全 文 :鲜三七与干三七皂苷含量的比较
马 妮,高明菊, 曾 江,陈中坚,王朝梁, 崔秀明
(云南省文山州三七研究所, 云南 文山 663000)
三七 Panax notoginseng ( Burk. ) F . H. Chen
为五加科人参属多年生草本植物, 是我国特有的传
统名贵药材。对三七的开发和使用一般是经过干燥
后的干三七, 鲜三七的研究尚未有文献报道,由于传
统三七干燥过程中需打磨,是有害物质二次污染三
七的途径之一,为了充分利用产区优势,直接开发利
用鲜三七,开展了鲜三七与干三七皂苷含量的比较,
为鲜三七的开发提供实验依据。
皂苷是三七的主要有效成分之一,其中人参皂
苷 Rg1 , Rb1的含量最高,在现有标准中已将其作为
三七品质评价的指标 [ 1, 2] , 而三七皂苷 R1 是三七特
有的皂苷成分,也有较高的含量,应将其作为三七品
质评价的指标之一 [ 3] ,在本研究中采取 Rg 1, Rb1, R1
共 3种皂苷成分来评价三七的内在品质。
1 仪器与试药
1. 1 仪器: 岛津 LC—10AT vp 高效液相色谱仪,
Shim-Pack VP-ODS ( 250 mm×4. 6 mm )色谱柱,
SPD—10A vp紫外检测器, Class—VP 工作站控制处
理, 电子分析天平 Shimadzu AX200(日本岛津) ,
CQ—250超声波清洗器(中船七院七二六研究所)。
1. 2 试剂:水为重蒸水,乙腈和甲醇均为色谱纯,单
体皂苷 R1 , Rg 1, Rb1对照品均购自中国药品生物制
品检定所。
1. 3 药材: 8—10月分别在云南省的文山、马关、砚
山等不同地区的 9个不同地点采样,样品均为 3年
生三七,每个点采集 20株,清洗后取主根部分干燥
或直接测定。
2 实验方法
2. 1 供试品溶液的制备:取 9个不同产地的部分鲜
三七样品切碎,精密称取 1. 200 g, 加甲醇10 mL,称
重,超声提取 1 h后浸泡 24 h, 补足损失甲醇, 0. 45
m 滤膜滤过, 滤液作为供试品溶液;切碎后余下的
鲜三七于40 ℃烤箱中烘干后作为干三七品,粉碎后
精密称取 0. 600 g ,按上法制取供试液。
2. 2 对照品溶液的制备: 精密称取经干燥恒重的三七
皂苷R 1, 人参皂苷 Rg 1和 Rb1 对照品适量, 加甲醇分
别制成三七皂苷 R1 0. 5 mg / mL, 人参皂苷 Rg 1 2. 5
mg/ mL,人参皂苷Rb1 2. 5 mg/ mL 的对照品溶液。
2. 3 色谱条件: 色谱柱: Shim-Pack VP-ODS 反相
柱( 250 mm×4. 6 mm , 5 m) ,填充剂为十八烷基硅
烷键合硅胶;乙腈( B) -水为流动相, 0→25 min ( B)
由 20%~40%线性梯度洗脱, 25 min 结束后( B)回
复至 20%, 进样前乙腈-水( 20∶80)应平衡 5 min,
流速为 1. 0 mL/ min; 检测波长为 203 nm; 柱温 40
℃; 理论板数按 Rg1 峰计算应不低于 3 000,相连组
分的分离度应符合要求; 样品进样量为 20 L。
2. 4 线性关系:精密吸取三七皂苷 R1 对照品溶液
3, 6, 9, 12, 15, 18 L 进样, 按上述色谱条件测定, 以
对照品质量对峰面积作回归曲线, 得 R 1回归方程:
Y = 282 474X+ 60 808, r = 0. 999 3, 线性范围为
1. 5~9. 0 g; 同法测得, 人参皂苷 Rg 1 回归方程:
Y = 282 354X + 482 678, r = 0. 999 3, 线性范围
7. 5~ 45 g ; Rb1 回 归方 程: Y = 172 576X +
239 848, r= 0. 999 3,线性范围为 7. 5~45 g。
2. 5 精密度试验:取 1号干样品,处理配制得供试
液, 连续进样 5 次, 以峰面积计算, 三七皂苷 R 1 的
RSD为 1. 25%; 人参皂苷 Rg 1 RSD为 1. 18% ;人参
皂苷 Rb1 RSD 为 1. 22% ( n= 5)。
2. 6 稳定性试验: 取上述 1 号干样品液, 每隔 30
m in进样 1次, 测定峰面积, 结果三七皂苷 R 1 RSD
为 1. 30%; 人参皂苷 Rg 1 RSD 为 1. 23%; 人参皂苷
Rb1 RSD为 1. 27% ( n= 5)。
2. 7 重复性试验:取 1号干样品粉末,分别称取 5
份处理配制成供试液,按上述色谱条件测定, 结果三
七皂苷 R1 , RSD 为 1. 29%; 人参皂苷 Rg 1 RSD 为
1. 25%;人参皂苷 Rb1 RSD为 1. 29% ( n= 5)。
2. 8 加样回收率试验:精密称取 1号干样品粉末 5
份, 加入三七皂苷 R1、人参皂苷 Rg1、人参皂苷 Rb1
各适量,按上述色谱条件测定。得三七皂苷 R1的平
均回收率为 97. 88%, RSD为 1. 41%; 人参皂苷 Rg 1
·92· 中草药 Chinese T raditional and Herbal D rug s 第 35 卷第 1 期 2004年 1月
收稿日期: 2003-03-03基金项目:云南中药现代化项目资助( 2002ZY-8)
* 通讯作者 E-mail: sanqi30@ hotmail. com T el : ( 0876) 2141062
的平均回收率为 97. 40% , RSD 为 1. 33% ; 人参皂
苷 Rb1的平均回收率为 96. 91% , RSD 为 1. 37%。
3 结果与分析
鲜三七与干三七样品单体皂苷含量的比较见表
1, 结果表明除 2号和 3号样品外, 其余均是鲜品的
单体皂苷含量高于干品的。对9份样品进行统计分
表 1 鲜三七与干三七的皂苷含量 ( x±s)
Table 1 Fresh and dry P . notoginseng Saponins ( x±s)
序
号 样品
三七皂苷
R 1/ %
人参皂苷
Rg1/ %
人参皂苷
Rb1/ %
( R1+ Rg 1+
Rb1) / %
1 鲜三七 0. 92±0. 01 3. 56±0. 02 2. 00±0. 01 6. 48±0. 02
干三七 0. 56±0. 04 2. 46±0. 03 1. 66±0. 03 4. 68±0. 02
2 鲜三七 0. 56±0. 00 3. 42±0. 01 2. 83±0. 01 6. 80±0. 01
干三七 0. 59±0. 02 2. 34±0. 02 2. 78±0. 02 5. 71±0. 05
3 鲜三七 0. 47±0. 03 2. 59±0. 06 1. 51±0. 04 4. 57±0. 12
干三七 0. 47±0. 03 2. 20±0. 03 1. 65±0. 03 4. 32±0. 08
4 鲜三七 0. 62±0. 00 4. 23±0. 01 2. 51±0. 01 7. 36±0. 01
干三七 0. 59±0. 03 2. 95±0. 02 2. 41±0. 04 5. 94±0. 08
5 鲜三七 0. 45±0. 01 3. 33±0. 01 3. 09±0. 02 6. 87±0. 02
干三七 0. 30±0. 03 2. 44±0. 04 1. 91±0. 01 4. 65±0. 06
6 鲜三七 0. 85±0. 01 2. 72±0. 04 2. 30±0. 01 5. 87±0. 05
干三七 0. 37±0. 02 1. 95±0. 04 1. 88±0. 04 4. 21±0. 09
7 鲜三七 0. 29±0. 02 3. 50±0. 07 2. 20±0. 01 5. 99±0. 09
干三七 0. 28±0. 01 1. 79±0. 05 1. 32±0. 03 3. 40±0. 03
8 鲜三七 0. 39±0. 00 3. 05±0. 04 2. 02±0. 02 5. 45±0. 02
干三七 0. 27±0. 01 1. 60±0. 03 1. 20±0. 04 3. 07±0. 02
9 鲜三七 0. 86±0. 02 3. 49±0. 01 1. 90±0. 01 6. 26±0. 02
干三七 0. 31±0. 04 2. 14±0. 03 1. 53±0. 00 3. 99±0. 01
析比较, 结果表明: 鲜三七三七皂苷 R1 平均含量为
0. 60%,干三七三七皂苷 R 1平均含量为 0. 42%, 降
低 30%。鲜三七人参皂苷Rg1 平均含量为 3. 32% ,
干三七人参皂苷 Rg 1 平均含量为 2. 21% , 降低
33. 43%。鲜三七人参皂苷 Rb1平均含量为2. 26% ,
干三七人参皂苷 Rb1 平均含量为 1. 82% , 降低
19. 74%。鲜三七在干燥过程中 R1+ Rg1+ Rb1的平
均含量由 6. 18%下降至 4. 44%,皂苷含量平均降低
28. 16%。
4 讨论
4. 1 测定过程中已经考虑了水分的影响,应用干燥
法分别测定鲜品与干品的含水量,在计算含量时除
去水分。
4. 2 鲜三七皂苷含量比干三七的皂苷含量高,而且
3个单体皂苷降低程度依次为 Rg 1> R 2> Rb1 ,可能
是在干燥过程中受热破坏所致。
4. 3 鲜三七更易加工,应结合产区优势及鲜三七皂
苷含量高的特点,加强以鲜三七为原料的产品开发。
References:
[1] Ch P (中国药典) [ S] . 2000 ed. Vol Ⅰ.
[2] Quali ty S tand ard f or Sanqi of W enshan (文山三七综合标准)
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[3] Cu i X M , C hen Z J , Dong X, et al. Determinat ion of s ingle
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[ J ] . J Ch in M ed Mater (中药材) , 2002, 25( 11) : 781-782.
薄层扫描法测定土荆皮药材中土荆皮乙酸含量
翟西峰1 ,张湛睿1,李国华2,孙文基3
( 1. 陕西医学高等专科学院 药学系, 陕西 西安 710068; 2. 陕西省人民医院,陕西 西安 710068;
3. 西北大学 生物医药重点实验室,陕西 西安 710069)
土荆 皮为松 科植 物金钱 松 Pseudolarix
kaemp f er i Gor don 的干燥根皮或近根树皮, 为《中华
人民共和国药典》收载的常用中药, 有杀虫止痒作
用,常用于疥癣瘙痒。其制剂有土荆皮酊、复方土荆
皮酊、复方土荆皮涂膜剂等。因此,对土荆皮药材进
行质量监控非常必要。土荆皮的抗真菌有效成分为
土荆皮酸, 为一混合物, 其中土荆皮乙酸含量最
高[ 1] , 可将土荆皮乙酸的含量作为控制土荆皮药材
质量的指标。本实验采用薄层扫描法测定了西安地
区药材市场出售的土荆皮中土荆皮乙酸的含量,建
立了土荆皮药材中土荆皮乙酸含量的薄层扫描法测
定方法。
1 仪器与试药
CAMAG T LC SCAN ER3薄层扫描仪(瑞士) ,
定量毛细管(瑞士) , 土荆皮乙酸对照品(中国药品生
物制品检定所) ,所用试剂均为分析纯。土荆皮样品
于 2000—2001年分批购自西安药材市场与省市药
材公司。
2 实验方法
2. 1 供试品溶液制备: 精密称取药材样品粗粉2 g ,
置 50 mL 具塞三角瓶中,加苯 20 mL, 称重,超声提
取 30 m in, 补加氯仿至原重,密封,放置 24 h, 精密
·93·中草药 Chinese T raditional and Herbal D rug s 第 35 卷第 1 期 2004年 1月
收稿日期: 2003-04-03