全 文 ：山茱萸不同炮制品中齐墩果酸含量的比较
应帮智1 , 张振凌2, 朱新成3 , 陈永强3X
( 1. 商丘市第一人民医院 ,河南 商丘　476100; 2. 河南中医学院药学院,河南 郑州　450008;
3. 河南宛西制药股份有限公司,河南 西峡　439600)
　　山茱萸是山茱萸科植物山茱萸 Cornus of f ici-
nal is Siet . et Zucc.的干燥成熟果肉。始载于《神农
本草经》。具有补肝肾、涩精气、固虚脱的功效, 是成
药六、八味地黄丸的重要原料。目前认为山茱萸中所
含的熊果酸、齐墩果酸、山茱萸苷、马钱子苷、没食子
酸、多糖类等为其主要有效成分,具有降血糖、增强
免疫、抗炎等药理作用 [ 1]。临床多用其酒蒸、酒炖等
炮制品,并采用薄层扫描法测定熊果酸含量作为其
质量控制指标 [ 2]。据报道炮制对山茱萸熊果酸含量
有明显影响 [ 3] , 炮制品中以酒炖品中熊果酸含量较
高[ 4]。山茱萸中含有齐墩果酸[ 5] ,但炮制对齐墩果酸
含量的影响尚未见到报道。本实验采用薄层扫描法
测定山茱萸中齐墩果酸的含量 [ 6] , 比较不同炮制方
法对其含量的影响, 为制定山茱萸合理的炮制工艺
提供实验依据。
1　仪器与材料
　　CS—9301 薄层扫描仪(日本岛津) ; Met t ler -
AE240电子天平(瑞士) ; 微量定量毛细管 ( Dr um-
mond 公司, 美国) ; 939型薄层铺板仪(重庆南岸贝
尔德仪器技术厂)。
　　齐墩果酸对照品(中国药品生物制品检定所) ;
硅胶G(青岛海洋化工厂) ;黄酒(绍兴市马山东星酒
厂) ;试剂均为分析纯。
　　山茱萸药材产于河南省西峡县,由宛西制药股
份有限公司提供,经河南中医学院中药资源教研室
陈随清副教授鉴定为山茱萸科植物山茱萸 Cornus
of f i cinalis Siev . et Zucc.。
　　取山茱萸样品,除去杂质和残留的果梗和核,得
净山茱萸。取净山茱萸 200 g ,摊于瓷盘中, 于烘箱中
60 ℃烘 8 h 至干, 取出,放于干燥器中放凉备用,作
为生品。取净山茱萸200 g, 缓慢加入 40 mL 黄酒搅
拌均匀, 加盖密闭, 浸润 2 h 后摊于瓷盘中,于烘箱
中 60 ℃烘 8 h 至干, 取出, 放于干燥器中放凉备
用[ 5] ,作为酒浸品。取净山茱萸200 g ,置于滤布上摊
开,放上蒸笼上蒸 2 h 后, 取出摊于瓷盘中,于烘箱
中 60 ℃烘 8 h 至干, 取出, 放于干燥器中放凉备
用[ 6] ,作为清蒸品。取净山茱萸 200 g ,缓慢加入 40
mL 黄酒拌匀,加盖闷润 0. 5 h,置于滤布上摊开, 放
上蒸笼上蒸 2 h 后,于烘箱中 60 ℃烘 8 h 至干, 取
出,放于干燥器中放凉备用,作为酒蒸品。取净山茱
萸 200 g, 缓慢加入 40 mL 黄酒搅拌均匀,放上蒸笼
上,隔水炖 2 h后摊于瓷盘中,于烘箱中 60 ℃烘 8 h
至干,取出,放于干燥器中放凉备用,作为酒炖品。
2　不同炮制品中齐墩果酸的含量
2. 1　薄层及扫描条件:硅胶 G 薄层板( 10 cm×20
cm。取硅胶 G 20 g 加 0. 5% CMC-Na 溶液 50 mL,
研匀, 用铺板仪制板, 板厚 0. 5 mm, 室温晾干, 110
℃活化 0. 5 h,置于干燥器中备用) ;展开剂:氯仿-甲
醇-甲酸( 20∶1∶0. 2) ;预饱和 1 h,必要时可用宽滤
纸条助饱和; 展距: 8 cm; 显色剂: 10%硫酸乙醇液;
置 110 ℃烘箱中烘 3～5 min, 呈现紫红色斑点, 覆
盖玻璃板胶布密封后扫描。单波长反射锯齿扫描; 测
定波长: 540 nm。
2. 2　对照品溶液制备: 精密称取齐墩果酸对照品
0. 80 mg ,置 2 mL 量瓶中,以氯仿溶解,并稀释至刻
度,即得 0. 40 mg/ mL 对照品溶液。
2. 3　标准曲线制备:用定量毛细管分别吸取齐墩果
酸对照液 1, 2, 3, 4, 5 LL 依次点于同一硅胶 G 板
上,按上述薄层和扫描条件测定,以斑点面积积分值
为纵坐标,对照品溶液点样量为横坐标,绘制标准曲
线。得回归方程: Y = 1 087X+ 187. 4, r= 0. 999, 齐
墩果酸在 0. 40～2. 00 Lg 呈良好的线性关系。
2. 4　供试品溶液制备:按文献[ 5]所用方法, 分别取
各实验样品粗粉1 g ,精密称取,置索氏提取器中, 加
乙醚 80 mL, 于 50 ℃～60 ℃回流提取 2 h,回收乙
醚,挥发至干,残渣加氯仿溶解,滤纸滤过,滤液定容
至 5 mL,即得。
2. 5　精密度试验:精密吸取供试品溶液,每点点样
量为 2 LL, 依次点 5点于同一硅胶 G板上,展开、显
色、扫描, 测定每点面积积分值, 结果其 RSD 为
·159·中草药　Chinese T raditional and Herbal D rug s　第 35 卷第 2 期 2004年 2月
X 收稿日期: 2003-04-24
2. 07%。依次点于 5块硅胶 G板上,展开、显色、扫
描,测定每点面积积分值,结果其 RSD为 2. 46%。
2. 6　稳定性试验:精密吸取供试品溶液,点样, 依上
述扫描条件每隔 20 min测面积 1次,连续 2 h, 面积
值基本不变, 其 RSD= 0. 42% ( n= 7)。
2. 7　重现性试验: 取同一批样品粗粉 5 份, 每份 1
g ,精密称取,按上述供试品溶液的制备方法制备。
分别精密吸取供试品溶液 2 LL, 点于不同的 5 块硅
胶 G 板上,展开、显色、扫描,测定齐墩果酸面积积
分值,结果其 RSD 为 2. 70%。
2. 8　回收率试验: 精密称取齐墩果酸适量(约 1. 1
mg ) , 加入已知含量的样品中(含齐墩果酸约 1. 1
mg ) ,按供试品溶液制备方法制备, 依法扫描测定,
计算回收率, 结果平均回收率为 102. 0%, RSD=
2. 24% ( n= 9)。
2. 9　样品含量测定:因回归方程不通过原点,故采
用外标两点法, 对照品溶液点样量为 2, 6 LL, 供试
品溶液点样量均为 2 LL。按上述薄层和扫描条件,
对供试品溶液和对照品溶液进行测定。计算样品中
齐墩果酸含量,结果见表 1。
表 1　山茱萸炮制品中齐墩果酸含量的测定结果 ( n= 3)
Table 1　Contents of oleanolic acid in Fructus
Corni processed products ( n= 3)
样品 齐墩果酸/ ( mg·g- 1) RSD/ %
生　品 1. 191 1. 64
酒浸品 2. 023 2. 00
清蒸品 1. 254 3. 99
酒蒸品 2. 205 3. 54
酒炖品 1. 772 2. 92
　　结果表明:山茱萸炮制品中齐墩果酸含量: 酒蒸
品> 酒浸品> 酒炖品> 清蒸品> 生品。
3　讨论
3. 1　山茱萸由于药用历史悠久,炮制方法较多,本
实验所采取的是临床常用的炮制方法与工艺,并且
有意设计比较加酒与不加酒的酒蒸与清蒸; 加热与
不加热的酒蒸、炖与酒拌润;加热过程中酒的挥发与
不挥发的酒蒸与酒炖等不同炮制方法与工艺的对
照。其具体的炮制工艺参照了《中华人民共和国药
典》、《全国中药炮制规范》、《中药炮炙经验集成》等。
因为药典和炮制规范均没有详细的规定加热时间,
本试验中把各样品的加热时间和烘干时间等条件控
制基本相同, 如各炮制品同条件下烘干,蒸炖加热时
间,辅料用量保持一致等均是为了尽量减少样品炮
制工艺因素对齐墩果酸含量造成的差异, 进而客观
实际地比较不同炮制方法对其含量的影响。
3. 2　实验结果表明不同炮制方法和加入的辅料对
齐墩果酸含量影响较大, 其炮制品中齐墩果酸含量
均高于生品,并且酒蒸品> 酒浸品> 酒炖品> 清蒸
品。由此可见, 炮制能升高山茱萸中齐墩果酸的含
量, 其原因可能是存在于山茱萸中结合型的齐墩果
酸炮制后分解, 也可能是其他成分经炮制后转化, 使
得齐墩果酸含量升高。齐墩果酸为广谱抗生素,具有
明显的抗炎作用 [ 1] , 临床上治疗急性病毒型肝炎用
炮制品而不用生品,这与山茱萸经炮制后齐墩果酸
含量升高是相一致的。
3. 3　为了分析炮制升高山茱萸中齐墩果酸含量的
原因,笔者曾测定了上述各种炮制品的收得率及其
水分的含量[ 7] ,结果证明上述不同炮制品收率及水
分含量并无明显差异,而且以生品中水分含量稍低,
所以水分含量并不是生品中齐墩果酸含量低于其他
炮制品的原因。炮制使山茱萸中齐墩果酸含量升高,
其原因可能是存在于山茱萸中结合型的齐墩果酸炮
制后分解,也可能是其他成分经炮制后转化, 使得齐
墩果酸含量升高, 加酒、加热可能促进这种分解转
化,所以加酒、加热炮制后含量变化明显,由于酒浸、
酒蒸和酒炖炮制工艺存在着加热与不加热、药物受
热温度高低、程度快慢的差异,因而在同一时间内使
升高的结果也有不同。这提示不同的炮制方法,应该
明确规定不同的炮制时间、温度等具体工艺。
3. 4　本实验采用薄层扫描法测定山茱萸中齐墩果
酸的含量, 所测结果与文献报道山茱萸中齐墩果酸
含量相一致[ 5]。但由于山茱萸中同时含有熊果酸, 与
齐墩果酸难以分离,因此本实验有必要采用更合适
的分离方法进行深入的比较。
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