18(6):367—369.
[4]YanZ,XiePS.AssayofterpenelactonesinGinkgobiloba
leavesbyHPLC—ELSD口].ChinJPharmA al(药物分析杂
志),2001,21(3):173—176.
[5]GuanYM,YouHL,WangJ,eta1.Determinationof
ginkgolidesinvariousGinkgoleaves[J].ChinJPharmAnal
(药物分析杂志),2001,21(2):107—109.
[6]TangHF,ZhengZQ,ZhuxY,eta1.Qualityandquantity
analysisofterpenelactonesfromGinkgobilobaleavesbyGC-
MS[J].ChinTraditHerbDrugs(中草药),2003,34(3):
214—217.
[7]WangY,ShengLS,LouFC.Analysisandstructure
determinationoftraceonstituentintheotalginkgolideby
usingLC/DAD/ESI/MS口].ActaPharmSin(药学学报),
2001,36(8):606—608.
[8]Ek)ngXR,WuGS.Extraction,purificationandisolationof
ginkgolides口].HubeiChemInd(湖北化工),2001(4):27—
28.
粗毛淫羊藿及其不同炮制品中多糖的测定
杨武德,胡高翔
(贵阳中医学院药学系,贵州贵阳550002)
粗毛淫羊藿Epimediumac inatumFranch.
的干燥地上部分是淫羊藿的来源之一,具有补肾壮
阳、强筋骨、祛风湿等功效。现代药理研究表明:淫羊
藿多糖具有明显的免疫活性,用于调节免疫、抗肿
瘤、抗衰老等,是一种很有发展前途的生物调节
剂[1]。本实验采用苯酚一硫酸法对粗毛淫羊藿及其炮
制品中多糖进行测定。
1仪器与试药
DU一70分光光度计(美国贝克曼公司)。浓硫
酸为优级纯,葡萄糖对照品(北京化工厂,AR级),
其他均为分析纯。粗毛淫羊藿药材采自贵州省贵阳
市花溪区高坡,经本院中药鉴定教研室魏升华鉴定。
2方法与结果
2.1炮制品的制备[21
2.1.1羊脂炙:取羊脂油加热熔化,加入淫羊藿丝
50g,文火炒至均匀有泽,取出,放凉。100kg淫羊藿
用羊脂(炼油)20kg,得率为81.6%。
2.1.2炒制:取淫羊藿50g置热锅中,用微火炒至
微焦,呈微黄色,取出,放凉。得率为86.5%。
2.1.3酒制:取淫羊藿50g加黄酒喷匀炒干,颜色
稍加深时,取出,放凉。100kg淫羊藿用黄酒24kg,
得率为93.2%。
2.1.4盐炒:取淫羊藿50g放热锅内,按质量比加
食盐2%,兑水适量,边炒边洒,炒至水干,边有焦
色,取出放凉。得率为89.2%。
2.1.5酥油制:取酥油置锅内,文火加热熔化,再将
淫羊藿50g倒入,炒拌均匀,取出,表面油亮光滑,
收稿日期:2004—05—18
摊开,放凉。得率为77.8%。
2.1.6烤制:预热烘箱,使箱内温度达到120℃,将
放置拌羊脂油的淫羊藿50g的烤盘放入,烘烤10
min,取出翻动1次,再烘烤15rain,至表面有亮色,
取出翻动后放凉。100kg淫羊藿用羊脂油(炼油)20
妇,得率为76.6%。
2.2淫羊藿多糖的提取与精制:称取已干燥的淫羊
藿粉末(40目)适量,置索氏提取器中加入适量石油
醚(60~90℃)回流,残渣提取3次脱脂。弃提取液,
药粉挥干溶媒后,加入80%乙醇水浴回流提取4次
(6、5、3、1h)以除尽单糖、低聚糖和醇溶性杂质。药
粉挥干溶媒,加水煎煮提取3次(3、2、2h),合并滤
液,加入活性炭脱色。溶液抽滤,浓缩,放冷后加入乙
醇,使乙醇体积分数达80%,冰箱中放置24h,离
心,Sevage法脱蛋白,流水透析24h,再用95%乙醇
和丙酮依次反复冲洗多次,40℃烘干至恒重,得精
制多糖粉末,并置于干燥器内备用。
2.3对照品溶液的制备:精密称取105℃干燥至恒
重的葡萄糖对照品256mg,置250mL量瓶中,加蒸
馏水溶解并稀释至刻度,摇匀,备用。
2.4标准曲线的绘制[3]:精密吸取葡萄糖对照品溶
液0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.4mL,分置25mL
量瓶中,加蒸馏水稀释至刻度,摇匀。分别精密吸取
2mL于10mL带塞试管中,另取2mL蒸馏水作空
白对照。各管再加入1.0mL苯酚溶液,混匀,迅速
加入浓硫酸5mL,摇匀后放置5min,置沸水浴,加
热15min,取出,置冷水中冷却,于490nm处测定
万方数据
·544· 中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第4期2005年4月
吸光度值,经计算得回归方程:A一0.0159C一
0.0101,r一0.9991。
2.5换算因素的测定:精密称取60℃干燥至恒重
的淫羊藿多糖30mg,置100mL量瓶中,加水稀释
至刻度,摇匀。分别精密吸取此溶液2mL于具塞试
管中,按标准曲线的绘制项下方法操作,测定吸光
度,根据回归方程计算多糖溶液中葡萄糖的质量浓
度,按下式计算换算因素,,测得厂一1.09(以一6)。
f=W/(CD)
式中形为多糖的质量(mg),C为溶液中葡萄糖的质量浓度
(mg/mL),D为稀释因素
2.6供试品溶液的制备:精密称取淫羊藿生品及6
种炮制品粉末(40目)各1.5g,按2.2项下方法脱
脂、除单糖,所得多糖置100mL量瓶中,加水至刻
度,即得。
2.7精密度试验:分别精密吸取生品供试品溶液2
mL,按标准曲线的绘制项下方法测定5次,计算得
多糖的质量分数为2.042%,RSD为0.18%。
2.8重现性试验:称取生品5份,每份1.5g,制备
供试品溶液,测定,计算得多糖的质量分数为
2.039%,RSD为0.24%。
2.9稳定性试验:取供试品溶液每30min测定1
次吸光度,结果2h内测定结果稳定,RSD为
1.20%。
2.10加样回收率试验:精密称取生品0.75g,共6
份,加入约15mg葡萄糖对照品,制备供试品溶液,
测定吸光度,计算得平均回收率为99.78%,RSD为
1.10%。
2.11样品的测定:精密吸取供试品溶液2mL于
10mL带塞试管中,按标准曲线的绘制项下的方法
操作,测定供试品溶液中葡萄糖的质量浓度,按下式
计算样品中的多糖,结果见表1。
多糖的质量分数一(CDZ/W)×100%
表1 粗毛淫羊藿生品及各炮制品中多糖的测定结果(棵一5)
Table1 DeterminationofpolysaccharideIn居·acuminatum
anditsdifferentprocessedpro ucts(席一5)
从测定结果看,淫羊藿及其炮制品中多糖的质
量分数依次为:羊脂炙>炒制>烘制>酥油制>酒
制>盐制>生品。统计分析结果表明,各炮制品中多
糖的量较生品有显著性增加。
3讨论
多糖为淫羊藿药效成分之一,在一定范围内多
糖的量与药效作用成正相关[4]。淫羊藿经炮制后,其
细胞大量破壁,促进了多糖的溶出,本实验证明,淫
羊藿经过炮制后入药较好。
《中华人民共和国药典>>2000年版采用羊脂炙
入药。从淫羊藿多糖的药理作用的角度和本实验结
果看,采用传统的羊脂炙,其多糖得量较生品显著增
加(P
References:
[1]HanB,YangJS.Advancesinpharmacologicalstudiesonthe
effectsofEpimediuraL.[J].ChinTraditHerbDrugs(中草
药),2000,31(11):873.
[2]RanMX,GuoJM.ModernProcessingHa dbookofChinese
MateriaMedica(现代中药炮制手册)[M].Beijing:China
PressofTraditionalChineseMedicine,2002.
[3]YangH,JiaX.Deternmnationofpolysaccharideinrootof
TibetanmedicinePot nt玎laanserine[J].ChinTraditHerb
Drugs(中草药),2001,32(1):30.
[4]WangBX.ModernPharmacologyofChineseMateriaMedica
(现代中药药理学)I-M].Tianjin:TianjinScienceand
TechnologyPress,1997.
(上接第511页)
[4]NairMG,ChangFC.6pHydoxy一4一stigmasten-3一oneand
6phydroxy一4一capesten一3一one口].Phytochemistry,1973,12
(4):903—906.
[5]PascuaJT,UronesJG,MaroIS,eta1.Triterpenesfrom
Euphorbiabroteri[J].Phytochemistry,1987,26(6):1767—
1776.
[6]GasparEMM,DasnevesHJC.Steriodalconstituentsfrom
maturewheats rawI-J].Phytochemistry,1993,34(2):523一
bZ7.
[7]F ndlayJA,PatilAD.Anovelsterolperoidesfromthesea
anemonemetridiumsenile[J].Steroids,1984,44(3):261—
265.
[ 3NotaroG,PicciallaV, SicaD. Newsteroidal
hydroxykytonesandcloselyrelatedDoilsfromthemarine
spongeclionacopiosa[J].JNatProd,1992,55(11);1588—
1594.
万方数据
粗毛淫羊藿及其不同炮制品中多糖的测定
作者: 杨武德, 胡高翔
作者单位: 贵阳中医学院,药学系,贵州,贵阳,550002
刊名: 中草药
英文刊名: CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年,卷(期): 2005,36(4)
被引用次数: 11次
参考文献(4条)
1.Han B.Yang J S Advances in pharmacological studies on the effects of Epimedium L[期刊论文]-中草药
2000(11)
2.Ran M X.Guo J M 现代中药炮制手册 2002
3.Yang H.Jia X Deternmnation of polysaccharide in root of Tibetan medicine Potentilla anserine[期刊
论文]-中草药 2001(01)
4.WANG B X 现代中药药理学 1997
引证文献(11条)
1.饶金华.刘文英.江佳峪 柱前衍生化高效液相色谱法分析淫羊藿多糖中单糖的组成[期刊论文]-时珍国医国药
2007(2)
2.李牡丹.石旭.张玉晶.关萍 粗毛淫羊藿ISSR-PCR体系的正交优化[期刊论文]-山地农业生物学报 2009(6)
3.胡涛.黎云祥 四川淫羊藿多糖的含量测定[期刊论文]-西华师范大学学报(自然科学版) 2006(4)
4.彭鹏.罗燕.谷新利.王静雅 不同炮制方法对黄芪、党参中多糖含量的影响[期刊论文]-中兽医医药杂志 2008(6)
5.王悦云.徐文芬.何顺志 贵州产淫羊藿药材不同药用部位中多糖的含量测定[期刊论文]-时珍国医国药 2009(2)
6.钟伯雄.张婉.刘伟志.秦阿娜.庞宗然.崔箭 炮制对生药化学成分的影响研究概述[期刊论文]-时珍国医国药
2011(11)
7.杨星辰.俞培忠.许麦成.张伟 常用中药材炮制品的化学成分变化及药理作用的研究进展[期刊论文]-中南药学
2009(6)
8.陈玲玲.贾晓斌.贾东升 淫羊藿炮制机制研究进展[期刊论文]-中草药 2010(12)
9.徐艳琴.陈建军.葛菲.刘小丽.王瑛 淫羊藿药材质量评价研究现状与思考[期刊论文]-中草药 2010(4)
10.杨晓华.张华峰.王瑛 淫羊藿多糖的功能、提取与开发前景[期刊论文]-中国食品添加剂 2008(z1)
11.张华峰.杨晓华 淫羊藿的生物活性成分及其开发策略研究[期刊论文]-中草药 2010(2)
本文链接:http://d.wanfangdata.com.cn/Periodical_zcy200504026.aspx