全 文 :罗氏海盘车、海燕、金氏真蛇尾皂甙的制备及性质鉴定比较△
郭承华 曹建国 宁黔冀
(烟台大学生化系 ,烟台 264005)
摘要 采用甲醇法分别对罗氏海盘车、海燕、金氏真蛇尾 3种棘皮动物的皂甙进行了提取制备 ,其产率分别
为 0. 0233% 、 0. 0522% 、 0. 1154% ,结果表明金氏真蛇尾的皂甙含量最高 ,并且对 3种皂甙进行理化性质实
验、溶血实验、紫外光谱和红外光谱鉴定比较 ,证明提取物为海星总皂甙 ,由罗氏海盘车、海燕、金氏真蛇尾提
取的皂甙溶点分别为 175~ 178℃、 242~ 255℃、 244~ 260℃。
关键词 罗氏海盘车 ,海燕 ,金氏真蛇尾 ,海星皂甙 ,蛇尾皂甙
PREPARATION AND IDENTIFICATION OF ASTEROSAPONIN
FROM ASTERIAS ROLLESTONI ASTERIN PECTINIFERA AND
OPHIURA KINBERGI
Guo Chenghua, Cao Jianguo, Ning Qianji
(Department of B iochemistry ,Yantai University , Yantai 264005)
ABSTRACT Asterossaponin f rom Asterias rol lestoni Asterina pect ini fera and Ophiura kin-
bergi at the coast Yantai w ere prepared sepa ra tely by ex t ration wi th methanol , the yields
w ere 0. 0233g、 0. 0522g and 0. 1154g from 100g dry material respectiv ely. The content of as-
terosaponin f rom Ophiura kinbergi i s the most. Data of the phy sical and chemical test ,
hemolytic test, ult rav iolet spectrum and infrared spect rum analyses show ed that the ex t racts
w ere asterosaponin. The mel ting point o f asterosaponin f rom Asterias rol lestini Asterina pec-
t ini fera and Ophiura kinbergi o ranged 175~ 178℃ , 242~ 255℃ and 244~ 260℃ respectiv ely.
KEY WORDS Asterias rollestoni , Asterina pectini fera, Ophiura kinbergi , asterosaponin,
ophiura saponin
自本世纪中期由 Hashimo to 和 Ya-
sumoto
[1 ]最初发现海星的水提取物中存在着
有毒的皂甙以来 ,国内外许多学者对生活在
不同海域的数十种棘皮动物中皂甙的化学结
构和毒理效应等进行了大量研究 [2 ]。 海星皂
甙 ( astero saponin)不但具有抗癌、抗菌及抗
炎等活性 ,而且还具有持续降压等多种作用 ,
是可开发为实用海洋药物的一种重要活性物
质 [2 ]。海星纲的罗氏海盘车、海燕和蛇尾纲的
金氏真蛇尾是黄海海域常见几种棘皮动物 ,
对其皂甙的制备及性质少见报道 ,为充分开
发烟台近海药用棘皮动物资源 ,我们采用生
物化学方法对上述 3种棘皮动物中的皂甙进
行了提取制备 ,并对其含量及纯度进行了比
较。
1 材料与方法
1. 1 材料
罗氏海盘车 Asterias rollestoni Bell、海
燕 Asterina pectini fera ( M uller et
Jroschel )、金氏 真蛇 尾 Ophiura kinbergi
Ljungman, 1999年 4月末至 5月初采自烟台
28 《中国海洋药物》杂志 2000年第 4期 (总第 76期 )
△ 山东省教委课题号: JOOH07
潮下带 ,新鲜时洗净泥沙 ,烘干备用。
1. 2 药品及仪器
标准皂甙 ( Serv a进口分装 ,北京化工
厂 ) ,甲醇 ,苯 ,正丁醇 ,丙酮 ,磷酸二氢钠 ,磷
酸氢二钠 ,柠檬酸钠 ,均为 AR试制。
真空抽压机 ,蒸馏装置 , IR-180红外分
光光度计 (日本分光公司 ) , U-3400紫外分光
光度计 (日本日立公司 ) , X T4-100X显微熔
点测定仪 (北京电光科学仪器厂 )。
1. 3 皂甙的提取方法 (甲醇法 )
将材料粉碎成碎末状 ,称量后用甲醇法
提取 [3 ]。
1. 4 皂甙的分析鉴定
1. 4. 1 溶血实验
参照 Fuji ta和 Nishimoto 的方法 [4 ]进
行 ,同时以标准皂甙的溶血指数 ( hemoly tic
index , HI. )作参考 ,皂甙的含量及纯度以每
克试样溶血指数 ( H. I. /g )表示。
1. 4. 2 紫外、红外光谱分析
取 3种皂甙样品测其红光、紫外光谱 ,并
与标准皂甙相比较 (紫外、红外光谱测定时所
用溶液均用磷酸盐缓冲液配制 )。
1. 4. 3 显微熔点测定
取皂甙样品和标准皂甙用显微熔点测定
仪测其熔点并比较。
2 结果与讨论
2. 1 3种皂甙产量及产率比较
表 1 3种皂甙的总皂甙产量及产率
种类 材料重量 ( g ) 总皂甙产量 ( g )产率 (% )
罗氏海盘车 60 0. 014 0. 0233
海 燕 100 0. 0522 0. 0522
金氏真蛇尾 2. 6 0. 003 0. 1154
表中所示结果为两次实验的平均值。
从以上结果可以看出 , 3种棘皮动物总
皂甙产量及产率明显不同。 产量不同的原因
所用材料的起始重量不同所致 ;而产率的差
异与金氏真蛇尾、海燕、罗氏海盘车 3种棘皮
动物本身皂甙含量不同有关。另外 ,金氏真蛇
尾、海燕、罗氏海盘车各自的生殖周期 ,也是
造成皂甙产率不同的原因。
2. 2 3种皂甙的溶血性及比较
表 2 3种皂甙的溶血活性
种类 总皂甙产率 (% ) 每克试样溶血指数
罗氏海盘车 0. 0233 6473
海 燕 0. 0522 6416
金氏真蛇尾 0. 1154 17857
表中结果为两次实验的平均值 ,标准皂甙 HI. /g平
均为 34722。
从实验结果可以看出 , 3种棘皮动物皂
甙的溶血活性自高至低依次为: 金氏真蛇尾、
罗氏海盘车、海燕。从海燕、罗氏海盘车中提
取的皂甙产量和产率虽有较大区别 , HI. /g
却相差不大 ,这说明从同属于海星纲的海燕、
罗氏海盘车中提取到总皂甙的活性非常相
似 ,因此从海星纲动物体中提取的皂甙统称
为海星皂甙 [5 ]。而从金氏真蛇尾中提取的皂
甙与前二者的溶血活性差异较大 ,可定义为
蛇尾皂甙 ( ophiura saponin)。
2. 3 皂甙特性鉴定及比较
2. 3. 1 理化性质比较
从外观看 ,罗氏海盘车皂甙呈淡黄色 ,海
燕皂甙略呈浅绿色 ,而金氏真蛇尾皂甙则呈
棕黄色 ,三者均有粘性 ,易吸潮。 它们的水溶
液经振荡均产生持久的泡沫反应 ,均溶于水、
甲醇、含水乙醇及正丁醇等低级醇中 ,不溶于
苯、乙醚、丙酮等极性小的有机溶剂中。 3种
皂甙均具备皂甙的典型性质。与标准皂甙的
熔点 ( 187~ 189℃ )相比 ,罗氏海盘车、海燕、
金氏真蛇尾 3种皂甙样品的熔点分别为 175
~ 178℃、 242~ 255℃和 244~ 260℃。 3种皂
甙的熔点与标准皂甙均有差别 ,除罗氏海盘
车外 ,另外两种皂甙熔距较大 ,这说明其皂甙
中含有杂质且为混合组分。 这些杂质可能是
熔点与皂甙有较大差别的脂类 ,主要是在脱
脂或透析时混入的。
2. 3. 2 红外光谱与紫外光谱分析比较
红外光谱测定结果显示 , 3种样品与标
29《中国海洋药物》杂志 2000年第 4期 (总第 76期 )
准皂甙均在 3450cm-1、 2970cm-1、 1640cm-1、
1060cm
-1处有相似峰形的吸收峰 ,但 3种皂
甙的吸收峰与标准皂甙吸收峰也有一定的差
异 ,这说明提取的 3种皂甙中均为混合组分。
从紫外光谱分析发展 , 3种样品溶液与
标准皂甙溶液在 222~ 244nm处有特征吸收
峰。其中金氏真蛇尾的皂甙的吸收峰不十分
明显 ,这可能是金氏真蛇尾皂甙的溶液浓度
偏低造成的。海燕、罗氏海盘车皂甙的吸收峰
多 ,说明这两种皂甙中含有混合组分。另从分
类分析 ,罗氏海盘车属海星纲钳棘目海盘车
科 ,海燕属有棘目海燕科。而金氏真蛇尾属于
蛇尾纲唇蛇尾目真蛇科 ,所以不同科属的化
学成分的结构 ,虽都是皂甙 ,结构不能完全相
同 ,其理化性质有所差异 ,也是必然的。
大量海洋非食用资源的药用开发研究 ,
不仅可变废为宝 ,从中获取特效药物 ,而且活
性成分被提取后 ,剩余部分的蛋白质与多糖
类等 ,有的可作为食品及其添加剂 ;有的可作
为饲料 ,进行再开发 ,从而提高资源的利用价
值 [6 ] ,创造明显的社会效益和经济效益。
罗氏海盘车是广泛分布于浅海的一种食
肉性棘皮动物 ,营养丰富 ,富含蛋白质 ,其中
不饱和脂肪酸含量较高 ,具有作为食品、饲料
开发的巨大潜力。因罗氏海盘车类棘皮组织
内含毒素 ,可引起神经症状 ,故作为食品或饲
料开发国内报道尚少。 对金氏真蛇尾的研究
尚未见报道。本文通过比较总结出 3种海洋
生物中皂甙的含量与性质的差别 ,这对于大
规模利用黄海海域棘皮动物提取皂甙 ,开发
海洋药物具有一定的现实意义。
参考文献
1 Hashimoto Y, Yasumoto T. Confi rmation of saponin as
a toxic principle of s tarfi sh. Bul l Jap Fish 1960, 26( 11):
1132
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1986, 4: 46
3 郭承华 ,刘传琳 ,张传钦 ,等 . 砂海星海星皂甙的制备 .
中国海洋药物 , 1997, 16( 1): 36
4 Fu ji ta M , Nishimoto K. On th e biological as say of
Japan ese senega. J Pharm Soc Japan , 1952, 72: 1654
5 张豁中 . 棘皮动物中皂甙的分布及其分离提取 . 海洋
药物 , 1983, 6( 2): 109
6 关美君 ,丁源 . 我国海洋药物科学的十年进展及战略设
想 . 中国海洋药物 , 1989, 8( 1): 25
(收稿日期: 1999-11-12)
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