全 文 ：。1540· 中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第10期2005年10月
·药材与资源·
金钗石斛的位点特异性PCR鉴别研究
徐虹“2，王峥涛“”，丁小奈1，徐珞珊1
(1．中国药科大学生药学研究室，江苏南京210038f2．上海中医药大学中药研究所．上海201203)
搐耍：目的建立一种简便、实用的金钗石斛的DNA分子鉴别方法。方法根据金钗石斛及其他黄草类、枫斗类
石斛的rDNAITS序列数据库．寻找金钗石斛特异性的序列位点，设计专用予金镀石斛鉴别的PCR引物，用该引
物在不同条件下扩增石斛属植物的模板DNA，建立只有金钗石斛具有阳性扩增的PCR鉴别条件。螭果在66℃、
40s的复性条件下进行鉴别PCR，金钗石斛的模板DNA扩增出约300hp的阳性扩增带，而其他39种石斛的模板
DNA在同样条件下无扩增产物。续论运用位点特异性PCR能有效地从其他石斛属植物中鉴别出金钗石斛，该
方法具有高教、准确、简便、省时的特点．应用前景广泛。
关羹词：金钗石斛f位点特异性PCR；鉴别
中圈分类号：R282．71 文献标识码：A 文章绷号：0253～2670(2005)10—1540—05
AuthenticationofDendrobiumnobilebyallele-specificdiagnosticPCR
XUHon91”，WANGZheng—ta01～，DINGXiao—yul．XULuo—shanl
(1rDepartmentofPharmacognosy-ChinaPharmaceuticalUniversity，NanjingZ10038．Chi al2．I stituteofChinese
MateriaMedica，ShanghaiUniversityofTraditiona[ChineseMedicine，Shanghai201203．China)
Abstract：ObjectiveTodevelopaconvenientandeffectivemolecularauthenticationme h dforiden，
tifyingDendrotnumnobilefromotherspeciesofDendrobiumSw．MethodsBasedonrDNAITSsequences
ofD．nobileandotherspeciesofDendrobiumSw．ofHuangeaosandFengdOUS。unusualsequencesit s
wereconfirmedandanallele—specificdiagnosticpr merpairwasdesignedforD．nobile．DiagnosticPCR
wasperformedusingtheprimerswiththetotalDNAofD．nobileandotherspeciesofDendrobiumSw．as
templatestOestablishthepositivePCRconditionforD．nobile．ResultsAnabout300bDDNApositive
fragmentWasamplifiedromD．nobilewithannealtemperature66Candannealtimeat40S。whereas
noanyDNAfragmentwasamplifiedromtherest39speciesofDendrobiumSw．ConclusionD．n bile
couldbeeffectivelydistinguishedfromotherspeciesOfDendrobiumS,k．bydiagnosticPCRwithallele—spe—
eificdiagnosticPCR，whichisnotonlyeffectiveandspecific，butalsosimpleandtimesaving．andhasa
comprehensiveapplicationprospects．
Keywords：Dendro&umnobileLindl．1allele—specificdiagnosticPCR；authentication．
石斛是我国传统贵重中药材，药用历史悠久。为
兰科石斛属(DendrobiumSw．)植物铁皮石斛D．
candidumWall．exLindl．、金钗石斛D．nobile
Lindl．、束花石斛D．chrysanthumLindl．、美花石斛
D．10ddigesiiRolfe或流苏石斛D．fimbriatum
Hook．的新鲜或干燥茎。金钗石斛(药材又称为金
钗石、扁金钗、扁黄草、扁草、黄草等)是历史上记载
最早的石斛习用种类，也是药用石斛的最重要品种
之一，始载于《神农本草经》，被列为上品，具有滋阴
清热、益胃生津等功效，是传统中成药石斛液光丸、
石斛明目丸、石斛清目丸及现代中成药脉络宁注射
液、复方“清咽宁”的重要配伍成分”’2]。
金钗石斛化学成分种类丰富多样，其中活性成
分生物碱的量也比较高，因此它不但具有较高的药
用价值而且药用前景十分广阔。在植物分布上，金钗
石斛虽然是石斛属植物中分布最广泛的品种之一，
荐喜磊异寮昱篓魏替磐噬旱翟磐半端褊黼蒜粤褥睾黎翠雀鞴穗臻嚣至豁警要从事生药学领域的
，通讯作≯‘!i譬露TT。le；l(：o(2012)15)153123225205711FE。。-需旨岩嚣2≤臻y@E．mahotmiI=a：i』器t@hotmam。。rn
万方数据
中草药ChineseTraditionalandHerbMDrugs第36卷第10期2005年10月- 541·
但是由于目前药用石斛来源仍以野生资源为主，过
度采收使其野生资源遭到严重破坏，分布区域急剧
缩小。野生资源量的逐年减少使供需矛盾日趋突出
并造成药材使用的混乱。据文献记载和实地调查，金
钗石斛常与30多种石斛属、少量金石斛属
(FlickingeriaHawkes)、石仙桃属(Pholidota
Lindl．)和石豆兰属(BulbophyllumThou．)共计40
余种植物混在一起采收加工。在进行种类鉴定时，依
靠传统的形态方法将金钗石斛与其他属的兰科植物
区分比较容易，而与同属的植物区分鉴别就比较困
难，特别是没有花和叶的植物体，或者经过加工干燥
后形态发生变化的药材。虽然已有利用rDNAITS
逸序列对石斛属种类进行DNA序列分析鉴别的报
道n“]，然而由于DNA测序技术复杂．成本高，目前
在我国各级药检部门应用有一定的局限性。为此，本
实验根据所测得黄草类、枫斗类石斛rDNAITS序
列数据，设计了一对用于金钗石斛专属性鉴定的
PCRBI物，对金钗石斛进行位点特异性PCR鉴定
研究，以期建立其简便易行的DNA分子鉴别方法。
1材料与方法
1．1材料：实验用金钗石斛及其他石斛属植物共计
40种，分别自1999--2003年采自我国石斛产区云
南、广西、贵州、海南、河南等地的原始森林，我国台
湾地区以及浙江乐清的枫斗类石斛加工地、江苏南
京金陵制药厂，南京药材公司，活体材料栽种于中国
药科大学植物园，标本存放于中国药科大学生药学
研究室，材料经中国科学院植物研究所吉占和研究
员及笔者鉴定原植物学名，见表1。
1．2 DNA提取、扩增和序列测定：部分黄草类、枫
斗类石斛rDNAITS区序列见文献报道o“o，本研究
继续对陆续采集到的12种石斛及～些居群材料的
原植物(表1注“*”的材料)进行了rDNAITS区序
列，DNA提取、扩增和测序方法见文献报道“J。
1．3序列分析及位点特异性鉴别引物的设计：用
ClustalW软件对所测石斛属植物的rDNAITS区
序列进行对位排列，用分子进化遗传分析软件
MEGA分析各物种间DNA序列差异。根据金钗石
斛与其他石斛属植物间的序列差异位点，设计一对
能特异性扩增金钗石斛的鉴别引物，分别为上游引
物PJ—NF与下游引物PJ—NR(引物序列已申请专
利，申请号：01127062．4)以用于金钗石斛位点特异
性鉴别研究。
1．4鉴别反应条件及鉴定：鉴别性PCR反应条件
与文献报道[3,43相似，退火温度设定为52～70℃、时
间40s～1min，以寻找合适的鉴别反应参数。PCR
反应中设无DNA模板的阴性对照，反应结束后，取
5pL反应液经1．2％琼脂糖凝胶电泳，EB染色，凝
胶成像系统下检测并拍照。
2结果
2．1 序剜分析：用引物P18S3‘：5‘一ATTGAA
TGGTCCGGTGAAGTGTTCG一37；P26S57：
57一AATTCCCGTTCGCTCGCCGTTAC一
3’对后续采集到的石斛原植物DNA进行了rDNA
Hs区序列的扩增和测序，连同以前的35种合计
40种黄草类、枫斗类石斛的rDNAITS区序列进行
对位排列与遗传差异分析，结果表明石斛属种间的
序列差异为8．79％～31．58％，居群闻为0％～
6．58％，rDNAITS区序列在石斛居群间表现出相
对稳定性，在种间表现出显著的差异。
2．2位点特异性鉴别：根据测得的枫斗类、黄草类
石斛的rDNAITS区序列，设计了一对鉴别引物
PJ—NR和PJ—NF，理论上该引物能够从金钗石斛的
模板DNA中扩增出约300bp的ITS区序列，包括
完整的5．8S保守区以及部分ITSl与ITS2区域。
进行鉴定性PCR研究时，首选运用ITS区的扩增引
物P18S3’与P26S5’对金钗石斛及其39种石斛属
植物进行PCR扩增，结果所有样品的模板DNA都
扩增出约700bp、具有～定亮度的rDNAITS条
带。然后，运用鉴别引物对不同产地的金钗石斛进行
PCR扩增，在52～72℃、40s～1min的复性条件
范围内，金钗石斛样品有约300bp的PCR产物产
生(图1)。接着对其他39种石斛进行了PCR扩增，
当复性条件为52c、40s时，3个产她的铁皮石斛
(表1中广西西林、贵州三都、上海)和报春石斛(表
1)的模板DNA扩增出与阳性对照金钗石斛同样长
度的DNA条带，其他石斛的模板DNA均无扩增产
物(部分石斛的扩增结果见图2)。梯度升高复性温
度以提高PCR反应特异性，结果3个来源的铁皮石
斛在56℃以上、报春石斛在66℃以上时扩增结果
也分别变为阴性(图3)。运用特异性鉴别引物对40
种石斛属植物的模板DNA进行重复性实验，在66
C、40s的复性条件下，除金钗石斛产生阳性扩增
外，其余的枫斗类、黄草类石斛的扩增反应均为阴
性。另外还扩大样本数对居群及个体样本、市场上收
集的商品石斛进行了鉴别性PCR反应(材料具体详
情省略)，结果只有金钗石斛能够产生阳性扩增，丽
其他所有石斛样品均无任何PCR条带，呈阴性
扩增。
万方数据
·1542· 中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第10期2005年lo月
竹柱石斛DendroSiurasalaccense
鼓槌石料D．chrysotoxum
球花石斛D．thyrsifloxum
t密花石斛D．densiflorum
细叶石斛D．hancrlcMi
细叶石斛
线叶石斛D aurantiacum
*线叶石斛 、
*叠鞘石斛naurantiacumv r．df””f4^“晰
*叠鞘石斛
长苏石斛D．brymerianum
流苏石斛D fimbriatum
短棒石斟ncapilliDes
*棒节石蒋}n矗ndlayanum
金镀石斛D．nalWle
盘锓石斛
*金钗石斛
*金锓石鹪
*金钗石斛
*金锼石斛
反瓣石斛D．eltlpsophyllum
翅萼石斛D．carlnlferum
*黑毛石斛D．williamsonfi
景洪石斛D．exile
剑叶石斛nacinaciforme
*矮石斛D．bellatul“m
*黄花石聱}ndla!anthum
罗河石斛D．10hohense
串珠石斛上)．丘lconeH
大苞鞘石斛D．wardianum
杯鞘石斛D．gratios#slmum
肿节石斛npendulum
美花石斛D．10ddigesii
美花石斛
*黄花石斛
齿瓣石斛nd押onianum
兜唇石斛D．印hyllum
报春石斛nprimullnum
晶帽石斛D．crystallinum
柬花石斛D．chrysanth“卅
攻瑰石斛D．crepidatttm
喇叭唇石斛D．1itulflorum
细茎石斛D．monitiforme
细茎石斛
-鲴茎石辩
铁皮石斛D．offidnale
铁皮石斛
*铁皮石斛
霍山石斛D．huoshane月se
盏茎石斛nflez&aule
重唇石斛D hercoglos5um
钩状石斛D．aduncum
伏牛山石斛D．funishanense
扣丁南石斛D．缸删enjP
云南西双敷纳
云南西双版纳
云南景洪
海南乐东尖峰I孥
云南昆明
河南西峡
云南昆明
广西．地点不】苹
云南西双版纳
云南，地点不详
云南西双版纳
云南西积版纳
云南西双版纳
云南西双版纳
I。西，地点不详
海南海口
云南丽江
贵州贵阳
重庆，地点不详
台湾台北
云南西双版纳
云南西双版纳
悔南乐东尘峰岭
云南西双版纳
云南群茅
江苏．产地不详
台湾台北
云南勐腊
云南勐腊
云南勐腊
云南勐腊
云南勐腊
云南思茅
台湾台北
云南文山
云南勐腊
云南勐腊
云南勐腊
云南勐腊
浙江乐清．产地不详
云南勐腊
云南勐腊
广西百色
扛西南昌
台湾台北
广西西林
贵州i都
上海，产地不详
安徽霍山
河南南用
云南勐腊
广西融江
河南南阳
河南南阳
YUII一99013
Yun一99014
Yun99011
HN一08005
Ytill一99042
He一2001—02
YUll—99045
(jX一2001一】0
Yun～90032
YUll一2001—03
Ytill99028
Yun一9903l
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Yun一99015
GX一2000一10
HN98006
Yun-99055
GZ09056
CQ一99060
TW200I-0l
Yun一99029
Yun99060
HN98005
Y一99026
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N一2003—0l
Yun2003-12
XYD99018
XYD99011
XYD99017
XYD99007
XYD90013
XYD99004
TW2001—04
Yull-2000r12
XYD99009
XYD99029
XYD9903l
XY099030
ZJ一2000—18
XYD00008
XYD99014
XYD09005
XYD99006
TW一2001—05
XYD99001
XYD99003
SH200904
XYD99015
XYD99035
XYD99r328
XYD0001
AF362026
AF362023
AF362032
AF362029
AF362025
AF362038
AF362044
AF362042
AF362040
AF362043
AF362036
AF362041
AF362035
AF362035
AF372039
AF362037
AF362026
AF362045
AF392046
AF362033
AF362027
AF362030
AF362024
AF362034
AF363024
AF420246
AF420245
AF311780
AF3629lZ
AF311778
AF311770
AF335573
AF302912
AF363023
AF355572
AF355574
AF35557l
AF311777
AF311776
AF355569
AF355570
AF363685
AF314125
AF479701
AF399254
*本研究中铡定序列的材料
*Materialsforsequencinginstudy
万方数据
中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第10期200．5年10月· 543·
I，6d南明汀2．7-r西3，8-海南海H
4，9贵州贵阿I5，10-雨庚
1，6【．ijiang，Yunmmz-7Guangxi3，8Haikou，
ttltinan4．9Guiyana，Guizhou5，10Chongqing
图I金钗石斛rDNAITS与ITS片段PCR扩增产物
(1～5：ITS．6～10：ITS部分片段)
Fig．1PCRAmplificationofrDNAITSandITS
fragmentsfromD．nobile(15：ITS，
6 10：someITSfragments)
．1掣河7i射2太苞鞘竹斛3怀辑1fI庠}4肿肖订斛5黄
化“耕6一时瓣n斛7兜J蜡“斛8一晶忻f1斛9攻瑰耵斛
o月l忡计照 Il_鼓槌fi培{12报存打斛 3细苹“静{ 1 4
艟f，斛15辑·小打斛16J{II攀“斛17璃群斤斛18-球抱
仃科iq铁哎，1斛(贵州·都)20钩状f1瞪|2【铁皮什斛
(1：海)22一刚性埘j!{{
1 1) [ohoht-，J^f12，)tcI“J0 {”“Ⅳ， 3D州Jatioff“i—
m*m^1)．prm／．／um5一1){mld{kf{“511-c tltMj
niamc 7-，)．phy[1．m8』)-frvJ』(』，，，Hff，¨0 D
“1pidulum【o positivecolltro[(D．nobilf)1D
chJ3，xt”nrⅢ¨t2f1．hrimulimtm13-n．utonil}mntlF
tti1 k．1land，tm15-z)，“t“nk【}m}}sr1≈D．“rr{
“}“{r 1I11．|”I-iEl蚶tlss㈨l8 D．Ih3，¨{n㈣11171
l 9 1，f∥，⋯inr／,一(Sandu．Guizhou)20，)．Ⅱ“Ⅲ㈣
2ID,d／hinah-(Shmlghai)22negnlire⋯1o[
围2 52(、40s复性条件下的PCR扩增产物
Fig．2PCRAmplificationin nnealingco dition
of52℃andannealtimeof40s
3讨论
在中药材分子鉴定研究中，近年来运用较多的
方法主要是以RAPD、RFI，P、AFI。P为主的对模板
DNA质量要求较高的DNA指纹鉴定技术n1“】。但
是由于中药材在加工、储存过程巾，DNA会发生不
同程度的降解．影响模板质量，因此在鉴定时往往难
以做出稳定的I)NA指纹图谱。因而这些方法在中药
1～3铁皮石斛(复性温度分别为56，58、60(1)
4～6报春百斛(复性盈度分剐为66、70、72r)
7一阴性对照8金议百斛(复性温度72f)
I 3一，)fJ，，ij”“^cannea[temperalLIr≮ achl5d．
58．and6¨()46一』)．prio|u[intf；n(annea[tem
peratureeachat66·7()-and72(1)7一negativecon—
trol8-』)mlbih，(anneMtemperaturenl72【)
图3铁皮石斛(广西西林)，报春石斛鉴别
PCR扩增产物
Fig．3PCRAmplificationofITSfragment
fr¨mD．officinale(Xilin．Guangxil
andD·primulinura
材的鉴别应用上有一定的局限性。而后来发展的
DNA序列分别虽然也被用于中药材的鉴定，但是由
于实验技术复杂、撩定成本高，也限制了其广泛应
用。1996年，DeSalle等o’首次在NatureE发表了利
用鉴别引物对鱼子酱中鱼卵所属鲟鱼的种类进行鉴
别以后．鉴别性PCR在世界范围内得到推厂+和应
用。在中药材鉴定领域．王义权等““首次在金钱白花
蛇及其伪品的鉴定研究中应用r位点特异性鉴别方
法，后来该技术被陆续地应用于龟甲、蛤蚧、乌梢蛇，
鹿类等动物药的鉴别研究中o””]．在植物药研究中
笔者曾报道了齿瓣石斛、铁皮石斛的位点特异性鉴
别研究“””]，而对于石斛类的珍贵品种金钗石斛还
没有相关的研究。
在对金钗石斛进行位点特异性鉴别时，选择合
适的具有鉴别意义的分子标记非常重要。在前期．笔
者报道了35种枫斗类、黄革类石斛的rDNAITS序
列o“]。结果表明ITS序列在石斛种问存在极其显
著的差异，金钗石斛与其他各种石斛均各自特异性
的序列位点，当根据石斛属植物的形态和药材件状
难以鉴别种类时，rDNAITS序列是可靠的分子鉴
别标记。在这些研究基础上。本研究义对陆续采集到
的12种石斛的ITS序列进行了测定与分析，再次证
明了11、s序列作为石斛鉴别分子标记的可靠性。园
此在进行金钗石斛的位点特异性PCR鉴别研究时．
本研究选择了rDNAITS序列进行序列测定与分
析，在此基础上进行鉴别PCR的研究。
在设计金钗石斛特异性鉴别引物时．本研究通
过对黄草类与枫斗类石斛rDNAITS序列的分析．
万方数据
·t544· 中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第10期2005年10月
确定金钗石斛特异性的序列位点，在该位点上设计
了一对与金钗石斛ITS序列完全互补的鉴别引物。
在52～72℃、40s～1min的复性条件下，鉴别引物
均能从金钗石斛的模板DNA中扩增出约300bp左
右的DNA片段，说明它对金钗石斛有较高的灵敏
性。以金钗石斛横板DNA为对照，调节PCR反应参
数中的复性温度使反应特异性增强，在66c、40s
的复性条件下，除金钗石斛外，其他种类的石斛不产
生任何扩增条带，说明在此复性条件下鉴别引物具
有很强的特异性，可作为金钗石斛鉴别PCR反应的
参数。同时，重复性和扩大样本实验也得到了同样的
结果，说明金钗石斛的PCR鉴别反应不仅具有特异
性而且具有很好的重现性。模板DNA的质量在
PCR扩增时十分关键，运用ITS区的扩增引物
P18S37与P26S5’对各种黄草类、枫斗类石斛均能扩
增出完整的rDNAITS片段，表明模板DNA的质量
符合PCR反应的要求，用于本研究的位点特异性鉴
别PCR反应也是非常可靠的。
金钗石斛的位点特异性PCR鉴别方法具有成
本小、时间短、效率高等特点，只需通过简单的PCR
反应就可以有效地将金钗石斛从其他石斛属植物中
鉴别出来，同时选用的分子标记又是多拷贝的1TS
区，扩增出的鉴别片段是仅为300bp左右的短片段
DNA，因此即使在石斛干药材DNA降解很严重的
情况下，也能达到很好鉴别效果，应用前景广阔。
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需零班零礴爨$秘霉举8苫＆社毋拳4霹8簪镕零霹辑爨零gL口霉零零器8零孚零牡辑零辑器参霭零笞§笞§罂零霭痹{卑
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万方数据
金钗石斛的位点特异性PCR鉴别研究
作者： 徐红， 王峥涛， 丁小余， 徐珞珊， XU Hong， WANG Zheng-tao， DING Xiao-yu， XU
Luo-shan
作者单位： 徐红,王峥涛,XU Hong,WANG Zheng-tao(中国药科大学,生药学研究室,江苏,南京,210038;上
海中医药大学中药研究所,上海,201203)， 丁小余,徐珞珊,DING Xiao-yu,XU Luo-shan(中
国药科大学,生药学研究室,江苏,南京,210038)
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2005,36(10)
被引用次数： 3次

参考文献(15条)
1.中国药典 2000
2.Bao X S;Shun Q S;Cheng L Z 中国药用石斛 2001
3.Xu H;Li X B;Ding X Y rDNA ITS Sequencing of Herba Dendrobii (Huangcao)[期刊论文]-药学学报 2001(10)
4.Ding X Y;Xu L S;Xu H Database establishment of the whole rDNA ITS region of Dendrobium species of
Fengdou and authentication by the analysis of their sequences[期刊论文]-药学学报 2002(07)
5.Tai W L;David;Shaw P C Authentication of medicinal Dendrobium species by the internal transcribed
spacer of ribosomal DNA[外文期刊] 2001(05)
6.Ha W Y;Shaw P C;Liu J Authentication of Panax ginseng and Panax quinquefolius using amplified
fragment length polymorphism (AFLP) and directed amplification of minisatellite region DNA (DAMD)[外
文期刊] 2002(07)
7.Shaw P C;But P P H Authentication of Panax species and their adulterants by random-primed
polymerase chain reaction[外文期刊] 1995(05)
8.Um J Y;Chung H S;Kim M S Molecular authentication of Panax ginseng species by RAPD analysis and
PCRRFLP[外文期刊] 2001(08)
9.Desalle R;Birstein V J PCR Identifiction of black caviar[外文期刊] 1996
10.Wang Y Q;Zhou K Y;Xu L S Sequencing of Cyt b gene fragments and PCR identification of Jinqian
Baihua She(Bungarus parvus) 1998(12)
11.Liu Z Q;Wang Y Q;Zhou K Y Authentication of Chinese crude drug,gecko,by allele-specific
diagnostic PCR[外文期刊] 2001(04)
12.Wang Y Q;Zhou K Y;Xu L S Auenthention of Bungarrus parvus and its adulterant by DNA molecular
method using diagnostic primer[期刊论文]-Chin Pharm Sci 2000
13.Liu X H;Wang Y Q;Zhou K Y Study on allele-specific diagnostic PCR of the traditional Chinese
medicines of the deers[期刊论文]-药学学报 2001(08)
14.Ding X Y;Xu L S;Wang Z T Allele-specific diagnostic PCR authentication of Dendrobium devonianum
from other Dendrobium species[期刊论文]-药学学报 2002(11)
15.Ding X Y;Wang Z T;Xu L S Allele-specific primers for diagnostic PCR authentication of Dendrobium
officinale[外文期刊] 2003(06)

本文读者也读过(10条)
1. 丁小余.徐珞珊.王峥涛.徐红.周开亚 齿瓣石斛的位点特异性PCR鉴别[期刊论文]-药学学报2002,37(11)
2. 罗玉明.丁小余.徐珞珊.保曙琳.常俊 细叶石斛的位点特异性PCR鉴别[期刊论文]-淮阴师范学院学报(自然科学
版)2002,1(1)
3. 丁小余.徐珞珊.徐红.王峥涛.周开亚 曲茎石斛及其近似种鉴别的形态和DNA分子证据[期刊论文]-药学学报
2001,36(11)
4. 丁小余.徐珞珊.常俊.保曙琳.丁秉中 兜唇石斛的位点特异性PCR鉴别[期刊论文]-南京师大学报(自然科学版)
2002,25(4)
5. 彭锐.李泉森.李隆云 石斛的分子生物学鉴定--基于RAPD分析[期刊论文]-西南农业大学学报(自然科学版)
2004,26(4)
6. 丁小余.徐珞珊.王峥涛.施国新.徐红 铁皮石斛居群差异的研究(Ⅰ)——植物体形态结构的差异[期刊论文]-中
草药2001,32(9)
7. 顾慧芬.庄意丽.梅其春.GU Hui-fen.ZHUANG Yi-li.MEI Qi-chun 铁皮石斛试管苗的RAPD分析及其特异性鉴定引
物设计[期刊论文]-复旦学报（自然科学版）2007,46(3)
8. 丁小余.徐珞珊.王峥涛.徐红.周开亚 束花石斛及其相似种的DNA分子鉴别[期刊论文]-中国中药杂志2002,27(6)
9. 张婷.王峥涛.徐珞珊.周开亚.ZHANG Ting.WANG Zheng-tao.XU Luo-shan.ZHOU Kai-ya 线粒体nad 1内含子2序
列在石斛属植物分子鉴定中的应用[期刊论文]-中草药2005,36(7)
10. 滕艳芬.吴晓俊.徐红.王峥涛.余国奠.徐珞珊 石斛及其常见混淆品的matK基因序列比较[期刊论文]-中国药科
大学学报2002,33(4)

引证文献(3条)
1.应依.徐红.王峥涛 球花石斛的位点特异性PCR鉴别研究[期刊论文]-药学学报 2007(1)
2.黄海.李劲松.曹兵 分子标记技术在石斛属植物种质资源研究中的应用[期刊论文]-生物技术通报 2010(4)
3.应依.徐红.王峥涛 DNA分子标记技术在中药石斛类药材鉴定中的应用[期刊论文]-世界科学技术-中医药现代化
2006(3)


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