全 文 ：海燕化学成分研究
任连杰, 果德安Ξ
(北京大学药学院 中医药现代研究中心, 北京　100083) )
　　海洋生物具有广泛的生物多样性。为了从我国
丰富的海洋生物资源中寻找到具有新颖结构和显著
生理活性的次生代谢产物, 探讨我国北部海域海洋
生物中次生代谢产物的化学结构特征, 我们对产自
青岛海域的海燕进行了化学成分研究。海燕A steri2
na p ectin if era 是棘皮动物门海星纲海燕科动物, 是
我国北部海域常见的海星品种[1 ]。我们从其 95% 乙
醇提取物的正丁醇部位中分离鉴定 12 个化合物, 分
别为 astero sapon in P 1 (É ) , pect in io side A (Ê ) , L 2
色氨酸 (Ë ) , L 2苯丙氨酸 (Ì ) , 对羟基苯甲酸 (Í ) ,
对羟基苯乙酸 (Î ) , 对羟基苯乙胺 (Ï ) , 尿嘧啶核苷
(Ð ) , 尿嘧啶 (Ñ ) , 胸腺嘧啶脱氧核苷 (Ò ) , 胸腺嘧
啶 (Ó ) , 次黄嘌呤核苷 (ÒÊ )。以上化合物除É、Ê
外均为首次报道从海燕中分离得到。
1　材料、仪器及试剂
海燕动物 2000 年 7 月采集于山东青岛附近海
域, 由中国水产科学院青岛水产科学研究所王清印
研究员鉴定为海燕科动物海燕A 1 p ectin if era , 标本
存放在北京大学药学院生物技术室。
XT 4A 数字显示双目显微熔点仪 (温度未校正) ,
B ruker A uance 500, 核磁共振光谱仪, A E I- M S-
50 型 ( E I2M S ) 和 ZAB 2H S 型 ( FAB 2M s) Perk in2
E lm er 983 型, KB r 压片, 旋光仪使用W ZZ- 1S 数
字式自动旋光仪。色谱用硅胶 (1002200 目, 2002300
目)为青岛海洋化工厂生产, 所用溶剂为北京化工厂
生产的分析纯产品。
2　提取和分离
干燥海燕全体 10 kg, 粉碎, 用 95% 乙醇浸提 3
次, 每次 15 L , 滤过浓缩分别用石油醚、醋酸乙酯、
正丁醇进行萃取。正丁醇部位上D 2101 大孔吸附树
脂, 分别用水、30% 乙醇、50% 乙醇、70% 乙醇及
95% 乙醇洗脱。所得各部分进行硅胶柱色谱。30%
乙醇部分经氯仿2甲醇2水梯度 (10∶1∶0～ 6∶4∶
1) 洗脱。经过反复硅胶柱色谱分别得到化合物Ò、Ë、Ì、Í。50% 乙醇洗脱部分以氯仿2甲醇2水 (7∶
3∶015) 洗脱, 反复硅胶柱色谱得到化合物É、Ê、
Î、Ï、Ð、Ñ、Ó、ÒÊ。
3　结构鉴定
化合物É : 白色固体, mp 191 ℃～ 192 ℃,
[ Α]20D : + 710°( 0197, M eOH ) , IR ΜKB rm ax cm - 1: 3 407,
1 221, FAB 2M S 给出准分子量m öz = 716 (M + + 1+
K) , 根据碳谱数据 10916, 8115, 8913, 8117, 6911,
5814 和氢谱数据分析有 3 位甲基化的阿拉伯呋喃
糖存在, 1H 2NM R (CD 3OD ) 谱上还显示了甾体母核
的特征, 对应的13C2NM R谱中有 3, 6, 8, 15 位羟基化
甾体的结构信号。波谱数据与文献报道的 astero s2
apon in P 1 一致, 13C2NM R (CD 3OD ) ∆: 3916 (C21) ,
3212 (C22) , 7212 (C23) , 3311 (C24) , 5316 (C25) ,
6710 (C26) , 5012 (C27) , 7519 (C28) , 5713 (C29) ,
3718 (C210) , 1916 (C211) , 4218 (C212) , 4515 (C2
13) , 6716 (C214) , 6919 (C215) , 4118 (C216) , 5611
(C217) , 1515 (C218) , 1412 (C219) , 3614 (C220) ,
1819 (C221) , 3118 (C222) , 2817 (C223) , 8415 (C2
24 ) , 3114 (C225) , 1815 (C226) , 1811 (C227) , 10911
(C21′) , 8115 (C22′) , 8913 (C23′) , 8117 (C24′) , 6911
(C25′) , 5814 (OM e)。但是文献报道[2 ]的化合物是以
硫酸酯钠盐形式存在, 我们所得到的化合物经过原
子吸收光谱测试证明是以硫酸酯钾盐形式存在。
化合物Ê : 白色粉末状固体,M o lish 反应阳性,
mp 330 ℃, [ Α]20D = - 515 (c, 110, pyrid ine) , IR ΜKB rm ax
cm
- 1
: 3 426提示有羟基存在, 1 694 cm - 1提示有羰
基的存在, 1 244, 1 173提示可能有含 S 基团存在。
TO F2M S 给出准分子离子峰1 257。根据原子吸收光
谱显示有 S、N a 元素的存在。结合碳谱和氢谱给出
分 子 式 C 57H 93O 28S- 。 在 13C2NM R 谱 中 ∆10711,
10514, 10418, 10318, 10310 以 及 在 1H 2NM R
(C5D 5N )谱中出现的 5129 (1H , d, J = 715 H z) , 5102
(1H , d, J = 715 H z) , 4198 (1H , d, J = 715 H z) , 4190
(1H , d, J = 810 H z) , 4184 (1H , d, J = 715 H z) 表明
是糖上的端基碳和端基质子信号, 共有 5 个糖而且
是 Β构型的糖。另外13C2NM R谱和1H 2NM R谱中还
出现了 9 (11) 位双键, 23 位羰基的甾体结构的特征
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Ξ 收稿日期: 2003206203
信号, 即 ∆14515, 116187, 21118。初步判断是一甾体
皂苷并以硫酸酯形式存在, 甾体母核上连有 5 个糖。
碳谱中还出现了 9 (11) 位双键, 23 位羰基的甾体结
构信号。其理化性质和波谱数据与文献报道的pec2
t in io side A 一致[3 ]。对波谱数据进行了归属,
1H 2NM R (C5D 5N ) ∆: 0186 ( 3H , d, J = 315 H z, H 2
26) , 0188 (3H , d, J = 315 H z, H 227) , 0195 (3H , s, H 2
18) , 1104 (3H , s, H 219) , 1155 (3H , s, H 221) , 1144,
1159, 1163, 1171 ( each 3H , d, J = 6 H z, sugar’s
M e) , 4184, 4190, 4193, 5101, 5129 ( each 1H , d, J =
715 H z, 5 anom eric H )。 13C2NM R (CD 3OD ) : 3610
(C21) , 2915 (C22) , 7815 (C23) , 3018 (C24) , 4912 (C2
5 ) , 8019 (C26) , 4117 (C27) , 3514 (C28) , 14515 (C2
9) , 3813 (C210) , 11618 (C211) , 4215 (C212) , 4117
(C213) , 5411 (C214) , 2315 (C215) , 2512 (C216) ,
5917 (C217) , 1316 (C218) , 1913 (C219) , 7318 (C2
20 ) , 2711 (C221) , 5419 (C222) , 21118 (C223) , 5411
(C224) , 2414 (C225) , 2217 (C226) , 2216 (C227) ,
10418 (Q u i É 2C21) , 9112 (Q u i É 2C23) , 7417 (Q u iÉ 2C24) , 7216 (Q u i É 2C25) , 1715 (Q u i É 2C26) ,
10318 (Q u i Ê 2C21) , 8212 (Q u i Ê 2C22) , 7410 (Q u iÊ 2C23) , 8615 (Q u i Ê 2C24) , 7117 (Q u i Ê 2C25) ,
1814 (Q u i Ê 2C26) , 10513 (Q u i Ë 2C21) , 7512 (Q u iË 2C22) , 7616 (Q u i Ë 2C23) , 7518 (Q u i Ë 2C24) ,
7410 (Q u i Ë 2C25) , 1815 (Q u i Ë 2C26) , 10310 (Glu2
C21) , 8414 (Glu2C22) , 7610 (Glu2C23) , 7019 (Glu2C2
4) , 7814 (Glu2C25) , 6213 (Glu2C26) , 10710 (Fuc2C2
1 ) , 7119 (Fuc2C22) , 7319 (Fuc2C23) , 7216 (Fuc2C2
4) , 7118 (Fuc2C25) , 1711 (Fuc2C26)。
化合物Ë : 淡黄色固体, mp 288 ℃, [ Α]20D : - 32°
(C10, H 2O ) , 茚三酮反应显紫色, 化合物Ë 的理化性
质及1H 2NM R和13C2NM R数据均与文献中报道[4, 6 ]的
L 2构型的色氨酸一致。故鉴定化合物Ë 为L 2色氨酸。
化合物Ì : 白色固体,mp 283 ℃, [ Α]20D : - 3811°
(c1510, H 2O ) , 茚三酮反应显紫红色。FAB 2M S 给出
准分子离子峰 m öz = 166 (M + + 1) , 1H 2NM R 和
13C2NM R数据与文献报道的苯丙氨酸一致, 对照旋
光确定此化合物为L 2构型的苯丙氨酸[6 ]。
化合物Í : 白色针状晶体,mp 213 ℃～ 214 ℃,
13C2NM R 中明显给出苯环对位二取代的特征信号∆161164, 131158, 121137, 115116。结合氢谱推断此
化合物为对羟基苯甲酸, 与对照品对照理化性质和
TL C 的 R f 值一致, 故鉴定化合物Í 为对羟基苯
甲酸。
化合物Î : 白色晶体, E I2M S 给出分子离子峰
m öz = 152 (M + ) , 观察1H 2NM R和13C2NM R , 发现此
化合物较化合物Í 多出 ∆3127 (2H , s) 和 ∆41113, 增
加一个2CH 2, 与对羟基苯乙酸对照品对照理化性质
和 TL C 的R f 值一致, 故鉴定化合物Î 为对羟基苯
乙酸。
化合物Ï : 无色片状晶体, FAB 2M S: m öz 138
(M + + 1) , 结合碳谱和氢谱数据分析, 确定化合物
为对羟基苯乙胺, 与对照品对照理化性质和 TL C 的
R f 值一致。
化合物Ð : 白色固体, FAB 2M S 给出准分子离
子峰 m öz = 245 (M + + 1) ; 结合 1H 2NM R (DM SO ,
d6) 和13C2NM R (DM SO , d6) 谱的分析, 确定分子组
成为C 9H 12O 6。其波谱数据和理化性质与文献报道尿
嘧啶核苷的一致, 故将化合物Ð 鉴定为尿嘧啶核
苷[5, 6 ]。
化合物Ñ : 白色固体,mp 333 ℃～ 335 ℃, 波谱
数据与文献报道的尿嘧啶一致, 经理化性质以及同
尿嘧啶对照品共薄层检识分析最终确定化合物Ñ 为
尿嘧啶。
化合物Ò : 白色针状晶体,mp 187 ℃～ 188 ℃,
对照文献发现化合物 Ò 的 E I2M S、TO F2M S、
1H 2NM R、13C2NM R 以及理化性质均与胸腺嘧啶脱
氧核苷一致[6 ]。故鉴定此化合物为胸腺嘧啶脱氧
核苷。
化合物Ó : 白色粉末, mp 315 ℃～ 316 ℃,
13C2NM R 数据与化合物Ñ 对比, 尿嘧啶 C5 上的
10112 向低场位移了 ∆, 同时增另一个 ∆1118 的信
号, 这是 5 位取代了一个甲基。与文献报道胸腺嘧啶
的波谱数据一致[6 ]。化合物Ó 与胸腺嘧啶对照品共
薄层R f 值也一致。故确定此化合物为胸腺嘧啶。
化合物 ÒÊ : 白色粉末, FAB 2M S: m öz 269
(M + + 1 ) , 结 合 碳 谱 和 氢 谱 确 定 分 子 式 为
C 10H 12N 4O 5, 其理化性质和 FAB 2M S、13C2NM R、
1H 2NM R 均与文献报道次黄嘌呤核苷一致[6 ] , 故鉴
定化合物ÒÊ 为次黄嘌呤核苷。
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苍术有效部位化学成分的研究
孟　青1, 冯毅凡1, 郭晓玲1, 陈耕夫1, 李卫民2, 高　英2Ξ
(11 广东药学院 中心实验室, 广东 广州　510224; 　21 广州中医药大学 新药开发研究中心, 广东 广州　510405)
　　苍术为菊科植物茅苍术 A tracty lod es lancea
( T hunb1 ) DC1 或北苍术 A 1 ch inensis (DC1 )
Ko idz1 的干燥根茎; 其性温, 味辛、苦, 归脾、胃、肝
经; 能燥湿健脾, 祛风散寒, 明目; 用于脘腹胀满, 泄
泻、水肿, 风湿痹痛, 风寒感冒, 雀目夜盲等症[1 ]
超临界 CO 2 萃取是以液态 CO 2 为溶剂进行提
取, 是一种不同于传统中药提取的新工艺, 能够更有
效地从中药中提取有效成分。而分子蒸馏是一种特
殊的液2液分离技术, 是一种对高沸点、热敏性物料
能有效无损的分离手段。本研究首次使用 GC2M S
联用技术对使用超临界CO 2 萃取技术从中药苍术
中提取的苍术油, 及根据现代中药有效部位药研究
需要, 利用分子蒸馏技术对苍术油进一步处理, 分离
出不同的有效部位进行分析; 确定不同部位的成分
分布; 以及为使有效部位达到 50% 的可测成分, 而
确定超临界 CO 2 最佳提取工艺及分子蒸馏分离的
最佳条件提供依据。
1　仪器和材料
111　仪器: 2×25 L 超临界萃取装置 (SFE) ,M D -
S80 分子蒸馏装置, H P5890Ê GCöH P5972M S 气相
色谱2质谱联用仪。
112　材料: 苍术药材 (经鉴定为菊科植物苍术A 1
lancea 的干燥根茎)。
2　样品的制备
211　苍术油的制备: 将药材粉碎成粗粉, 装入超临
界萃取罐中, 以压力为 21 M Pa、温度为 40 ℃、流量
为 22 L öh 的条件进行萃取 4 h; 以压力为 612M Pa;
温度为 50 ℃进行解析, 萃取出淡红棕色油状物即
得, 萃取得率约为 5%。
212　分子蒸馏有效部位的制备: 取苍术油 (苍术2
SFE)适量, 在温度 100 ℃、真空度 100 (Pa×10- 1)条
件下进行分子蒸馏分离出两个部分苍术2M D 1 及苍
术2M D 2。
213　挥发油的制备: 取适量的苍术2M D 1, 按《中华
人民共和国药典》2000 年版一部附录挥发油项下进
行处理, 得挥发油 (苍术2H FY)约 75%。
3　苍术超临界CO 2 萃取物有效部分 GC-M S 分析
311　色谱条件: 色谱柱为BP1 (nonpo lar) 石英毛细
管柱 60 m ×0122 mm ×0125 Λm (澳大利亚 SGE 公
司) ; 初始温度 80 ℃, 停留 2 m in, 以 5 ℃öm in 速率
一阶升温至 120 ℃, 保持 10 m in, 以 1 ℃öm in 的速
率二阶升温至 240 ℃, 保持 25 m in, 再以 10 ℃öm in
的速率三阶升温至 260 ℃, 保持 5 m in。进样口温度
280 ℃, 柱流量 1 mL öm in。样品浓度 10 m gömL。质
谱条件: 电离方式 E I, 电离高压2 012 mV , 离子源温
度 178 ℃, 扫描质量范围 50～ 550 m öz。
312　分析结果: 取苍术2SFE、苍术2M D 1、苍术2
H FY 适量, 以无水乙醇2正己烷 (1∶1) 溶解, 配制成
浓度约为 10 m gömL 的溶液; 分别吸取 1 ΛL 以无分
流方式进样, 得总离子流图, 所得各色谱峰经峰纯度
检测, 并将得到的质谱数据经由W iley 138 质谱数
据库检索及结合文献[2 ]进行鉴别, 结果见表 1。从结
果来看, 苍术 CO 2 超临界提取物中分离出 66 个色
谱峰, 鉴定出 32 种化合物, 占气化产物总量的
77189% ; 其中苍术素占 21147, 醇类占 13192% , 烯
类占 37118% , 酯类占 1184%。经过分子蒸馏分离提
取, 各有效组份得到保留, 其中M D 1 挥发油约占
75% , 与传统方法得到的挥发油相比组份基本没有
被破坏。
4　苍术超临界CO 2 萃取物中脂肪酸类GC-M S 分析
·041· 中草药　Ch inese T radit ional and H erbal D rugs　第 35 卷第 2 期 2004 年 2 月
Ξ 收稿日期: 2003208212