全 文 ：图谱存在一定的差异 ,其共有峰相对保留时间基本
一致 ,相对峰面积比值存在一定的差异 ,可用来鉴别
和区分不同厂家生产的刺五加片。
2. 5　结论:根据研究结果 ,制定了刺五加片剂标准
指纹图谱技术参数 ,其共有峰的峰号 (相对保留时
间 ): 1 ( 0. 270) , 2( 0. 307) , 3 ( 0. 329) , 4( 0. 434) , 5
( 0. 528) , 6( 0. 584) , 7( 0. 655) , 8( 0. 676) , 9( 0. 692) ,
10( 0. 712) , 11( 0. 830) , 12 ( 0. 878) , 13( 1. 000) , 14
( 1. 081) , 15( 1. 143) , 16( 1. 378) , 17( 1. 451)。
3　讨论
3. 1　文献研究了不同产地刺五加药材的指纹图
谱 [3 ] ,流动相采用了甲醇 -水-冰醋酸 ( 15∶ 85∶ 1)等
度洗脱。研究中发现:由于刺五加中含有较多的化学
成分 ,流动相若采用等度洗脱 ,当提高流动相的洗脱
能力时 ,则可出现较多的色谱峰 ,提供较多的信息 ,
但有很多峰不能完全分离 ;当降低流动相的洗脱能
力时 ,虽可改善峰的分离情况 ,但有部分成分不能被
洗脱出峰 ,信息量减少。采用梯度洗脱 ,可兼得二者
的优点。各成分之间分离情况良好 ,因此本实验采用
了甲醇 -1% 醋酸梯度洗脱 ( 0→ 6 0min 1% 醋酸
100% ～ 35% )的方法。
3. 2　刺五加对照药材与其片剂的指纹图谱比较显
示 ,药材的成分比片剂更复杂 ,但片剂特征峰与药材
特征峰基本一致 ,相关性良好。
3. 3　试验结果显示: 5个不同生产厂家刺五加片指
纹图谱中主要峰群的整体图貌基本一致。但各成分
含量的相对比值有所不同 ,为鉴别、区分不同来源的
刺五加片提供了科学依据。
3. 4　建立指纹图谱对刺五加片进行综合、宏观的分
析有利于全面控制该制剂的质量 ,促进刺五加制剂
质量控制水平的提高。
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化瘀巴布膏体外透皮吸收研究
寿　旦 ,孙静芸
(浙江大学药学院 ,浙江 杭州　 310006)
摘　要: 目的　研究促透皮吸收剂氮酮对化瘀巴布膏体外透皮吸收的影响。方法　采用改良 Franz扩散池法 ,研究
化瘀巴布膏中胡椒碱的体外透皮吸收特性 ,采用高效液相色谱法检测透过的胡椒碱 ,同时采用气相色谱法 ,以丁香
酚为检测指标考察制剂稳定性。结果　经统计学分析 ,胡椒碱的体外渗透过程符合零级方程 ,并且试验过程中制剂
基本稳定。 结论　促透皮吸收剂氮酮可以促进药物的透皮吸收。
关键词: 化瘀巴布膏 ;透皮吸收 ;胡椒碱 ;改良 Franz扩散池法 ;丁香酚
中图分类号: R283. 62; R286. 02　　　文献标识码: B　　　文章编号: 0253 2670( 2003) 03 0220 03
Study on in vitro percutaneous adsorption of Huayu Babu Sticking Plaster
SHOU Dan, SUN Jing-yun
( Schoo l o f Pha rmacy , Zhejiang Univ ersity, Hang zhou 310006, China )
Abstract: Object　 To resea rch the effect o f lauro capram upon the percutaneous abso rption o f Huayu
Babu Sticking Plaster ( HBSP) in vitro. Methods　 The improved Franz di ffusing cells were chosen to study
percutaneous abso rption o f piperine f rom HBSP. The content o f permeated piperine was determined by
HPLC; w hi le the content of augenol w as determined by GC to inspect the stabi li ty o f HBSP. Results　 The
resul t show ed that the process o f penet ra ting of piperine in HBSP through skin could be in accordance w ith
zero-grade releasing equation and HBSP w as stable during the course of experiment. Conclusion Lauro-
·220· 中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　第 34卷第 3期 2003年 3月
收稿日期: 2002-03-18基金项目:浙江省中医药管理局资助项目 ( 045)作者简介:寿　旦 ( 1973— ) ,女 ,浙江诸暨人 ,助理研究员 , 1994年毕业于华西医科大学药学院药学专业后 ,在浙江省中医药研究院从事中药新药开发工作 ,现为浙江大学药学院研究生。
capram could promo te percutaneous absorption of piperine.
Key words: Huayu Babu Sticking Plaster ( HBSP) ; percutaneous abso rption; piperine; improved
Franz di ffusing cells; angenol
　　化瘀巴布膏是由骨伤科常用的黑膏药经剂改而
成的外用中药新制剂 ,由荜茇、丁香、冰片等组成 ,具
有活血化瘀的功效 ,对跌打扭挫等急性软组织损伤
具有显著而确切的疗效。本实验以氮酮作为巴布剂
的促透皮吸收剂 ,采用体外改良 Franz扩散池法 ,对
主药荜茇中有效成分胡椒碱的体外透皮吸收进行了
研究 ,考察氮酮的促透皮吸收作用。
1　仪器与材料
岛津 LC-10ATvp高效液相色谱仪 ;岛津 GC-
14A气相色谱仪 ; Franz扩散池 (宁海黄坛玻璃仪器
厂 ) ;恒控磁力搅拌器 (温州医疗电器厂 )。
　　化瘀巴布膏 (自制 ) ;胡椒碱对照品 (中国药品生
物制品检定所 ,批号 771-9001) ;丁香酚对照品 (中
国药品生物制品检定所 ,批号 0918-9603) ;脱毛膏
(英国产 ,中国对外贸易广州商贸公司经销 ) ;甲醇
(色谱纯 )。
　　昆明种小鼠 ,雌雄不限 , 25～ 28 g (浙江省中医
药研究院实验动物中心提供 )。
2　方法与结果
2. 1　胡椒碱标准曲线制备:精密称取干燥至恒重的
胡椒碱对照品 3. 3 mg于 10 mL容量瓶中 ,加无水
乙醇稀释至刻度 ,摇匀 ,再精密吸 1 m L,用无水乙醇
定容于 10 mL容量瓶中 ,摇匀 ,作为对照品溶液。分
别吸取上述对照品溶液 0. 4, 1. 0, 3. 0, 5. 0μL,注入
高效液相色谱仪中 ,以峰面积为纵坐标 ,进样量为横
坐标 ,绘制标准曲线 ,得方程 Y= 3 161 651. 39X-
5 751. 12, r= 0. 999 9,表明胡椒碱在 0. 013 2～
0. 165μg峰面积与进样量之间呈良好线性关系。
2. 2　丁香酚标准曲线制备:精密称取丁香酚对照品
7. 02 mg于 5 mL容量瓶中 ,加无水乙醇稀释至刻
度 ,摇匀 ,即得对照品溶液。 分别吸取上述对照品溶
液适量 ,用无水乙醇配成 0. 087 9, 0. 171, 0. 351,
0. 702, 1. 404 mg /mL的对照品溶液 ,取上述溶液各
1 mL注入气相色谱仪中 ,以峰面积为纵坐标 ,进样
量为横坐标 ,绘制标准曲线 ,得回归方程: Y=
2 140. 6X+ 112. 8, r= 0. 996 9,表明丁 香酚在
0. 087 9～ 1. 404μg峰面积与进样量之间呈良好线
性关系。
2. 3　 色 谱 条 件: 液 相 色 谱 柱 为 V P-ODS
( 150 mm× 4. 6 mm ) ,流动相为甲醇-水 ( 70∶ 30) ,
检测波长为 343 nm ,流速为 1 m L /min。以胡椒碱为
对照品 ,进样后测定峰面积。 测得平均回收率为
98. 20% ( RSD为 1. 30%。)
　　气相色谱柱为 PEG-20 M石英毛细管柱 ,柱温
110℃保持 5 min,以 10℃ /min升至 110℃ ,再以
20℃ /min升至 220℃ ,保持 10 min,检测器进样器
温度均为 230℃ , F ID检测器。以丁香酚为对照品 ,
进样后测定峰面积。 测得平均回收率为 98. 74%
( RSD为 2. 15% )。
2. 4　皮肤的制备:取体重合格的小鼠 ,用脱毛霜脱
去背部皮肤毛 ,用蒸馏水彻底洗净 ,浸在生理盐水中
备用。
2. 5　体外透皮吸收试验: 采用改良 Franz装置 (接
受池体积为 14. 5 mL,接受池有效接触面积为 4. 14
cm
2 ) ,固定装置 ,将 50%乙醇生理盐水加入接受池
中。 取离体鼠皮 ,将真皮层一侧面向 Franz池接受
池 ,蒙在接受池上 ,确保无气泡存在 ,用塑料绳沿池
口包裹、扎紧 ,以防接受液外漏 ,剪去多余皮肤 ,将化
瘀巴布膏 ( 4. 2 g )紧贴于离体鼠皮角质层一侧 ,释放
池顶端用塑料薄膜密封。另取一套改良 Franz装置 ,
同法操作 ,将不加促透皮剂氮酮的化瘀巴布膏 ( 4. 4
g )紧贴于离体鼠皮角质层一侧 ,作为空白对照。 水
浴恒温至 ( 37± 1)℃ ,电磁恒速搅拌 ,分别于 2, 4, 6,
8, 9. 5, 24, 30, 32, 48, 50 h时从样品接受池和空白
接受池中分别取出 4 mL接受液 ,同时各补加等量
50%乙醇生理盐水。
　　取出的接受液经微孔滤膜过滤后 ,取 20μL注
入高效液相仪中测定 ,根据峰面积计算累计透过量
(Q) ,以时间 t为横坐标 ,各时间点胡椒碱累计透过
量 Q为纵坐标 ,绘制体外透皮吸收曲线 ,见图 1。
　　由图 1可见 ,化瘀巴布膏的体外透皮是零级过
程 ,在 2～ 50 h体外经皮渗透接近恒速 ,其渗透曲线
方程为Q= 0. 526 3t+ 1. 536 3, r= 0. 932 8(n= 10) ;
不加氮酮的化瘀巴布膏的体外透皮也是零级过程 ,
在 2～ 50 h体外经皮恒速渗透 ,其渗透曲线方程为
Q= 0. 367 8t+ 0. 172 3, r= 0. 949 2 (n= 10)。 但是
不加氮酮的化瘀巴布膏的累计透过量明显小于加入
氮酮的。
2. 6　制剂稳定性的考察:取 3套改良 Franz装置 ,
室温保持约 32℃ ,同上操作 ,化瘀巴布膏 ( 3. 8 g )紧
·221·中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　第 34卷第 3期 2003年 3月
图 1　加入氮酮 (A)及不加入氮酮 (B)的
化瘀巴布膏剂体外透皮吸收曲线
Fig. 1　 Percutanous absorption curves of HBSP with
laurocapran (A) and without laurocapran (B)
贴于离体鼠皮角质层一侧。 接收池中不加接收液以
消除因经皮渗透及吸水造成的影响 ,而只考察试验
过程中因挥发性成分挥发而造成的影响。分别于 8,
24, 50 h依次称取其中一份巴布剂约 0. 5 g ,同时该
套装置即结束试验。另称取新拆封的巴布剂约 0. 5 g
作为 0 h的样本 ,进行丁香酚的含量测定。
　　样品置 25 mL容量瓶中 ,加适量无水乙醇 ,超
声提取 30 min后放冷 ,定容 ,取 3μL注入气相色谱
仪中测定 ,根据峰面积计算出含量 (C ) ,以时间 t为
横坐标 ,各时间点丁香酚含量 (C )为纵坐标 ,绘制曲
线 ,见图 2。 可见体外透皮吸收试验过程中 ,化瘀巴
布剂基本稳定。
3　讨论
3. 1　我们曾经选用生理盐水、 30%乙醇生理盐水
液、 50%乙醇生理盐水液作为接受液测定胡椒碱的
含量 ,结果用 50%乙醇生理盐水液溶解最好 ,含量
最高。 所以选用 50%乙醇生理盐水液作为接受液。
3. 2　胡椒碱对照品溶液经紫外扫描 ,发现 339 nm
图 2　 50 h内丁香酚含量变化曲线
Fig. 2　 Angenol change curve during 50 h
处有最大吸收 ,所以选用 339 nm为检测波长。
3. 3　不加氮酮明显小于加了氮酮的化瘀巴布膏的
累计透过量 ,说明氮酮起到了很好的促渗透作用 ,化
瘀巴布膏中加入氮酮是合理可行的。
3. 4　化瘀巴布膏在 0～ 50 h体外经皮恒速渗透 ,作
用时间较长 ,有望发展成为长效的经皮给药制剂。
3. 5　制剂稳定性试验中曾选择冰片作为指标 ,因为
对照品有两个峰 ,计算后得到的标准曲线中的线性
关系不如丁香酚 ,两者的含量相似 ,故采用丁香酚为
挥发性成分指标。
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苦玄参、黄芩与黄柏的大孔树脂提取研究
邹节明 ,陆　浩 ,何　斌 ,吴敏菊
(桂林三金药业股份有限公司药物研究所 ,广西 桂林　 541004)
摘　要: 目的　探讨大孔吸附树脂在精制苦玄参、黄芩与黄柏有效部位的应用。 方法　以中药中的有效成分为指
标 ,筛选适用的大孔吸附树脂型号 ,评价树脂吸附与解吸工艺。 结果　苦玄参、黄芩与黄柏提取物精制适用树脂型
号分别为 HPD500、 HPD300与 HPD100,吸附阶段的泄漏点分别为 1. 5, 0. 5和 1;饱和点分别为 11, 2和 4. 75;解吸
阶段的适用乙醇浓度分别为 50% , 30%和 50%。结论　不同型号的大孔吸附树脂对中药有效部位的提取精制有较
大差别。
关键词: 苦玄参 ;苦玄参苷 IA;黄芩 ;黄芩苷 ;黄柏 ;盐酸小檗碱 ;大孔吸附树脂
中图分类号: R284. 2; R286. 02　　　文献标识码: B　　　文章编号: 0253 2670( 2003) 03 0222 05
·222· 中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　第 34卷第 3期 2003年 3月
收稿日期: 2002-09-09