全 文 ：关键 。细胞 [ Ca2+] i升高被认为是凋亡的始动因
素。有研究表明各种原因诱导的细胞凋亡出现之
前 ,胞浆内游离 Ca2+浓度均持续升高 ,抑制 Ca2+浓
度的升高则可阻止诱导的细胞发生凋亡[ 1 ,2] 。Takel
等在胎鼠皮层神经元培养液中加入 Ca2+载体(ion-
omycin),使细胞 [ Ca2+] i升高 ,诱发了神经元凋亡 ,
提示 Ca2+与迟发性神经元凋亡有关[ 3] 。大量实验
证明:阻止 Ca2+内流可明显减轻细胞损伤的程度。
SH-SY5Y 细胞来源于人的神经母细胞瘤 ,细胞
的形态与正常神经元相似 ,呈锥形 ,而且具有明显的
轴突 ,某些生理功能亦与正常神经元有相似之处 ,是
目前国际上研究神经细胞功能较好的一种细胞模
型[ 5] 。本实验以培养神经细胞 SH-SY5Y 缺糖-缺
氧损伤为模型 ,模拟脑缺血状态 ,诱导培养的 SH-
SY5Y 细胞凋亡的发生。结果发现 ,随着缺糖-缺氧
损伤时间的延长 ,细胞 [ Ca2+] i随之明显增高 ,细胞
凋亡的发生也越来越多 ,坏死的细胞也增多 ,代表细
胞损伤程度的 LDH 的释放也越来越多 。丹参素能
明显改善这种情况 ,使 LDH 的释放 、细胞 [ Ca2+] i
水平 、细胞凋亡及坏死的百分率均明显降低 ,对缺血
性损伤的神经细胞有保护作用。尼莫地平是 L 型
钙通道阻断剂 ,能阻止 Ca2+跨膜内流 ,抑制细胞内
Ca2+的释放 ,使细胞 [ Ca2+] i保持在一定的水平。
丹参素降低缺糖-缺氧损伤后 SH-SY5Y 细胞
[ Ca2+] i水平的效应与尼莫地平相仿 。实验结果提
示丹参素对缺糖-缺氧损伤后 SH-SY5Y 细胞的凋
亡过程具有抑制作用 ,神经细胞具有保护作用 ,这种
作用可能与其抑制神经细胞内钙超载有关 ,但丹参
素的作用机制是影响细胞外钙的内流 ,还是调整细
胞内钙库的释放 ,尚需进一步研究。
References:
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四季青鲜汁治疗烫伤的实验研究
潘秋文
(杭州市预防保健门诊部 , 浙江 杭州　310007)
　　四季青为冬青科植物冬青 Ilex purpurea Has-
sk.的叶 ,味苦 、微涩 ,性凉 ,具有清热解毒 、凉血止
血 、收敛生肌等功效。浙江民间有鲜叶捣烂外敷治
疗烧烫伤的使用习惯 ,本实验观察四季青鲜汁对实
验性大鼠烧烫伤模型的治疗作用。
1　材料
1.1　动物:SD 大鼠 ,雄性 ,体重 200 ～ 250 g ,购自
浙江省实验动物中心 ,动物合格证号:浙实验动准字
2001001号;饲料:标准大鼠颗粒饲料 ,含蛋白质
20%,含钙 0.6%,由浙江省实验动物中心提供 。
1.2　药物与试剂:四季青 ,鲜用榨汁 ,相当于鲜药
1.6 g/mL ,由浙江省医学科学院药物研究所天然药
物研究室提供。烫伤宁气雾剂 ,贵州远东药业有限
公司产品 ,批号 20000518。戊巴比妥钠 ,上海医药
集团生化试剂厂进口分装 ,批号 890416 。0.9%氯
化钠注射液 ,慈溪制药有限公司生产 ,批号 010224。
硫化钠 , 浙江省兰溪市化工试剂厂生产 , 批号
971006 。
1.3　仪器:D.SCr420 型可控硅控温三用水箱 ,通
州市长江实验仪器厂产品;AEL200 型电子分析天
平 ,LIBOR公司产品 。
2　方法与结果
　　雄性 SD 大鼠 50 只 ,按文献[ 1] 方法 ,将大鼠背
部剃毛后用硫化钠脱毛(脱毛剂配制:2%CMC-Na
水溶液加 10%硫化钠溶液);次日 ip戊巴比妥钠 40
mg/kg 麻醉 ,将去毛的背部皮肤浸入 85 ℃恒温水
浴中持续 15 s ,使之造成深Ⅱ度烫伤 ,烫伤面积为 5
cm ×8 cm ,约是体表面积的 10%;随后立即 ip灭菌
生理盐水每只 5 mL ;次日 ,用透明硫酸纸描绘大鼠
皮肤烫伤面积的图形 ,电子天平称取烫伤面积图纸
·924· 中草药　Chinese T raditional and Herbal Drugs　第 35 卷第 8 期 2004年 8月
收稿日期:2003-10-15
的质量 ,表示烫伤皮肤面积 ,根据大鼠烫伤面积的差
异调整并均分为 5组 ,每组 10只 ,分别在烫伤皮肤
表面涂抹生理盐水(模型对照组)、烫伤宁(阳性对照
组)及四季青鲜汁大剂量(原鲜汁)、中剂量(生理盐
水 2 倍稀释鲜汁)、小剂量(生理盐水 4 倍稀释鲜
汁),每天上 、下午各 1 次 ,每次 0.2 mL ,连续用药
25 d;每 5 d用透明硫酸纸描绘皮肤烫伤面积的图
形 1次 ,称取烫伤皮肤面积图纸的质量 ,计算烫伤皮
肤面积减少率 ,以此评价受试药物的作用;末次用药
后次日 ,大鼠脱颈椎处死 ,剪取烫伤部位皮肤 ,固定
于 4%甲醛溶液中 ,石蜡包埋切片 , HE染色 ,显微镜
下观察各组大鼠烫伤皮肤的愈合程度 ,结果见表 1。
烫伤面积减少率=(用药后图纸质量-用药前图纸质
量)/用药前图纸质量×100%
组织切片检查结果显示 ,模型对照组大鼠烫伤
皮肤表皮坏死 ,内有大量嗜中性多形核白细胞 ,真皮
内有多量炎症细胞浸润 ,未见毛囊及血管;而四季青
鲜汁各剂量组大鼠伤口表面有较多成纤维细胞生
长 ,表皮真皮分界不清 ,并且可见含坏死组织碎屑的
痂开始脱落 ,表皮开始生长;与模型对照组比较 ,愈
合程度明显要好。
表 1　四季青对实验性皮肤烫伤模型大鼠的影响(x±s)
Table 1　Effect of fresh extract from I.purpurea on experimental scald model rats(x ±s)
组　别 剂量/(g·只-1)
动物数
/只
用药前烫伤面积
纸质量/mg
用药后不同时间烫伤面积减少率/ %
5 d 10 d 15 d 20 d 25 d
模型　 - 9 146.6±34.7 23.2±16.9 22.3±28.3 22.0±33.0 38.9±25.5 50.3±28.1
烫伤宁 - 8 153.5±35.0 33.3±14.6 35.0±14.9 41.5±10.6 54.8± 8.4 66.0± 7.8
四季青鲜汁 0.64 9 154.5±14.2 39.5± 7.6 44.9± 7.4＊ 62.1± 8.7＊ 67.7± 7.4＊ 76.3± 6.9
0.32 9 154.2±29.6 34.0±11.9 37.8±19.1 56.6±13.6＊ 65.2±16.1＊ 75.8±15.0
0.16 7 146.7±33.0 22.0±17.7 29.7±12.3 42.5±14.8 54.8± 9.7 64.5± 4.4
　　　与模型组比较:＊P<0.05
　　　＊P<0.05 vs model group
3　讨论
　　实验过程中各组均有个别大鼠因烫伤过于严重
而死亡 ,但尚不影响实验结果 。结果显示 ,与用药前
比较 ,四季青鲜汁各剂量的烫伤面积减少率用药后
不同时段均较模型对照组大 , 其中大剂量用药后
10 、15 、20 d 的减少率与模型对照组相比差异显著
(P <0.05),中剂量用药后 15 、20 d 减少率与模型
对照组比较差异显著 (P <0.05);表明四季青鲜汁
可促进大鼠烫伤皮肤的愈合速度。
现代药理研究表明四季青具有抗菌 、消炎等作
用 ,民间常取其鲜草捣烂或榨取鲜汁外用治疗疔疮 、
痈肿以及跌打损伤等 ,本研究也证实了四季青鲜汁
有促进大鼠烫伤皮肤愈合的功效 ,至于其有效成分
及作用机制尚有待进一步研究。
References:
[ 1] 　Feng S J , Hua L N , Jin S W , et al.Preparat ion of scald model
in rats [ J] .Acta U niv Med S econd Shanghai(上海第二医科
大学学报), 1995 , 15(2):195.
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