全 文 ：依法制备供试品溶液 ;精密吸取供试品溶液 4μL,
对照品溶液 2, 4μL,分别点于同一硅胶 G薄层板
上。以氯仿 -甲醇 -水 ( 7∶ 4∶ 0. 5)为展开剂 ,展开 ,取
出 ,晾干 ,喷以 10%硫酸-乙醇溶液 , 90℃烘 10 min
显色 ,扫描 ,测定 ,计算。结果见表 1。
表 1　不同采集时间地黄药材中地黄苷 A的含量
采集时间 地黄苷 A含量 (mg /g )
1999年 8月 1. 425
2000年 8月 1. 575
2001年 4月 1. 563
　　以上结果可见 ,地黄中地黄苷 A含量以干燥品
计 ,应不低于 1. 0 mg /g。
3　讨论
3. 1　 地黄苷 A对照 品经 UV、 IR、 1HNM R、
13
CNM R光谱鉴定为环烯醚萜 -2-葡萄糖苷 , HPLC
归一化法测其含量> 98% 。
3. 2　显色剂曾选择碘蒸汽 ,但碘显色需较长时间
( 30 min)且斑点荧光易消褪。选用 10%硫酸 -乙醇溶
液 90℃烘 10 min显色 ,斑点荧光于 407 nm处有最
大吸收且扫描无干扰。
3. 3　对于干燥地黄样品中地黄苷 A含量应不低于
1. 0 mg /g ,对鲜地黄及熟地黄中地黄苷 A含量变化
有待进一步研究。
清肝颗粒制备工艺研究
刘　力 ,罗月琴 ,徐德生
(上海中医药大学附属曙光医院 ,上海　 200021)
　　根据我院院长王灵台教授的经验方 ,由猫人参、
黄芩、柴胡、白术等中药制成的清肝颗粒 ,既保持了
传统汤剂作用迅速的特点 ,又克服了汤剂临用时煎
煮不便的缺点 ,体积小 ,服用、贮藏、携带方便 ,具有
改善肝功能 ,抑制丙肝病毒复制的作用 ,是临床治疗
急慢性丙肝的纯中药制剂。
1　仪器与试药
AEL-160电子分析天平 (日本岛津 ) ; CS-930
型双波长薄层扫描仪 (日本岛津 ) ; CQ-250超声清
洗器 (上海必能信超声波仪器公司 )。黄芩等饮片 (上
海徐重道饮片厂 ) ;黄芩苷 (中国药品生物制品检定
所 ) ;其他试剂均为分析纯; GF254高效板 ( E. Merck)。
2　提取方法的选择
以方中黄芩的有效成分黄芩苷的含量为指标 ,
加上白术中的挥发油 ,柴胡中的柴胡皂苷薄层色谱
鉴别 ,以及清肝浸膏的干膏得率来分析清肝颗粒的
提取工艺。经试验 ,结果表明全方以乙醇热提法 ,干
膏得率较高 ,黄芩苷含量最高 ,并且能在薄层色谱中
显示柴胡皂苷、白术挥发油的斑点。 结果见表 1。
3　正交表的设计 [1 ]
　　采用正交试验 ,以乙醇浓度、乙醇用量、热提次数
以及热提时间为因素 ,分别设定 3个水平 ,见表 2。
表 1　不同提取工艺比较
提取方法 面积积分值 干膏得率 (% ) 柴胡 TLC 白术 TLC
水提法　　 33 799. 16 20. 67 - -
水提醇沉法 29 157. 84 13. 56 - -
乙醇冷浸法 30 668. 64 17. 82 + +
乙醇热提法 44 458. 28 19. 99 + +
表 2　因素水平表
水平 因素
A醇浓度 (% ) B时间 (min) C次数 (次 ) D加醇量 (倍 )
1 50 30 1 6
2 60 45 2 8
3 70 60 3 10
4　样品的制备
　　准确称取处方中各药味 ,加乙醇浸泡 0. 5 h后 ,
按上述正交设计的条件 ,回流提取 ,滤过 ,滤液减压
回收乙醇至无醇味 ,再浓缩至 100 mL,作为样品液 ,
制得 9份样品。
5　考察指标的测定
5. 1　干膏得率的测定: 精密吸取各样品液 10 mL,
置已恒重的蒸发皿中 ,于水浴上蒸干后 ,在 105℃干
燥 3 h至恒重 ,移置干燥器中冷却 30 min,称取质
量 ,计算干膏得率 (表 3)。
5. 2　黄芩苷的含量测定
5. 2. 1　供试液制备: 精密吸取各样品液 25 mL,真
·707·中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　 2002年第 33卷第 8期
收稿日期: 2001-11-26基金项目:国家“九五”科技攻关课题 ( 96-906-08-04)作者简介:刘　力 ,女 ,主任药师 ,硕士导师 ,执业药师 , 1984年毕业于上海中医药大学 ,现在曙光医院中药研究室工作 ,从事中药新药的开发与研究。 Tel: 021-53825761
空干燥后拌入 2 g硅藻土 ,置研钵研匀 ,移至具塞锥
形瓶中 ,精密加入 20 mL甲醇 ,超声提取 1 h ,滤过 ,
续滤液作为供试品溶液。
5. 2. 2　层析条件的选择 [2 ]: 醋酸乙酯-丁酮 -甲酸 -
水 ( 5∶ 3∶ 1∶ 1)为展开剂 ,展距 5 cm ,紫外灯下观
察。在此薄层条件下 ,黄芩苷能与方中其他成分很好
地分离。
5. 2. 3　扫描条件的选择: 吸取一定量对照品溶液 ,
点样 ,层析 ,扫描 ,黄芩苷在 310 nm处有最大吸收 ,
在 210 nm处吸光度值最小。 故扫描条件为双波长
锯齿型扫描 ,λS= 310 nm ,λR= 210 nm, SX = 3,狭缝
1. 2 mm× 1. 2 mm。
5. 2. 4　标准曲线的制备: 精密称取黄芩苷对照品
1. 1 mg ,加甲醇溶解并定容至 2 mL,使对照品溶液
浓度为 0. 55 mg /mL。吸取对照品溶液 1, 2, 4, 6, 8,
10μL,点样 ,层析 ,扫描测定峰面积 ,计算回归方程
为 Y= 101 410. 2X+ 2 140. 77, r= 0. 999 6,表明黄
芩苷在 0. 55～ 4. 4μg线性关系良好。
6　试验结果
　　吸取一定量的黄芩苷对照品溶液和供试品溶
液 ,点样 ,层析 ,扫描 ,计算即得 (表 3)。
　　根据表 3可知 ,影响干膏得率因素主要为提取
次数 ,其次是醇浓度和提取时间 ,影响黄芩苷的因素
主要为提取次数 ,其次是提取时间和加醇量。试验号
A1 B3 C3D3得膏率最高 ,黄芩苷含量也最高 ,因此综
合考虑 ,选择 A1B3C3D3为最合适的提取条件 ,即用
含醇量为 50%的乙醇提取 3次 ,每次 60 min,每次
加醇量为生药量的 10倍。
表 3　正交试验表
试验号 A B C D 干膏得率
(% )
黄芩苷含
量 ( mg /g)
1 1 1 1 1 14. 47 22. 195
2 1 2 2 2 19. 91 23. 993
3 1 3 3 3 21. 34 32. 917
4 2 1 2 3 16. 14 27. 365
5 2 2 3 1 18. 99 29. 067
6 2 3 1 2 14. 21 25. 178
7 3 1 3 2 16. 75 24. 928
8 3 2 1 3 12. 93 25. 326
9 3 3 2 1 15. 92 26. 108
　　K 1
　　K 2
　　K 3
　　R
干膏得率
55. 72 47. 36 41. 61 49. 38
49. 34 51. 83 51. 97 50. 87
45. 60 51. 47 57. 08 50. 41
3. 37 1. 49 5. 16 0. 50
黄芩苷含量
79. 105 74. 488 72. 699 77. 370
81. 610 78. 386 77. 466 74. 099
76. 362 84. 203 86. 912 85. 608
1. 749 3. 239 4. 738 3. 836
　　验证试验: 按筛选得到的最佳工艺 ,分别试验 3
次 ,测定干膏得率和黄芩苷含量 ,结果干膏得率为
21. 25% ,黄芩苷含量为 32. 271 mg /g。
7　讨论
7. 1　清肝颗粒原工艺为水提醇沉法 ,得膏率很低 ,
T LC鉴别不出柴胡皂苷及白术挥发油 ,为提高药
效 ,提高颗粒剂的质量 ,选择醇提水沉法。
7. 2　利用方中白术、柴胡的 T LC鉴别试验对清肝
颗粒的质量鉴别起到辅助作用。
参考文献:
[ 1 ]　周怀悟 . 医药应用数理统计 [M ] . 济南: 山东教育出版社 ,
1986.
[2 ]　中国药典 [ S] . 2000年版 .一部 .
山慈菇中秋水仙碱醇提工艺的优选
田素英1 ,陈周全 2
( 1. 新兴中药学校 ,广东 新兴　 527400; 2. 三九医药股份有限公司研发部 ,广东 深圳　 518026)
　　目前 ,全国各地使用的山慈菇商品较混乱 ,它们 不仅在性状、组织结构、粉末特征上存在差异 [1 ] ,而
·708· 中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　 2002年第 33卷第 8期
收稿日期: 2002-01-11作者简介:田素英 ,女 ,讲师 ,学士 , 1992年毕业于河南中医学院中药系 ,主要从事中草药和中成药的鉴定工作 ,在国家级刊物发表过数篇学术论文。 Tel: 0766-2951363。