免费文献传递   相关文献

罗氏海盘车、海燕、金氏真蛇尾皂甙的制备及性质鉴定比较



全 文 :罗氏海盘车、海燕、金氏真蛇尾皂甙的制备及性质鉴定比较△
郭承华 曹建国 宁黔冀
(烟台大学生化系 ,烟台  264005)
摘要 采用甲醇法分别对罗氏海盘车、海燕、金氏真蛇尾 3种棘皮动物的皂甙进行了提取制备 ,其产率分别
为 0. 0233% 、 0. 0522% 、 0. 1154% ,结果表明金氏真蛇尾的皂甙含量最高 ,并且对 3种皂甙进行理化性质实
验、溶血实验、紫外光谱和红外光谱鉴定比较 ,证明提取物为海星总皂甙 ,由罗氏海盘车、海燕、金氏真蛇尾提
取的皂甙溶点分别为 175~ 178℃、 242~ 255℃、 244~ 260℃。
关键词 罗氏海盘车 ,海燕 ,金氏真蛇尾 ,海星皂甙 ,蛇尾皂甙
PREPARATION AND IDENTIFICATION OF ASTEROSAPONIN
FROM ASTERIAS ROLLESTONI ASTERIN PECTINIFERA AND
OPHIURA KINBERGI
Guo Chenghua, Cao Jianguo, Ning Qianji
(Department of B iochemistry ,Yantai University , Yantai 264005)
ABSTRACT  Asterossaponin f rom Asterias rol lestoni Asterina pect ini fera and Ophiura kin-
bergi at the coast Yantai w ere prepared sepa ra tely by ex t ration wi th methanol , the yields
w ere 0. 0233g、 0. 0522g and 0. 1154g from 100g dry material respectiv ely. The content of as-
terosaponin f rom Ophiura kinbergi i s the most. Data of the phy sical and chemical test ,
hemolytic test, ult rav iolet spectrum and infrared spect rum analyses show ed that the ex t racts
w ere asterosaponin. The mel ting point o f asterosaponin f rom Asterias rol lestini Asterina pec-
t ini fera and Ophiura kinbergi o ranged 175~ 178℃ , 242~ 255℃ and 244~ 260℃ respectiv ely.
KEY WORDS  Asterias rollestoni , Asterina pectini fera, Ophiura kinbergi , asterosaponin,
ophiura saponin
  自本世纪中期由 Hashimo to 和 Ya-
sumoto
[1 ]最初发现海星的水提取物中存在着
有毒的皂甙以来 ,国内外许多学者对生活在
不同海域的数十种棘皮动物中皂甙的化学结
构和毒理效应等进行了大量研究 [2 ]。 海星皂
甙 ( astero saponin)不但具有抗癌、抗菌及抗
炎等活性 ,而且还具有持续降压等多种作用 ,
是可开发为实用海洋药物的一种重要活性物
质 [2 ]。海星纲的罗氏海盘车、海燕和蛇尾纲的
金氏真蛇尾是黄海海域常见几种棘皮动物 ,
对其皂甙的制备及性质少见报道 ,为充分开
发烟台近海药用棘皮动物资源 ,我们采用生
物化学方法对上述 3种棘皮动物中的皂甙进
行了提取制备 ,并对其含量及纯度进行了比
较。
1 材料与方法
1. 1 材料
罗氏海盘车 Asterias rollestoni Bell、海
燕 Asterina pectini fera ( M uller et
Jroschel )、金氏 真蛇 尾 Ophiura kinbergi
Ljungman, 1999年 4月末至 5月初采自烟台
28 《中国海洋药物》杂志 2000年第 4期 (总第 76期 )
△ 山东省教委课题号: JOOH07
潮下带 ,新鲜时洗净泥沙 ,烘干备用。
1. 2 药品及仪器
标准皂甙 ( Serv a进口分装 ,北京化工
厂 ) ,甲醇 ,苯 ,正丁醇 ,丙酮 ,磷酸二氢钠 ,磷
酸氢二钠 ,柠檬酸钠 ,均为 AR试制。
真空抽压机 ,蒸馏装置 , IR-180红外分
光光度计 (日本分光公司 ) , U-3400紫外分光
光度计 (日本日立公司 ) , X T4-100X显微熔
点测定仪 (北京电光科学仪器厂 )。
1. 3 皂甙的提取方法 (甲醇法 )
将材料粉碎成碎末状 ,称量后用甲醇法
提取 [3 ]。
1. 4 皂甙的分析鉴定
1. 4. 1 溶血实验
参照 Fuji ta和 Nishimoto 的方法 [4 ]进
行 ,同时以标准皂甙的溶血指数 ( hemoly tic
index , HI. )作参考 ,皂甙的含量及纯度以每
克试样溶血指数 ( H. I. /g )表示。
1. 4. 2 紫外、红外光谱分析
取 3种皂甙样品测其红光、紫外光谱 ,并
与标准皂甙相比较 (紫外、红外光谱测定时所
用溶液均用磷酸盐缓冲液配制 )。
1. 4. 3 显微熔点测定
取皂甙样品和标准皂甙用显微熔点测定
仪测其熔点并比较。
2 结果与讨论
2. 1  3种皂甙产量及产率比较
表 1  3种皂甙的总皂甙产量及产率
种类 材料重量 ( g ) 总皂甙产量 ( g )产率 (% )
罗氏海盘车 60 0. 014 0. 0233
海   燕 100 0. 0522 0. 0522
金氏真蛇尾 2. 6 0. 003 0. 1154
表中所示结果为两次实验的平均值。
从以上结果可以看出 , 3种棘皮动物总
皂甙产量及产率明显不同。 产量不同的原因
所用材料的起始重量不同所致 ;而产率的差
异与金氏真蛇尾、海燕、罗氏海盘车 3种棘皮
动物本身皂甙含量不同有关。另外 ,金氏真蛇
尾、海燕、罗氏海盘车各自的生殖周期 ,也是
造成皂甙产率不同的原因。
2. 2  3种皂甙的溶血性及比较
表 2  3种皂甙的溶血活性
种类 总皂甙产率 (% ) 每克试样溶血指数
罗氏海盘车 0. 0233 6473
海   燕 0. 0522 6416
金氏真蛇尾 0. 1154 17857
表中结果为两次实验的平均值 ,标准皂甙 HI. /g平
均为 34722。
从实验结果可以看出 , 3种棘皮动物皂
甙的溶血活性自高至低依次为: 金氏真蛇尾、
罗氏海盘车、海燕。从海燕、罗氏海盘车中提
取的皂甙产量和产率虽有较大区别 , HI. /g
却相差不大 ,这说明从同属于海星纲的海燕、
罗氏海盘车中提取到总皂甙的活性非常相
似 ,因此从海星纲动物体中提取的皂甙统称
为海星皂甙 [5 ]。而从金氏真蛇尾中提取的皂
甙与前二者的溶血活性差异较大 ,可定义为
蛇尾皂甙 ( ophiura saponin)。
2. 3 皂甙特性鉴定及比较
2. 3. 1 理化性质比较
从外观看 ,罗氏海盘车皂甙呈淡黄色 ,海
燕皂甙略呈浅绿色 ,而金氏真蛇尾皂甙则呈
棕黄色 ,三者均有粘性 ,易吸潮。 它们的水溶
液经振荡均产生持久的泡沫反应 ,均溶于水、
甲醇、含水乙醇及正丁醇等低级醇中 ,不溶于
苯、乙醚、丙酮等极性小的有机溶剂中。 3种
皂甙均具备皂甙的典型性质。与标准皂甙的
熔点 ( 187~ 189℃ )相比 ,罗氏海盘车、海燕、
金氏真蛇尾 3种皂甙样品的熔点分别为 175
~ 178℃、 242~ 255℃和 244~ 260℃。 3种皂
甙的熔点与标准皂甙均有差别 ,除罗氏海盘
车外 ,另外两种皂甙熔距较大 ,这说明其皂甙
中含有杂质且为混合组分。 这些杂质可能是
熔点与皂甙有较大差别的脂类 ,主要是在脱
脂或透析时混入的。
2. 3. 2 红外光谱与紫外光谱分析比较
红外光谱测定结果显示 , 3种样品与标
29《中国海洋药物》杂志 2000年第 4期 (总第 76期 )
准皂甙均在 3450cm-1、 2970cm-1、 1640cm-1、
1060cm
-1处有相似峰形的吸收峰 ,但 3种皂
甙的吸收峰与标准皂甙吸收峰也有一定的差
异 ,这说明提取的 3种皂甙中均为混合组分。
从紫外光谱分析发展 , 3种样品溶液与
标准皂甙溶液在 222~ 244nm处有特征吸收
峰。其中金氏真蛇尾的皂甙的吸收峰不十分
明显 ,这可能是金氏真蛇尾皂甙的溶液浓度
偏低造成的。海燕、罗氏海盘车皂甙的吸收峰
多 ,说明这两种皂甙中含有混合组分。另从分
类分析 ,罗氏海盘车属海星纲钳棘目海盘车
科 ,海燕属有棘目海燕科。而金氏真蛇尾属于
蛇尾纲唇蛇尾目真蛇科 ,所以不同科属的化
学成分的结构 ,虽都是皂甙 ,结构不能完全相
同 ,其理化性质有所差异 ,也是必然的。
大量海洋非食用资源的药用开发研究 ,
不仅可变废为宝 ,从中获取特效药物 ,而且活
性成分被提取后 ,剩余部分的蛋白质与多糖
类等 ,有的可作为食品及其添加剂 ;有的可作
为饲料 ,进行再开发 ,从而提高资源的利用价
值 [6 ] ,创造明显的社会效益和经济效益。
罗氏海盘车是广泛分布于浅海的一种食
肉性棘皮动物 ,营养丰富 ,富含蛋白质 ,其中
不饱和脂肪酸含量较高 ,具有作为食品、饲料
开发的巨大潜力。因罗氏海盘车类棘皮组织
内含毒素 ,可引起神经症状 ,故作为食品或饲
料开发国内报道尚少。 对金氏真蛇尾的研究
尚未见报道。本文通过比较总结出 3种海洋
生物中皂甙的含量与性质的差别 ,这对于大
规模利用黄海海域棘皮动物提取皂甙 ,开发
海洋药物具有一定的现实意义。
参考文献
1  Hashimoto Y, Yasumoto T. Confi rmation of saponin as
a toxic principle of s tarfi sh. Bul l Jap Fish 1960, 26( 11):
1132
2 王唯玮 .海星的生理药理活性物质 . 海洋药物杂志 ,
1986, 4: 46
3 郭承华 ,刘传琳 ,张传钦 ,等 . 砂海星海星皂甙的制备 .
中国海洋药物 , 1997, 16( 1): 36
4  Fu ji ta M , Nishimoto K. On th e biological as say of
Japan ese senega. J Pharm Soc Japan , 1952, 72: 1654
5 张豁中 . 棘皮动物中皂甙的分布及其分离提取 . 海洋
药物 , 1983, 6( 2): 109
6 关美君 ,丁源 . 我国海洋药物科学的十年进展及战略设
想 . 中国海洋药物 , 1989, 8( 1): 25
(收稿日期: 1999-11-12)
欢迎订阅《生物技术通讯》
《生物技术通讯》是军事医学科学院生物工程研究所主办的关于生物技术的全国性专业学
术刊物 (国内统一刊号 CN81-1148 /Q,国际标准刊号 ISSN 1009-0002) ,主要报道生物技术 (生
物工程 )及所有相关学科领域的最新科研成果与进展。主要栏目有:研究报告、技术方法、研究
简报、专论、综述、论坛、讲座、经验交流等。 读者对象主要为从事生物技术及其在生物医学、工
业、农业、环保等领域应用的科研、教学、管理人员 ,大专院校相关专业师生及有关工程技术人
员 ,以及其他对生物技术感兴趣的人员。欢迎订阅、欢迎供稿。
《生物技术通讯》 (季刊 )为大 16开本 , 80页 ,每期定价 9元 ,全年 36元。国内外开发行 ,国
内邮发代号: 82-196,国外发行代号 1433Q。编辑部办理邮购业务。
邮政编码: 100071,地址:北京丰台东大街 20号
电话: ( 010) 66948856;传真: ( 010) 63895646
电子信箱: yanm f@ ns. cn. net  bio let t@ bjl63. com
30 《中国海洋药物》杂志 2000年第 4期 (总第 76期 )