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Criteria of quality control for root of Rumex gmelini

毛脉酸模药材质量标准研究



全 文 :中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第12期2005年12月· 875·
衰6木霉防治鱼腥草白绢病田间试验
Table6 EffectofT.huzirumoilSouthernblight
jnH.cordatainfieldcondition
该试验结果同时表明,在鱼腥草发病前期使用
多菌灵均能有效地减轻鱼腥草白绢病的危害,能明
显地降低该病的发病率。本试验使用多菌灵的处理
其发病率为15.66%,比对照低13.86%,防治效果
达46.95%。
3讨论
种茎处理试验结果表明,栽种前用多菌灵浸泡
种根能推迟白绢病的发病时间和降低发病率,明显
地提高产量。室内拮抗实验表明木霉对鱼腥草白绢
病菌具有极强的拮抗作用,但不产生抑菌圈,其作用
方式并非是产生抗生素,而是木霉菌丝沿病原菌菌
丝生长,缠绕在白绢病菌菌丝上生长,有些穿人菌丝
内部生长,从而导致病原菌菌丝的死亡。木霉可使菌
核消失,具有铲除作用。盆栽试验表明木霉能显著降
低鱼腥草白绢病的发病率。田间试验结果表明其防
治效果比常用农药好,20g/m2就能收到较好的防
治效果。但生物制剂的田问防治效果受多种因素的
影响,如使用方法、使用时间、施入土层的深度、微生
物群落等,因此木霉对鱼腥草白绢病的田间防治还
有待于进一步研究。
农药田间试验结果表明,多菌灵能有效地减轻
鱼腥草白绢病的危害,明显地提高产量。在鱼腥草发
病初期施多菌灵可湿性粉剂3次,间隔10d,能有效
地防治白绢病,但其药效的发挥受农药的使用方法、
浓度、施用时的气候状况及施药时间等多种因素的
影响,因此在施用时必须选择好施药时期、天气和正
确的施用方法,才能保证药效的发挥,减轻鱼腥草白
绢病的危害。
根据鱼腥草白绢病的初侵染源、发生发展规律
及传播途径,可以采用一些相应的农业防治措施。精
选无病健壮的种茎栽植,可有效地控制初侵染源,降
低田间发病率;实行轮作尤其是水旱轮作可减少土
壤带菌;加强栽培管理,清洁田园,注意灌溉和排水,
合理施肥及做好越冬防寒工作;同时加强地下害虫
防治工作也可有效减轻病害。
综上所述,要有效地防治鱼腥草自绢病,必须采
用农业、生物和化学方法相结合的综合防治措施。
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毛脉酸模药材质量标准研究
王振月,左月明,康毅华,崔红花,李瑞明
(黑龙江中医药大学药学院,黑龙江哈尔滨150040)
摘要:目的制定毛脉酸模药材质量标准,为该药用植物资源的开发利用提供科学依据。方法生药学研究,浸
出物测定法,灰分测定法,水分测定法,薄层色谱法及HPLC色谱法。结果对毛脉酸模的性状、显微特征进行了描
llii蓬lj穗95恙餐璧翌昱窜莹筹嚣藉鎏鸳锶耋荽髂犁豸晏籍嬲驾銎虢术研究。Tel:(0451,82196254作者筒介:王振月(1 6一),男,黑龙江中医药大学硕士生导师,主要从事中药资源开发与生物技术研究。 )
E—mail:wangzhen—yue@163com
万方数据
·1876· 中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第12期2005年12月
述;对14个不同产地毛脉酸模的浸出物、总灰分、酸不溶性灰分和水分进行了测定;同时进行了薄层定性鉴别和
HPLC色谱的定量研究。结论通过研究制定了毛脉酸模的质量控制标准。
关键词;毛脉酸模;质量标准;TLC}HPLC
中圈分类号:R282.02 文献标识码:B 文章编号:0253—2670(2005)12—1875—05
Criteriaofqualitycontrolf rootofRumexgmelini
WANGZhen—yue,ZUoYue—ming,KANGYi—hua,CUIHong—hua,LIRui—ruing
(CollegeofPharmacy.HeilongjiangUniversityofTraditionalChineseMedicine,Harbin150040,China)
Abstract:ObjectiveToprovidescientificbasisfortheutilizationndevelopmentofRumexgmelini
bysettingupthequalitycontrolcriteriaofR.gmelini.MethodsThepharmacognosticalmethodswere
employed.TheextractofR.gmeliniwasexamined.Moistureandashwe determined.Andthebioactive
constitUentsw reanalyzedbvTLCandHPLC.ResultsThemorphologicalandhistologicalcharactersof
R.gmef抽iwereobserved.Contentofex ract,totalash,acid—insolubleash,andmoistureof14samples
fromdifferenthabitatsweredetermined.ThequalitativendquantitativeanalysisbyTLCandRPHPLC
(DAD)werepreformed,respectively.Conc|usioaThemethodsdevelopedinthisexperimentcanheused
forthequalitycontrolofR.gmelini.
Keywords:therootofRumexgmeliniTurez.exL deb.;qualitycr eria;TLC;HPLC
毛脉酸模RumexgmeliniTurcz.exL deb.为
蓼科酸模属植物,民间药用根。毛脉酸模为多年生草
本植物,味酸苦性寒,人心、肺、膀胱经等。该植物广
泛分布于黑龙江省大小兴安岭及张广才岭东部山
区,资源十分丰富。临床上对淋病、上呼吸道感染、癣
和疮毒有确切疗效[1。]。抑菌实验结果显示,根部粉
末水浸液(1mL相当于原药材1g)对金黄色葡萄球
菌的抑菌效果仅次于土霉素;对乙型链球菌的抑菌
效果与土霉素相同。目前国内对毛脉酸模的研究仅
限于笔者的系列研究,研究表明毛脉酸模根中含有
白藜芦醇苷、白藜芦醇、大黄酚、大黄素等多种有效
成分o~5]。为了更好地开发利用这一植物资源,本实
验对14个不同产地样品从药材性状、显微特征、浸
出物、总灰分、酸不溶性灰分和水分进行了测定,采
用TLC法和HPLC法进行了定性、定量研究,为制
定毛脉酸模的质控标准、开发新药奠定了基础。
1仪器、试药与样品
高效液相色谱仪(Waters2996/Waters2695
型);Mettler电子天平(瑞士);高温炉RJM一2.8—10
(沈阳市电炉厂);硅胶G(青岛海洋化工厂生产)。对
照品:大黄素、大黄酚、大黄素甲醚(购自中国药品生
物制品检定所);白藜芦醇苷、白藜芦醇(购自美国
Sigma公司);酸模素由笔者从药材中分离得到,质
量分数达98%以上。14个不同产地毛脉酸模采自黑
龙江省各林区(表1)和黑龙江中医药大学药用植物
园,并经笔者鉴定为R.gmeliniTurcz.。
2药材性状、显微特征
2.1性状:根茎短缩簇生多数粗根,根表面红棕色,
外皮有纵皱纹,类长圆柱形,分枝甚少,长5~20
cm,直径0.2~1.5em,质脆,易折断,断面不平坦,
表面黄白或淡棕色,形成层环不明显。老根表面颜色
较深,断面棕红色,形成层环明显呈黄色,有的髓部
中空(老根)。气微,味微甘。
2.2显微特征:草酸钙簇晶甚多,棱角大多短钝,少
有长尖或细尖,有的棱角边缘不清楚,大小不一,直
径10~55p-m;导管以具缘纹孔和梯纹导管多见;木
栓细胞表面观呈多方形,细渡状弯曲。
3浸出物、总灰分、酸不溶性灰分和水分的测定
3.1测定方法:浸出物测定参照《中国药典》2005
年版(一部)附录xA浸出物测定法,采用热浸法测
醇溶性浸出物;总灰分、酸不溶性灰分测定参照《中
国药典》2005年版(一部)附录ⅨK灰分测定法;水
分测定是参照《中国药典}2005年版(一部)附录Ⅸ
H水分测定法(烘干法)口J。
3.2测定结果:不同产地样品的浸出物、总灰分、酸
不溶性灰分和水分的测定结果见表1。
4薄层色谱鉴定
4.1对照品溶液的制备:分别称取大黄素、大黄酚、
大黄素甲醚对照品各0.2mg,加甲醇制成0.2mg/
mL的对照品溶液。
4.2供试品溶液的制备:取14个不同产地毛脉酸
模样品各0.05g,加氯仿7mI。,超声处理20rain,滤
过,滤液挥发至2mL,作为供试品溶液。
4.3薄层色谱条件及结果:吸取上述供试品和对照
品溶液各20“L,分别点于同一硅胶G薄层板上,用
石油醚(30~60℃)一甲酸乙酯甲酸(15{5:1)的
万方数据
中草药ChineseTraditionalandHerba|Drugs第36卷第12期2005年12月·1877·
衰1 14个不同产地毛脉酸横样品中各检查项的测定结果
Table1 ResultsofexamlngitemsofrootofR.gmelinifrom14differenthabitats
样品号 药材来酥 浸出物/“总灰分/蹦酸不溶性灰分/%水分/“ 障品号 药材来源 浸出物/“总灰分/“酸不溶性灰分/“水分/“
1 大兴安岭新林 4796 10.89 1.14 5-41 8 尚志市幅儿山 54.99 8.98 o.27 2.83
2 大兴安岭加格达奇 5272 10.Ol o.18 2·47 9 伊春市犟峦 46.32 8.62 o 28 4 35
3 大兴安岭塔河 4024 1070 1.04 6.5z 10 伊春市红星区 47.24 7 50 o 21 3 75
4桃山跃进 55.49 7.61 017 2.91 11 伊春市上甘岭 49.86 918 o.91 3 24
5 桃山种树 49.71 1083 1.23 7·13 12 伊春市新青桦林 4835 9 65 o 97 4 21
6绥棱北殷流 5012 12 oo 1.13 316I3 药圃(1年生) 50.88 71z o 33 6鸺
7 绥棱义气松 5079 8.43 o.98 6.85 14 药圃(z年生) 52卵 7 38 o 30 5 62
上层溶液为展开剂,展开,取出,晾干,置紫外光灯
(365nm)下检视。供试品色谱中,在与对照品色谱
相应的R{(★*蠢)一0.41,Rit尢黄l_羹)=0.73,
Rf。★-目)一0.82位置上,显相同颜色的荧光斑点(图
1);置氨蒸气中熏后,日光下检视,斑点变为红色。
1一大黄索2~15-毛脉酸模16一大黄酚17一大黄素甲醚
1 emodln2—15R.gmelini1 6 chrysophanol1 7-physcion
图1不同产地毛脉酸模的TLC图(365rim)
Fig.1TLCehromatogramofR.gmelinifrom
differenthabitats(365nm)
5有效成分的测定
5.1色谱条件:PlanetsilC1B(200mm×4.6mm,5
“m);体积流量1.0mL/min;柱温35℃;测定白藜
芦醇苷、白藜芦醇的流动相为乙腈一水(20:80),检
测波长为303nm;测定大黄素、大黄酚、大黄素甲醚
的流动相为甲醇一0.1%磷酸(80;20),检测波长为
254nm;测定酸模素的流动相为甲醇一0.1%磷酸梯
度洗脱;检测波长为225Flm。
5.2对照品溶液的制备:精密称取白藜芦醇苷、白
藜芦醇、酸模素、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚对照品
适量,加甲醇使溶解,分别制成每毫升各含0.50、
0.09、0.22、0.i3、0.19、0.05mg的对照品溶液。
5.3供试品溶液的制备:精密称取不同产地毛脉酸
模药材粉末(过80目筛)各0.25g,置索氏提取器
内,加50%乙醇65mL提取4h,滤过,滤液蒸干,残
渣加甲醇使溶解,转移至25mL量瓶中,定容至刻
度,过0.45pm的微孔滤膜,弃去初滤液取续滤液
作为供试品溶液。
5.4标准曲线的制备:分别取上述6种对照品溶
液,以5.1项色谱条件分别按不同进样体积注入液
相色谱仪。以进样量(pg)为横坐标,峰面积为纵坐
标绘制标准曲线,回归方程及线性范围见表2,各成
分均呈良好的线性关系。
裹2毛脉酸模中6种有效成分的线性方程
Table2 LinearequationsofsixkindsofactiveconstituentsinrootofR·gmelini
5.5精密度试验:精密吸取上述6种对照品溶液,
分别重复进样5次,以5.1项色谱条件分析测定,白
藜芦醇苷、白藜芦醇、酸模素、大黄素、大黄酚、大黄
素甲醚的峰面积的RSD分别为1.59%、2.33%、
1.63%、0.43%、1.93%、1.44%。
5.6稳定性试验:精密吸取6种对照品溶液,分别
间隔4h重复进样7次,以5.1项色谱条件分别测
定,6种成分峰面积的RSD分别为1.95%、1·91%、
1.89%、1.80%、0.46%、2.05%,表明各成分在24
h内保持稳定。
5.7重现性试验:取l3号药材样品5份,以5.1项
色谱条件分别测定,6种成分峰面积的RSD分别为
1.77%、0.90%、2.56%、1.68%、0.87%、1.85%。
5.8加样回收率试验:精密称取已知含量的13号
药材样品5份,分别精密加入不同量的6种对照品,
按含量测定方法测定,计算回收率,6种成分平均回
万方数据
·1878· 中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第12期2005年12月
收率分别为100.34%、99.84%、99.23%、
103.30%、99.62%、99.28%,RSD分别为1.46%、
2.17%、2.07%、1.31%、1.69%、2.6l%。
5.9样品测定:取14个不同产地的毛脉酸模药材的
供试品溶液各20pL,注入液相色谱仪,按5.1项色
谱条件分别测定,色谱图见图2、3,测定结果见表3。
裹3毛脉酸模中6种有效成分的测定结果(n一3)
Table3 Determinationofsixki dsofactiveconstituentsinrootofR.gmelini抽一3)
样品号罴嚣罴荔鬟纛 样品号黑嚣麓篡蕊纛
l 1.8000.697 2.132 0.692 1.185 o.298 8 1 180 1.】77 0.885 0 683 1.154 0.286
2 1.895 0.348 0.322 0.220 0.595 0.102 9 4.Z81 0.052 0.113 0.205 0.395 0.118
3 】.755 0.084 0.109 0.074 0.33l 0.052 10 2 709 0 057 0 027 0.148 0.3330.100
4 0 432 0 719 0.623 0 508 0.823 0 271 11 2 534 0 040 0 125 0.146 0.331 0.081
5 2 452 0 330 0 314 0 206 0 471 0.124 12 4.195 0.072 0.070 0.329 0.700 0.142
6 5.425 0.022 0.140 0.207 0 392 0.130 13 2.196 0.048 0 093 0 080 0.328 0 048
7 3.379 0 118 0 153 0 274 0 709 0 186 14 3.070 0.062 0.120 0.052 0.144 0 037
l
百]—可1F
6 I
.,.————JL——
0 4 8 12 162024
C l
l【
矿1—F1r雨1矿蜀
A太黄素B大黄酚c大黄素甲醚D白藜芦醇苷E白藜芦醇F一酸模索
A—emodinBchrysophanolCphyscionD—polydatinE—resveratro[F—nepodin
图2对照品的HPLC色谱图
Fig.2HPLCchromatogramsfreferencesubstances
虹心k
d下矿1r雨面—函 o’i百1n可E矿五 0 4 8 12162024283236404448
图3 尚志市帽儿山产毛脉酸模中6个成分的HPLC图谱
Fig.3HPLCchromatogramsfsixkindsofactiveconstituentsinrootofR.gmelini
growninMao’eMountainofShangzhiCity
6讨论 准的参考依据。
6.1对于性状、显微特征,文中所作描述能较好地 6.3薄层色谱结果表明,14个不同产地毛脉酸模
与同属易混淆品种洋铁叶酸模相区分,详见文献报 样品中,均采用薄层色谱法,检出大黄素、大黄酚、大
道01;与同属其他品种的区别见文献报道口]。 黄素甲醚3种蒽醌类成分,斑点清晰且方法简便、快
6.2 由表1可知,建议毛脉酸模药材各指标范围可 速、可行,故此方法可作为毛脉酸模药材的定性鉴别
控制在:浸出物量不低于45.0%,总灰分不得超过 依据。
12.0%,酸不溶性灰分不得超过2.0%,水分量应低6.4从表3测定结果来看,药圃栽培的13、14号样
于10.o%,此结论可作为制定毛脉酸模药材质量标 品中除白藜芦醇苷量与采自各林区样品量相仿外,
Iiiiiiji
E。
万方数据
中草药ChineseTraditionalandHerbaIDrugs第36卷第12期2005年12月· 879·
其余5种成分量均低于各林区样品量,说明药材野
生变家种过程中存在成分量的差异,可能是有效成
分在植物体内生物合成和积累与年限、生态环境的
影响因素有关,从而提示要进一步研究药材的标准
化种植技术,为大量生产优质原药材奠定基础。不同
产地药材中的6种成分之间白藜芦醇苷和白藜芦醇
二者量有互为消涨的趋势,待进一步验证;而其他成
分的变化趋势不明显。从以上结果可以看出,中药材
质量标准的确定是一项复杂的工作,仅以一种有效
成分的量目前难以全面反映中药材质量,而多种成
分量的测定又受到缺少对照品的影响,因而现阶段,
指纹图谱的研究给药材质量标准的确定带来了更科
学的客观评价指标。
6.5 中药材质量标准的最终制定应从形态、解剖、
化学、药效和分子标记等多方面进行比较,才能客观
地进行评价。
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穿龙薯蓣最佳采收期的研究
刘丽娟1,金德祥2,牛志多3,徐国经3
(1通化师范学院生物系,吉林通化134002;2.吉林永利药业有限公司
吉林白山 134300;3.吉林省中医中药研究院,吉林长春130021)
穿龙薯蓣DioscoreanipponicaMakino别名穿
地龙、穿龙骨、穿山龙,为薯蓣科薯蓣属多年生缠绕
性草本植物,属道地北药,以根茎人药,主要药用成
分为薯蓣皂苷(dioscin)及水解后产生的薯蓣皂苷元
(diosgenin)一“,后者是合成各种避孕药和甾体激素
类药物的重要原料,其本身有肝脏保护”1、抑制癌细
胞增殖o]、治疗骨质疏松o]、抗糖尿病和消炎等功
能““3。近年来,由于国内外合成甾体激素类药物的
迅速发展,对穿龙薯蓣的需求量日益增加,野生资源
已不能满足生产需求,人工驯化与栽培正在广泛兴
起。笔者已对穿龙薯蓣氮、磷、钾养分量变化规律进
行了研究o],最近又进行了一个生长季内和不同年
生穿龙薯蓣根茎内有效成分变化规律的研究,日的
是探索一年内的最佳采收月份和最佳采收年限,以
摸索最佳采收期。
1仪器、试剂与材料
1.1 仪器与试药:高效液相色谱仪:岛津LC一
10AT高效液相色谱仪;检测器:SPD10A紫外检测
器;手动进样。所用试剂均为色谱纯和分析纯。对照
品薯蓣皂苷元(批号:111572200301)购于中国药品
生物制品检定所,供测定用。
1.2材料:样品采自吉林省靖宇县,种栽经吉林省
中医中药研究院徐国经鉴定为当地野生种穿龙薯蓣
D.nipponicaMakino的根状茎。在人工栽培基地
中,分别选生长l~4年的地块,每个样品随机取3~
4点,整株挖出,进行不同年生穿龙薯蓣根茎内有效
成分变化规律研究;另外,从4月初开始在人工栽培
基地每个月的月初取样一次,连续取到9月初,共计
6个样品;取样时将地下根茎全部挖出,每个样品选
3点,整株挖出,所有样品去泥土和须根,切成1.5~
2cm的小段,烘干后备用。
2方法
2.1供试品溶液的制备:取本品粉末约1g,置圆底
烧瓶中,加1.5mol/L硫酸9mL,异丙醇21mI。,于
箨薯品羿:茹需蟊h甾2一),女,硕士,讲师,主要从事药用植物营养与栽培的研究。
Tel:(0435)6113230E—mail:liulijuan214@163.eom
万方数据
毛脉酸模药材质量标准研究
作者: 王振月, 左月明, 康毅华, 崔红花, 李瑞明, WANG Zhen-yue, ZUO Yue-ming,
KANG Yi-hua, CUI Hong-hua, LI Rui-ming
作者单位: 黑龙江中医药大学药学院,黑龙江,哈尔滨,150040
刊名: 中草药
英文刊名: CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年,卷(期): 2005,36(12)
被引用次数: 4次

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5.Wang Z Y;Li Y B;Kuang H X Isolation and identification of rhein and emodin 1996(02)
6.中华人民共和国药典(一部) 2000
7.Wang Z Y;Du S B;Kang Y H Pharmacognostical studies on Radix Rumex Gmelini 1994(06)
8.Wang Z Y;Wang Y Z;Wang Y Studies on the microscopical structures of eight species Chinese medicine
from Rumex root[期刊论文]-中草药 1999(11)

本文读者也读过(10条)
1. 王振月.刘颖新.刘利利.Wang Zhenyue.Liu Yingxin.Liu Lili 毛脉酸模叶中有效成分提取方法的比较研究[期
刊论文]-中国药业2011,20(9)
2. 徐美术.王振月.康毅华 毛脉酸模及同属药用植物研究述要[期刊论文]-中医药学刊2004,22(3)
3. 王振月.左月明.康毅华.丛艳.宋新丽 毛脉酸模化学成分的研究(Ⅱ)[期刊论文]-中草药2005,36(11)
4. 李成义 酸模和酸模叶蓼的显微鉴定研究[期刊论文]-中医药学刊2001,19(6)
5. 朱长福.同利琪.柯向梅.王国振.严玉平.由会玲 番石榴叶的质量标准研究[期刊论文]-中草药2006,37(6)
6. 王振月.孙晖.崔红花.康毅华.左月明.李瑞明 毛脉酸模不同生长发育期HPLC色谱指纹图谱研究[期刊论文]-植物
研究2005,25(1)
7. 李国文.程雪梅.吴弢.郑善松.王峥涛 蜜制紫菀饮片的质量标准研究[期刊论文]-中草药2008,39(2)
8. 张广庆.赵海鹏.王振月.程建蕊.唐先明.Zhang Guangqing.Zhao Haipeng.Wang Zhenyue.Cheng Jianrui.Tang
Xianming 酸模属植物的化学成分与药理活性研究进展[期刊论文]-世界科学技术-中医药现代化2008,10(5)
9. 于敏.弥宏.焦连庆.吕清远 西洋参饮片的质量标准研究[期刊论文]-中草药2005,36(11)
10. 汪冶.肖聪颖.田兰.欧阳聪芬 侗药毛秀才药材质量标准的研究[期刊论文]-中国民族医药杂志2009,15(8)

引证文献(4条)
1.胡凤.侯素云.高宁.程玉鹏.王振月 毛脉酸模内生真菌分布特征及其优势菌群化学成分相似度分析[期刊论文]-广
东药学院学报 2012(4)
2.程建蕊.王振月.胡凤.周晓慧.赵海鹏 白藜芦醇在植物中的分布及其生物活性研究进展[期刊论文]-世界科学技术
-中医药现代化 2007(5)
3.周玉.孙晓佳.孙莹.张维君.王振月 响应面法分析优化毛脉酸模多糖提取工艺[期刊论文]-中医药学报 2013(3)
4.肖凌.冯海龙 酸模药材质量标准研究[期刊论文]-中药新药与临床药理 2010(5)


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