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泽泻对 Lewis肺癌自发性转移的抑制作用及其机制研究



全 文 :表 4  SF对 ADP诱导的大鼠血小板聚集
的影响 (x± s , n= 10)
Table 4  Effect of SF on platelet aggregation
induced by ADP in rats (x± s , n= 10)
组 别 剂量 / ( mg· kg- 1) 聚集率 /% 抑制率 /%
空白对照 -   41. 10± 6. 85 -
NDS 1 000 25. 55± 3. 37* 37. 93
SF 40 22. 53± 3. 45* * 45. 18
20 29. 84± 6. 68* * 27. 39
10 36. 24± 5. 74 11. 82
  与空白对照组比较: * P < 0. 05 * * P < 0. 01
  * P < 0. 05 * * P < 0. 01 vs cont rol group
3 讨论
  脑缺血是一种病理过程复杂的疾病 ,其发病过
程涉及到脑血流减少、缺血缺氧和能量代谢衰竭及
氧自由基产生、炎性因子和细胞的参与等 ,最终导致
神经细胞溃变死亡 [8 ]。 血栓形成是脑缺血性疾病的
主要致病因素之一 ;脑缺血时 ,细胞内钙超载 ,氧自
由基产生增加 ,激活膜上的磷脂酶 A2 ,使膜磷脂分
解 ,生成大量的花生四烯酸 ,再经环氧酶途径形成不
稳定的中间物 PCG2和 PGH2 ,前者经 TXA2合成酶
催化形成 TXA2 ,后者则生成 PGI2 , TX A2大量合
成 ,致 PGI2 /TX A2比值失调 ,凝血机制障碍 ,易于血
栓形成 ,成为脑缺血的重要病理机制之一 [9 ]。同时 ,
血小板功能异常亢进 ,血小板激活之后的聚集和粘
附则是血栓形成的主要环节 ,如出血及 ADP, AA,
胶原等血小板激活剂等因素均可诱导血小板聚集和
粘附 ,使血液处于高凝状态 ,以至于形成血栓 ,这是
造成继发性脑损伤的重要原因之一。 抗凝药物能够
通过改善血液循环、干扰血栓形成过程 ,从而为重要
侧枝循环的建立及减慢脑缺血过程争取了时间 [10 ]。
本研究发现红花总黄酮不仅能改善大脑中动脉
栓塞所致脑缺血大鼠的行为障碍 ,减少脑缺血区面
积 ,也能抑制大鼠体内血栓的形成和 ADP诱导的
大鼠血小板聚集 ;提示红花总黄酮对大鼠局部脑缺
血的保护作用与其抑制血小板聚集、干扰血栓的形
成有关。
References:
[1 ]  Xin X L, Geng M Y, Qi X, et al . Stud y on the act ion mech-
anism of a new type anti-cereb ral ischmia marine drug 989
[ J] . J Qin gdao Ocean Univ (青岛海洋大学学报 ) , 2001, 31
( 4): 536-540.
[2 ]  Huang W M, Li B Z, Yan X J, et al . Clinic and basic re-
search on an ti-platelet aggregation ef fect of berb erine [ J].
Ch in J Hematol (中华血液学杂志 ) , 1989, 10: 288.
[3 ]  Longa E Z, Weins tein P R, Carl son S, et al . Reversible
midd le cerebral artery occlusion w ithout craniectomy in rats
[ J] . Stroke, 1998, 20: 84.
[4 ]  Zhang Y Z, Gu D G, Mao S Y, et al . Protectiv e effect s of
Ginkgo bi loba ex t ract on focal cereb ral i sch emia and th rombo-
genesi s of carotid artery in rats [ J] . Acta Pha rm Sin (药学学
报 ) , 1998, 33( 12): 901.
[5 ]  Wang H T, Jin H T, Su n J N, et al . Experimen tal s tudies
on anti-th rombosis ef fect of 3, 4-oxois opropylidene-shikimic
acid [ J] . Acta Pharm S in (药学学报 ) , 2002, 37 ( 4): 245.
[6 ]  Wang M , Wang J, Sh ao M Y, et al . Fibrinolyt ic p ropert ies
and th rombolyt ic ef fect of a novel f ib rinolytic en zyme f rom
s t reptomyces SP. Y405 [ J]. Acta Pharm Sin (药学学报 ) ,
1998, 33( 7): 481-485.
[7 ]  Herbert J M , Bernat A, Samaman N, et al . The antiagg re-
gating and anti th rombotic activi ty of ticlopidne is potentiated
by aspi rin in th e rat [ J]. Thromb Haemost , 1996, 76 ( 1):
94.
[8 ]  Sies jo B K. Mechanisms of secondary brain damage in g lobal
and focal i sch emia: a speculation synthesis [ J ]. J Neuro-
trauma , 1995, 12: 943.
[9 ]  Wang J, Zhang J T. Relations of anti-cereb ral i schemia ef-
fect of total s alvianolic acid to anti-th rombosis formation [ J].
Ch in Pharmacol Bul l (中国药理学通报 ) , 1999, 16( 3): 237-
239.
[ 10]  Geng M Y, Xin X L, Li J, et al . Protective ef fect s of DPS on
M CAO rats [ J]. Oceanol Limnol Sin (海洋与湖沼 ) , 2001,
32: 192.
泽泻对 Lewis肺癌自发性转移的抑制作用及其机制研究
马 兵 1 ,项 阳 1 ,李 涛 1 ,于和鸣 2 ,李学军 1
( 1. 北京大学基础医学院 药理学系 ,北京  100083; 2. 国家计划生育委员会科学技术研究所 ,北京  100081)
摘 要: 目的 研究泽泻对 Lewis肺癌自发性转移的影响及其可能机制。方法 以 Lewis肺癌自发性转移为模型 ,
测定泽泻对瘤重指数、转移灶数的影响及其转移抑制率。 用激光衍射法和微压积管法测定红细胞的变形指数及比
容。双相凝胶电泳分析给药后小鼠血清蛋白质组变化。结果 泽泻 10, 20 g /( kg· d)连续给药 20 d均可使肺中的
·743·中草药  Chinese T raditional and Herbal Drug s 第 34卷第 8期 2003年 8月
收稿日期: 2002-09-10作者简介:马 兵 ( 1970— ) ,女 ,山西运城人 ,博士 ,讲师 , 1993年在沈阳药科大学获学士学位 , 1996年在该校获硕士学位 , 1996~ 2000年在北京医科大学 (现北京大学医学部 ) 基础医学院药理学系工作 ,任助教、讲师 , 2000年至今在北京大学基础医学院攻读博士学位 ,研究方向为分子药理学。 Tel: ( 010) 62091421  E-Mail: matongbing@ yahoo. com
* 通讯作者  Tel: ( 010) 62091421  E-mail: lix j@ bjmu. edu. cn
转移灶数明显减少 ,其转移抑制率分别为 56. 92% 和 88. 82%。荷瘤小鼠红细胞变形指数及比容明显降低 ,泽泻对
其无明显改善。泽泻可使荷瘤小鼠的血清蛋白成分发生显著变化。结论 泽泻可显著抑制 Lew is肺癌的自发性转
移 ,其机制可能与血清中某些蛋白成分的改变有关。
关键词: 泽泻 ; 肿瘤转移 ; 红细胞变行性 ; 红细胞比容 ; 蛋白质组
中图分类号: R286. 91   文献标识码: A   文章编号: 0253 2670( 2003) 08 0743 04
Inhibitory effects of Alisma oriental is on spontaneous metastasis of
Lewis lung carcinoma and its mechanism
M A Bing
1 , XIAN G Yang
1 , L I Tao
1 , YU He-ming
2 , L I Xue-jun
1
( 1. Depar tment of Pha rmaco log y , Schoo l o f Basic Medical Sciences, Peking Univ er sity , Beijing 100083, China;
2. National Resea rch Institute fo r Family Planning , Beijing 100081, China )
Key words: Alisma orientalis ( Sam. ) Juzep. ; tumor metasta sis; erythrocyte defo rmabi li ty; hemat-
ocrit; pro teome
  泽泻 Alisma oriental is ( Sam. ) Juzep. 为泽泻
科植物的干燥块茎。现代临床研究表明 ,泽泻及其复
方在治疗高脂血症、脂肪肝、免疫复合物型及抗基底
膜型肾炎、肾结石、高血压、冠心病、腹水及美尼尔氏
综合症等常见病方面取得了良好的疗效。 有报道泽
泻还具有明显的抗血小板聚集、抗血栓形成及促进
纤溶酶活性等作用 [1 ]。 而最近的研究发现肿瘤转移
与血栓形成、纤溶酶原系统的活性有密切关系 [2 ]。为
深入研究与开发泽泻的药理作用 ,本研究以 Lewis
肺癌自发性转移为模型 ,研究了泽泻对肿瘤转移的
影响 ,并观察其对红细胞变形能力、红细胞比容等血
液流变学参数的影响。 同时应用双相凝胶电泳技术
研究了给药后小鼠血清的蛋白质组变化。
1 材料与方法
1. 1 药物: 泽泻醇提浓缩液 (每克浓缩液相当于
16. 1 g原药 )由北京大学药学院中药研究室车庆明
老师惠赠 ,将其混悬于 0. 5% 羧甲基纤维素钠中 ,
并用超声粉碎仪打匀。
1. 2 动物模型与分组: C57BL /6小鼠 ,雌性 , 6~ 8
周龄 ,体重 18~ 20 g,购自北京大学医学部实验动
物中心。 Lewis肺癌荷瘤小鼠购自中国医学科学院
药物研究所。从荷瘤小鼠上剥离皮下瘤 ,选取生长良
好的瘤块 ,按肿瘤 (g )和生理盐水 ( mL) 1∶ 3的比
例研磨成匀浆 , C57BL /6小鼠腋窝皮下接种肿瘤组
织匀浆液每只 0. 2 mL。实验共分 4组:正常组 (不
接种肿瘤 ) ;模型组 (接种肿瘤 ,不用药 ) ;泽泻 10和
20 g生药 / ( kg· d)剂量组 ,每组 9只动物。于肿瘤
接种后第一天开始 ig给药 ,共给药 20 d。对照组仅
给予同体积溶媒。
1. 3 转移分析:于接种后第 21天颈椎脱臼处死动
物 ,称体重、皮下瘤重、双肺湿重 ,并在解剖显微镜下
计数双肺中所形成的转移瘤灶数目。 计算瘤重指数
与转移抑制率。
瘤重指数 = 皮下瘤重 /体重× 100%
转移抑制率= (模型组双肺湿重 - 治疗组双肺湿重 ) /
(模型组双肺湿重 -正常组双肺湿重 )× 100%
1. 4 红细胞变形能力和比容测定 [3 ]:悬浮介质 PV P
(聚乙烯吡咯烷酮 ) 溶液相对分子质量 3× 104 ,
p H7. 4,渗透压 300 mOsm /kg , PV P浓度 15% ,黏
度 8 mPa· s,含 0. 004% 牛血清白蛋白。5 mL PV P
溶液配成浓度为 2× 107 /mL的红细胞悬液。
1. 4. 1 测量方法: 处死动物前 ,摘眼球取血约
0. 6~ 0. 9 mL (肝素抗凝 ) ,用微压积管测定红细胞
比容。用激光衍射法 ( LBY-BX2型激光衍射仪 ,北
京普利生仪器中心 )测定全血中红细胞在切变率为
50~ 1 000 s- 1的变形指数 ( DI)。
1. 4. 2 计算公式:通过测量衍射环的短轴 af和长轴
bf ,可计算出红细胞变形指数: DI= bf /af
1. 5 蛋白质组学分析:动物模型与分组同 1. 2。 于
接种肿瘤后第 21天 ,摘取小鼠眼球取血 ,待血凝后
取血清 ,立即分装 ,投入液氮 ,然后转移至 - 70℃
冰箱保存待用。双相凝胶电泳所用试剂均为 Amer-
sham Pharmacia或 Bio-Rad公司产品。
1. 5. 1 双相凝胶电泳分离血清总蛋白:第一相固相
梯度等电聚焦 IPG-DAL T: 主要按 Sanchez的方
法 [4 ]和 IPGpho rTM等电聚焦系统指南进行。取模型
组和泽泻 20 g /( kg· d) 组小鼠血清 ,室温融化后 ,
Bradfo rd法 [ 5]测定血清总蛋白浓度。各取 140μg,
加入水化液 ( 8 mol /L Urea , 2% CHAPS, 0. 28%
DT T, 0. 5% IPG Buffer ) ,总体积 350μL,加入
IPGstrip持胶槽中 ,将 IPG干胶条去保护膜胶面朝
下 ,轻轻置入持胶槽中 ,覆盖一层矿物油 ,盖好盖子
后置于 IPGphor水平电泳仪 ( Amersham Pha rma-
cia)电极板上。 等电聚焦程序如下: 无电压溶胀 6
·744· 中草药  Chinese T raditional and Herbal Drug s 第 34卷第 8期 2003年 8月
h; 30 V , 6 h; 200V , 0. 5 h; 500V , 1 h; 1 000 V , 1 h;
8 000 V , 4~ 8 h。第二相垂直板 SDS-PAGE电泳:
等电聚焦结束后 ,胶条在含 50 mmo l /L Tris-HCl , 6
mol /L Urea, 30% 甘油 , 2% SDS, 1% DTT和痕量
溴酚蓝的平衡液 ( p H8. 8) 中平衡 15 min,然后于
2. 5% 碘代乙酰胺替换 1% DT T的同样的平衡液中
平衡 15 min。胶条移至 10% SDS-PAGE胶的上端 ,
0. 5% 琼脂糖封胶 , SDS-PAGE在 Pro teanⅡ ( Bio-
Rad)电泳槽中进行 , 20 mA /胶电泳 , 40 min后换用
30 m A /胶 ,直到溴酚蓝到达胶的底线。 将胶放入考
马斯亮蓝溶液中染色 4 h,脱色。
1. 5. 2 图像的采集与分析: 双相电泳凝胶用 Gel
Doc 2000凝胶成像系统获取图象 ,用 Imagemaster
R 2D Elite ( Amersham Pha rmacia) 软件包进行分
析。图像分析过程包括蛋白点的检测、量化、背景扣
除和点的匹配。蛋白点检测后进行匹配、编辑。以治
疗组双相凝胶电泳图作为参考胶 ,并建立一些匹配
点 ,然后自动匹配其他蛋白点。蛋白点的相对分子质
量和等电点采用二维校正法确定。
1. 6 统计学处理: 结果以 x± s表示。 采用 SPSS
10. 0软件 ,多组样本均数比较采用 ANOV A分析。
2 结果
2. 1 泽泻对 Lew is肺癌自发性转移的影响: 表 1
结果显示泽泻 10和 20 g /( kg· d) 对 Lewis癌皮
下瘤的瘤重指数无显著影响 ,提示其不能明显抑制
皮下瘤的生长。但两种剂量的泽泻均可抑制 Lew is
肺癌的自发性转移 ,使肺中的转移灶数及双肺湿重
均明显降低且呈现一定剂量依赖关系。 其转移抑制
率分别为 56. 92% 和 88. 82% 。
2. 2 泽泻对 Lewis癌荷瘤小鼠血液流变学参数的
影响:如表 2结果所示 ,荷瘤小鼠红细胞在切变率为
1 000 s
- 1时的变形指数以及红细胞比容与正常组小
鼠相比均明显降低 ,给泽泻后不能使红细胞的流变
学特性得到有效恢复。
表 1 泽泻对小鼠 Lewis肺癌自发性转移的影响 (x± s)
Table 1  Ef fect of A. orientalis on spontaneous metastases of Lewis lung carcinoma ( x± s )
组别 剂量 / ( g· kg- 1) 动物数 瘤重指数 转移灶数 双肺湿重 /mg 转移抑制率 /%
对照 - 9 - -    173. 90± 5. 99* * * -
模型 - 8    29. 30± 1. 00    21. 67± 1. 31    370. 00± 62. 62 -
泽泻 10 8 22. 89± 3. 00 16. 25± 1. 73* 258. 38± 23. 98* 56. 92
20 6 22. 22± 1. 61 6. 33± 0. 80* * * 195. 83± 7. 94* * 88. 82
  与模型组比较: * P < 0. 05 * * P < 0. 01 * * * P < 0. 001
  * P < 0. 05 * * P < 0. 01 * * * P < 0. 001 vs model group
表 2 泽泻对 Lewis肺癌荷瘤小鼠红细胞
流变学特性的影响 (x± s )
Table 2  Effect of A. orientalis on erythrocyte
rheological behavior of mice bearing
Lewis lung carcinoma (x± s)
组别 剂量 / ( g· kg- 1 )动物数 变形指数 /% 红细胞比容 /%
对照 - 9 33. 75± 0. 53    46± 1
模型 - 8 26. 13± 0. 76* * * 28± 2* * *
泽泻 10 8 25. 77± 1. 59* * * 21± 1* * *
20 6 28. 33± 0. 76* * 24± 1* * *
  与正常组比较: * * P < 0. 01 * * * P < 0. 001
  * * P < 0. 01 * * * P < 0. 001 vs no rmal group
2. 3 泽泻对 Lewis肺癌荷瘤小鼠血清蛋白质组的
影响: 模型组和治疗组小鼠血清总蛋白经 IPG-2D-
PAGE分离 ,考马斯亮蓝染色得到的图谱 ,其模式
非常相似。二维凝胶电泳图谱经 Imagemaster R 2D
Eli te软件进行分析 ,模型组检测到 ( 269± 12)个蛋
白点 (n= 3) ,治疗组检测到 ( 295± 8) 个蛋白点
(n= 3)。选取治疗组胶作为参考胶进行匹配 ,匹配
( 109± 11)个蛋白点 (n= 3)。提示药物治疗前后血
清蛋白质组发生了显著变化。
3 讨论
  肿瘤转移是恶性肿瘤的基本特征 ,亦是临床肿
瘤患者的主要死因。因此 ,努力开发出高效低毒的抗
转移药物将在肿瘤治疗中具有重要意义。本研究中
所用的 Lewis肺癌为自发性肺内未分化上皮样癌。
移植瘤主要通过血行播散在肺部形成转移灶。
Lew is肺癌从移植后的增殖、侵袭、转移、到最终形
成肺转移瘤的过程基本类似于人类肿瘤从生长到转
移瘤形成所经历的一系列步骤 ,故称之为癌的自发性
转移模型。 所以 ,用此模型来研究药物的抗癌转移活
性更具有临床意义。本研究结果发现 ,泽泻醇提物 10
和 20 g /( kg· d)可使肺内形成的转移瘤灶数显著减
少 ,对转移的抑制率分别为 56. 92% 和 88. 82% 。提
示泽泻具有较强的抗恶性肿瘤转移作用。
随着恶性肿瘤的演进 ,荷瘤动物都有轻重不等
的代谢性酸中毒及电解质平衡紊乱 ,可直接影响血
液的渗透压 ,而红细胞所处介质的渗透压和 pH值
对其膜的稳定性和变形能力都有很大影响 ,结果可
造成红细胞的皱缩、膨胀、破碎及硬化。 晚期荷瘤动
·745·中草药  Chinese T raditional and Herbal Drug s 第 34卷第 8期 2003年 8月
物出现恶液质、严重贫血也会使红细胞比容降低。本
实验结果表明 ,荷瘤组小鼠与正常组小鼠相比 ,红细
胞在切变率为 1 000 s- 1时的变形指数显著降低 ,红
细胞比容也明显下降。 研究结果证实泽泻不能有效
改善荷瘤小鼠的血液流变学特性 ,提示其抗肿瘤转
移活性是通过其他途径实现的。
蛋白质组学是在体液、组织或细胞整体水平上
研究蛋白质的属性:表达水平、翻译后修饰、相互作
用等 ,并由此在蛋白质水平上获得对疾病过程、细胞
生理、生化过程和调控网络的广泛而完整的认识 [6 ]。
肿瘤转移是由既相互联系又相互作用的多步骤构成
的级联过程。 以往的研究多集中于单个或少数几个
基因或蛋白质。采用蛋白质组学的分析方法从整体
水平上探讨这类多基因、多蛋白参与的疾病的生化
过程具有重要的实际的理论意义。蛋白质组学的技
术提供了一种发现和鉴定疾病状态下表达异常的蛋
白质的方法。这些蛋白质可以作为药物设计的靶点。
还可通过对肿瘤演进的不同阶段蛋白质组变化的分
析 ,获得一些肿瘤不同时期的标志分子 ,这不仅对药
物发现具有指导意义 ,还对肿瘤的诊断、治疗提供理
论基础 [7, 8 ]。在本研究中 ,建立了 Lewis肺癌转移模
型 ,用蛋白质组学的关键技术对模型组与给药组动
物血清蛋白质组进行了比较分析 ,发现在用泽泻治
疗后血清中的很多蛋白质成分发生了显著变化 ,这
些蛋白质成分可能参与了肿瘤恶性生长、去分化和
其他表型与生物学特征改变的调控。为了进一步探
讨其与泽泻的抗肿瘤转移活性之间的关系 ,笔者正
在对这些差异蛋白进行识别与鉴定。
References:
[1 ]  Wang X H. Adv ances in th e s tudies on European Water-p lan-
tain ( Al isma plan tago-aquatica ) [ J ]. Chin Tradi t Herb Drugs
(中草药 ) , 1999, 30( 7): 557-S i.
[ 2 ]  Valen te M , Pon te E. Th rombosis and cancer [ J ]. Minerva
Cardioangiol , 2000, 48( 4-5): 117-127.
[3 ]  Wen Z Y, Ma W Y, Gao T, et al . Ef fect of suspending medi-
um viscosity on orientat ion and defo rmation of RBC in a sh ear
f low field [ J] . Clin Hemorrheol , 1995, 15( 4): 619-625.
[ 4]  Sanchez J C, Roug e V, Pisteu r M , et al . Imp roved and sim-
pli fi ed in-gel s am ple applicat ion using resw el ling of dry immo-
bi lized pH gradien ts [ J] . Electrophoresis , 1997, 18: 324-327.
[5 ]  Krug er N J. The Bradfo rd meth od for protein quanti tation
[ A] . Walk er J M. The Protein Protocols Handbook [ M ].
New Jersey: Humana Pres s Inc, 1996.
[6 ]  Black stock W P, Weir M P. Proteomics: quanti tativ e and
ph ysical mapping of cel lular proteins [ J] . T IB TEC H, 1999,
17: 121-127.
[ 7]  Hanash S M , M adoz-Gu rpid e J, M is ek D E. Identi fication of
nov el targets for cancer therapy using ex pres sion proteomics
[ J ]. Leukemia , 2002, 16( 4): 478-485.
[ 8 ]  Searl s D B. Using bioinfo rmat ics in gene and d rug discovery
[ J] . Drug Discovery Today , 2000, 5( 4): 135-143.
仙灵骨葆治疗膝关节髌骨软化 110例临床观察
苗 兵
(天津医院 ,天津  300160)
  仙灵骨葆是一种具有标本兼治通过对机体的全
身性调节而达到纠正机体激素失衡作用 ,既抑制骨
吸收又促进骨形成治疗骨质疏松的中药内服制剂 ,
具有明显抗骨质疏松作用。 仙灵骨葆能使被破坏的
性腺组织结构趋于正常达到保护性腺的作用 ,维持
体内正常激素水平。本观察采用仙灵骨葆治疗髌骨
软化症 110例 ,获得满意疗效 ,并与双氯芬酸钠对
照组 110例进行比较 ,现将观察结果报道如下。
1 资料与方法
1. 1 一般资料: 220例患者均为门诊病人 ,随机分
为两组 ,治疗组 110例用仙灵骨葆 ,对照组 110例
用双氯芬酸钠治疗。治疗组男 48例 ,女 62例 ;有外
伤史或劳损史 72例 ,无明显外伤史为 38例 ;单膝
为 63例 ,双膝为 47例 ;年龄 16~ 70岁 ;病程 1年
以内 11例 , 1~ 3年 50例 , 4~ 5年 43例 , 5年以上
6例。对照组男 45例 ,女 65例 ;年龄 15~ 68岁 ;病
程 1年以内 12例 , 1~ 3年 48例 , 4~ 5年 45例 , 5
年以上 5例 ,两组资料比较差异无统计学意义 ,具
有可比性。
1. 2 诊断标准:膝关节疼痛 ,蹲起及上下楼梯时加
重 ,髌骨研磨试验 X线显示有骨质疏松 ,髌骨软骨
下骨吸收或囊性变髌骨软骨表面凹凸不平。 排除其
他膝关节疾病 [1 ]。
1. 3 治疗方法:治疗组口服仙灵骨葆 (贵州同济堂
·746· 中草药  Chinese T raditional and Herbal Drug s 第 34卷第 8期 2003年 8月
收稿日期: 2002-10-12作者简介:苗兵 ( 1966— ) ,男 ,河北人 ,主治医师 , 1989年毕业于天津医学院 ,现在天津医院关节炎科工作 ,主要致力于关节外科 ,类风湿及关节置换的研究。