全 文 ：材 ,成分较为复杂 ,多含有萜类、皂苷、黄酮等成分 ,
且剂型为颗粒剂 ,含有大量的糖 ,对色谱结果的干扰
较大。故采用甲醇为提取溶剂 ,再通过大孔吸附树脂
柱处理 ,用 50%乙醇洗脱 ,既可有效地去除糖的干
扰 ,又可富集制剂中栀子苷成分 ,再经正丁醇提取 ,
氨试液洗涤以除去水溶性黄酮等杂质 ,即可达到纯
化供试品的目的。 所得的供试品溶液使被测成分栀
子苷能得到很好分离 ,保留时间也与对照品一致 ,阴
性对照溶液亦无干扰。
3. 2　检测波长的确定: 采用 Waters 996型二极管
阵列检测器 ,对栀子苷对照品的色谱峰扫描 ,于最大
峰高处 ,提取紫外吸收图谱。 结果最大吸收波长为
238. 4 nm ,故选定 238 nm为检测波长。
3. 3　本实验建立了蚁肝康颗粒中栀子苷含量的
HPLC测定方法 ,实验结果表明 ,本法便捷 ,灵敏、准
确 ,重现性好 ,可以控制该药品的质量。
HPLC法测定山茱萸胶囊中熊果酸和齐墩果酸的含量
皮文霞 ,蔡宝昌 ,邱建红
(南京中医药大学药学院 ,江苏 南京　 210029)
　　山茱萸胶囊由山茱萸有效部位环烯醚萜总苷及
总三萜酸经特殊制剂工艺制备而成。 对糖尿病微血
管并发症有独特疗效。 熊果酸和齐墩果酸为山茱萸
胶囊的主要有效成分。 由于熊果酸和齐墩果酸结构
极相似 ,所以对两者的分离较困难 [1, 2 ]。 本实验建立
的山茱萸胶囊中熊果酸和齐墩果酸含量的 HPLC
测定方法 ,较《中华人民共和国药典》 2000年版使用
的薄层扫描法操作更简便准确 ,且本法可使熊果酸
和齐墩果酸达到基线分离 ,从而准确定量。
1　仪器与试药
美国 Agilent 1100高效液相色谱仪 , DAD检测
器。甲醇、乙腈为色谱纯 ,其余均为分析纯 ,水为亚沸
蒸馏水。熊果酸和齐墩果酸对照品由中国药品生物
制品检定所提供。 山茱萸胶囊 (自制 ,批号: 020612,
020615, 020618)。
2　方法与结果
2. 1　色谱条件: 色谱柱: Zi rchrom , romasi l ODS-1
( 250 mm× 4. 6 mm);流动相:乙腈 -甲醇 -水-醋酸铵
( 80∶ 10∶ 10∶ 0. 5) ;柱温: 30℃ ;流速: 1 mL /min;
检测波长: 215 nm。
2. 2　标准曲线的绘制:精密称取熊果酸、齐墩果酸
对照品 ,用甲醇配制成 120. 2(熊果酸 )、 102. 0μg /
m L(齐墩果酸 )的混合对照品溶液。精密吸取混合对
照品溶液 10, 15, 20, 25, 30, 35μL进样 ,齐墩果酸的
出峰时间为 13. 171 min,熊果酸的为 14. 038 min。
以进样量为横坐标 ,峰面积为纵坐标 ,绘制标准曲
线。回归方程为:熊果酸 Y= 22. 276X+ 32. 671, r=
0. 999 1,线性范围为 0. 60～ 2. 10μg;齐墩果酸 Y=
17. 784X - 15. 067, r= 0. 999 9,线性范围为 0. 51～
1. 79μg。
2. 3　供试品溶液的配制:精密称取山茱萸胶囊内容
物 0. 5 g ,加甲醇 20 mL超声提取 10 min,再以甲醇
定容至 25 mL量瓶中。用 0. 45μm微孔滤膜滤过 ,
备用。
2. 4　精密度试验:以上述混合对照品溶液进样 10
μL,重复进样 5次。 按熊果酸及齐墩果酸的平均峰
面积计算 ,得熊果酸 RSD为 0. 85% ,齐墩果酸 RSD
为 0. 94%。
2. 5　稳定性试验:精密吸取供试品溶液 15μL,分
别间隔 0, 1, 3, 6, 12, 24, 36 h进样 ,按熊果酸、齐墩
果酸峰面积计算 , RSD分别为 1. 3%、 1. 7% 。结果显
示供试品溶液在 36 h内稳定。
2. 6　重现性试验: 精密称取山茱萸胶囊同一批
( 020612)样品 ,按上述供试品溶液制备方法制备 5
份供试品溶液 ,依法测定。结果熊果酸及齐墩果酸含
量的 RSD分别为 1. 2% 、 1. 6%。
2. 7　加样回收率试验: 精密称取熊果酸、齐墩果酸
对照品适量 ,加入 3粒山茱萸胶囊 ,测定 ,结果齐墩
果酸的平均回收率为 100. 91% , RSD= 1. 08% (n=
5) ,熊果酸的平均回收率为 99. 83% , RSD= 1. 22%
(n= 5)。
(下转附 11页 )
·1103·中草药　 Chinese T raditional and Herba l D rugs　第 34卷第 12期 2003年 12月
收稿日期: 2003-04-20作者简介:皮文霞 ( 1968— ) ,女 ,安徽霍邱人 ,博士 ,南京中医药大学药化教研室讲师 ,研究方向为中药新药和指纹图谱。
Tel: ( 025) 6798164 ( O)
肾、益气养阴、活血祛浊之功效。糖宁片治疗组 55例 ,优降糖
对照组 49例。用药 3个月。结果: 两组显效率分别为 58% ,
44. 9% ,两组比较差异显著 (P < 0. 05); 有效率分别为
96. 0% , 91. 0%。 治疗后两组 FBG均下降 ,治疗组的 PBG,
Hb A1C下降优于对照组 (P < 0. 05)。
21　茶色素
　　茶色素是一种从茶叶提取的包括茶黄素、茶红素和茶褐
素等水溶性色素 ,主要成分为多元酚类物质。 临床用茶色素
治疗高血脂症、高血压和心脑血管疾病。现用于治疗 I I型糖
尿病 ,治疗组在服用优降糖加茶色素胶囊 ,共 84例 ,对照组
78例只服用优降糖 ,疗程 6周。 结果表明 ,茶色素能改善 II
型糖尿病患者血糖控制状况 ,降低全血黏度、血浆黏度和纤
维蛋白原 ,降低血小板黏附率和聚集率 ;有效降低血糖、血
脂 ,改变血液流变性 ,缓解微循环障碍。 茶色素是 II型糖尿
病一种辅助治疗药物。
22　参地降糖颗粒
　　由人参、生地、莪术等药材制成参地降糖颗粒具有益气
养阴 ,清热活血之功效。 用链脲佐菌素性糖尿病 ( ST Z-DM)
大鼠模型和正常大鼠 ,观察参地降糖颗粒对血糖、血脂、
M DA及胰岛素的影响。 结果: 该药对葡萄糖引起的血糖升
高有明显的拮抗作用 ;对 S TZ-DM大鼠血脂代谢障碍有明
显改善作用 ;对 STZ-DM大鼠的 MDA有明显降低作用 ,表
明有一定的抗氧化作用 ;对 STZ-DM大鼠细胞损伤有一定
修复作用。对正常大鼠的 FBG和 IN S没有明显影响 ;而优降
糖组则明显升高 ;对正常大鼠的血脂代谢亦没有明显影响。
提示参地降糖颗粒用于治疗葡萄糖耐量异常患者时 ,既可阻
止其发展成糖尿病 ,又无发生低血糖的不良反应。
23　血栓心脉宁胶囊
　　用血栓心脉宁胶囊治疗糖尿病周围神经病变 60例 ,另
用肌注弥可保针治疗 52例作为对照组。结果:治疗组与对照
组分别总有效率为 93. 3% , 51. 9% ,两组比较差异显著 (P <
0. 01)。 治疗组治疗前后空腹及餐后 2 h血糖值比较均有显
著差异 (P < 0. 05) ;对照组治疗前后以上指标比值也均有显
著性差异 (P < 0. 05)。治疗组治疗前后比较 ,其血浆黏度、血
液比黏度、红细胞压积及纤维蛋白原差异均有显著性 (P <
0. 01, 0. 05) ;而对照组治疗前后比较 ,以上各指标均无显著
性差别。 治疗组与对照组治疗前比较 ,以上指标均无显著性
差异 ,而两组治疗后相比较 ,差异有显著性 (P < 0. 01,
0. 05)。提示由人参、川芎、丹参 、水蛭、牛黄、毛冬青等药制成
的血栓心脉宁胶囊具有益气养阴、活血通络、清热解毒的功
效 ,可使气足、血畅、热清、末梢神经得以濡养 ,故疗效显著。
24　结语
　　另外尚有糖复康、消渴康 、消渴愈胶囊、桑枝颗粒、双降
丸、糖肾康、仙贞片、糖尿停、复方降糖乐、消渴平胶囊、消糖
止渴胶囊、三黄煎等研究报道。研究防治 II型糖尿病中药制
剂工作正向纵深发展 ,预期取得突破性成果。
　　 (上接第 1103页 )
2. 8　样品测定: 吸取上述供试品溶液 10μL进样 ,
按上述 HPLC色谱条件测定峰面积值 ,按标准曲线
法计算样品中熊果酸和齐墩果酸的含量 ,结果见表
1,色谱图见图 1。
表 1　山茱萸胶囊中熊果酸和齐墩果酸
的含量测定结果 (n= 3)
Table 1　 Content of ursolic acid and oleanolic acid
in Shanzhuyu Capsule (n= 3)
批号 含量 /( mg· g
- 1 )
熊果酸 齐墩果酸
020612 453 146
020615 445 138
020618 456 147
3　讨论
　　本试验结果表明 ,本法使结构性质极相似的熊
果酸与齐墩果酸两成分达到了基线分离 ,从而为山
茱萸及其制剂的定量分析提供了准确的测定方法。
山茱萸胶囊中两酸的含量达 59. 5% 。
1-齐墩果酸　 2-熊果酸
1-oleanolic acid　 2-urs olic acid
图 1　混合对照品 ( A)和山茱萸胶囊 (B)的 HPLC图谱
Fig. 1　 HPLC chromatograms of mixed reference
substances (A) and Shanzhuyu Capsule ( B)
References:
[1 ]　 Yuan K, Li G L, Li J Z. Determination of ursolic acid and
oleanolic acid in Ch eqiancao b y HPLC [ J ]. Chin Trad it Herb
Drugs (中草药 ) , 1999, 30( 12): 901-903.
[2 ]　 Yang X T, Ch eng L L, M i K. Determination of ursolic acid in
Sh an zha by HPLC [J ]. J Shangha i Trad it Ch in Med Univ (上
海中医药大学学报 ) , 2001, 15( 1): 53-55.
　　　　　　　　中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　第 34卷第 12期 2003年 12月　　　　　　· 附 11·