免费文献传递   相关文献

川芎的超临界CO2萃取-大孔树脂吸附工艺的研究



全 文 :·1168· 中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第8期2005年8月
川芎的超临界C02萃取一大孔树脂吸附工艺的研究
张 军1,王风云2,詹丽玲1,黄秀红2,曾丽云1,赖小平1
(1.广州中医药大学新药开发中心,广东广州 510405;2.广州中医药大学中药学院,广东广州510405)
川芎含有藁本内酯等挥发油、川芎嗪等生物碱、
阿魏酸等酚类成分。由于药材中阿魏酸的热不稳定
性,采用水蒸气蒸馏工艺提取挥发油,可导致阿魏酸
在长时间加热提取过程中的损失;采用醇提工艺,不
仅提取得膏率高,影响制剂载药量,而且在药材提取
液回收乙醇过程中,可导致部分挥发油随溶剂蒸发,
降低了挥发油保留率。超临界CO。萃取工艺提取低
极性、挥发性成分的同时,又不破坏药渣中的热不稳
定性成分。对川芎药材进行超临界CO:萃取后,萃
取药渣中仍有大量阿魏酸和高极性成分。因此本实
验以阿魏酸的保留率和川芎药材的HPLC图谱主
峰为指标,考察超临界CO。萃取工艺所得药渣的醇
提一大孔树脂精制工艺,以达到“去粗存精”,有效富
集有效部位,提高制剂载药量的目的。
1仪器与试药
DionexSummit高效液相色谱仪,5L—SFE超
临界CO:萃取装置(广州市轻工研究所);F型大孔
吸附树脂(西安蓝深公司);阿魏酸对照品(中国药品
生物制品检定所,批号0773—9910);川芎药材购于
广州市药材公司,由本校赖小平教授鉴定为伞形科
植物川芎LigusticumchuanxiongHort.的干燥根
茎;乙腈为色谱纯,其他试剂均为分析纯。
2方法与结果
2.1 色谱条件:色谱柱:PhenomenexC18柱(250
mm×4.6ram);流动相:乙腈一0.12%磷酸溶液梯度
洗脱,60min内(10:90)一(90:10);检测波长:
280nm;体积流量:1.0mL/min。
2.2 标准曲线的制备:精密称取阿魏酸对照品
6.08mg,用甲醇溶解,定容于100mL量瓶中。精取
2.0mL,以甲醇定容至5.0mL,按照上述色谱条
件,分别进样1、2、4、8、12、20、30肛L,记录峰面积。
以峰面积对质量浓度进行线性回归,得回归方程:
y=4755.8X一21.142,r一0.9999,线性范围为
0.02432~0.7296/zg。
2.3供试品溶液的制备
收稿日期:2004—11-26
基金项目:广东省科技计划项目(2004810401007)
2.3.1超临界萃取浸膏供试品溶液制备:取萃取浸膏
(超声混匀)样品约1g,精密称定,置100mL量瓶中,
加甲醇超声溶解,稀释至刻度,摇匀,即得。
2.3.2超临界萃取药渣供试品溶液制备:取萃取药
渣约1g,精密称定,加70%乙醇50mL,称定质量,
50℃水浴温浸1h,回流提取1h,放冷,补足质量,
滤过,取续滤液,即得。
2.3.3大孔吸附树脂精制物供试品溶液制备:取川
芎超临界萃取药渣精制干燥物约1.0g,精密称定,
置于100mL量瓶中,加甲醇超声溶解,稀释至刻
度,即得。
2.4超临界CO:萃取工艺:取川芎药材细粉500
g,装入超临界CO。萃取罐,25MPa、60℃提取1.5
h[1~3],得浸膏40.2g,制备供试品溶液,HPLC法测
定阿魏酸质量浓度。结果浸膏中阿魏酸质量分数为
0.36%,折合药材中阿魏酸质量分数为0.029%,阿
魏酸提取率为25.0%;萃取药渣中阿魏酸质量分数
为0.085%,提取率为73.9%。提示川芎药材超临界
CO:萃取药渣中仍有70%以上的阿魏酸及HPLC
图谱中高极性成分未被超临界工艺提取。
2.5药渣的大孔树脂精制工艺
2.5.1上柱液的制备:取药渣适量,以40%乙醇8
倍量回流提取3h[4’5],滤过,减压浓缩至无醇味,以
水定容至(1:5),即得。
2.5.2动态吸附的考察:取已预处理的F型大孔
树脂9g,湿法装柱(30cm×2cm),溶液以1mL/
rain的速度上柱,试管收集过柱流出液,每25mL
一管,收集16管,测定其中阿魏酸的质量浓度计算
未吸附率,绘制动态吸附曲线,见图1。可见从第10
管以后,阿魏酸泄漏量开始显著增大,说明树脂柱开
始不能完全吸附药液中的阿魏酸,确定o~250mL
药液为基本吸附区域。为了阿魏酸保留完全,250
mL作为量大上样量,相当于最大上样量以阿魏酸
计为3.008mg/g干树脂,以阿魏酸在药材中的质
量分数为0.3%计,相当于最大上样量以药材计为
万方数据
中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第8期2005年8月·1169。
10
香s
蓝6
巢。
2
0
O 5 lO 15 20
试管号
图1阿魏酸的动态吸附曲线
Fig.1Dynamicadsorptioncurveofferulicacid
1.0g/g干树脂。
2.5.3洗脱溶媒种类的考察:按实验确定的最大上
样量上柱后,水洗至糖的反应为阴性,分别以4倍柱
体积20%、40%、60%、80%、95%乙醇洗脱树脂柱,
收集洗脱液,测定其中阿魏酸的质量浓度,并按公式
洗脱率一阿魏酸质量浓度×洗脱液体积/上柱液中
阿魏酸质量×100%,计算洗脱率,结果见表1。结果
表明,80%乙醇可将99%以上的阿魏酸洗脱下来,
因此确定以80%乙醇为洗脱溶媒。
表1不同溶媒对阿魏酸的洗脱
Table1 Elutionrateofferulicacidinvarioussolvent
2.5.4洗脱溶媒用量的考察:按实验确定的最大上
样量上柱后,水洗至糖的反应为阴性,分别以8倍柱
体积80%乙醇洗脱树脂柱,收集洗脱液,每1倍柱
体积1份,测定其中阿魏酸的质量浓度,计算洗脱
率,结果见表2。结果表明,4倍柱体积80%乙醇可
洗脱95%以上吸附的阿魏酸,因此确定以4倍柱体
积80%乙醇为洗脱溶媒。
表2不同用量80%乙醇对阿魏酸的洗脱率
Table2 Elutionrateofferulicacidindifferent
volumeof80%alcohol
序号 阿魏酸/(rag·mL-1)洗脱率/%
1 0.058 35.7
2 0.051 31.0
3 0.023 14.1
4 0.013 7.85
5 0.008 4.63
6 0.005 2.81
7 0.003 1.76
8 0.001 1.24
2.6过柱工艺的重复试验:取川芎药渣500g,加8
倍量40%乙醇,回流提取3h,滤液减压浓缩至无醇
味,以水定容至3000mL;药液上大孔吸附树脂柱,
水洗至多糖的反应为阴性后,以4倍柱体积80%乙
醇洗脱,合并洗脱液,回收乙醇,减压干燥,称定质
量,结果阿魏酸的得率为0.980.4。取精制产物1.0
g,精密称定,测定其中阿魏酸的质量分数,结果阿魏
酸的过程保留率为98.2%(过程保留率为上柱液中
阿魏酸的质量与乙醇洗脱液干膏中阿魏酸的质量
比)。
3讨论
以本实验确定的工艺路线,萃取浸膏与醇提精
制物合并后,与川芎药材HPLC图谱主峰基本一致
(图2),阿魏酸保留率达90%以上;同时该联合工艺
得膏率为lO%以下,大大低于传统水提或醇提工艺
的得膏率(30%以上),从而达到保留药材中有效成
分,去除杂质,提高制剂载药量的目的。
0.O 10.O20.030.040.050.060.070.0
0.O 10020.030.040.050 60070.0
O.0 10.020.030.0 40.050.050.0 70.0
t|min
1一川芎嗪2一阿魏酸
1一chuangxiongzine2-ferulicac d
图2对照品(A)、萃取浸膏(B)和药渣精制产物(c)、
川芎药材(D)的HPLC图谱
Fig.2HPLCchromatogramsofreferencesubstance
(A),extract(B),residualfin dxtract(C),
andchuanxiong(D)
References:
[1]ZhangH,LiuzL,WangHQ.Studieson xtractionofactive
ingredientsfromLigusticumch anxiongbysupercriticalfluid
extractionEJ3.ChinTraditHerbDrugs(中草药),2001,32
(12):1077-1079.
E23YuanYF,ZhouJ,ZhengXM,ela1.Studiesonvolatileoi
inLigusticumchuanxiongbysupercritiealfluidxtraction[J-I.
ChinPharmJ(中国药学杂志),2000,35(2):84.
I-3]ChenXL,LiL.Comparisonofvolatileoilfrom4 kindsof
herbsysteamdistillationndsupercriticalfluidextraction
[-j-].ChinTraditPatMed(中成药),2004,26(6):440—443.
r-4]YangGD,LiangMJ,HeLC,ela1.Solventextraction
methodsfferulicacidinLigusticumch anxiongHort.LJJ-
ChinTraditPatMed(中成药),2002,24(6):418—420.
[5]ZhaoLL,XiaXH.Studyonalcoholextractionpr cessof
RhizomaChuanxiongI-J].ChinTraditPatMed(中成药),
2002,24(3):173—174.
万方数据
川芎的超临界CO2萃取-大孔树脂吸附工艺的研究
作者: 张军, 王凤云, 詹丽玲, 黄秀红, 曾丽云, 赖小平
作者单位: 张军,詹丽玲,曾丽云,赖小平(广州中医药大学,新药开发中心,广东,广州,510405), 王凤云
,黄秀红(广州中医药大学中药学院,广东,广州,510405)
刊名: 中草药
英文刊名: CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年,卷(期): 2005,36(8)
被引用次数: 7次

参考文献(5条)
1.Zhang H;Liu Z L;Wang H Q Studies on extraction of active ingredients from Ligusticum chuanxiong by
supercritical fluid extraction[期刊论文]-中草药 2001(12)
2.Yuan Y F;Zhou J;Zheng X M Studies on volatile oil in Ligusticum chuanxiong by supercritical fluid
extraction[期刊论文]-中国药学杂志 2000(02)
3.Chen X L;Li L Comparison of volatile oil from 4 kinds of herbs by steam distillation and
supercritical fluid extraction[期刊论文]-中成药 2004(06)
4.Yang G D;Liang M J;He L C Solvent extraction methods of ferulic acid in Ligusticum chuanxiong Hort
[期刊论文]-中成药 2002(06)
5.Zhao L L;Xia X H Study on alcohol extraction process of Rhizoma Chuanxiong[期刊论文]-中成药
2002(03)

本文读者也读过(7条)
1. 魏玉平.刘俊.王永富.石兴明.陈大军.任天池 川芎中活性成分的提取工艺建立与综合评判[期刊论文]-中草药
2005,36(1)
2. 杨薇.曾瑾.王晓阳.张爱军 正交设计法对川芎镇痛活血有效部位的分析[期刊论文]-中药药理与临床2005,21(1)
3. 孔慧.邢洪霞.刘玉黔.Kong Hui.Xing Hong-xia.Liu Yu-qian 超临界CO2萃取在中药提取分离中的应用[期刊论
文]-齐鲁药事2005,24(9)
4. 刘明言.聂万达.凌宁生.LIU Ming-yan.NIE Wan-da.LING Ning-sheng 三相流化床蒸发浓缩更年安提取物的研究
[期刊论文]-中草药2005,36(9)
5. 汪继红.杨瑞.范巧娜.王凯平.胡明慧.WANG Ji-hong.YANG Rui.FAN Qiao-na.WANG Kai-ping.HU Ming-hui 正交
试验优选猪苓多糖长循环脂质体制备工艺的研究[期刊论文]-中草药2007,38(10)
6. 林秀仙.李菁 超临界萃取地肤子油的抑菌作用研究[期刊论文]-中药材2004,27(8)
7. 张赫名.年四辉.ZHANG He-ming.NIAN Si-hui 水提天麻工艺的初步研究[期刊论文]-云南中医学院学报
2006,29(2)

引证文献(8条)
1.何莉.夏新华 川芎提取液中川芎嗪与阿魏酸在HPD-100型大孔树脂上吸附-脱吸附动力学研究[期刊论文]-湖南中
医药大学学报 2007(3)
2.范震宇.吴云.窦霞.刘涛.萧伟 川芎提取物的大孔树脂纯化工艺研究[期刊论文]-南京中医药大学学报 2011(1)
3.蒋林英.郑云枫.李红阳.彭国平 当归的超临界CO2萃取-大孔树脂吸附联用工艺的研究[期刊论文]-中华中医药学
刊 2008(3)
4.范震宇.吴云.窦霞.刘涛.萧伟 川芎提取物的大孔树脂纯化工艺研究[期刊论文]-南京中医药大学学报 2011(1)
5.洪燕龙.徐德生.冯怡.袁莹 川芎中含阿魏酸效应组分的提取、纯化工艺研究[期刊论文]-中国中药杂志 2007(17)
6.王玥.杜守颖.吴清.王英姿.陆显进.魏长玲.戎堃.袁航.赵静宜.黎迎.李慧云 川芎中阿魏酸的闪式提取工艺研究
[期刊论文]-北京中医药大学学报 2012(8)
7.王秀杰.马琳 中药材中阿魏酸的提取精制方法评价[期刊论文]-时珍国医国药 2007(1)
8.王玥.杜守颖.戴俊东.陆洋.魏长玲.陆显进.黎迎.李慧云.赵静宜 当归、川芎配伍闪式提取工艺优选[期刊论文]-
中国实验方剂学杂志 2012(17)


本文链接:http://d.wanfangdata.com.cn/Periodical_zcy200508022.aspx